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鲆鲽鱼Nodal信号途径相关基因的克隆与胚胎发育早期表达分析

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鲆鲽鱼Nodal信号途径相关基因的克隆与胚胎发育早期表达分析

作者：刘聪辉中国海洋大学

学位级别：硕士

Nodal是转化生长因子β (TGFβ)超级家族中的一个成员，Nodal及其下游基因组成的通路在脊椎动物侧板中胚层、内胚层的诱导和胚胎发育期左右模式的构建中发挥了重要的作用。在斑马鱼和小鼠中的研究表明Nodal信号途径对胚胎发育过程中器... 详细信息

Nodal是转化生长因子β (TGFβ)超级家族中的一个成员，Nodal及其下游基因组成的通路在脊椎动物侧板中胚层、内胚层的诱导和胚胎发育期左右模式的构建中发挥了重要的作用。在斑马鱼和小鼠中的研究表明Nodal信号途径对胚胎发育过程中器官左右不对称的发生起关键作用，此发现对解释鲆鲽鱼变态期间特殊的左右不对称体制构建提供了一条可能的研究途径。其中，lefty作为Nodal信号通路的下游基因，可以通过与Nodal受体的竞争结合，对其实现反馈调节;而pitx2作为另一个下游基因，受到其激活后出现左右不对称的表达，对心脏、肠道以及身体的正向旋转都有调节作用。另外根据报道，在小鼠中，纤毛驱动的node胞液流动对器官正确位置的建立起着关键作用。纤毛轴丝动力蛋白的重链，有一个环状马达结构域，水解ATP后，会经历一个构像变化，从而带动动力蛋白以“杆”作为支点运动。其中，dnah9基因编码其中的一条重链。在小鼠模型中，DnaH家族基因编码的轴丝动力蛋白出现在原结纤毛中，显示了其与早期基因的表达和后期器官偏转的关联。本研究通过同源克隆和RACE（Rapid amplificationof cDNA ends）技术获得了舌鳎lefty和pitx2，以及牙鲆dnah9的全长cDNA，利用生物软件对基因进行了生物信息学的预测分析，并借助于实时荧光定量、原位杂交等技术对3种基因不同发育时期的时空表达进行了研究。同时，本文还研究了半滑舌鳎胚胎发育过程中、各组织以及化学处理前后的内参基因的表达变化，筛选出了适合该物种基因表达研究的内参体系。具体结果总结如下： 1.半滑舌鳎内参基因的筛选不同发育时期，geNorm运算得到GAPDH和B2M最为适用，而BestKeeper得到GAPDH和18S最为适用。对于不同的组织类型，两软件结果相同得出相同的内参基因，最适内参基因为18S和RPL17。对于化学处理，geNorm运算结果为B2M/TUBA，而Bestkeeper结果为UBCE/TUBA。 2.半滑舌鳎lefty和pitx2基因克隆及表达本文使用同源克隆的方法分别获得了半滑舌鳎lefty和pitx2基因的开放阅读框，其中lefty总长972bp，推测编码324个氨基酸;pitx2总长939bp，推测编码313个氨基酸。pitx2编码的蛋白质在Homeobox和OAR两个结构域的区域表现了极强的保守性。lefty与pitx2都存在母源性表达的现象，但是lefty体现为瞬时表达，主要集中在胚胎发育阶段;pitx2除了在胚胎发育阶段表达之外，在成体中也表达，但表达量略有下降。其表达方式与其自身的作用相一致。 3.牙鲆dnah9的cDNA全长的克隆及表达采用同源克隆与基因组文库相结合的方法，从褐牙鲆中克隆获得了dnah9的cDNA全长序列。cDNA的开放阅读框全长13,611bp，3’UTR长384bp，推测编码4573个氨基酸。该基因在基因组DNA上有两个拷贝，以串联的形式排列。第一个拷贝，总长62,632bp，共有100个外显子;第二个拷贝总长128,387bp，共有80个外显子。通过荧光定量分析，dnah9存在母源表达现象，受精之后表达量逐渐降低，囊胚期之后回升，并在15体节期达到峰值。胚胎整体原位杂交也证实了这一现象，并且原位杂交结果还表明在胚胎发育后期dnah9主要集中在胚胎的头部，其中间脑、中后脑和延脑的几个区域。

