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MiR-155通过抑制IL-18BP在狼疮性肾炎小鼠模型中促进足细胞焦亡的分子机制

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MiR-155通过抑制IL-18BP在狼疮性肾炎小鼠模型中促进足细胞焦亡的...

作者：吴昱升右江民族医学院

学位级别：硕士

目的:建立miR-155Fas基因型小鼠动物模型,探讨微小RNA-155（micro RNA-155,miR-155）诱导小鼠细胞焦亡促进狼疮性肾炎（lupus nephritis,LN）的发病机制,为诊断及治疗狼疮性肾炎提供新思路。方法:（1）分组:构建mir155基因敲除小鼠模型,... 详细信息

目的:建立miR-155Fas基因型小鼠动物模型,探讨微小RNA-155（micro RNA-155,miR-155）诱导小鼠细胞焦亡促进狼疮性肾炎（lupus nephritis,LN）的发病机制,为诊断及治疗狼疮性肾炎提供新思路。方法:（1）分组:构建mir155基因敲除小鼠模型,将miR-155基因敲除型小鼠与LN小鼠进行杂交,用聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）及琼脂糖凝胶电泳鉴定出miR-155Fas基因型小鼠。将实验动物分为三组:空白组（C57组）、模型组（LN组）、miR-155组(miR-155Fas基因敲除组),每组各8只,均为雌性。（2）检测指标与方法:于14周起每两周收集各组小鼠24小时尿液,检测各组小鼠尿蛋白含量;20周后处死动物,收集各组小鼠肾组织,取小鼠血清,酶联免疫吸附测定法测定（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）抗史密斯抗体（anti-Smith antibody）、抗双链脱氧核糖核酸抗体（anti-ds DNA antibody）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time quantitative polymerse chain reaction,RT-q PCR）检测各组肾组织中miR-155及caspase-1、IL-1β、IL-18BP、IL-18、GSDMD（Gasdermin D）、P-cadherin、Nephrin因子在基因水平的表达;Western blot法检测caspase-1、IL-1β、IL-18BP、IL-18、GSDMD（Gasdermin D）、P-cadherin、Nephrin因子在蛋白水平的表达;苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,HE）、过碘酸雪夫染色（Periodic Acid-Schiff stain,PAS）、过碘酸六胺银染色（periodic acid-silver metheramine,PASM）、马松染色（Masson）等观察小鼠肾脏组织损伤情况;透射电镜观测肾小球足细胞及基底膜完整性。免疫荧光分析各组肾小球Caspase-1和Nephrin表达与分布。（3）生物信息学分析预测miR-155可能结合的靶基因3’非翻译区（Untranslated Region,UTR）的结合位点,双荧光素酶报告基因检测IL-18BP基因活性。结果:（1）与空白组相比,模型组和miR-155组小鼠尿蛋白含量和狼疮特异性抗体anti-smith antibody及anti-ds DNA antibody表达上升,caspase-1、IL-1β、IL-18、GSDMD、NLRP3表达增高,IL-18BP、P-cadherin、Nephrin表达降低,且差异具有统计学意义（P升高,且差异具有统计学意义（P<0.05）,病理染色结果也显示肾脏损伤显著缓解。（3）生物信息学分析预测结合双荧光素酶报告基因进一步验证发现miR-155与IL-18BP3’UTR可以结合。结论:（1）狼疮性肾炎小鼠模型中miR-155的表达上调、焦亡相关因子表达且与病情呈正相关,特异性敲除miR-155可以减轻足细胞焦亡从而改善狼疮性肾炎的症状。（2）Mi R-155可能通过结合并抑制IL-18BP基因的途径发挥作用。

关键词：狼疮性肾炎细胞焦亡 miR-155 足细胞损伤

miR-155在狼疮性肾炎细胞焦亡中作用机制的研究进展

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医学研究杂志 2023年第11期52卷 11-15页

作者：吴昱升林栩右江民族医学院附属医院肾内科、右江民族医学院研究生学院 533000

狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)是系统性红斑狼疮引起的继发性肾炎,其致病机制复杂,且缺乏特异性治疗。细胞焦亡是一种伴随炎性反应的程序性细胞死亡,其在LN中的作用愈发受到广泛关注,miR-155作为一种高度保守的非编码小RNA,近年来被... 详细信息

狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)是系统性红斑狼疮引起的继发性肾炎,其致病机制复杂,且缺乏特异性治疗。细胞焦亡是一种伴随炎性反应的程序性细胞死亡,其在LN中的作用愈发受到广泛关注,miR-155作为一种高度保守的非编码小RNA,近年来被发现通过参与多种信号通路从而影响细胞焦亡及LN的发生、发展。本文通过归纳概括细胞焦亡参与LN的致病过程、miR-155对细胞焦亡通路的调控及对LN的影响等方面,总结了miR-155通过调节细胞焦亡从而影响LN的作用机制,旨在为LN的靶向治疗提供新的视角。

关键词：狼疮性肾炎细胞焦亡 miR-155 炎性小体

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巨噬细胞极化在肾脏纤维化中的研究进展

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第10期 168-171页

作者：黄慕源王蓉吴昱升右江民族医学院广西百色533000

肾脏纤维化是一种复杂的病理变化,表现为肾间质纤维化、肾小球硬化,可有蛋白尿、血清肌酐升高、血尿素氮升高等肾功能损害表现。肾脏纤维化的发病机制复杂,至今尚未完全明确。近年来新的试验研究表明,巨噬细胞在肾脏纤维化的发病过程中... 详细信息

肾脏纤维化是一种复杂的病理变化,表现为肾间质纤维化、肾小球硬化,可有蛋白尿、血清肌酐升高、血尿素氮升高等肾功能损害表现。肾脏纤维化的发病机制复杂,至今尚未完全明确。近年来新的试验研究表明,巨噬细胞在肾脏纤维化的发病过程中发挥着重要的生物学作用,M1型巨噬细胞的促炎作用可驱动肾脏纤维化的发生和促进其发展。也有研究发现M2型巨噬细胞的抗炎作用在抗肾脏纤维化中起着举足轻重的作用。本文也将分别从巨噬细胞的起源、极化及其在肾脏纤维化中的作用做相关领域的理论综述,以阐明巨噬细胞极化在肾脏纤维化整个发生发展中的作用,探索新的抗肾脏纤维化药物治疗的靶点,提供新的研究思路。

关键词：巨噬细胞极化肾脏纤维化

建立重症狼疮性肾炎模型并探索其与足细胞蛋白nephrin、P-cadherin的相关性

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右江医学 2022年第3期50卷 161-166页

作者：王晨林栩唐志明韦美理吴昱升王蓉右江民族医学院附属医院肾内科广西免疫相关性疾病医学科研基础保障重点实验室广西百色533000

目的建立重症MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)动物模型,并对模型成功与否进行验证,进一步探索狼疮性肾炎与足细胞蛋白nephrin、P-cadherin的相关性。方法将实验动物分为三组:空白组、模型组和脂多糖组。空白组为雌性C57小鼠8... 详细信息

目的建立重症MRL/lpr小鼠狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)动物模型,并对模型成功与否进行验证,进一步探索狼疮性肾炎与足细胞蛋白nephrin、P-cadherin的相关性。方法将实验动物分为三组:空白组、模型组和脂多糖组。空白组为雌性C57小鼠8只,模型组及脂多糖组为雌性MRL/lpr小鼠各8只,其中脂多糖组腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),空白组及模型组每周注射等量生理盐水。20周后检测小鼠尿蛋白,处死动物,收集各组小鼠肾组织。苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色观察小鼠肾脏组织。RT-qPCR和Western blot检测肾组织中nephrin、P-cadherin的mRNA及蛋白表达。结果与空白组相比,模型组小鼠尿蛋白升高,肾脏病理损伤严重;与模型组相比,LPS组小鼠尿蛋白升高,肾脏损伤进一步加重;此外肾组织中nephrin、P-cadherin表达水平在三组间逐步下降(P<0.01)。结论用LPS腹腔注射的MRL/lpr小鼠可诱导加重狼疮,且狼疮性肾炎的严重程度与nephrin及P-cadherin相关。

关键词：狼疮性肾炎细菌脂多糖足细胞损伤 nephrin P-cadherin

基于网络药理学和分子对接探讨鸡血藤治疗糖尿病肾病的作用机制研究

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右江医学 2023年第12期51卷 1069-1075页

