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应用RIP法检测小肠结肠炎耶氏菌对鼠疫F_1抗体的交叉反应性

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中国地方病防治 1991年第6期6卷 353-354页

作者：陈永金郑彩明叶菊莲浙江省丽水地区卫生防疫站

利用放射免疫沉淀试验(RIP)检测鼠疫F_1抗体的敏感性与特异性均优于广泛应用的间接血凝试验(IHA)。本文将鼠疫抗血清用本室保存的小肠结肠炎耶氏菌抗原吸收后以RIP和IHA测定鼠疫抗血清的残留效价,观察小肠结肠炎耶氏菌对鼠疫F_1的交叉... 详细信息

利用放射免疫沉淀试验(RIP)检测鼠疫F_1抗体的敏感性与特异性均优于广泛应用的间接血凝试验(IHA)。本文将鼠疫抗血清用本室保存的小肠结肠炎耶氏菌抗原吸收后以RIP和IHA测定鼠疫抗血清的残留效价,观察小肠结肠炎耶氏菌对鼠疫F_1的交叉反应。现将结果报告如下。

关键词：鼠疫抗体 RIP 小肠炎耶氏菌

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多重荧光定量PCR甄别霍乱弧菌方法的建立

中华流行病学杂志 2010年第9期31卷 1026-1029页

作者：张政金大智朱水荣叶菊莲罗芸浙江省疾病预防控制中心杭州310051

目的利用多重荧光定量PCR技术,建立一种快速、准确、特异甄别霍乱弧菌的定量方法.方法分别根据霍乱弧菌霍乱毒素A亚单位基因（ctxA）和糖基转移酶基因（LPSgt）作为检测的靶基因,设计引物和TaqMan-MGB探针,探针的5＇端分别用FAM和VIC... 详细信息

目的利用多重荧光定量PCR技术,建立一种快速、准确、特异甄别霍乱弧菌的定量方法.方法分别根据霍乱弧菌霍乱毒素A亚单位基因（ctxA）和糖基转移酶基因（LPSgt）作为检测的靶基因,设计引物和TaqMan-MGB探针,探针的5＇端分别用FAM和VIC进行荧光标记,3＇端标记MGB.优化PCR扩增体系,对多重实时荧光定量PCR方法的特异性、灵敏度、重复性评价,同时进行一定数量临床样本考核鉴定,与常规方法进行比较.结果该方法可准确、特异地鉴定霍乱弧菌,同时能够甄别O139群霍乱弧菌.全部的霍乱弧菌用ctxA基因对应引物和探针检测均为阳性,其中只有O139群霍乱弧菌出现LPSgt基因阳性,其他菌株均无阳性结果.检测的灵敏度为2×102 cfu/ml.同时对收集的45例临床样本进行鉴定,结果显示10例为霍乱弧菌,其中O139群有4例,其余均为阴性结果,与常规鉴定方法一致.结论研究建立的多重荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速,可有效鉴定产毒霍乱弧菌及甄别O139群霍乱弧菌,可用于霍乱监测和防制工作中的实验室诊断.

关键词：霍乱弧菌多重实时荧光定量PCR

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库克沙门菌引起的食物中毒病原学检测

中国卫生检验杂志 2012年第5期22卷 1060-1062页

作者：王晓燕罗芸叶菊莲李琳吴爱萍石国祥杭州市上城区疾病预防控制中心杭州310009 浙江省疾病预防控制中心杭州310002

目的:检测从食物中毒事件中分离到的致病菌的生物学特性,确定食物中毒的病原。方法:参照GB4789.4-2010的方法,对检出的菌株进行表型的鉴定;采用WHO推荐的改良K-B纸片法对检出的菌株进行抗生素敏感试验;运用PFGE方法对检出的菌株进行分... 详细信息

目的:检测从食物中毒事件中分离到的致病菌的生物学特性,确定食物中毒的病原。方法:参照GB4789.4-2010的方法,对检出的菌株进行表型的鉴定;采用WHO推荐的改良K-B纸片法对检出的菌株进行抗生素敏感试验;运用PFGE方法对检出的菌株进行分子分型及流行病学特征分析。结果:从5份粪便样品中检出5株库克沙门菌,从3份剩余食物中检出1株库克沙门菌,共计6株菌。血清抗原式均符合[1,3,19:g,m:-];生物学性状和药敏试验结果一致;PFGE带型完全一致。结论:本次食物中毒是由库克沙门菌污染引起;PFGE技术适用于菌株的同源性分析和传染源的追踪。

