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不同类型脂肪酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响及其与PPARγ、Cdk5的关系

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不同类型脂肪酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素表达的影响及其与PPARγ、...

作者：吕玉珊南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景脂联素是一种脂肪细胞因子,因其在防治心血管疾病、降低肥胖患者体重、降血糖等方面发挥的作用而备受关注。许多研究表明膳食因素可影响脂联素的表达,以脂肪酸的影响最为显著。而脂肪酸根据其碳链长短及其饱和程度不同可分为饱... 详细信息

研究背景脂联素是一种脂肪细胞因子,因其在防治心血管疾病、降低肥胖患者体重、降血糖等方面发挥的作用而备受关注。许多研究表明膳食因素可影响脂联素的表达,以脂肪酸的影响最为显著。而脂肪酸根据其碳链长短及其饱和程度不同可分为饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。许多研究表明,不同类型脂肪酸的作用存在差异。另有研究发现在脂联素基因的启动子上存在过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)的反应元件,PPARγ激动剂通过上调脂联素的表达进而使胰岛素的敏感性增强。研究还发现,高脂饮食可激活细胞周期性蛋白激酶Cdk5 (Cyclin-Dependent Kinase 5),导致PPARγ第273位的丝氨酸磷酸化,进而降低PPARγ对脂联素的特定靶基因的调控,使脂联素表达降低。那么不同类型的脂肪酸对脂联素表达的影响如何呢?作为PPARγ的天然配体的脂肪酸是否能通过PPARγ和(或者)Cdk5-PPARγ途径来调节脂联素表达呢?研究目的本研究拟以体外培养并诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞为研究对象,观察不同浓度、不同类型的脂肪酸对3T3-L1成熟脂肪细胞脂联素分泌和表达的影响,发现脂肪酸调节脂联素表达和分泌的规律;观察在不同脂肪酸及同一脂肪酸不同浓度作用下脂联素与PPARy、Cdk5的关系,为进一步探讨脂肪酸调节脂联素表达的分子机制奠定基础。其研究结果将为肥胖及肥胖相关疾病的防治提供新的思路和科学依据。研究方法1.选用不同浓度(25、50、100、200、400μmol/L)的n-3系多不饱和脂肪酸：二十碳五稀酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、α-亚麻酸(a-ALA),n-6系多不饱和脂肪酸：花生四烯酸(AA)、亚油酸(LA),单不饱和脂肪酸：油酸(OA)及饱和脂肪酸：棕榈酸(PA)分别处理体外培养并诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞24h,同时设空白对照、阴性对照(GW9662)及阳性对照(rosiglitazone),用实时荧光定量PCR法检测处理后胞内脂联素、PPARy及Cdk5基因表达,观察胞内脂联素、PPARy及Cdk5基因表达变化及脂联素与PPARy、Cdk5的相互关系。2.用100及400μmol/L的EPA、DHA、a-ALA、AA、LA、OA、PA处理3T3-L1成熟脂肪细胞,收集胞内蛋白后,用Western-blot法检测胞内脂联素、PPARy及Cdk5的蛋白质相对表达量,观察受试后各组胞内脂联素、PPARy及Cdk5蛋白的变化。3.用100μmol/L的EPA、DHA、a-ALA、AA、LA、OA、PA处理3T3-L1成熟脂肪细胞后,收集细胞培养液,用Western-blot法检测培养液中脂联素蛋白质相对表达量,观察胞外脂联素蛋白表达的变化。4.所得数据采用平均数±标准差(X±S)表示,采用统计软件SPSS19.0进行分析。如果方差齐,组间比较采用单因素方差分析(One Way ANOVA),两两比较采用LSD T-test或dunnett T-test;如果方差不齐,运用Welch法和Dunnett’s T3法分别进行组间比较和两两比较。相关性分析采用Pearson相关分析。P0.05)。(3)不同浓度的α-ALA对脂联素、PPARγ及Cdk5基因表达的影响脂肪细胞经不同浓度的α-ALA处理后,其50、100μmol/L浓度组的脂联素基因相对表达量较对照组显著增加(P<0.05),以100μmol/L浓度组最为明显;浓

关键词：脂肪酸 3T3-L1脂肪细胞脂联素 PPARγ Cdk5

用于海水养殖水脱氮的反硝化细菌的诱变及筛选

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海洋科学 2011年第11期35卷 35-40页

作者：吕玉珊齐树亭王晓宇石玉新李芳芳高长虹河北工业大学海水资源高效利用化工技术教育部工程研究中心天津300130 河北工业大学研究生院天津300130

以实验室中已有的反硝化菌株作为出发菌株,对这株自然菌株进行氯化锂和紫外线照射诱变,得到2株硝酸盐还原率高且亚硝酸盐积累量低的突变体L02与Z06。在培养基中硝酸盐起始含量为1 mmol/L,静置培养的条件下,这2株突变株对硝酸盐的还原率... 详细信息

