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复方降压片的药效学研究

复方降压片的药效学研究

作者：史艳宇吉林农业大学

学位级别：硕士

复方降压片由钩藤、罗布麻两味药组成。钩藤(Uncaria rhynchopyhlla(Miq)Jackon)属茜草科植物，主要分布于热带地区，其带钩茎枝入药，具有清热平肝、活血通瘀、息风定惊的功效，在我国应用已有悠久的历史。主要用于治疗头晕目眩、惊痫... 详细信息

复方降压片由钩藤、罗布麻两味药组成。钩藤(Uncaria rhynchopyhlla(Miq)Jackon)属茜草科植物，主要分布于热带地区，其带钩茎枝入药，具有清热平肝、活血通瘀、息风定惊的功效，在我国应用已有悠久的历史。主要用于治疗头晕目眩、惊痫抽搐、全身麻木、高血压等心脑血管和神经系统疾病。罗布麻(Apoacynum venetum L)为夹竹桃科植物，广泛野生于盐碱沙荒地区，其叶入药，具有平肝安神，清热利水之功效，主要用于治疗高血压、哮喘及加强免疫功能。本实验主要研究由钩藤和罗布麻有效成分组成的复方降压片的降压作用和其对高血压伴随症状的影响。钩藤以80mg/kg经十二指肠一次性给药后，麻醉状态下正常大鼠(ANR)血压在给药45-180min后持续下降，与对照组比较有明显差异。另外，钩藤与罗布麻的有效成分以1：4、1：2、1：1进行配伍组合，即钩藤80mg/kg，罗布麻用药剂量分别为320mg/kg、160mg/kg、80mg/kg。对ANR进行观察，结果表明：各剂量组经十二指肠给药后，均能明显降低正常大鼠的血压，和空白对照组比较有明显意义(P＜0.05-0.001)，因钩藤与罗布麻间比例为1：2的用药量降压效果显著，药量适中，故确定该复方中两味药的比例为1：2。通过小鼠急性毒性试验，确定其灌胃给药LD50为2.924817g/kg，该复方最大给药剂量240mg/kg远低于中毒剂量。采用两肾一夹方法复制高血压大鼠(2K1C-RHR)模型，大鼠血压在术后三周呈上升趋势，在术后四周血压明显升高并呈稳定状态。RHR在一次性给药8h后血压即明显下降(P＜0.05)，连续给药十天后降到最低(P＜0.05-0.001)，最大降压幅度达22.24％。且通过对该动物模型血浆中血管紧张素(AngⅡ)和心钠素(ANP)含量测定表明，其对ANP含量有增加的趋势，对AngⅡ含量无明显影响。通过对SHR动物模型降压作用的观察结果表明，240mg/kg剂量组从给药第三天开始，大鼠血压开始明显下降(P＜0.05-0.001)，到给药第16天降到最低(P＜0.001)，降压幅度达18.95％。120mg/kg剂量组，从给药第二天开始降压(P＜0.05-0.01)。60mg/kg剂量组降压效果不明显，仅在给药第三天和第二十天出现显著降压作用(P＜0.05)，呈明显的量效关系。复方降压片使ANP含量显著增高，对AngⅡ影响不明显，对ET含量有降低趋势，但无统计学意义(P＞0.05)。吉林农业大学硕士学位论文复方降压片的药效学研究提示，ANP含量的增加可能是该复方制剂降低血压的机制之一。通过对豚鼠眩晕模型的治疗作用结果表明，复方降压片可明显改善豚鼠的眩晕症状，减少豚鼠自耳窝内滴注氛仿后20而n、40而n后的眼球震颤次数和头左右摇摆次数。同时本实验通过对血疥动物血液粘度、血沉和红细胞压积测定及体外血检形成等观察表明，其可明显抑制体外血松的形成。模型组和空白对照组的血栓长度(em)、湿重(mg)、干重(mg)分别为12.88士1.17、420.75土25.7、108.5士25.7，而24om乡吸g给药组，分别为10.46士3.25、315.13士74.3(p<0.05)、87士20.87，120mglkg给药组分别为9.19士21.8(p<0.05)、304.13士74.3(p<0 .05)、79.75士17.61;60Ing/kg剂量组分别为11.3士2.72、330.25士44.06(p<0.05)、83.88士12.63(P<0 .05)，可见，给药组和模型组比较有明显差异，提示，复方降压片可明显抑制大鼠体外血检的形成，使血癣动物全血比粘度、血沉与模型组比明显降低，但对血浆比粘度及红细胞压积影响不明显。表明其可降低血液粘度，改善血疥动物血液流变性。提示对于防治心血管疾病有一定作用。通过对小鼠急性高血脂模型的治疗作用的结果表明，复方降压片622mg般g可明显降低急性高血脂小鼠的胆固醇水平，和模型组比较有显著意义(P<0.05);同时，高剂量622m眺g组和中剂量336m眺g组可显著降低高血脂小鼠的甘油三醋水平，和模型组比较，有显著意义(P<0.05)

