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Beclin1基因干预后SKOV3细胞mRNA和蛋白质表达水平变化的初步研究

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Beclin1基因干预后SKOV3细胞mRNA和蛋白质表达水平变化的初步研究

作者：吕雪怡昆明医科大学

学位级别：硕士

目的本研究通过干预自噬基因Beclinl在SKOV3细胞中的表达量(过表达和表达抑制),应用基因芯片技术和荧光差异双向电泳-质谱技术检测出Beclinl干预后SKOV3细胞中mRNA和蛋白质的表达变化。方法体外培养卵巢癌细胞SKOV3,按不同处理因素分组... 详细信息

目的本研究通过干预自噬基因Beclinl在SKOV3细胞中的表达量(过表达和表达抑制),应用基因芯片技术和荧光差异双向电泳-质谱技术检测出Beclinl干预后SKOV3细胞中mRNA和蛋白质的表达变化。方法体外培养卵巢癌细胞SKOV3,按不同处理因素分组。SKOV3-Beclinl组：Beclinl过表达组(转染重组载体pcDNA3.1/Beclinl);SKOV3-pcDNA31组：Beclinl过表达组对照组(转染空白载体pcDNA3.1);SKOV3-siRNA组：Beclinl降表达组(转染siRNA干扰探针);SKOV3-RNAiMAX组：Beclinl降表达组对照组(转染siRNA的转染试剂RNAiMAX);对照组：SKOV3细胞组(未处理SKOV3)。通过荧光定量PCR检测Beclinl在五组中的表达。然后通过基因芯片技术和荧光差异双向电泳-质谱技术检测出SKOV3-Beclinl组、SKOV3-siRNA组和对照组中mRNA和蛋白质的表达变化。1、 Beclinl基因的siRNA探针、过表达载体转染卵巢癌SKOV3细胞后,荧光定量PCR检测,结果显示转染后SKOV3-Beclinl组中Beclinl的相对拷贝量明显增高,SKOV3-siRNA组中Beclinl的相对拷贝量明显降低,说明转染成功,成功实现了Beclinl基因在SKOV3细胞中的表达变化,并且后续的实验表明Beclinl在mRNA水平和蛋白水平都发生了相应的变化。2、通过基因芯片技术检测出5110个在mRNA表达水平发生变化的基因,其中18个基因在蛋白水平发生表达变化,分别是PTPRK、 AMIG02、 PDIA3、 SCAMC、 MSN、 SAG、 ANXA3、 ANXA5、 ERP29、 GSTPl、 PCK2、 MVP、 PRDX4、 TDPX、 BECNl、 SOD2、 STX5、***基因干预SKOV3后,通过荧光差异双向电泳-质谱实验检出了32个表达水平发生变化蛋白,分别是线粒体乙醛脱氢酶、两性蛋白诱导蛋白、膜联蛋白A3、膜联蛋白A5、钙依赖线粒体载体蛋白、DOCK蛋白、内质网蛋白29、线粒体烯脂酰辅酶A水解酶、beclinl蛋白、线粒体谷氨酰胺肾异构体、谷胱甘肽S-转移酶、缺氧上调蛋白1、人主要穹窿蛋白、线粒体甲基丙二酸辅酶A差向异构酶、膜突蛋白、肌球蛋白、线粒体泛醌Fe-S蛋白、线粒体NADH-泛醌氧化还原酶75KDa亚组、过氧化还原蛋白4、线粒体三磷酸鸟苷、蛋白质二硫键异构酶A3、mRNA前体加工因子19、受体型蛋白络氨酸磷酸酶K,视网膜色素变性1-样1蛋白、s-抑制蛋白、锰超氧化物岐化酶、突触融合蛋白5、线粒体硫氧还原蛋白依赖性过氧化物还原酶、锌指蛋白292。结论1、筛选出在mRNA表达水平发生变化的基因5110个;表达水平变化的蛋白32个,其中的18个蛋白同时在mRNA水平发生相应的变化。分别是受体型蛋白络氨酸磷酸酶k、两性蛋白诱导蛋白2、蛋白质二硫键异构酶A3、钙依赖线粒体载体蛋白、膜突蛋白、s-抑制蛋白、膜联蛋白A3、膜联蛋白A5、内质网蛋白29、谷胱甘肽S-转移酶、线粒体三磷酸鸟苷、人主要穹窿蛋白、过氧化还原蛋白4、线粒体硫氧还原蛋白依赖性过氧化物还原酶、beclinl蛋白、锰超氧化物岐化酶、突触融合蛋白5、、锌指蛋白292。