作者：王蓉林栩吴昱升黄慕源徐璐瑶张洁右江民族医学院附属医院肾内科广西百色533000 广西免疫相关性疾病医学科研基础保障重点实验室广西百色533000

目的运用网络药理学和分子对接探讨鸡血藤治疗糖尿病肾病(DKD)的潜在作用机制。方法通过检索多个数据库筛选出鸡血藤活性成分和核心靶点,借助Drugbank、TTD、OMIM、Genecard、PharmGkb数据库收集DKD作用靶点,运用Venny 2.1.0获取鸡血藤... 详细信息

目的运用网络药理学和分子对接探讨鸡血藤治疗糖尿病肾病(DKD)的潜在作用机制。方法通过检索多个数据库筛选出鸡血藤活性成分和核心靶点,借助Drugbank、TTD、OMIM、Genecard、PharmGkb数据库收集DKD作用靶点,运用Venny 2.1.0获取鸡血藤与DKD的交集靶点基因。使用STRING数据库构建蛋白相互作用(PPI)网络,并使用Cytoscape软件和CytoNCA插件进行分析筛选出核心靶点。然后进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。最后,使用AutoDock Tools软件通过分子对接技术验证活性化合物与核心靶点的结合能力。结果挖掘出24种鸡血藤的关键活性成分,DKD靶点12818个,有48个二者的交集靶点基因。筛选出鸡血藤活性成分3种(芦荟大黄素、木犀草素、甘草查尔酮a),核心靶点基因4种[热休克蛋白90 Alpha家族A级成员1(HSP90AA1)、MYC原癌基因(MYC)、肿瘤蛋白p53(TP53)、信号传感器和转录激活剂3(STAT3)]。GO功能共富集498个条目,KEGG通路共富集61个条目。分子对接技术验证了3种活性化合物与其作用的关键靶点具有可靠的亲和力。结论推测鸡血藤治疗DKD具有多成分-多靶点-多途径的特点,为进一步研究鸡血藤治疗DKD的分子机制提供了新的思路。

关键词：网络药理学分子对接鸡血藤糖尿病肾病

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源于钛基铅酸电池的再生钛基体作为板栅集电体的研究

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高等学校化学学报 2024年第7期45卷 111-120页

作者：刘德波吴昱澎许珂大林海波吉林大学化学学院无机合成与制备化学国家重点实验室长春130012

钛基铅酸电池能够大幅度提高铅酸电池的能量密度,并且解决了传统铅酸电池正极板易腐蚀和软化的问题,商业化潜力巨大.然而,相比于传统铅酸电池成熟的回收工艺和再生铅的利用,钛基铅酸电池的回收方法以及回收材料的应用途径是未来钛基铅... 详细信息

钛基铅酸电池能够大幅度提高铅酸电池的能量密度,并且解决了传统铅酸电池正极板易腐蚀和软化的问题,商业化潜力巨大.然而,相比于传统铅酸电池成熟的回收工艺和再生铅的利用,钛基铅酸电池的回收方法以及回收材料的应用途径是未来钛基铅酸电池应用和发展的关键.本文制备了源于钛基铅酸电池的再生钛基的正负极板栅,将正极板栅组成为再生钛基体/锡锑中间层/铅,将负极板栅组成为再生钛基体/铜/铅.通过研究源于钛基铅酸电池的再生钛基体用于板栅集电体的电化学性能,讨论了循环应用的可能性.结果表明,基于再生钛基正极板的活性物质放电比容量为72.4mA·h/g,相应电池在0.5C100%DoD(放电深度)下的循环寿命为180次;基于再生钛基负极板的活性物质放电比容量为98mA·h/g,相应电池在0.5C100%DoD下的循环寿命达到332次,用再生钛基体制备的板栅及电池的性能与纯钛基体相同.

关键词：铅酸电池再生钛基体板栅循环利用循环寿命

数智化时代会计改革创新与新质生产力的融合发展

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财务与会计 2024年第14期 71-72页

作者：孙倩吴昱昊刘志杰石家庄铁道大学管理学院河北中医药大学中国邮政集团有限公司培训中心

随着人工智能、大数据、区块链等先进技术的产生,数智化新生态必然推动经济社会的快速发展。然而,数智化生态使得会计领域呈现出易变、不确定、复杂和模糊(VUCA)的趋向。会计作为一门专业性较强的现代学科,它既受科技、经济、管理、系... 详细信息