关键词：复方降压片降压降脂

西洋参有效部位对K562细胞凋亡诱导的实验研究

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中国药理学通报 2005年第12期21卷 1494-1497页

作者：史艳宇李红杨世杰吉林大学基础医学院药理学教研室吉林长春130021

目的利用人的白血病细胞K562对西洋参有效部位(Panaxquinquefolium’effectiveparts,PQEP)的抗癌作用机制进行研究。方法K562细胞进行常规培养后,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法进行PQEP(6.25～400mg·L-1)的细胞毒性测试;利用倒置相差显... 详细信息

目的利用人的白血病细胞K562对西洋参有效部位(Panaxquinquefolium’effectiveparts,PQEP)的抗癌作用机制进行研究。方法K562细胞进行常规培养后,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法进行PQEP(6.25～400mg·L-1)的细胞毒性测试;利用倒置相差显微镜和荧光显微镜(DAPI染色)来观察细胞形态学改变;凝胶电泳法观察细胞凋亡;通过流式细胞仪分析DNA含量和细胞周期分布。结果PQEP对K562细胞有明显细胞毒性,呈时间和剂量依赖关系;PQEP能明显诱导细胞皱缩,膜膨胀和核染色质固缩和碎裂,形成大约为180～200bp或其多聚体组成的寡核苷酸片断;流式细胞仪观察显示PQEP剂量依赖性地提高凋亡细胞DNA含量,阻止细胞在G1期。结论PQEP能够诱导K562细胞发生凋亡。

关键词：西洋参有效部位凋亡 K562 癌症

多重荧光定量PCR检测沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌

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卫生研究 2012年第2期41卷 256-259页

作者：陈萍魏琼史艳宇任常菲吉林农业大学食品科学与工程学院长春130118 吉林省产品质量监督检验院

目的基于SYBR Green I染料建立沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌的多重荧光定量PCR检测方法。方法针对沙门菌invA基因、志贺菌ipaH基因和virA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因和femA基因片段设计引物,根据Tm值的差异分析确定荧光定量PCR扩增... 详细信息

目的基于SYBR Green I染料建立沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌的多重荧光定量PCR检测方法。方法针对沙门菌invA基因、志贺菌ipaH基因和virA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因和femA基因片段设计引物,根据Tm值的差异分析确定荧光定量PCR扩增的靶基因和特异性引物,通过优化PCR反应体系,建立了用SYBR GreenⅠ多重荧光定量PCR熔解曲线来检测多种致病菌的方法。结果该方法检测的菌液灵敏度分别是沙门菌168 CFU/ml,志贺菌136CFU/ml,金黄色葡萄球菌1240CFU/ml,特异性强,整个过程只需要2h。结论该方法能快速、灵敏、特异检出沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌。

