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干细胞移植修复椎间盘退变的研究现状

中国修复重建外科杂志 2013年第5期27卷 575-579页

作者：王锋吴小涛王运涛鲍军平东南大学附属中大医院骨科南京210009

目的总结干细胞对椎间盘退变的修复机制,综述干细胞移植修复椎间盘退变的研究现状。方法查阅近年干细胞移植修复椎间盘退变的相关文献,分析总结干细胞移植修复椎间盘退变的临床疗效、修复机制、影响修复效果的相关因素,以及面临的主要... 详细信息

目的总结干细胞对椎间盘退变的修复机制,综述干细胞移植修复椎间盘退变的研究现状。方法查阅近年干细胞移植修复椎间盘退变的相关文献,分析总结干细胞移植修复椎间盘退变的临床疗效、修复机制、影响修复效果的相关因素,以及面临的主要问题。结果临床自体干细胞移植可修复椎间盘退变并有效缓解腰腿痛症状。干细胞在退变椎间盘内可向椎间盘软骨细胞分化,促进细胞外基质以及营养因子合成,延缓椎间盘细胞凋亡,维持椎间盘免疫豁免状态。干细胞的种类与数量、细胞移植的载体支架、干细胞移植前的预处理方法,以及移植椎间盘的退变程度等因素皆可影响干细胞移植的修复效果。减少移植干细胞的回漏、调控干细胞在椎间盘中的迁移分布、探明干细胞在退变椎间盘微环境下维持其干细胞特性的能力和规律是面临的全新挑战。结论基于干细胞移植的生物学修复策略是早期扭转椎间盘退变的可行方案。

关键词：干细胞椎间盘退变细胞移植

非接触共培养条件下人BMSCs对氧化应激环境中退变髓核细胞凋亡的保护研究

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中国修复重建外科杂志 2010年第4期24卷 391-398页

作者：王锋吴小涛王运涛李果张明东南大学附属中大医院骨科南京210009

目的BMSCs移植可修复椎间盘退变,但确切修复机制尚不明确。探讨非接触共培养条件下人BMSCs对氧化应激诱导退变髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)凋亡的保护作用,了解BMSCs移植修复椎间盘退变的可能机制。方法密度梯度离心联合贴壁... 详细信息

目的BMSCs移植可修复椎间盘退变,但确切修复机制尚不明确。探讨非接触共培养条件下人BMSCs对氧化应激诱导退变髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)凋亡的保护作用,了解BMSCs移植修复椎间盘退变的可能机制。方法密度梯度离心联合贴壁法分离、培养正常人BMSCs,并鉴定CD34、CD45、CD13细胞表面分子。胶原酶消化法分离、培养人退变椎间盘NPCs,HE染色、倒置相差显微镜观察NPCs细胞形态,甲苯胺蓝染色、免疫细胞化学染色鉴定NPCs的类软骨细胞表型。取第3代BMSCs和第1代NPCs按共培养体系不同分为4组:A组单纯NPC(s1×106个)培养,不行凋亡诱导;B组BMSCs(1×106个)与NPCs(1×106个)共培养;C组BMSCs(3×105个)与NPCs(1×106个)共培养;D组单纯NPCs(1×106个)培养,行凋亡诱导。B、C、D组分别于共培养3、7d加入0.1mmolH2O2作用20min诱导NPCs凋亡。胰蛋白酶消化收集各组NPCs,行DAPI染色观察细胞核形态,Annexin-V/碘化丙啶染色、流式细胞仪计算凋亡率,半定量RT-PCR检测Bcl-2、Bax基因转录水平,Western-blot检测Caspase-3蛋白含量。结果成功分离并培养人BMSCs和人退变椎间盘NPCs;BMSCs鉴定呈CD34-、CD45-、CD13+;第1代NPCs呈梭形或多角形,于胞质内表达Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖。DAPI染色示凋亡的NPCs可见细胞核固缩;共培养3、7d后,B组(29.26%±8.90%,18.03%±2.25%)及C组(37.10%±3.28%,13.93%±1.25%)细胞凋亡率均低于D组(54.90%±5.97%,26.97%±3.10%),高于A组(15.67%±1.74%,8.87%±0.15%),比较差异均有统计学意义(P0.05);Western blot检测示B、C组NPCs的Cas-pase-3蛋白表达量低于D组,高于A组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论非接触共培养条件下人BMSCs可一定程度保护氧化应激诱导的退变NPCs凋亡,BMSCs共培养预处理的NPCs可能通过降低Bax/Bcl-2的转录比例来增强抗凋亡能力。

关键词： BMSCs 髓核细胞共培养椎间盘退变细胞凋亡氧化应激

白介素-1α在退变腰椎间盘中的分布与神经根性疼痛的相关性

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中国临床康复 2002年第22期6卷 3352-3353页