随着人工智能、大数据、区块链等先进技术的产生,数智化新生态必然推动经济社会的快速发展。然而,数智化生态使得会计领域呈现出易变、不确定、复杂和模糊(VUCA)的趋向。会计作为一门专业性较强的现代学科,它既受科技、经济、管理、系统论等学科的思想影响,又与各学科相互渗透。新质生产力是会计改革创新的内在驱动力,其与现代会计如何实现互融互通成为关注的焦点。

关键词：会计改革现代会计内在驱动力人工智能现代学科区块链大数据系统论

慢病毒载体介导过表达和敲低miR-155的AB 8/13细胞株的建立

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右江医学 2022年第5期50卷 321-327页

作者：唐志明林栩梁钊王晨韦美理王蓉吴昱升黄慕源右江民族医学院附属医院肾内科广西免疫相关性疾病医学科研基础保障重点实验室广西百色533000

目的利用慢病毒载体构建稳定过表达miR-155的AB 8/13细胞株(AB 8/13-LV-has-miR-155)和稳定敲低miR-155的AB 8/13细胞株(AB 8/13-LV-has-miR-155p inhibiton),为研究miR-155在足细胞焦亡和肾脏疾病中的作用奠定基础。方法体外培养AB 8/13细胞,使用不同浓度嘌呤霉素刺激AB 8/13细胞48 h,在光学显微镜下观察AB 8/13细胞的死亡情况;使用LV-has-miR-155阴性对照病毒、LV-has-miR-155-5p inhibiton阴性对照病毒分别感染AB 8/13细胞,在荧光显微镜下观察AB 8/13细胞的状态和感染效率;在嘌呤霉素筛选出稳定细胞株后,通过实时荧光定量PCR法检测稳定细胞株的miR-155表达量。结果在3.5μg/mL及以上浓度的嘌呤霉素作用于AB 8/13细胞48 h后,所有细胞全部死亡。LV-has-miR-155慢病毒感染AB 8/13细胞的感染效率达到80%的最佳条件为在含HiTransG P的完全培养基中进行感染,MOI为10;LV-has-miR-155-5p inhibiton慢病毒感染AB 8/13细胞的感染效率达到80%的最佳条件为在含HiTransG A的完全培养基中进行感染,MOI为100。qRT-PCR结果显示AB 8/13-LV-has-miR-155细胞株的miR-155表达量明显升高,AB 8/13-LV-has-miR-155p inhibiton细胞株的miR-155表达量降低。结论成功构建AB 8/13-LV-has-miR-155稳定细胞株和AB 8/13-LV-has-miR-155p inhibiton稳定细胞株,为进一步探究miR-155在人足细胞焦亡中的作用机制奠定基础。

关键词： AB 8/13细胞慢病毒载体 miR-155

基于反障碍距离加权的复杂场景电磁频谱地图构建方法

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电子与信息学报 2024年

作者：陶诗飞吴昱江罗佳丁浩王元贺电磁空间安全全国重点实验室南京理工大学电子工程与光电技术学院南京理工大学工程训练中心

针对复杂场景中存在电磁波不可穿透的障碍物导致电磁频谱地图(REMs)构建性能不佳、反距离加权(IDW)算法受限于插值邻域的人工选择等问题，该文提出一种基于Voronoi图的反障碍距离加权(VIODW)的复杂场景电磁频谱地图构建算法。该算法通... 详细信息

针对复杂场景中存在电磁波不可穿透的障碍物导致电磁频谱地图(REMs)构建性能不佳、反距离加权(IDW)算法受限于插值邻域的人工选择等问题，该文提出一种基于Voronoi图的反障碍距离加权(VIODW)的复杂场景电磁频谱地图构建算法。该算法通过创建包含障碍物的Voronoi图，为每一个待插值点自适应选定插值邻域用于电磁频谱数据构建，并利用任意角度路径寻优算法(ANYA)计算得到待插值点与插值邻域内每个监测站点之间的障碍距离，最后以障碍距离的反幂次作为权重加权获得待插值点处的电磁频谱数据，实现高精度的复杂场景电磁频谱地图构建。理论分析和仿真结果表明，该方法具有良好的构建精度，能够准确拟合出电磁波在复杂场景中的功率分布情况，为复杂场景下电磁频谱地图高精度构建提供了一种有效方法。

关键词：电磁频谱地图反距离加权插值障碍距离复杂场景