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拟南芥钙依赖的蛋白激酶CPK28正向参与渗透胁迫应答反应

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科学通报 2014年第1期59卷 50-58页

作者：高安礼吴晴阳张宇苗雨晨宋纯鹏河南省植物逆境生物学重点实验室棉花生物学国家重点实验室河南大学生命科学学院开封475004

作为钙离子的感受蛋白,钙依赖的蛋白激酶(calcium-dependent protein kinases,CDPKs)在拟南芥生长发育、应答逆境胁迫等方面具有重要作用.本研究探讨了拟南芥CDPK家族成员之一CPK28在应答渗透胁迫中的功能.结果表明,CPK28基因缺失导致... 详细信息

作为钙离子的感受蛋白,钙依赖的蛋白激酶(calcium-dependent protein kinases,CDPKs)在拟南芥生长发育、应答逆境胁迫等方面具有重要作用.本研究探讨了拟南芥CDPK家族成员之一CPK28在应答渗透胁迫中的功能.结果表明,CPK28基因缺失导致拟南芥幼苗对NaCl和甘露醇引起的渗透胁迫轻度敏感,而CPK28基因超表达增强了拟南芥对渗透胁迫的耐受性.拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达结果和转化永久GFP(green fluorescent protein)融合蛋白结果均证明CPK28定位于细胞质膜上.RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction)和GUS(glucuronidase)化学染色结果表明,CPK28基因在拟南芥多种组织中均有表达,而且受NaCl和甘露醇胁迫诱导表达.本研究进一步检测了拟南芥幼苗受NaCl和甘露醇胁迫后体内的脯氨酸含量,发现CPK28基因超表达植株比野生型和功能缺失突变体体内积累更多的脯氨酸.利用半定量RT-PCR检测了已知的胁迫相关基因在野生型、CPK28功能缺失突变体和CPK28基因超表达植株中的表达模式,发现这些基因的表达在3种基因型材料中没有明显的差别,暗示CPK28可能不是通过调节基因的转录来参与胁迫应答过程.另外,本研究还发现CPK28可以催化自身磷酸化,这为解析CPK28的激酶活性调节提供了线索.上述研究结果表明CPK28可能参与了拟南芥应答NaCl和甘露醇胁迫反应,并正向调节这些反应过程.

关键词： CDPK CPK28 拟南芥超表达渗透胁迫

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微信平台在生物化学教学应用初探

中文科技期刊数据库（文摘版）教育 2021年第10期 207-208页

作者：吴晴阳江西中医药高等专科学校江西抚州344000

近年来知识更新的速度越来越快,知识也越来越多,高校课程结构和比重也随之发生变化。课程的增多伴随着课时的减少,尤其是医学类高专生物化学课时,目前普遍为每周2-3个课时,但生物化学知识点多、碎、抽象程度很高,尤其三大营养物质代谢... 详细信息

近年来知识更新的速度越来越快,知识也越来越多,高校课程结构和比重也随之发生变化。课程的增多伴随着课时的减少,尤其是医学类高专生物化学课时,目前普遍为每周2-3个课时,但生物化学知识点多、碎、抽象程度很高,尤其三大营养物质代谢内容复杂、知识点多、过程抽象,学生在有限的课时里很难理解掌握相关代谢。基于这一问题,本研究着眼于目前学生日常生活中比较常应用的微信平台入手,探究这一平台在高校生物化学课程教学中的应用,希望能够对未来高校生物化学课教学的深化予以帮助。

关键词：生物化学教学生物化学课程微信平台

乌龙茶加工过程中(Z)-3-己烯醛与(E)-2-己烯醛转化关键调控基因的筛选与表达分析

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食品科学 2023年第16期44卷 205-212页

作者：吴晴阳周子维杨云胡清财黄慧清林佳琪吴宗杰赖钟雄孙云福建农林大学园艺学院茶学福建省高校重点实验室福建福州350002 福建农林大学园艺植物生物工程研究所福建福州350002 宁德师范学院生命科学学院福建宁德352000

通过检测乌龙茶加工过程中(Z)-3-己烯醛和(E)-2-己烯醛的变化,并结合转录组数据筛选4条(3Z):(2E)-己烯醛异构酶((3Z):(2E)-hexenal isomerase,HI)关键基因,对(Z)-3-己烯醛和(E)-2-己烯醛二者变化趋势与基因表达水平进行相关性分析。结... 详细信息