作者：吴小涛赵延勋东南大学附属中大医院江苏南京210009

目的研究白介素-1α(IL-1α)在退变腰椎间盘中的表达与分布,探讨其在坐骨神经痛发生机制中的作用。方法收集30例腰椎间盘突出症手术切除的椎间盘组织,每例在3个部位取材:(1)凸入椎管内与神经根紧贴的椎间盘组织(A组);(2)软骨终板间的椎... 详细信息

目的研究白介素-1α(IL-1α)在退变腰椎间盘中的表达与分布,探讨其在坐骨神经痛发生机制中的作用。方法收集30例腰椎间盘突出症手术切除的椎间盘组织,每例在3个部位取材:(1)凸入椎管内与神经根紧贴的椎间盘组织(A组);(2)软骨终板间的椎间盘(B组);(3)软骨终板(C组)。6份正常髓核取自4例急性腰椎外伤骨折患者。应用IL-1α单克隆技术,采用SP免疫组化染色技术,对标本中IL-1α表达水平进行检测。结果IL-1α表达水平A组明显高于B组及C组(P<0.05)。结论IL-1α在退变腰椎间盘3个部位均有表达,但分别不一致;腰椎间盘突出症术后坐骨神经痛不能缓解,可能与残留椎间盘中IL-1α有关。

关键词：白介素-1α 退变腰椎间盘神经根性疼痛坐骨神经痛腰椎间盘突出症

内窥镜下后路腰椎椎体间融合附加单侧椎弓根螺钉固定的力学基础

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中国矫形外科杂志 2014年第7期22卷 632-636页

作者：王运涛陈辉吴小涛王以进东南大学附属中大医院骨科南京210009 上海大学生物力学工程研究所上海201800

[目的]通过生物力学试验评价内窥镜下后路腰椎椎体间融合(PLIF)附加单侧椎弓根螺钉固定的稳定性及力学合理性。[方法]建立PLIF术式相关的小牛腰椎模型,进行前屈、后伸、左右侧屈、扭转等的非破坏性测定,记录融合节段L4、5和邻近节段L3、... 详细信息

[目的]通过生物力学试验评价内窥镜下后路腰椎椎体间融合(PLIF)附加单侧椎弓根螺钉固定的稳定性及力学合理性。[方法]建立PLIF术式相关的小牛腰椎模型,进行前屈、后伸、左右侧屈、扭转等的非破坏性测定,记录融合节段L4、5和邻近节段L3、4的应变、应力、腰椎的轴向刚度和扭转刚度等力学量并对比分析。[结果]PLIF附加单侧椎弓根螺钉固定组融合节段上的应变、应力在前屈、后伸、侧屈等工况下较正常组有所减少但差异无统计学意义(P>0.05),而与PLIF附加双侧椎弓根螺钉固定组间差异有非常显著性意义(P0.05);而与PLIF附加双侧椎弓根螺钉固定组间差异有统计学意义(P0.05),但明显低于PLIF附加双侧椎弓根螺钉固定组(P0.05),而在前屈时与PLIF附加双侧椎弓根螺钉固定组间差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]PLIF附加单侧椎弓根螺钉固定可以弥补由于后方骨性和韧带结构部分破坏所造成的医源性不稳,增强腰椎的初始稳定性;在重建脊柱稳定性的同时,并没有增加邻近节段退行性疾病发生的危险。

关键词：内窥镜肌肉骨骼系统螺钉重建应力分布生物力学

椎间盘镜腰椎间盘切除术与开放式手术对患者应激反应的实验研究

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中国矫形外科杂志 2007年第19期15卷 1504-1507页

作者：王晖吴小涛熊传芝马超陈明徐州市中心医院暨东南大学医学院附属徐州医院骨科江苏221009 南京东南大学医学院附属中大医院骨科 210009

[目的]研究椎间盘镜腰椎间盘切除术与开放式手术对患者细胞因子应激反应的影响。[方法]前瞻性随机对照研究:选择符合研究条件的病人,随机分为两组。一组采用椎间盘镜(METRx)行后路腰椎间盘髓核摘除术,另一组行开放式腰椎间盘髓核摘除术... 详细信息

[目的]研究椎间盘镜腰椎间盘切除术与开放式手术对患者细胞因子应激反应的影响。[方法]前瞻性随机对照研究:选择符合研究条件的病人,随机分为两组。一组采用椎间盘镜(METRx)行后路腰椎间盘髓核摘除术,另一组行开放式腰椎间盘髓核摘除术,各约30例。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别检测手术前和手术后第1、2、4、8、24、48h患者血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的数值。同时检测各时段血清C反应蛋白(CRP)和外周血白细胞(WBC)数量。[结果]采用椎间盘镜髓核摘除术(MED)组相比开放式手术(OD)组手术切口小、出血少、住院时间短,但手术时间偏长。两组手术前后比较肢体疼痛视觉模拟评分(VAS)值均明显降低。术后24h两组CRP值均达到峰值,但OD组较MED组(CRP)值明显升高。术后8h左右IL-1β、IL-6、TNF-α均达到峰值,OD组较MED组IL-1β、IL-6、TNF-α值均明显升高。术后24hWBC数量OD组较MED组明显升高。[结论]椎间盘镜(METRx)腰椎间盘切除术与开放式手术相比,患者组织细胞因子应激反应小,创伤小,疗效接近。