关键词：半滑舌鳎褐牙鲆 Nodal lefty1 pitx2 内参基因 dnah9

血清软骨寡聚基质蛋白水平与糖尿病肾病患者心脑血管事件发生率的关系

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中国老年学杂志 2016年第5期36卷 1227-1228页

作者：刘聪辉金秀平华北理工大学附属医院内分泌科河北唐山063000

糖尿病（DM）肾病（DN）患者多存在心脑血管并发症,尤其是糖尿病Ⅳ及Ⅴ期患者,心脑血管事件发生率更高。目前尚缺乏有效预测DN患者心脑血管事件发生的有效指标。一旦DN患者发生心脑血管事件,多出现致残、致死。

关键词：软骨寡聚基质蛋白糖尿病肾病血管钙化心血管疾病

糖尿病肾病患者血清软骨寡聚基质蛋白水平及其与血管钙化的关系

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重庆医学 2014年第32期43卷 4320-4321,4325页

作者：刘聪辉金秀平河北联合大学附属医院内分泌科河北唐山063000

目的研究糖尿病肾病(DN)患者血清软骨寡聚基质蛋白(COMP)水平及其与血管钙化的关系。方法收集Ⅳ及Ⅴ期DN患者54例(DN组)及28例健康体检者(对照组),采用ELISA法检测血清COMP水平。根据胸部X线片主动脉弓钙化情况,将DN患者分为无血管钙化... 详细信息

目的研究糖尿病肾病(DN)患者血清软骨寡聚基质蛋白(COMP)水平及其与血管钙化的关系。方法收集Ⅳ及Ⅴ期DN患者54例(DN组)及28例健康体检者(对照组),采用ELISA法检测血清COMP水平。根据胸部X线片主动脉弓钙化情况,将DN患者分为无血管钙化组和血管钙化组,比较两组的血清COMP水平。根据合并心血管疾病(CVD)与否,将DN组患者分为合并组和非合并组,比较两组血清COMP水平。采用Logistic回归分析血清COMP水平与血管钙化、CVD发生率之间的关系。结果 DN组患者血清COMP水平高于对照组;DN组主动脉弓钙化者占75.9%,其血清COMP水平高于无血管钙化组;合并CVD组患者血清COMP水平显著高于非合并组(P<0.05);血清COMP水平每升高10ng/mL,血管钙化发生风险增加1.324倍,CVD发生风险增高1.310倍。结论 DN患者血清COMP升高,血管钙化和CVD发生风险增加。

关键词：糖尿病肾病心血管疾病血管钙化软骨寡聚基质蛋白

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《三角形的内角》说课稿

《三角形的内角》说课稿

2型糖尿病伴OSAHS患者血清NPY、NGAL水平变化及其与早期认知功能损伤的关系

作者：刘聪辉吉林省白城市特殊教育学校

一、教材分析1.说教材。《三角形的内角》是人教版七年级下册第七章《三角形》的第二节内容,本节课是在学生学习了与三角形有关的概念的基础上,让学生动手操作,通过拼图说出"三角形的内角和等于180°"成立的理由,由浅人深,循序渐进,引...

一、教材分析1.说教材。《三角形的内角》是人教版七年级下册第七章《三角形》的第二节内容,本节课是在学生学习了与三角形有关的概念的基础上,让学生动手操作,通过拼图说出"三角形的内角和等于180°"成立的理由,由浅人深,循序渐进,引导学生观察、实验、猜测,培养学生的推理能力。2.教学目标和要求。根据新课标的要求及七年级学生的认知水平,我制定本节课的教学目标如下:(1)了解三角形的内角。

关键词：

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临床和实验医学杂志 2020年第21期19卷 2289-2292页

作者：谢宇刘聪辉冀中能源峰峰集团有限公司总医院内分泌科河北邯郸056002 华北理工大学附属医院内分泌科河北唐山063000

目的探究2型糖尿病(T2DM)伴阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血清神经肽Y(NPY)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)水平变化及其与早期认知功能损伤的关系。方法回顾性选取2018年3月至2020年3月于冀中能源峰峰集团有限公司... 详细信息