关键词： SKOV3细胞 Beclin1基因蛋白质 mRNA

压力生物反馈核心稳定训练联合吸气肌训练对脑卒中偏瘫患者肺功能的影响

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中国康复医学杂志 2024年第4期39卷 577-580页

作者：王璐怡吕雪莹张玉婷耿雨涵王丛笑首都医科大学附属北京康复医院康复诊疗中心北京市100144

脑卒中是世界范围内发病率和致残率较高的疾病之一,在脑卒中患者中,呼吸功能障碍也是一种常见和严重的并发症[1-2],脑卒中患者存在膈肌、肋间外肌及腹肌等呼吸肌部分或全部肌力下降的情况[3]。呼吸肌无力是由于中枢神经系统损伤引起的... 详细信息

脑卒中是世界范围内发病率和致残率较高的疾病之一,在脑卒中患者中,呼吸功能障碍也是一种常见和严重的并发症[1-2],脑卒中患者存在膈肌、肋间外肌及腹肌等呼吸肌部分或全部肌力下降的情况[3]。呼吸肌无力是由于中枢神经系统损伤引起的呼吸相关肌肉的力量降低或协调性收缩障碍[4],也有研究认为,呼吸功能的降低与住院后长期卧床和呼吸功能失调导致的氧转运能力下降有关[5]。呼吸肌功能下降会导致脑卒中患者肺部感染的风险及病死率增加,加重功能障碍,并且在康复训练或有氧运动时容易疲劳,延长康复进程[6]。国内外研究表明,呼吸肌训练可以提高脑卒中患者心肺功能,改善患者的运动功能及生活质量[7—9]。

关键词：脑卒中患者呼吸肌功能呼吸功能障碍呼吸肌无力康复进程康复训练功能失调有氧运动

郡郭东南一派流——国博藏祝允明《草书七绝三首诗卷》品鉴

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中国书法 2024年第3期 190-192页

作者：吕雪菲中国国家博物馆

《草书七绝三首诗卷》,是其草书风格即将形成前的一幅厚积薄发的大草作品,此卷在笔法、笔势和笔意上,上追黄庭坚而远接晋唐,是一幅不计工拙而工拙超然的畅神之作,经考证,大约为其四十四岁前后所书。诗文内容与书写风格相得益彰,折射出... 详细信息

《草书七绝三首诗卷》,是其草书风格即将形成前的一幅厚积薄发的大草作品,此卷在笔法、笔势和笔意上,上追黄庭坚而远接晋唐,是一幅不计工拙而工拙超然的畅神之作,经考证,大约为其四十四岁前后所书。诗文内容与书写风格相得益彰,折射出作者高深的文学修养、审美境界和寄情山水的不羁个性。

关键词：祝允明草书形成状态诗文

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基于网络监督数据的细粒度图像分类方法研究

基于网络监督数据的细粒度图像分类方法研究

作者：吕雪帅山东师范大学

学位级别：硕士

得益于大规模且标注精确的数据集,深度学习技术在多种计算机视觉任务上已取得显著成就。在细粒度图像分类领域,任务的复杂性显著增加,要求不仅将图像分辨为基础类别,还需进一步将这些类别细分为更加具体的子类别。这一过程对数据标注的... 详细信息