关键词：应激反应椎间盘切除术细胞因子椎间盘镜(METRx)

Pluronic F-127负载骨髓间充质干细胞和bFGF及BMP-2修复兔膝关节骨软骨缺损

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中国实用外科杂志 2011年第S1期31卷 42-44页

作者：黄开杨金华王筱林吴小涛常熟市第二人民医院骨科江苏常熟215500 东南大学附属中大医院江苏南京210009

目的探讨应用Pluronic F-127负载骨髓间充质干细胞(MSCs)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及骨形态发生蛋白(BMP-2)修复兔膝关节骨软骨缺损的可行性及效果。方法对常熟市第二人民医院骨科应用组织工程支架等材料修复兔膝关节骨软骨缺损... 详细信息

目的探讨应用Pluronic F-127负载骨髓间充质干细胞(MSCs)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及骨形态发生蛋白(BMP-2)修复兔膝关节骨软骨缺损的可行性及效果。方法对常熟市第二人民医院骨科应用组织工程支架等材料修复兔膝关节骨软骨缺损的资料进行分析。结果术后4周时修复效果不明显。术后16周,实验组缺损表面平整光滑,半透明,质坚韧,不易辨认,缺损上层以透明样软骨修复为主,表达Ⅱ型胶原,而缺损下层形成松质骨,表达Ⅰ型胶原,Pluronic F-127基本降解仅残余少量颗粒。而细胞组和生长因子组缺损表面不平整,界限清晰,修复组织中间以纤维组织为主,没有明显的Ⅰ和Ⅱ型胶原表达,周缘见少许纤维软骨出现。对照组仅缺损底部有纤维组织覆盖。组织学评分术后4周和16周时实验组的修复效果要好于其他三组(P<0.05),而实验组的术后16周时修复效果好于4周(P<0.05)。结论 Pluronic F-127负载MSCs和bFGF及BMP-2的复合物最终形成类骨软骨样修复组织,可以同时修复关节软骨及软骨下骨的联合缺损。

关键词：骨髓间充质干细胞骨软骨缺损 Pluronic F-127 碱性成纤维细胞生长因子

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椎间盘髓核细胞老化的微环境因素研究现状

中国脊柱脊髓杂志 2016年第4期26卷 370-374页

作者：康新桂吴小涛时睿蔡峰王锋东南大学附属中大医院脊柱外科中心南京市210009

椎间盘退变（intervertebral disc degeneration,IDD）继发的脊柱不稳与椎管狭窄是引起腰腿痛的主要原因。老化的髓核细胞（nucleus pulposus cells,NPCs）在退变的椎间盘组织中广泛聚集,这些老化的NPCs能诱导并加速IDD。与细胞程序性... 详细信息

椎间盘退变（intervertebral disc degeneration,IDD）继发的脊柱不稳与椎管狭窄是引起腰腿痛的主要原因。老化的髓核细胞（nucleus pulposus cells,NPCs）在退变的椎间盘组织中广泛聚集,这些老化的NPCs能诱导并加速IDD。与细胞程序性凋亡不同,老化细胞仍有代谢活性,却停止分裂增殖,同时上调炎症因子和基质降解酶的表达,通过形成老化分泌表型（senescent-associated secretory phenotypes,SASP）来恶化邻近细胞生存的微环境。

关键词：微环境细胞老化椎间盘髓核髓核细胞分裂增殖椎间盘组织 intervertebral 椎管狭窄 degeneration 程序性凋亡

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椎间盘髓核细胞表型的研究进展

东南大学学报（医学版） 2015年第3期34卷 443-447页

作者：蔡峰吴小涛王锋东南大学医学院附属中大医院脊柱外科江苏南京210009

髓核细胞特异性表型是识别髓核细胞和研究其生物学行为的基础,同时也是基因干预、细胞移植等生物学修复椎间盘退变的前提。髓核细胞兼有软骨细胞和脊索细胞的表型特点,而特定基因的转录和表达调控又广泛受到椎间盘局部微环境以及椎间盘... 详细信息

髓核细胞特异性表型是识别髓核细胞和研究其生物学行为的基础,同时也是基因干预、细胞移植等生物学修复椎间盘退变的前提。髓核细胞兼有软骨细胞和脊索细胞的表型特点,而特定基因的转录和表达调控又广泛受到椎间盘局部微环境以及椎间盘退行性变的影响。部分髓核细胞亚群还具有祖细胞的生物学特性并表达特定的表型。对髓核细胞表型的研究有助于推动椎间盘退变生物学治疗的进展。

关键词：椎间盘退变髓核细胞表型软骨细胞脊索细胞髓核祖细胞文献综述

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高等数学例题与习题

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