通过检测乌龙茶加工过程中(Z)-3-己烯醛和(E)-2-己烯醛的变化,并结合转录组数据筛选4条(3Z):(2E)-己烯醛异构酶((3Z):(2E)-hexenal isomerase,HI)关键基因,对(Z)-3-己烯醛和(E)-2-己烯醛二者变化趋势与基因表达水平进行相关性分析。结果表明,在加工过程中,(Z)-3-己烯醛和(E)-2-己烯醛大体呈现“此消彼长”的动态变化趋势;摇青工艺的机械损伤促使(Z)-3-己烯醛上升,(E)-2-己烯醛下降;而摇青后的摊放则有利于(Z)-3-己烯醛向(E)-2-己烯醛转化,使得(E)-2-己烯醛逐渐增加。筛选获得的4条CsHI基因总体上对机械损伤和失水胁迫有较好的响应。系统发育进化树的构建发现CsHI与包括茶树、胡萝卜等物种在内的多条类萌发素蛋白具有较近的亲缘关系。本研究为明确乌龙茶加工过程中挥发性物质的形成与转化机理及乌龙茶品质提升提供一定参考依据。

关键词：乌龙茶加工过程 (Z)-3-己烯醛 (E)-2-己烯醛 (3Z):(2E)-己烯醛异构酶

基于SBSE-GC-O-MS技术的3个代表性乌龙茶品种关键香气成分分析

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食品科学 2024年第1期45卷 101-108页

作者：黄慧清郑玉成胡清财吴晴阳杨云欧晓西赵梦莹孙云福建农林大学园艺学院茶学福建省高校重点实验室福建福州350002

为探究3个代表性乌龙茶品种关键香气成分,采用搅拌棒吸附萃取结合气相色谱-嗅闻-质谱(gas chromatography-olfactory-mass spectrometry,GC-O-MS)联用技术对黄旦、铁观音、金观音3个代表性乌龙茶品种关键香气成分进行鉴定和描述,结合香... 详细信息

为探究3个代表性乌龙茶品种关键香气成分,采用搅拌棒吸附萃取结合气相色谱-嗅闻-质谱(gas chromatography-olfactory-mass spectrometry,GC-O-MS)联用技术对黄旦、铁观音、金观音3个代表性乌龙茶品种关键香气成分进行鉴定和描述,结合香气活性值(odor activity value,OAV)、香气特征影响值和感官审评进行对比分析。感官审评表明,3个品种乌龙茶各表现出明显的品种特征香气,黄旦花香显,略带奶香,铁观音花香浓郁,金观音具甜果香,略带木质香。结合OAV及GC-O-MS鉴定结果表明,香叶醇、植醇、茉莉酸甲酯、反式-橙花叔醇、2-壬酮、苯乙醇等物质是黄旦的关键香气成分,赋予黄旦花香清高、奶香显的香气特征;铁观音中的芳樟醇、3,5-辛二烯-2-酮、氧化芳樟醇、顺式茉莉酮、脱氢芳樟醇、α-松油醇等物质呈多元性的花香,与其品种特征香气密切相关;金观音中的关键香气成分包括芳樟醇、藏花醛、香叶基丙酮、顺式茉莉酮、异丁子香酚等物质,是形成其甜果香与木质香品种特征香气的关键物质。

关键词：乌龙茶香气搅拌棒吸附萃取气相色谱-嗅闻-质谱香气活性值

乌龙茶加工过程中α-法呢烯的形成关键调控基因的筛选与表达分析

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食品工业科技 2020年第15期41卷 135-142页

作者：吴晴阳周子维武清扬倪子鑫赖钟雄孙云福建农林大学园艺学院/茶学福建省高校重点实验室福建福州350002 福建农林大学园艺植物生物工程研究所福建福州350002

为探讨乌龙茶加工过程中做青工序的机械力对香气成分中α-法呢烯的影响及形成机理,本实验以乌龙茶品种黄旦的鲜叶、萎凋叶、摇青叶为供试材料,未摇青等时间摊放叶为对照组,采用GC-TOF-MS方法检测乌龙茶加工过程中α-法呢烯含量,结合转... 详细信息