目的探究2型糖尿病(T2DM)伴阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血清神经肽Y(NPY)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)水平变化及其与早期认知功能损伤的关系。方法回顾性选取2018年3月至2020年3月于冀中能源峰峰集团有限公司总医院治疗的T2DM患者200例,根据是否合并OSAHS,将患者分为T2DM-OSAHS组(n=135)、T2DM组(n=65)。另选取同期体检的健康人100例作为正常组。比较3组血清NPY、NGAL水平、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分。根据T2DM-OSAHS组患者MoCA评分情况,将其分为认知功能障碍组(MoCA<26分)、认知正常组(MoCA≥26分)。比较认知功能障碍组与认知正常组血清NPY、NGAL水平、MoCA评分。分析T2DM-OSAHS患者NPY、NGAL水平与早期认知功能损伤的关系。分析T2DM-OSAHS患者的血清NPY、NGAL水平对认知功能障碍的诊断价值。结果T2DM-OSAHS组患者血清NPY、NGAL水平为(2.37±0.79)、(7.34±2.07)μg/L,均高于单纯T2MD组[(1.82±0.64)、(6.28±1.78)μg/L]、正常组[(1.34±0.49)、(5.14±1.23)μg/L],MoCA评分为(25.33±6.57)分,低于单纯T2MD组(28.32±3.64)分、正常组(29.18±3.49)分,差异有统计学意义(P<0.05);T2DM-OSAHS组中,出现认知功能障碍组的患者血清NPY、NGAL为(2.94±0.46)、(7.83±1.08)μg/L,均显著高于认知功能正常组患者[(1.85±0.37)、(6.89±0.92)μg/L];MoCA评分为(24.24±4.26)分,低于认知功能正常组患者(26.37±1.24)分,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析可知,T2MD合并OSAHS患者血清NPY、NGAL水平与MoCA评分均呈负相关(r=-0.396、-0.291,P=0.000、0.008)。ROC曲线分析显示,NPY、NGAL联合预测患者认知功能障碍的AUC、特异度、敏感度为0.831、72.8%、93.4%。结论T2DM-OSAHS患者血清NPY、NGAL出现升高,2者联合可以为早期认知功能障碍的发生提供较为准确的预测。

关键词： 2型糖尿病阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征神经肽Y 中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白认知功能

市工商局调整下放全市企业登记管理事权 001

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2型糖尿病伴阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者应用持续气道正压通气治疗的疗效

陇东报

作者：刘聪辉柴阔

本报讯为巩固深化商事制度改革成效，推进“放、管、服”一体化工作，营造更加有利于创业创新发展环境，市工商局经过深入调研、反复讨论，按照“依法放权、能放则放”的原则，对全市企业登记管理事权进行了重新调整。据悉，本次登记事... 详细信息

本报讯为巩固深化商事制度改革成效，推进“放、管、服”一体化工作，营造更加有利于创业创新发展环境，市工商局经过深入调研、反复讨论，按照“依法放权、能放则放”的原则，对全市企业登记管理事权进行了重新调整。据悉，本次登记事权调整明确了市、县（区）工商局企业?

关键词：工商局企业登记管理

来源： cnki报纸评论

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中国老年学杂志 2021年第10期41卷 2076-2078页

作者：王玲刘聪辉李建张嘉宾解宝泉谢宇华北理工大学附属医院河北唐山063000 冀中能源峰峰集团总医院

目的分析持续气道正压通气(CPAP)治疗2型糖尿病(T2DM)伴阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者的疗效。方法选取诊断明确的T2DM伴OSAHS患者80例,随机分为对照组和治疗组各40例,对照组给予常规药物治疗,治疗组除给予常规药物治疗外... 详细信息

目的分析持续气道正压通气(CPAP)治疗2型糖尿病(T2DM)伴阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者的疗效。方法选取诊断明确的T2DM伴OSAHS患者80例,随机分为对照组和治疗组各40例,对照组给予常规药物治疗,治疗组除给予常规药物治疗外,加用CPAP治疗。治疗3个月后,比较两组治疗前后睡眠呼吸监测参数、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)总分及血清8-异前列腺素(8-iso-PGF)2α、8-羟脱氧鸟苷(8-OHdG)的水平。结果治疗前,两组最低脉搏容积血氧饱和度、最长呼吸暂停时间、睡眠呼吸暂停低通气指数(AHI)、血清8-iso-PGF2α水平、血清8-OHdG水平、MoCA总分比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);治疗3个月后,治疗组上述指标均较治疗前明显改善,且明显优于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论CPAP是T2DM伴OSAHS患者的一种简单而有效的治疗方法,可改善睡眠呼吸功能及降低血清8-iso-PGF2α、8-OHdG的水平,进而改善认知功能。