关键词：食物中毒库克沙门菌血清学鉴定耐药性脉冲场凝胶电泳

熔解曲线分析方法甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7

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中国卫生检验杂志 2012年第1期22卷 93-95页

作者：金大智罗芸张政叶菊莲程苏云浙江省疾病预防控制中心杭州310051

目的:采用熔解曲线分析技术,建立一种快速、简便、准确地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7方法。方法:选取肠出血性大肠杆菌O157:H7编码脂多糖基因(rfbE)和编码鞭毛抗原基因(fliC)作为检测靶基因,建立荧光PCR反应体系。结果:通过多种标准菌... 详细信息

目的:采用熔解曲线分析技术,建立一种快速、简便、准确地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7方法。方法:选取肠出血性大肠杆菌O157:H7编码脂多糖基因(rfbE)和编码鞭毛抗原基因(fliC)作为检测靶基因,建立荧光PCR反应体系。结果:通过多种标准菌株试验,结果显示所建立的熔解曲线分析法可特异性地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7;纯培养的灵敏度达到2.8×101cfu/ml;检测108例临床样本,其中18例肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性,3例为肠出血性大肠杆菌O157:非H7阳性,与常规培养方法的符合率达到100%。结论:本方法可简便、准确地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7,结果可靠,通过进一步增加反应体系中引物的数量可同时对肠出血性大肠杆菌其他血清型进行鉴定。

关键词：熔解曲线肠出血性大肠杆菌O157:H7 甄别

脉冲场凝胶电泳检测一起汤卜逊沙门菌食物中毒

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中国卫生检验杂志 2012年第5期22卷 1170-1172页

作者：李月华叶菊莲韦俊超王雅琴浙江省东阳市疾病预防控制中心浙江东阳322100 浙江省疾病预防控制中心杭州310051

目的:用脉冲场凝胶电泳对一起食物中毒所分离的汤卜逊沙门菌进行同源性分析。方法:对分离的沙门菌进行生化鉴定、血清学分型、药敏试验后,进行PFGE检测并用Bio Numerics软件对PFGE分型图谱进行分析并绘出聚类分析图。结果:此次食物中毒... 详细信息

目的:用脉冲场凝胶电泳对一起食物中毒所分离的汤卜逊沙门菌进行同源性分析。方法:对分离的沙门菌进行生化鉴定、血清学分型、药敏试验后,进行PFGE检测并用Bio Numerics软件对PFGE分型图谱进行分析并绘出聚类分析图。结果:此次食物中毒分离到8株沙门菌,其中5株是从病人大便或肛拭分离,1株是从厨房抹布分离,2株是从剩余食物分离。经PFGE分析,病人的5株和剩余羊肉的1株完全相同,牛肉和抹布中的2株有1～2条电泳条带的差异。结论:此次食物中毒是由羊肉携带的汤卜逊沙门菌引起。

关键词：汤卜逊沙门菌脉冲场凝胶电泳食物中毒同源性分析

多重实时荧光定量PCR检测肠出血性大肠杆菌O157：H7

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第12期29卷 1135-1139页

作者：金大智张政罗芸程苏云朱敏叶菊莲浙江省疾病预防控制中心杭州310051

目的利用多重荧光定量PCR技术，建立一种快速、准确、特异检测肠出血性大肠杆菌O157：H7的定量方法。方法选取肠出血性大肠杆菌O157：H7编码脂多糖基因（rfoE）和编码鞭毛抗原基因（fliC）作为检测的靶基因，设计引物和TaqMan—MGB探针... 详细信息

目的利用多重荧光定量PCR技术，建立一种快速、准确、特异检测肠出血性大肠杆菌O157：H7的定量方法。方法选取肠出血性大肠杆菌O157：H7编码脂多糖基因（rfoE）和编码鞭毛抗原基因（fliC）作为检测的靶基因，设计引物和TaqMan—MGB探针，探针的5’端分别用FAM和HEX进行荧光标记，3’端标记MGB。优化PCR扩增体系，对多重实时荧光定量PCR方法的特异性、灵敏度、重复性评价，同时进行一定数量临床样本鉴定，与常规方法进行比较。结果本研究所建立的多重实时荧光定量PCR方法可准确、特异地检测和鉴定肠出血性大肠杆菌O157：H7，能够有效甄别肠出血性大肠杆菌O157：H7与非H7菌株，其他菌株均无阳性结果；该方法的灵敏度可达到10CFU／ml；定量检测的批间和批内变异系数均小于5％；对66例临床样本进行评价，结果显示15例肠出血性大肠杆菌O157：H7阳性，2例为肠出血性大肠杆菌O157：非H7阳性，其中16例与常规培养法结果符合，符合率达到98．49％。结论本研究建立的检测肠出血性大肠杆菌O157：H7多重实时荧光定量PCR方法快速，结果准确、可靠，操作简便，为肠出血性大肠杆菌O157：H7的临床诊断、现场流行病学调查和食品安全监测提供了新的鉴定方法。