得益于大规模且标注精确的数据集,深度学习技术在多种计算机视觉任务上已取得显著成就。在细粒度图像分类领域,任务的复杂性显著增加,要求不仅将图像分辨为基础类别,还需进一步将这些类别细分为更加具体的子类别。这一过程对数据标注的专业性和准确性提出了更高的要求。然而,精确标注不仅费时费力,而且很难大规模实现,因此,许多研究者开始探索使用网络监督学习作为一种可行的替代方案。尽管网络监督方法提供了一个有吸引力的解决方案,但互联网上的图像及其标注的可靠性并不总能得到保证,这些带有噪声的标签极有可能导致深度神经网络的过度拟合,从而削弱了模型的性能。面对标签噪声问题,现有的研究大多采用样本选择策略,即在训练过程中优先选择损失较低的样本作为“干净”数据,进而更新模型。这种做法虽然在一定程度上有效,但也有可能导致一些重要但损失较高的“难”样本被遗漏,从而影响模型的泛化能力。此外,尽管通过引入噪声转移矩阵来纠正损失的方法在理论上是可行的,但实际操作中却复杂且容易过拟合。针对上述挑战,本文提出了一种新颖的基于协同训练的网络监督标签校正方法,并设计了一个三阶段的网络监督引导程序以精确建立图像与其标签之间的关系。本研究的主要贡献和创新点概括如下:(1)在考虑数据集可能同时包含分布内和分布外噪声的复杂情况下,本文提出了一种创新的基于协同训练框架的方法,专门用于识别噪声样本并执行细粒度图像分类任务。该框架巧妙地结合了“样本选择”与“损失校正”两种策略,从而能够有效地从含噪声的数据中学习细粒度图像特征,以完成分类任务。训练过程旨在识别并剔除分布外噪声样本,同时对分布内噪声样本进行重新标记。具体而言,首先对所有数据进行预热训练,并使用模型输出与给定标签计算交叉熵损失。随后,在预训练阶段结束时,通过记录并排序模型输出来筛选出分布外的噪声数据,以便在后续阶段只使用筛选后的数据。通过比较两个想通网络预测的一致性,进一步将数据集分为干净数据集和分布内噪声数据集。此外,该方法还提出了一种基于历史预测分布的重新标记策略,该策略通过累积预测结果来更新分布内噪声样本的标签,并将这些重新标记的样本与干净样本一起用于监督学习。(2)为了深入学习图像与给定标签及真实标签之间的关系,并且减少同时训练两个网络带来的巨大开销,本文进一步提出了一种三阶段网络监督方法,以指导图像与标签之间的关系学习。首先,通过对所有数据执行自监督预训练,然后训练一个早期停止分类器,基于每个样本到类中心的距离,将训练集初步划分为干净集和噪声集。接着,在半监督学习阶段,通过计算伪损失将噪声集进一步细分,丢弃那些无用的分布外噪声,而将可重用的分布内噪声重新标记后加入干净集。最后,在第三阶段,对这些重新组合的干净集样本进行监督学习,从而实现更准确的细粒度图像分类。

关键词：网络监督学习细粒度图像分类噪声标签数据增强

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数据犯罪司法解释条款的反思与完善研究

数据犯罪司法解释条款的反思与完善研究

作者：吕雪倩烟台大学

学位级别：硕士

从成文法的角度出发,狭义的数据犯罪概念是指犯罪对象为计算机信息系统数据的犯罪行为,具体可以描述为违反国家规定,针对计算机信息系统数据而实施的非法获取、删除、修改或者增加的犯罪行为。我国《刑法》中明确规定以计算机信息系统... 详细信息