关键词：沙门菌志贺菌金黄色葡萄球菌多重荧光定量PCR

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电穿孔法在量子点标记细胞中的应用

高等学校化学学报 2005年第6期26卷 1043-1045页

作者：杨蕊冀伟闫玉禧史艳宇费强牟颖金钦汉吉林大学化学学院微分析仪器研究所吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室长春130023 吉林大学基础医学院长春130021

An electroporation method was proposed to make QDs pass through the membranes of K562 leukaemia cells. This method is operated simply and facilitates the tagging experiment greatly. The results show that when the electroporation voltage is 200 V and the lasting time is 1 ms, a high tagging rate is reached. A lot of cells can be tagged at the same time and the livability of the cells is 60%. The whole process can be completed in 20 min. This method brings forward some more extrusive advantages than cell endocytosis and microinjection method, and there should have a very good foreground for further applications.

关键词：量子点细胞标记电穿孔

基于荧光共振能量转移构建关-开型复合荧光探针快速检测沙门氏菌

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分析化学 2019年第12期47卷 1973-1980页

作者：崔雯雯徐琳琳史艳宇董娜陈萍吉林农业大学食品科学与工程学院吉林省食品检验所

将经硅烷化以及氨基化修饰的功能化磁珠与沙门氏菌特异性抗体进行偶联,制备功能化免疫磁珠,通过近红外光谱、荧光光谱、紫外光谱等技术对其进行结构和活性表征。将功能化磁珠、抗体和量子点（QDs）进行有序组装,构建了集磁性富集分离和... 详细信息

将经硅烷化以及氨基化修饰的功能化磁珠与沙门氏菌特异性抗体进行偶联,制备功能化免疫磁珠,通过近红外光谱、荧光光谱、紫外光谱等技术对其进行结构和活性表征。将功能化磁珠、抗体和量子点（QDs）进行有序组装,构建了集磁性富集分离和检测于一体的磁珠-抗体-QDs复合荧光纳米探针。基于此复合荧光纳米探针中的QDs与金纳米粒子（AuNPs）间的荧光共振能量转移（FRET）效应,建立了快速检测沙门氏菌的"关-开"型荧光分析方法。结果表明,复合荧光纳米探针的荧光恢复度与菌浓度的对数值呈良好的线性关系,线性回归方程为y=103.5x+121.4（R;=0.9956）,检出限为10;CFU/mL（S/N=3）,检测时间少于2 h。本方法特异性好,检出限低,灵敏度高,可满足食品中沙门氏菌快速检测的需求。

关键词：复合荧光纳米探针荧光共振能量转移快速检测沙门氏菌

豆制食品中胰蛋白酶抑制剂活性测定方法的改进

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食品科学 2009年第12期30卷 237-240页

作者：史艳宇刘金华逄晓阳刘俊会吉林省产品质量监督检验院吉林长春130022 吉林出入境检验检疫局吉林长春130062

在ISO 14902:2001《动物饲料—大豆制品胰蛋白酶抑制剂活性的测定》方法的基础上,对影响豆制食品中胰蛋白酶抑制剂活性测定的一些关键因素进行改进与补充,为豆制食品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定提供新方法。采用分光光度法,对样品提取... 详细信息

在ISO 14902:2001《动物饲料—大豆制品胰蛋白酶抑制剂活性的测定》方法的基础上,对影响豆制食品中胰蛋白酶抑制剂活性测定的一些关键因素进行改进与补充,为豆制食品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定提供新方法。采用分光光度法,对样品提取方法、样品脂肪含量、提取液过滤与否影响、结果计算公式等进行相应改进研究,使改进后的测定方法操作简便快速、变异系数小,适用性强、计算方式简单、计算结果准确、检测速度提高并具有足够高的重复性等优点,适宜日常豆制食品检验工作的开展。

关键词：豆制食品胰蛋白酶抑制剂活性测定

大肠杆菌O_(157):H_7 PCR-ELISA检测方法的建立

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黑龙江畜牧兽医 2014年第6期 128-131页

作者：王丹刘金华史艳宇薛力刚吉林农业大学长春130118 吉林出入境检验检疫局长春130062 吉林省产品质量监督检验院长春130022 长春科技学院长春130600