以实验室中已有的反硝化菌株作为出发菌株,对这株自然菌株进行氯化锂和紫外线照射诱变,得到2株硝酸盐还原率高且亚硝酸盐积累量低的突变体L02与Z06。在培养基中硝酸盐起始含量为1 mmol/L,静置培养的条件下,这2株突变株对硝酸盐的还原率均能达到95%以上;摇床条件下培养,其还原率也能达到94%以上,且对亚硝酸盐的积累率均为0。经过5次传代实验,L02与Z06菌株对硝酸盐的还原率始终保持在95%以上,说明其遗传性能稳定。

关键词：反硝化细菌诱变紫外线氯化锂硝酸盐还原率

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盐化潮土不同农田土壤养分和土壤酶活性研究

安徽农业科学 2009年第35期37卷 17620-17622页

作者：焦利卫齐树亭吕玉珊潘腾飞李军冲河北工业大学海水资源高效利用化工技术教育部工程研究中心天津300130

对天津近郊盐化潮土不同农田中土壤脲酶、蛋白酶、转化酶、碱性磷酸酶活性和土壤养分进行了分析研究。结果表明,不同农田中土壤养分含量和酶活性存在显著差异。农田土壤养分和土壤酶活性不仅具有垂直分布的规律而且土壤酶活性和土壤养... 详细信息

对天津近郊盐化潮土不同农田中土壤脲酶、蛋白酶、转化酶、碱性磷酸酶活性和土壤养分进行了分析研究。结果表明,不同农田中土壤养分含量和酶活性存在显著差异。农田土壤养分和土壤酶活性不仅具有垂直分布的规律而且土壤酶活性和土壤养分显著相关。主成分分析提取了转化酶综合因子和全氮因子。转化酶可作为盐化潮土不同农田中土壤养分的肥力指标。

关键词：盐化潮土土壤酶活性土壤养分相关性主成分分析

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配电网线损的理论计算及分析

农业科技与装备 2012年第7期 46-48页

作者：吕玉珊杨涛吕岩东辽县农电有限公司吉林辽源136200

配电网线损是电力企业一项综合性技术指标,其大小直接反映电力企业技术进步与科学管理的现状。降低线损是电力行业开展节能活动的重要方面,也是供电企业降低消耗、提高效益的主要工作之一。针对农村配电网理论线损计算的现状,系统比较... 详细信息

配电网线损是电力企业一项综合性技术指标,其大小直接反映电力企业技术进步与科学管理的现状。降低线损是电力行业开展节能活动的重要方面,也是供电企业降低消耗、提高效益的主要工作之一。针对农村配电网理论线损计算的现状,系统比较理论线损的计算方法,以具体的实际线路为计算模型,确定利用电量分摊法进行线损计算。

关键词：配电网线损电量分摊法模型

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复合固定化微生物脱氮动力学模型研究

水处理技术 2011年第8期37卷 48-52页

作者：李芳芳齐树亭石玉新李军冲吕玉珊河北工业大学生物化工学院天津300130 河北工业大学海水高效利用化工技术教育部工程研究中心天津300130

以聚乙烯醇、海藻酸钠加活性炭为载体,对硝化和反硝化细菌进行固定,开展硝化和反硝化试验,通过正交试验优化脱氮条件,并分析内扩散影响,建立动力学模型。结果表明,菌体质量分数2.5%,活性炭比重为1%,温度32℃,pH 8.0,脱氮效率达88.35%;... 详细信息

以聚乙烯醇、海藻酸钠加活性炭为载体,对硝化和反硝化细菌进行固定,开展硝化和反硝化试验,通过正交试验优化脱氮条件,并分析内扩散影响,建立动力学模型。结果表明,菌体质量分数2.5%,活性炭比重为1%,温度32℃,pH 8.0,脱氮效率达88.35%;内扩散对反应影响可以忽略,可用Monod方程表示反应动力学,动力学参数vmax=2.47×10-3 mg.L-.1s-1,Km=481.38 mg.L-1。

关键词：复合固定化微生物脱氮正交试验动力学模型

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应当允许旁听人员发言

公民导刊 2011年第4期 19-20页

作者：吕玉珊重庆市荣昌县人大常委会办公室

旁听公民是否拥有发言权?目前法律尚无明确规定,各地也有争议。笔者认为,应当允许旁听公民在会上围绕议题发表意见和建议。关于旁听公民的发言权问题,各地做法不一,有的地方禁止,有的地方允许,既然法律没有

关键词：人大常委会发言权

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复合芽孢杆菌在海水养殖水体中脱氮的研究

河北工业大学学报 2011年第6期40卷 34-39页

作者：石玉新齐树亭吕玉珊杜运福河北工业大学海水资源高效利用化工技术教育部工程研究中心天津300130

从海水养殖公司排污池中的底泥中筛选出两株芽孢杆菌W01与Y01.研究表明,W01与Y01菌株对氨氮的去除与生长同步进行,达到稳定期后两株菌对氨氮的去除率分别达到78%和83%.Y01不能在以亚硝酸盐氮或硝酸盐氮为唯一氮源的培养基中生长,而W01... 详细信息

