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三化汤化学成分分析

三化汤化学成分分析

作者：刘水龙南京农业大学

学位级别：硕士

三化汤（Sanhua Decoction,SHD）由大黄、枳实、厚朴、羌活四味药组成,首次记载于《素问气宜保命集》,是治疗缺血性脑卒中的代表性中药方剂。然而,目前关于三化汤的药效活性物质基础方面研究相对滞后,口服三化汤后吸收到血液中的化学成... 详细信息

三化汤（Sanhua Decoction,SHD）由大黄、枳实、厚朴、羌活四味药组成,首次记载于《素问气宜保命集》,是治疗缺血性脑卒中的代表性中药方剂。然而,目前关于三化汤的药效活性物质基础方面研究相对滞后,口服三化汤后吸收到血液中的化学成分及其代谢产物的信息很少,阻碍了三化汤在临床中的广泛应用。亟需应用现代药理研究方法,鉴定三化汤潜在的药效物质基础。本研究以经典名方三化汤为研究对象,利用中药血清药物化学的方法,从三化汤中主要化学成分、入血成分方面阐明三化汤药效物质基础,为其制剂研发、质量控制和进一步的临床研究提供实验依据。主要结果如下:1.建立三化汤冻干粉UPLC分析方法考察三化汤复方与各单味饮片、阴性样品的浸膏得率以及UPLC图谱信息,初步确定三化汤主要色谱峰的饮片来源,同时检测冻干粉的主要成分含量,确保后续入血成分研究时给药质量的稳定性。制备的5个批次S1～S5的浸膏量为73.38±1.98 g,浸膏得率为45.86%±1.24%,RSD为2.71%,表明冻干粉制备过程稳定可控;在单味药及阴性组浸膏量的考察中发现,厚朴的浸膏量最少,仅为5.59 g,剩余各组浸膏量差别不大;分别考察了254、271、280和310 nm四个波长下对照品与三化汤的色谱图,高波长下色谱峰的数量和吸收均较少,在254 nm波长下基线平稳,共有峰数量多,故确定254nm为后续检测波长。对三化汤各成分色谱行为进行优化,确定最佳色谱条件为:色谱柱为Acquity UPLC HSS T3色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8μm）;流动相:（含0.1%甲酸水）A-乙腈B;流速:0.2 m L·min;柱温:30℃;进样量:5μL,梯度洗脱程序:0～0.5 min,2%A;0.5～31 min,2%A→85%A;31～32 min,85%A→2%A。采用优化后的色谱条件,建立三化汤UPLC图谱,经与对照品比对指认15个色谱峰,色谱峰分离度良好,阴性对照无干扰。汇总特征峰信息可知,在指认的28个色谱峰中,大黄色谱峰的贡献值最大,12个峰由大黄所贡献,5个峰归属枳实,厚朴和羌活中各有7个色谱峰归属。建立三化汤主要成分的含量测定方法,通过线性关系考察和精密度、稳定性、重复性对该方法进行验证。结果表明,三化汤各成分之间含量差异显著,其中来源于枳实的柚皮苷和新橙皮苷显著高于其它成分的含量。5个批次S1～S5主要化学成分含量差异不大,RSD小于6.35%,表明制备的三化汤冻干粉质量稳定,可用于进一步化学成分和入血成分研究。2.三化汤非挥发性与挥发性成分分析将三化汤冻干粉甲醇溶解后,采用UPLC-Q-TOF-MS技术,在负离子模式下,共鉴定了77种化合物,其中来源于大黄、枳实、厚朴与羌活的化合物分别有28、28、15、6种,主要由12种蒽醌类及蒽酮类、19种黄酮类、9种苯丙素类、8种鞣质类和7种香豆素类组成。水蒸气蒸馏法提取三化汤挥发油,以GC-MS进行检测鉴定,峰面积归一化法计算各挥发性成分的相对含量,共分离鉴定出44个化合物,其中相对含量高于1.00%成分的有12个,柠檬烯（23.38%）相对含量最高,其次是α-蒎烯（13.21%）、β-蒎烯（12.83%）、γ-萜品烯（9.61%）、芳樟醇（7.55%）、邻伞花烃（7.22%）、乙酸龙脑酯（4.96%）、4-萜烯醇（2.50%）、愈创醇（1.98%）、γ-律草烯（1.94%）等。通过该研究实验阐明了三化汤主要化学成分,为开发利用该经典复方提供科学依据。3.三化汤入血成分的分析在体外成分研究基础上,采用UPLC-Q-TOF-MS技术,结合参考文献以及对照品信息对三化汤供试品溶液、空白血清、含药血清的化学成分进行解析,筛选入血成分。共鉴定出16种三化汤入血成分,其中8种来源于君药大黄,分别是表儿茶素没食子酸酯、芦荟大黄素-8-O-葡萄糖苷、大黄素、芦荟大黄素、大黄素甲醚、大黄酚、大黄酸;4种来源于臣药枳实,分别为柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素;2种来源于佐药厚朴,即厚朴酚和厚朴酚;2种来源于使药羌活,即羌活醇、异欧前胡素。这些化合物主要是蒽醌类、黄酮类、木脂素类和香豆素类成分。本研究初步确定了三化汤的16种入血成分,这些成分可能是三化汤的药效物质基础。