为了建立大肠杆菌O157:H7微孔板固相捕获呈色探针快速检测方法,试验根据GenBank网站公布的大肠杆菌O157:H7血清型基因序列设计1对特异性引物和探针,进行聚合酶链式反应、核酸杂交、酶联显色,测定吸光度值,并对此快速检测方法的特异性和... 详细信息

为了建立大肠杆菌O157:H7微孔板固相捕获呈色探针快速检测方法,试验根据GenBank网站公布的大肠杆菌O157:H7血清型基因序列设计1对特异性引物和探针,进行聚合酶链式反应、核酸杂交、酶联显色,测定吸光度值,并对此快速检测方法的特异性和敏感性进行研究。结果表明:大肠杆菌O157:H7吸光度值为2.214,敏感性试验最低检测限为每25 mL菌液中有1 cfu。

关键词：大肠杆菌 O157 H7 探针聚合酶链式反应核酸杂交酶联显色

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实时荧光PCR方法检测食品中痕量荞麦成分

食品科学 2009年第20期30卷 312-315页

作者：史艳宇刘金华逄晓阳张晓惠任常菲吉林省产品质量监督检验院吉林长春130022 吉林出入境检验检疫局吉林长春130062

目的:建立一种快速、特异、灵敏的荞麦成分检测方法。方法:针对荞麦内转录间隔区ITS(internal transcribed spacer)和5.8SrRNA基因序列设计一对PCR引物及探针,建立实时荧光PCR检测方法;以同源性(27个荞麦属相关物种)及非同源性(食品中... 详细信息

目的:建立一种快速、特异、灵敏的荞麦成分检测方法。方法:针对荞麦内转录间隔区ITS(internal transcribed spacer)和5.8SrRNA基因序列设计一对PCR引物及探针,建立实时荧光PCR检测方法;以同源性(27个荞麦属相关物种)及非同源性(食品中常见的栽培型植物)参考植物物种作特异性检测;以50mg/kg小麦DNA作为稀释液对荞麦DNA进行梯度稀释,做灵敏度检测。结果:该方法能够有效对荞麦成分进行快速检测,具有较强的特异性,灵敏度较高(可达0.1μg/kg)并且小麦成分的存在对荞麦灵敏度检测没有影响。结论:该方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测食品中含有的痕量荞麦成分。

关键词：荞麦过敏原内转录间隔区ITS 荧光定量PCR 检测

应用实时荧光PCR技术检测构巢曲霉的初步研究

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中国生物工程杂志 2008年第10期28卷 95-99页

作者：刘金华贺丹史艳宇张宇王丽吉林出入境检验检疫局长春130062 吉林大学基础医学院病原生物学教研室长春130021 吉林省产品质量监督检验研究院长春130022

目的:根据构巢曲霉(Aspergillus nidulans)3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)基因特异位点设计并合成Taqman探针及引物,建立构巢曲霉实时荧光PCR检测方法。方法:应用lasergene7.1软件对构巢曲霉与13种常见曲霉主要包括黑曲霉(***)、烟曲霉(***)、杂色曲霉(***)、土曲霉(***)、黄曲霉(***)、温特曲霉(***)、寄生曲霉(***)、泡盛曲霉(***)、米曲霉(***)、棒曲霉(***)、赤曲霉(***)、亮白曲霉(***)及赭曲霉(***)进行GAPDH基因序列比对分析,在特异位点设计引物和探针,建立构巢曲霉实时荧光PCR检测方法,并对该方法进行特异性及敏感性分析。结果:用曲霉属22种41株不同曲霉及其他属的12株病原真菌验证实验表明,所建立的荧光PCR方法特异性强;检测灵敏度可达4.03×10-12μg/ml的模板DNA。结论:应用实时荧光PCR技术能够有效检测构巢曲霉,该方法具有特异、灵敏、快速等特点,可在实际工作中应用。

关键词：构巢曲霉实时荧光PCR 检测