关键词：多重实时荧光定量PCR 肠出血性大肠杆菌O157:H7 检测靶基因

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浙江省首例人体感染横川后殖吸虫的报告

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1991年第S1期9卷 144-145页

作者：姚立农陈琼张作忠许宝炉叶菊莲雷昌球浙江省卫生防疫站浙江省天台县卫生防疫站浙江省台州地区卫生防疫站

横川后殖吸虫是人畜共患性寄生虫,为东南亚地区常见的吸虫。国内有十余例人体感染横川后殖吸虫的报道,吴光早在1937年就在杭州地区的猫、犬体内查见该虫,但至今浙江省尚未见横川后殖吸虫病患者。我们于1990年5月在天台县人体寄生虫分布... 详细信息

横川后殖吸虫是人畜共患性寄生虫,为东南亚地区常见的吸虫。国内有十余例人体感染横川后殖吸虫的报道,吴光早在1937年就在杭州地区的猫、犬体内查见该虫,但至今浙江省尚未见横川后殖吸虫病患者。我们于1990年5月在天台县人体寄生虫分布调查过程中,查见类似华支睾吸虫的虫卵,经淘虫确定人体感染横川后殖吸虫1例。现报告如下:

关键词：横川后殖吸虫分布调查人体寄生虫华支睾吸虫东南亚地区杭州地区肠支沉淀集卵法生殖吸盘营养状况

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74株福氏志贺氏菌的药敏试验

浙江预防医学 1996年第2期8卷 57-58页

作者：叶菊莲俞莲花椒江市产品质量监督检验所 317700 椒江市人民医院

志贺氏菌属是引起细菌性痢疾(简称菌痢)的主要病原菌,在我国以福氏志贺氏菌为最多,宋内氏志贺氏菌次之.菌痢常年皆可发生,但以8、9、10月多见,9月份为高峰.我们在1994年共收集了全年从门诊及住院病人粪便中检出的74株志贺氏菌,并进行菌... 详细信息

志贺氏菌属是引起细菌性痢疾(简称菌痢)的主要病原菌,在我国以福氏志贺氏菌为最多,宋内氏志贺氏菌次之.菌痢常年皆可发生,但以8、9、10月多见,9月份为高峰.我们在1994年共收集了全年从门诊及住院病人粪便中检出的74株志贺氏菌,并进行菌型鉴定和药敏试验,以了解本市流行菌型和菌株耐药情况.

关键词：福氏志贺氏菌药敏试验病原菌

KPC型碳青霉烯酶基因荧光定量PCR快速鉴定

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中国公共卫生 2013年第1期29卷 138-141页

作者：罗芸金大智叶菊莲张政沈伟伟陈慧红浙江省疾病预防控制中心微生物所肠道室杭州310051 台州市疾病预防控制中心浙江省台州医院

目的建立一种准确地鉴定肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)基因的方法。方法比对11种KPC型碳青霉烯酶基因,在保守区设计引物和探针,优化PCR反应体系,评价特异性、灵敏度和重复性,对样本分离株进行检测,通过测序、药敏实验等验证该方法的正确... 详细信息

目的建立一种准确地鉴定肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)基因的方法。方法比对11种KPC型碳青霉烯酶基因,在保守区设计引物和探针,优化PCR反应体系,评价特异性、灵敏度和重复性,对样本分离株进行检测,通过测序、药敏实验等验证该方法的正确性。结果该方法可准确、特异地鉴定KPC型碳青霉烯酶基因,其他不携带该基因的菌株均无阳性结果;阳性质粒、纯培养细菌和模拟样本的灵敏度分别为10 copies/μL、10 CFU/mL和102CFU/mL;检测489株临床痰液样本分离菌,产KPC型碳青霉烯酶的肺炎克雷伯菌阳性7例,大肠埃希菌阳性11例、枸橼酸杆菌阳性1例,与测序结果完全一致。结论荧光定量PCR法能准确、特异、快速地鉴定KPC型碳青霉烯酶基因,操作简便,可用于产KPC型碳青霉烯酶菌株的临床诊断及流行病学调查,同时,检测结果表明浙江地区目前以携带产KPC-2型碳青霉烯酶为主的菌株。

关键词：荧光定量PCR KPC型碳青霉烯酶基因鉴定