为探讨乌龙茶加工过程中做青工序的机械力对香气成分中α-法呢烯的影响及形成机理,本实验以乌龙茶品种黄旦的鲜叶、萎凋叶、摇青叶为供试材料,未摇青等时间摊放叶为对照组,采用GC-TOF-MS方法检测乌龙茶加工过程中α-法呢烯含量,结合转录组和茶树基因组数据库筛选α-法呢烯合成酶(AFS)关键基因,构建系统进化发育树,利用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)进行数据验证,并进行α-法呢烯含量与基因表达水平间的相关性分析。结果表明,α-法呢烯的含量在第一次摇青时有所下降,由于机械胁迫的累加,摇青叶中α-法呢烯的含量逐渐增加并在第三次摇青时达到峰值(0.9485%)。筛选获得的***7_All转录本与茶树α-法呢烯合成酶基因(CsAFS,GenBank登录号:MH125264.1)高度相似,暂命名为CsAFS7基因,该基因表达模式与测序数据相一致。皮尔逊相关系数分析表明,乌龙茶加工过程中α-法呢烯含量与CsAFS7基因的相关表达水平之间存在极显著正相关(r=0.951,P<0.01)。因此,乌龙茶做青过程中α-法呢烯的累积可能受到CsAFS7基因的表达调控。

关键词：乌龙茶做青 α-法呢烯 CsAFS基因 qRT-PCR

斑地锦黄烷酮-3-羟化酶基因及启动子的克隆与分析

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西北植物学报 2021年第9期41卷 1475-1481页

作者：钟小菊吴晴阳张永康饶泽昌王飞黄胜和江西中医药高等专科学校医学基础部江西抚州344000 南昌大学抚州医学院江西抚州344000

该研究以斑地锦茎叶为材料,利用同源克隆结合RACE和Tail-PCR法,克隆了1个黄烷酮-3-羟化酶(F3H)基因,命名为EmF3H(GenBank登录号为MW767838),其ORF区为1092 bp,编码364个氨基酸。生物信息学分析显示,EmF3H蛋白相对分子质量为40.93 kD,等... 详细信息

该研究以斑地锦茎叶为材料,利用同源克隆结合RACE和Tail-PCR法,克隆了1个黄烷酮-3-羟化酶(F3H)基因,命名为EmF3H(GenBank登录号为MW767838),其ORF区为1092 bp,编码364个氨基酸。生物信息学分析显示,EmF3H蛋白相对分子质量为40.93 kD,等电点为5.47,属于2-酮戊二酸铁依赖的双加氧酶超家族,其氨基酸序列与油桐的序列相似性为85.5%,在系统进化上为相对独立的一个分支。采用Tail-PCR法获得1604 bp的EmF3H启动子序列,分析发现其内含TAAT-box、CAAT-box等序列和G-box等光反应元件。qRT-PCR结果表明,EmF3H基因在不同生长期各组织中均有表达,其中花期的根和果期的果实中表达水平最高。此结果为进一步研究EmF3H基因表达调控奠定了基础,也为完善斑地锦槲皮素生物合成途径提供了新思路。

关键词：斑地锦 F3H基因启动子克隆 qRT-PCR

基于混合式教学的教学设计在生物化学教学的初探——以甘油三酯分解代谢为例

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科技风 2021年第27期 76-78页

作者：吴晴阳郑佳莉宋美玲江西中医药高等专科学校江西抚州344000

生物化学是医学类的基础学科,脂代谢是生物化学课程中的难点也是重点,知识点繁多,尤其是甘油三酯分解代谢途径复杂,难于理解。随着手机、平板电子产品的普及,混合式教学越来越受到学生和老师的欢迎,被越来越多地应用于课堂。本文针对混... 详细信息

生物化学是医学类的基础学科,脂代谢是生物化学课程中的难点也是重点,知识点繁多,尤其是甘油三酯分解代谢途径复杂,难于理解。随着手机、平板电子产品的普及,混合式教学越来越受到学生和老师的欢迎,被越来越多地应用于课堂。本文针对混合式教学模式对甘油三酯的氧化分解代谢进行了专门的教学设计,课堂采用以学生为中心的情境教学法、启发教学法、讨论教学法等教学方法,由最新研究导入新课,围绕热门关注点和临床案例进行讨论,旨在培养学生的合作探究、分析归纳能力,并对教学效果进行了多元评价。