从成文法的角度出发,狭义的数据犯罪概念是指犯罪对象为计算机信息系统数据的犯罪行为,具体可以描述为违反国家规定,针对计算机信息系统数据而实施的非法获取、删除、修改或者增加的犯罪行为。我国《刑法》中明确规定以计算机信息系统数据为对象的罪名主要包括《刑法》第285条第2款规定的非法获取计算机信息数据罪与《刑法》第286条第2款规定的破坏计算机信息系统罪(以增删计算机信息数据为行为手段),共计两个罪名。基于维护网络安全与计算机安全、打击计算机犯罪的目的,有关机关出台了《计算机案件司法解释》,其中包含了对数据犯罪罪名解释的条款内容,主要包括数据犯罪后果的判断标准、共犯责任等内容,初步完善了数据犯罪的刑法规制体系。但是,由于《计算机案件司法解释》的主要目的在于保护计算机信息系统安全,所以司法机关在应用司法解释进行数据犯罪刑法规制活动时面临较多实践困境。首先,司法解释对于“计算机信息系统数据”概念的解释模糊。其次,不同地区的司法工作人员或者不同机关的司法工作人员出现“同案不同判”现象。再其次,司法解释没有精确解释数据犯罪违法性的规范判断和技术判断标准。此外,面对“网络爬虫”等公开数据获取行为,司法解释没有给司法工作人员更多的指导。完善数据犯罪司法解释的基本路径在于识别数据犯罪的保护法益,法益保护理论可以弥补数据犯罪司法解释的滞后性,可以保证其谦抑性同时兼顾刑事违法性判断和实质违法性判断。数据犯罪保护法益应当为数据安全法益,主要原因在于:首先,数据安全是一种必要的生活利益;其次,数据安全法益尊重技术判断规范判断、具有刑法上的可侵害风险;最后,数据安全法益可独立于其他犯罪法益具有刑法进行保护的特殊性。数据安全法益本质上要保护的是数据自身的价值属性,例如市场经济要素属性等。其具体内容主要为保护数据的保密性、完整性和可用性。数据保密性是非法获取数据罪所保护的直接法益数据的完整性与可用性是破坏数据罪所保护的直接法益。为满足司法实践需要并且在大数据时代背景下保障数据产业的蓬勃发展,对数据犯罪司法解释再完善提出以下建议:首先,司法解释中需要通过数据的“二分属性”来界定数据犯罪所要保护的数据范围和类型。从范围来讲,数据犯罪保护所有计算机信息系统犯罪不需要限缩,从类型来讲,数据犯罪保护主要表现为数据技术属性的计算机信息系统数据;其次,应当完善非法获取型数据犯罪和增删改型数据犯罪的入罪基准,完善其技术判断标准和犯罪后果量化标准,使其符合司法实践的现实需要并且符合数据犯罪的技术特征;最后,司法解释应当针对“网络爬虫”等数据获取行为规定行为善意判断标准,若数据获取行为符合善意标准应当对其出罪。

关键词：数据安全数据犯罪数据安全法益非法获取计算机信息系统数据罪破坏计算机信息系统

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链图的距离特征值

运筹学学报（中英文） 2024年第1期28卷 112-120页

作者：吕雪征马梦郁中国人民大学数学学院北京100872

如果一个图G不包含2K_(2),C_(3)及C_(5)作为导出子图,称其为链图。在所有点数和边数给定的连通二部图中,链图具有最大的谱半径,这使得链图在图谱理论中占有一席之地。本文研究了连通链图距离特征值的分布情况。对于点数为n的连通链图G=G... 详细信息

如果一个图G不包含2K_(2),C_(3)及C_(5)作为导出子图,称其为链图。在所有点数和边数给定的连通二部图中,链图具有最大的谱半径,这使得链图在图谱理论中占有一席之地。本文研究了连通链图距离特征值的分布情况。对于点数为n的连通链图G=G(t_(1),…,t_(h);s_(1),…,s_(h)),我们证明了-2是G的重数为n-2h的距离特征值,且G有h-1个距离特征值小于-2和h+1个距离特征值大于-2。

关键词：链图距离特征值合理划分

企业特质风险与高管机会主义减持——基于行为代理模型的实证考察

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系统工程理论与实践 2024年第7期44卷 2155-2174页