从海水养殖公司排污池中的底泥中筛选出两株芽孢杆菌W01与Y01.研究表明,W01与Y01菌株对氨氮的去除与生长同步进行,达到稳定期后两株菌对氨氮的去除率分别达到78%和83%.Y01不能在以亚硝酸盐氮或硝酸盐氮为唯一氮源的培养基中生长,而W01对亚硝酸盐氮和硝酸盐氮的去除率分别可以达到82%和70%.将两株脱氮能力不同的菌株进行复合配比实验,得到复合比为W01∶Y01(每毫升所含细胞个数比)=1∶3的复合菌株,该复合菌株对无机氮的去除率可达70%左右.采用正交实验确定复合芽孢杆菌对氨氮去除的最佳条件,在pH为6.5,温度为35℃,转速为200 r/min的条件下,复合菌株对氨氮的去除率可达80%以上.

关键词：氨氮无机氮脱氮芽孢杆菌复合菌株

不同PUFAs调节脂肪细胞脂联素和PPAR γ的剂量反应关系

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营养学报 2018年第3期40卷 250-253,260页

作者：李程宋佳吕玉珊国林青毛丽梅南方医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系广州510515

目的探讨不同类型多不饱和脂肪酸(PUFAs)调节3T3-L1脂肪细胞脂联素及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的剂量反应关系和效应差异。方法不同浓度(0、25、50、100、200、400μmol/L)二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、α-亚麻... 详细信息

目的探讨不同类型多不饱和脂肪酸(PUFAs)调节3T3-L1脂肪细胞脂联素及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的剂量反应关系和效应差异。方法不同浓度(0、25、50、100、200、400μmol/L)二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、α-亚麻酸(α-ALA)、花生四烯酸(AA)及亚油酸(LA)处理3T3-L1脂肪细胞24h,实时荧光定量PCR法测定脂联素及PPARγ基因表达水平,Western blot法测定二者蛋白水平,ELISA法测定脂联素分泌水平。结果 50~200μmol/L浓度范围内,n-3PUFAs上调脂联素及PPARγ基因表达,DHA作用最显著(P<0.05);400μmol/L呈现显著抑制效应。100μmol/L时,n-3 PUFAs上调脂联素及PPARγ蛋白表达(P<0.05);仅DHA促进脂联素分泌(P<0.05),n-6PUFAs呈现抑制效应。结论 PUFAs在一定浓度范围内提升脂联素及PPARγ基因表达,高浓度作用时呈现抑制效应。n-3PUFAs更能促进脂联素、PPARγ蛋白合成,并促进脂联素分泌。不同类型PUFAs对PPARγ的不同作用,可能是其对脂联素的调节产生差异的重要原因。

关键词：多不饱和脂肪酸脂联素 PPARγ

n-6/n-3多不饱和脂肪酸对3T3-L1脂肪细胞脂联素及PPARγ表达的调节作用

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营养学报 2016年第2期38卷 152-156页

作者：吕玉珊罗玮宋佳张奕林杰义毛丽梅南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养与食品卫生学系广州510515

目的探讨不同比例、不同浓度的n-6/n-3多不饱和脂肪酸（PUFA）对3T3-L1脂肪细胞脂联素及过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）表达的调节作用。方法用不同比例、不同浓度的n-6/n-3PUFA分别处理已诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,用实时定... 详细信息

目的探讨不同比例、不同浓度的n-6/n-3多不饱和脂肪酸（PUFA）对3T3-L1脂肪细胞脂联素及过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）表达的调节作用。方法用不同比例、不同浓度的n-6/n-3PUFA分别处理已诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞,用实时定量PCR和Western-Blot法测定各处理组胞内脂联素、PPARγmRNA表达水平以及脂联素蛋白表达水平。结果与空白对照相比,n-6/n-3PUFA为1：1时,在25~200μmol/L范围内时显著促进脂联素mRNA表达;比例为5：1时25、50μmol/L浓度组及比例为10：1时50μmol/L浓度组均显著促进脂联素mRNA表达。比例为20：1及30：1时,各浓度组对脂联素mRNA表达主要起抑制作用。在脂肪酸浓度达到400μmol/L时,n-6/n-3PUFA无论何种构成比均抑制脂联素表达。胞内脂联素蛋白表达与脂联素mRNA表达基本一致。PPARγ表达与脂联素表达呈正相关。结论 n-6/n-3PUFA可能通过PPARγ途径,以剂量依赖方式调节脂联素表达。

关键词： 3T3-L1脂肪细胞 n-6/n-3PUFA 脂联素 PPARγ