关键词：教学设计甘油三酯微课混合式教学

生物化学课堂教学中“糖的有氧氧化”课堂设计及教学体会

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科技风 2021年第29期 78-80页

作者：吴晴阳郑佳莉宋美玲江西中医药高等专科学校江西抚州344000

生物化学是大专药学中最重要的基础专业课,糖代谢是体内三大营养物质代谢核心,尤其是有氧氧化是我们身体内产能的主要途径,因此学好有氧氧化对于学生学习三大营养物质代谢有着举足轻重的作用,但由于有氧氧化中物质代谢过程复杂,中间代... 详细信息

生物化学是大专药学中最重要的基础专业课,糖代谢是体内三大营养物质代谢核心,尤其是有氧氧化是我们身体内产能的主要途径,因此学好有氧氧化对于学生学习三大营养物质代谢有着举足轻重的作用,但由于有氧氧化中物质代谢过程复杂,中间代谢产物和酶促反应较多,调控就更为复杂,对于初学生物化学的学生来讲很难理解和学习。本文本着试图将复杂的代谢简单化,延伸最新知识的设计理念,融入思政元素,从新课导入、课堂讲解、教书育人等方面详细介绍了糖的有氧氧化课程的课堂设计与教学体会,旨在为生物化学课堂教学提供一些新的思路与参考。

关键词：生物化学糖酵解三羧酸循环课堂设计

气流因子差异化做青工艺对乌龙茶香气品质的影响

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农业工程学报 2022年第21期38卷 240-248页

作者：周子维魏莹莹吴晴阳范丽君饶泓婷陈援援吴灵贞戴彬彬蔡烈伟郑世仲王芳孙云宁德师范学院生命科学学院/宁德师范学院茶叶审评中心宁德352100 福建农林大学园艺学院/茶学福建省高校重点实验室福州350002 福建农林大学食品科学学院福州350002

为探究气流因子在乌龙茶做青工艺中对其香气品质的影响,以鲜叶(CK)、常氧摇青叶(Ta)和乏氧摇青叶(Tb)及相应的毛茶a(Ma)和毛茶b(Mb)为试材,利用半定量反转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription and Polymerase Chain Reaction,RT-PCR... 详细信息

为探究气流因子在乌龙茶做青工艺中对其香气品质的影响,以鲜叶(CK)、常氧摇青叶(Ta)和乏氧摇青叶(Tb)及相应的毛茶a(Ma)和毛茶b(Mb)为试材,利用半定量反转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription and Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)、顶空固相微萃取法(Head-Space Solid-Phase MicroExtraction,HS-SPME)与气相色谱-飞行时间质谱联用(Gas Chromatography-Time-Of-Flight Mass Spectrometry,GC-TOF MS)等技术,通过多元统计分析等方式,对不同气流因子介导做青工艺的乌龙茶挥发性组分进行分析。结果表明:Tb中低氧胁迫响应因子Cs HIG4和CsHIG6基因的表达水平相较Ta和CK有所上调,基于毛茶中共鉴定出的205种挥发性组分,采用最小偏二乘法(Partial Least Squares,PLS)分析表明,以重要性投影指标值(Variable Important Projection,VIP)大于1.0为筛选条件,获得标志性差异挥发性成分有24个,其中吲哚的VIP值最大(4.75),α-法呢烯(3.06)、罗勒烯异构体混合物(2.77)、反式-橙花叔醇(2.75)等随后。乏氧摇青叶有5种特征差异挥发性组分,而常氧摇青叶中仅2种。毛茶感官审评结果发现,常氧摇青处理叶付制的乌龙茶香气清香持久,花香较显(香气感官得分90.67)。Ma中反式-橙花叔醇、2,3-二氢-3,5二羟基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮、异植物醇、亚硫酸-2-乙基己基丁酯、6-氮杂双环[3.2.1]辛烷的含量均显著高于Mb(P<0.05),推测该5个物质可能是常氧摇青条件下形成较优品质乌龙茶的标志性代谢物,这有助于更好理解气流因子对摇青过程中香气物质代谢的影响,研究结果为探究环境因子介导下摇青工艺对乌龙茶香气品质的形成机制提供理论基础。

关键词：香气品质控制乌龙茶气流做青挥发性组分最小偏二乘法