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玉米根V-ATPase的A亚基磷酸化位点的鉴定

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Acta Botanica Sinica 2004年第4期46卷 428-435页

作者：刘贯山陈硕陈珈王学臣中国农业大学生物学院，植物生理学与生物化学国家重点实验室，北京100094

以玉米(ZeamaysL.)根的高纯度液泡膜为材料进行的磷酸化反应表明，液泡膜蛋白的磷酸化可明显提高V型H^+-ATPase(V-ATPase)的ATP水解活性和H^+转运活性。进一步研究表明，纯化的液泡膜蛋白能被硫代磷酸化，用V-ATPase的A亚基抗体将一条约... 详细信息

以玉米(ZeamaysL.)根的高纯度液泡膜为材料进行的磷酸化反应表明，液泡膜蛋白的磷酸化可明显提高V型H^+-ATPase(V-ATPase)的ATP水解活性和H^+转运活性。进一步研究表明，纯化的液泡膜蛋白能被硫代磷酸化，用V-ATPase的A亚基抗体将一条约69kD的条带鉴定为A亚基。为了测定V-ATPase的A亚基的磷酸化位点，从硫代磷酸化的凝胶中切下A亚基条带并用胰蛋白酶彻底消化。用RP-HPLC分离纯化酶解片断，收集纯化的硫代磷酸化肽段进行质谱分析所测定的分子量为573．83Da。A亚基胰蛋白酶彻底消化后能产生61个肽段，只有F56肽段的分子量573．66Da与573．83Da最接近，而且F56肽段上只有第525位的丝氨酸可以被磷酸化。因此可以确定，玉米根V-ATPaseA亚基的潜在磷酸化位点为Ser525。就我们所知，这是首次确定植物V-ATPaseA亚基的磷酸化位点。

关键词： V-ATPase 液泡膜玉米磷酸化位点 A亚基鉴定

烟草基因组计划重大专项成功创制了全球最大的烟草突变体库

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中国烟草学报 2012年第1期 2-3页

作者：刘贯山

烟草基因组计划重大专项2011年度研究项目"烟草突变体库创制、筛选与分析"取得了重大突破。该项目由中国烟草总公司青州烟草研究所牵头,在国家烟草专卖局科技司和重大专项首席科学家的领导下,集合中国农业科学院生物技术研究所、西南大... 详细信息

烟草基因组计划重大专项2011年度研究项目"烟草突变体库创制、筛选与分析"取得了重大突破。该项目由中国烟草总公司青州烟草研究所牵头,在国家烟草专卖局科技司和重大专项首席科学家的领导下,集合中国农业科学院生物技术研究所、西南大学、中国科学院植物研究所、中国农

关键词：基因组计划突变体库烟草重大专项

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烟草基因组知识篇:3.基因组注释

中国烟草科学 2010年第3期31卷 82-83页

作者：刘贯山中国农业科学院烟草研究所青岛266101

在完成序列的拼接后,得到的是很长的DNA序列、甚至可能是整个基因组的序列。这些序列中包含许多未知的基因,将基因从这些序列中找出来是基因组注释的主要内容。基因组DNA序列可分为两大部分：基因及其相关序列、基因间序列。以起始密码... 详细信息

在完成序列的拼接后,得到的是很长的DNA序列、甚至可能是整个基因组的序列。这些序列中包含许多未知的基因,将基因从这些序列中找出来是基因组注释的主要内容。基因组DNA序列可分为两大部分：基因及其相关序列、基因间序列。以起始密码子开始、终止密码子结束、称之为开放阅读框（open readingframe,ORF）的序列为基因序列,它们可编码蛋白质和RNA（非编码RNA）,所以又称为编码序列;基因相关序列包括拟（假）基因（pseudogene）、基因片段、内含子、非翻译区（untranslated region,UTR）等。基因间序列主要是一些重复序列,它们是所有基因组尤其是真核生物基因组共同的重要特征。

关键词：基因组注释 DNA序列知识烟草相关序列起始密码子终止密码子开放阅读框

烟草N基因及其介导的抗TMV信号转导分子机制

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中国烟草科学 2016年第3期37卷 93-99页

作者：王倩刘贯山中国农业科学院烟草研究所青岛266101

烟草N基因来源于粘烟草(Nicotiana glutinosa),通过特异识别烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)的解旋酶结构引发植物的过敏性坏死反应,介导植物对该病毒的抗性。N-TMV互作是研究最早且最深入的植物-病原菌互作的模型之一。从N基... 详细信息

烟草N基因来源于粘烟草(Nicotiana glutinosa),通过特异识别烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)的解旋酶结构引发植物的过敏性坏死反应,介导植物对该病毒的抗性。N-TMV互作是研究最早且最深入的植物-病原菌互作的模型之一。从N基因的分离、转录表达、编码产物结构及其抗TMV信号转导分子机制等方面进行了综述。