作者：陈奉先董静怡首都经济贸易大学金融学院北京100070

高管的风险承担往往对企业发展有重要意义.基于行为代理模型的分析思路,本文使用高管机会主义减持行为刻画高管风险承担,并以2007年至2022年中国沪深A股上市企业为考察对象,深入分析特质风险对高管机会主义减持行为的影响和作用机制,并... 详细信息

高管的风险承担往往对企业发展有重要意义.基于行为代理模型的分析思路,本文使用高管机会主义减持行为刻画高管风险承担,并以2007年至2022年中国沪深A股上市企业为考察对象,深入分析特质风险对高管机会主义减持行为的影响和作用机制,并探讨了内外监督机制的治理效果.研究发现,企业特质风险显著促进高管机会主义减持行为,并且这一发现在一系列内生性和稳健性检验后依然成立.此外,本文结合情境框架发现正向框架会强化特质风险对高管机会主义减持的促进作用,而负向框架会弱化这一作用.机制分析表明,这种关系受到企业高管风险负担的影响.当高管的风险感知水平更高,企业处于非成长期、有控股股东开展股权质押以及行业竞争水平较高时,特质风险对高管机会主义减持的作用更强.最后,本文考察了内部治理、外部机构投资者以及股权激励对高管风险承担的治理作用,证实企业存在多个大股东、有效的内控制度以及外部机构投资者能有效治理特质风险下高管机会主义减持行为,但股权激励并没有实现治理效果.研究结论表明,有效的内部治理制度与外部机构投资者持股是制约特质风险下高管损失规避的关键.

关键词：特质风险机会主义减持行为代理模型内部控制

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基于等面积圆环和伴星夹角的星图识别算法

吉林大学学报（工学版） 2024年第3期54卷 821-827页

作者：张刘何金航刘赫章家保吕雪莹吉林大学仪器科学与电气工程学院长春130012

针对于传统径向和环向特征星图识别算法在构建径向特征过程中伴星分布不均匀以及采用环向特征匹配过程中特征值不稳定的问题,提出了一种等面积圆环划分和伴星矢量夹角相结合的星图识别算法。通过选取动态半径使得径向特征下的圆环面积相... 详细信息

针对于传统径向和环向特征星图识别算法在构建径向特征过程中伴星分布不均匀以及采用环向特征匹配过程中特征值不稳定的问题,提出了一种等面积圆环划分和伴星矢量夹角相结合的星图识别算法。通过选取动态半径使得径向特征下的圆环面积相等,保证伴星落在每个圆环的概率相等,有效提高了径向匹配过程的识别率。对于径向匹配后冗余的导航星,采用伴星组成的矢量夹角特征进行筛选,选定匹配特征值最高的为最终识别结果。仿真模拟结果表明:当添加位置噪声为1像素时,星图识别成功率达到95%;当伪星数目为2颗时,识别率达到98%。相较于传统径向和环向识别算法,本文方法在识别率和识别速度上具有明显优势。

关键词：星图识别径向特征环向特征匹配度

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高校资助育人关键风险分析的模型改进

同济大学学报（自然科学版） 2024年第4期52卷 647-654页

作者：尤筱玥陈慧怡同济大学中德工程学院上海201804 国网上海市电力公司上海200122

以高校资助的“育人”环节为研究对象,对传统失效模式与后果分析(FMEA)模型加以改进,通过结合三角模糊数、风险指标赋权、专家客观赋权、德尔菲法和调研访谈等方式,提出模糊FMEA模型用以分析“育人”环节的失效模式和关键风险。研究发现... 详细信息

以高校资助的“育人”环节为研究对象,对传统失效模式与后果分析(FMEA)模型加以改进,通过结合三角模糊数、风险指标赋权、专家客观赋权、德尔菲法和调研访谈等方式,提出模糊FMEA模型用以分析“育人”环节的失效模式和关键风险。研究发现,改进模型能够更客观反映风险指标重要性和专家话语权的差异,具有较高的精确性和可靠性,同时针对高风险失效模式提出了相应建议。

关键词：失效模式与后果分析模糊集高校资助育人高等教育