关键词：三化汤化学成分 UPLC-MS GC-MS 大鼠入血成分

茉莉酸甲酯对荆芥抗氧化能力、腺毛密度及其分泌物的影响

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南京农业大学学报 2023年第2期46卷 247-256页

作者：师建玲崔英静夏威刘水龙马召唐晓清王康才李宇峰顾斌杰南京农业大学中药材研究所江苏南京210095 常熟市启帆农业科技有限公司江苏常熟215501

[目的]本文旨在研究不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)及不同处理时间对荆芥次生代谢的影响,为优化荆芥栽培技术、提高其药用品质提供理论参考。[方法]采用盆栽试验,测定4个MeJA处理浓度(0、50、100、250μmol·L^(-1))和6个处理时间(0、6、24... 详细信息

[目的]本文旨在研究不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)及不同处理时间对荆芥次生代谢的影响,为优化荆芥栽培技术、提高其药用品质提供理论参考。[方法]采用盆栽试验,测定4个MeJA处理浓度(0、50、100、250μmol·L^(-1))和6个处理时间(0、6、24、72、120、168 h)下荆芥抗氧化物质含量、抗氧化能力、腺毛密度以及腺毛分泌物等指标,初步确定有利于其药用品质提升的最佳浓度和处理时间组合。[结果]MeJA处理的荆芥叶片总酚、总黄酮含量增加,抗氧化活性增强,且随着处理时间的延长呈先升后降的趋势,在50μmol·L^(-1)MeJA处理120 h时达到峰值。荧光显微镜下荆芥叶表皮腺毛在不同波长条件有不同响应,头状腺毛和盾状腺毛分别在紫外光(512~542 nm)和蓝光(435~485 nm)下具有荧光现象。50μmol·L^(-1)MeJA处理的荆芥叶片头状腺毛和盾状腺毛密度显著增加。MeJA处理对荆芥腺毛分泌物各组分所占比例影响较大,其中单萜类化合物相对含量增加,倍半萜类含量下降。胡薄荷酮相对含量在50μmol·L^(-1)MeJA处理72 h以及250μmol·L^(-1)MeJA处理120 h时较对照均显著增加,薄荷酮含量变化与胡薄荷酮呈相反趋势。D-柠檬烯在MeJA处理后相对含量下降。[结论]MeJA能有效调控荆芥挥发性成分萜类化合物的代谢,提高植株抗氧化能力,以50μmol·L^(-1)MeJA处理120 h效果最优。

关键词：茉莉酸甲酯荆芥抗氧化腺毛密度腺毛分泌物

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一例卵巢非特异性类固醇细胞瘤诊治报告

浙江临床医学 2022年第8期24卷 1244-1245页

作者：陈芸芸施文银卓芸巧李文娟刘水龙谢臻蔚浙江大学医学院附属妇产科医院 310006 杭州市余杭区妇幼保健院(浙江大学医学院附属妇产科医院余杭分院) 311100

卵巢类固醇细胞瘤(steroid cell tumor,SCT)是一种罕见的卵巢性索间质肿瘤,可分泌类固醇激素,常合并高雄激素血症,影像学检查是术前诊断重要辅助检查,但病理检查是确诊依据,手术治疗是其主要治疗方法,术后激素水平可迅速正常化.因该病罕... 详细信息

卵巢类固醇细胞瘤(steroid cell tumor,SCT)是一种罕见的卵巢性索间质肿瘤,可分泌类固醇激素,常合并高雄激素血症,影像学检查是术前诊断重要辅助检查,但病理检查是确诊依据,手术治疗是其主要治疗方法,术后激素水平可迅速正常化.因该病罕见,临床易误诊,本文通过报道卵巢非特异性类固醇细胞瘤一例并结合国内外相关文献复习,以期加深临床医师对该病的认识.