关键词： N基因烟草 TMV 信号转导

烟草基因组学研究方法篇:1.烟草突变体的创制及其在功能基因组学研究中的应用

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中国烟草科学 2011年第1期32卷 92-93页

作者：刘贯山中国农业科学院烟草研究所青岛266101

从2000年6月26日参与＂国际人类基因组计划＂的美、英、日、法、德、中6个国家16个研究中心联合宣布人类基因组＂工作框架图＂开始,人类历史进入了一个崭新的时代即后基因组时代。其研究内容主要包括功能基因组学、转录物组学、蛋白质... 详细信息

从2000年6月26日参与＂国际人类基因组计划＂的美、英、日、法、德、中6个国家16个研究中心联合宣布人类基因组＂工作框架图＂开始,人类历史进入了一个崭新的时代即后基因组时代。其研究内容主要包括功能基因组学、转录物组学、蛋白质组学、代谢物组学、比较基因组学等,可在全基因组水平上研究基因功能和基因之间相互作用及其调控机制。其中，突变体创制是功能基因组学研究不可缺少的重要组成部分。

关键词：功能基因组学突变体国际人类基因组计划烟草应用后基因组时代比较基因组学工作框架图

烟草重要基因篇:7.烟草多药和有毒化合物排出基因

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中国烟草科学 2015年第1期36卷 114-117页

作者：张艳艳王倩刘贯山中国农业科学院烟草研究所青岛266101

多药和有毒化合物排出（multidrug and toxic compound extrusion,MATE）基因编码的蛋白是一类依靠Na^＋/H^＋跨膜电化学势转运底物的次级转运蛋白,对金属离子、次级代谢产物、抗生素及多种药物有转运作用.MATE是一个多基因家族,该家族... 详细信息

多药和有毒化合物排出（multidrug and toxic compound extrusion,MATE）基因编码的蛋白是一类依靠Na^＋/H^＋跨膜电化学势转运底物的次级转运蛋白,对金属离子、次级代谢产物、抗生素及多种药物有转运作用.MATE是一个多基因家族,该家族成员最先在细菌中报道,此后真菌、动物和植物中也陆续有MATE基因得到鉴定.植物MATE家族成员主要参与金属离子、毒素物质和次级代谢产物的运输,进而在抗逆和毒素解毒中发挥作用;部分成员参与生长素的生物合成,调节植物的生长发育进程.

关键词：有毒化合物基因编码烟草次级代谢产物多基因家族转运蛋白生长发育进程金属离子

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茄科植物组织特异性启动子研究进展

中国烟草学报 2015年第2期21卷 105-110页

作者：吕婧刘贯山王卫锋王大伟孙玉合中国农业科学院烟草研究所/烟草行业烟草基因资源利用重点实验室山东青岛266101

综述了组织特异启动子的结构、表达调控模式以及生物学功能,重点阐述茄科作物特有启动子的应用和研究进展。对下一步利用启动子改良茄科作物前景进行了展望。

关键词：组织特异启动子茄科作物分子育种

野生烟草甲羟戊酸激酶NsyMK基因克隆与序列分析

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作物杂志 2013年第5期 75-79页

作者：吕婧刘贯山龚达平孙玉合中国农业科学院烟草研究所/烟草行业烟草基因资源利用重点实验室山东青岛266101

甲羟戊酸激酶是植物中控制整个甲羟戊酸途径重要的限速酶,其代谢产物萜类物质是烟草芳香物质的主要来源。本研究采用同源克隆,利用RACE方法获得二倍体林烟草(Nicotiana sylvestris)甲羟戊酸激酶(NsyMK)的开放阅读框序列,对NsyMK序列进... 详细信息

甲羟戊酸激酶是植物中控制整个甲羟戊酸途径重要的限速酶,其代谢产物萜类物质是烟草芳香物质的主要来源。本研究采用同源克隆,利用RACE方法获得二倍体林烟草(Nicotiana sylvestris)甲羟戊酸激酶(NsyMK)的开放阅读框序列,对NsyMK序列进行生物信息学分析,预测蛋白理化性质、二级结构、三维结构并推测其结构与功能。结果表明,克隆获得的林烟草NsyMK的开放阅读框全长为1158bp,编码385个氨基酸,预测分子量41.4kDa、等电点为6.05,GenBank登录号KC871597。蛋白质结构分析显示NsyMK存在典型GHMP激酶和甲羟戊酸激酶保守结构域。生物信息学预测NsyMK蛋白不含跨膜区与信号肽。本研究成功克隆并分析了一个未报道的林烟草NsyMK的全长序列,为进一步阐明栽培烟草中萜类代谢途径奠定基础。

关键词：林烟草甲羟戊酸激酶萜类生物合成

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