关键词： 2型糖尿病阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征持续气道正压通气

PCT、APTT联合PSI评分对老年CAP严重程度评估及预测预后的价值

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华北理工大学学报（医学版） 2022年第3期24卷 204-208,216页

作者：张嘉宾刘聪辉付爱双刘靖轩华北理工大学附属医院呼吸科河北唐山063000 华北理工大学附属医院内分泌科河北唐山063000

目的探讨血清降钙素原(PCT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)联合肺炎严重指数(PSI)评分对评估老年社区获得性肺炎(CAP)严重程度及预测预后的价值。方法采用回顾性研究,收集2019年11月~2021年11月华北理工大学附属医院收治的118例老年CAP... 详细信息

目的探讨血清降钙素原(PCT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)联合肺炎严重指数(PSI)评分对评估老年社区获得性肺炎(CAP)严重程度及预测预后的价值。方法采用回顾性研究,收集2019年11月~2021年11月华北理工大学附属医院收治的118例老年CAP患者病历资料。根据重症社区获得性肺炎(SCAP)诊断标准及PSI评分,分为重症组48例、非重症组70例;重症组再根据肺炎转归情况分为死亡组14例、生存组34例。收集并分别比较各组患者入院第1、3、7d的PSI评分及血清PCT、APTT水平变化。血清PCT、APTT水平与PSI评分的相关性采用Pearson相关性分析。结果与非重症组比较,重症组患者入院1、3、7d的PSI评分及血清PCT、APTT水平均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);与生存组比较,死亡组患者入院1、3、7d的PSI评分及血清PCT、APTT水平均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清APTT、PCT水平与PSI评分均呈正相关(r=0.418、0.362,P<0.05)。结论血清PCT水平、PSI评分与老年CAP严重程度相关,且血清PCT水平与PSI评分呈正相关,即血清PCT水平、PSI评分越高提示老年重症肺炎患者预后越差;APTT与PSI评分呈正相关性,APTT延长可能会加重老年CAP严重程度及预后。

关键词：社区获得性肺炎肺炎严重指数血清降钙素原活化部分凝血酶原时间

COPD-OSAHS重叠综合征患者认知功能障碍与血清MCP-1及SAA水平变化的临床意义

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2018年第7期32卷 485-488页

作者：戈艳蕾刘聪辉付爱双王红阳华北理工大学附属医院呼吸科河北唐山063000 华北理工大学附属医院内分泌科

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)-阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSASH)[重叠综合征(OS)]患者血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血清淀粉样蛋白A(SAA)水平与认知功能相关性。方法:以60例OS患者作为实验组,33例COPD患者作为对照组,测... 详细信息

目的:探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)-阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSASH)[重叠综合征(OS)]患者血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、血清淀粉样蛋白A(SAA)水平与认知功能相关性。方法:以60例OS患者作为实验组,33例COPD患者作为对照组,测定其血清MCP-1、SAA水平;应用蒙特利尔量表评分分析MCP-1、SAA与认知功能之间的关系。结果:(1)OS组MCP-1、SAA水平分别为(159.85±21.38)ng/L和(122.64±42.49)ng/L,对照组分别为(135.02±15.31)ng/L和(71.37±10.16)ng/L,2组差异有统计学意义(P<0.05)。(2)OS组蒙特利尔量表评分均较对照组低(P<0.05)。(3)OS组蒙特利尔量表评分与MCP-1、SAA呈显著负相关(P<0.05)。结论:OS组患者较对照组存在明显认知功能障碍,提示OSAHS很可能是认知障碍的一个独立危险因素;而血清MCP-1、SAA水平增高,认知功能缺陷加重,这提示MCP-1、SAA在OS患者认知障碍发生中发挥作用。

关键词：慢性阻塞性肺疾病睡眠呼吸暂停低通气综合征,阻塞性蒙特利尔认知量表认知功能单核细胞趋化蛋白-1 血清淀粉样蛋白A