关键词：高雄激素血症临床医师术前诊断卵巢性索间质肿瘤类固醇激素确诊依据影像学检查病理检查

柳江县1996年度粮食自给工程项目建设通过自治区级验收

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广西农业机械化 1997年第3期 12-11页

作者：刘水龙

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雌激素受体β在乳腺癌中的表达价值分析

当代医学 2013年第28期19卷 80-81页

作者：刘水龙浙江省杭州市余杭区妇幼保健院浙江311100

目的探讨分析ERβ在乳腺癌中的调控作用。方法选取2010年1月-2012年1月杭州市余杭区妇幼保健院收治的70例乳腺癌患者作为实验对象,从其乳腺组织中获取标本,对样本ERβ表达和相关临床参数进行检测。结果 70例样本中ERβ阳性表达率为65.7%... 详细信息

目的探讨分析ERβ在乳腺癌中的调控作用。方法选取2010年1月-2012年1月杭州市余杭区妇幼保健院收治的70例乳腺癌患者作为实验对象,从其乳腺组织中获取标本,对样本ERβ表达和相关临床参数进行检测。结果 70例样本中ERβ阳性表达率为65.7%。ERβ的表达和患者肿瘤大小、浸润范围、月经情况、临床分期、p 53等表达无明显关系(P>0.05);与病理分型、Ki 67有相关性(P<0.05)。结论 ERβ和乳腺癌细胞增殖存在一定关系。

关键词：雌激素受体β 乳腺癌表达

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主斜井强力皮带的硫化及更换

山西焦煤科技 2003年第4期27卷 30-31页

作者：刘水龙山西焦煤集团公司西曲矿

系统地介绍了主斜井强力皮带硫化、更换方案选取和硫化工艺 ,有效的保证了质量。

关键词：煤矿斜井强力皮带硫化工艺更换输送机

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新型羽绒检测专用浊度仪的研发和应用

畜牧与兽医 2012年第9期44卷 37-40页

作者：宋保国郑琳姚超万旺军谭蒙刘水龙单波浙江出入境检验检疫局羽毛绒检测实验室浙江杭州311208

采用新型羽绒检测专用浊度仪测量羽绒滤出液的吸光度,在与用现行的《水洗羽毛检验方法》(GB/T 10288-2003)方法测量的羽绒滤出液透明度比较后,得出了羽绒透明度与吸光度的幂函数回归方程。实验证明使用该仪器检测羽绒浊度/透明度准确性... 详细信息

采用新型羽绒检测专用浊度仪测量羽绒滤出液的吸光度,在与用现行的《水洗羽毛检验方法》(GB/T 10288-2003)方法测量的羽绒滤出液透明度比较后,得出了羽绒透明度与吸光度的幂函数回归方程。实验证明使用该仪器检测羽绒浊度/透明度准确性高、结果稳定、重现性好,有效地解决了目前国内外检测羽绒浊度使用的目视法带来的误差。

关键词：新型羽绒检测专用浊度仪浊度吸光度目视法

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阑尾病理标本中寄生虫分析与诊断

检验医学与临床 2011年第17期8卷 2136-2137页

作者：游小文韦云龙刘水龙浙江省杭州市余杭区妇幼保健院检验科 311100 浙江省杭州市余杭区妇幼保健院病理科 311100

目的了解儿童阑尾炎的病因,有助于术后规范化治疗。方法将阑尾炎标本制作蜡块,切片,制成病理标本。脱蜡后,苏木素染色显微镜镜检。结果根据蛲虫特有的典型结构,符合雄性蠕形住肠线虫的特征。结论蠕形住肠线虫梗阻可引起急性单纯性阑尾炎。

关键词：阑尾炎标本制备肠/寄生虫学线虫纲

少数民族文化传承研究凝视:现实图景与未来路向

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民族学论丛 2024年第1期 125-134页

作者：刘水波汪勇贵州师范大学马克思主义学院贵州1贵阳550001

少数民族文化传承对推动中华民族优秀传统文化良性发展和文化强国建设有着重要的现实意义。利用CiteSpace可视化分析软件对少数民族文化传承研究已有成果进行量化分析,可从时间、空间、热点层面描绘该主题研究的现实图景。少数民族文化... 详细信息

少数民族文化传承对推动中华民族优秀传统文化良性发展和文化强国建设有着重要的现实意义。利用CiteSpace可视化分析软件对少数民族文化传承研究已有成果进行量化分析,可从时间、空间、热点层面描绘该主题研究的现实图景。少数民族文化传承研究具有鲜明的政策导向性,跨学科交叉研究趋势明显,少数民族文化传承机制研究、少数民族“非遗”传承研究、少数民族艺术体育文化传承研究等是该主题研究的前沿热点,但研究主体之间缺乏交流合作,实证研究和经验总结有待加强。未来进一步深化拓展少数民族文化传承研究,可以从创新优化研究方法、提升研究内容热点“黏性”、牵引研究视野转向三个方面发力,加强少数民族文化传承理论研究与实践工作的相互关照。

关键词：少数民族文化传承可视化计量分析现实图景热点场域研究展望