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非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定

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畜牧兽医学报 2023年第1期54卷 281-292页

作者：齐艳丽刘桃雪于海深张超鲁维飞王江褚贝贝张改平河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室郑州450046 河南农业大学河南省动物生长发育调控重点实验室郑州450046 河南农业大学动物免疫学国际联合研究中心郑州450046

旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV)p54蛋白的特异性单克隆抗体。本研究利用大肠杆菌表达系统表达p54蛋白,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合。利用纯化的p54蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞。经4... 详细信息

旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV)p54蛋白的特异性单克隆抗体。本研究利用大肠杆菌表达系统表达p54蛋白,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合。利用纯化的p54蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞。经4次亚克隆后,取杂交瘤细胞上清进行单克隆抗体亚型鉴定,利用体内诱生法制备单克隆抗体并进行纯化。间接ELISA方法检测单克隆抗体的效价,利用交叉反应性试验、间接免疫荧光试验和蛋白印迹对所获单克隆抗体的特异性进行鉴定。根据预测的p54蛋白二级结构,采用逐步截短法分析鉴定单克隆抗体识别的抗原表位区域,并在p54的三级结构中进行标注。结果显示:成功筛选了6株分泌p54单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为28G12-1、31G7-1、31G7-2、35F10-1、35F10-2、38D3-1。其中28G12-1、31G7-1、31G7-2重链为IgG2a型,35F10-1、35F10-2、38D3-1重链为IgG1型;轻链均为κ链。单克隆抗体的最低效价为1∶25 600,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒、猪细小病毒、猪急性腹泻综合征冠状病毒、猪圆环病毒2型不发生交叉反应,特异性强,所获抗体均识别p54蛋白C端127—146 aa肽段。本研究成功获得了ASFV p54蛋白和p54单克隆抗体,并鉴定了6株单克隆抗体的抗原表位,为p54蛋白功能研究和ASFV新型表位疫苗研究奠定了基础。

关键词：非洲猪瘟病毒 p54蛋白原核表达单克隆抗体间接ELISA 抗原表位

非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定

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畜牧兽医学报 2023年第8期54卷 3415-3423页

作者：刘桃雪苏冰倩齐艳丽郭江涛刘忠虎褚贝贝王江曾磊河南农业大学动物医学院郑州450046 河南农业大学农业农村部动物生化与营养重点实验室郑州450046 河南农业大学河南省动物生长发育调控重点实验室郑州450046

为制备非洲猪瘟病毒(ASFV)p30蛋白的单克隆抗体,以原核表达的重组p30蛋白为免疫原免疫6~8周龄雌性BALB/c小鼠,3次免疫后分离小鼠脾细胞并将其与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛选。结果获得2株能稳定分泌抗ASFV p30蛋白单克隆抗... 详细信息

为制备非洲猪瘟病毒(ASFV)p30蛋白的单克隆抗体,以原核表达的重组p30蛋白为免疫原免疫6~8周龄雌性BALB/c小鼠,3次免疫后分离小鼠脾细胞并将其与SP2/0细胞进行融合,通过间接ELISA方法筛选。结果获得2株能稳定分泌抗ASFV p30蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2G10-2和6D2-1。抗体效价分别为1∶12800和1∶3200。亚型鉴定结果显示,2株单克隆抗体的重链均属于IgG,轻链均为κ型。Western blot和间接免疫荧光试验结果显示,2株单克隆抗体与p30蛋白均具有良好的结合活性。通过Western blot检测,2株单克隆抗体能有效结合截短重组p30蛋白的170~194位氨基酸,证明其抗原识别区域为第170~194位氨基酸。本研究制备了p30蛋白的2株单克隆抗体,并对其抗原表位进行鉴定,为ASFV p30蛋白结构和功能的研究及血清学诊断试剂的研发奠定基础。

关键词：非洲猪瘟病毒 p30蛋白原核表达单克隆抗体抗原表位

大口黑鲈虹彩病毒主衣壳蛋白单克隆抗体制备与抗原表位鉴定

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河南农业科学 2024年第10期53卷 149-158页

作者：宋占林明胜利曾磊潘佳佳赵黎明刘桃雪王江刘忠虎河南农业大学动物医学院河南郑州450046 河南农业大学农业农村部动物生化与营养重点实验室河南郑州450046 河南农业大学河南省兽医生物技术重点实验室河南郑州450046 河南省水产技术推广站河南郑州450008

以大口黑鲈虹彩病毒(Largemouth bass iridovirus,LMBV)主衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)为检测靶蛋白,利用原核表达系统表达MCP重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP/20)融合,经亚克隆筛选、小鼠... 详细信息

以大口黑鲈虹彩病毒(Largemouth bass iridovirus,LMBV)主衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)为检测靶蛋白,利用原核表达系统表达MCP重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP/20)融合,经亚克隆筛选、小鼠腹腔接种、收集腹水等过程获得单克隆抗体;利用免疫印迹技术对所制备的单克隆抗体免疫识别的特异性以及其识别的抗原表位进行研究分析,为研制适于养殖现场快速检测LMBV的胶体金检测试纸条奠定基础。结果表明,获得了1株单克隆抗体2C9-6。特异性分析结果显示,单克隆抗体2C9-6可以特异性识别真核表达的LMBV-MCP和LMBV病毒颗粒。抗原表位分析结果表明,单克隆抗体2C9-6识别LMBV-MCP的抗原表位位于LMBV-MCP蛋白N端第1—20位氨基酸。

关键词：大口黑鲈虹彩病毒主衣壳蛋白单克隆抗体抗原表位

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天然和饱水红砂岩三轴压缩蠕变变形试验研究

三峡大学学报（自然科学版） 2025年第1期47卷 9-15页

作者：刘桃根胡凯李玲王伟湖南工学院土木与建筑工程学院湖南衡阳421002 河海大学岩土工程科学研究所南京210098 江西职业技术大学建筑工程学院江西九江332007

蠕变特性和长期强度是红砂岩地区岩体工程安全评价的关键要素,饱水软化效应对红砂岩蠕变特性和长期强度具有重要影响.采用全自动岩石三轴压缩伺服流变仪,开展天然与饱水红砂岩的三轴压缩试验和三轴压缩蠕变试验.试验结果表明:峰值强度... 详细信息

蠕变特性和长期强度是红砂岩地区岩体工程安全评价的关键要素,饱水软化效应对红砂岩蠕变特性和长期强度具有重要影响.采用全自动岩石三轴压缩伺服流变仪,开展天然与饱水红砂岩的三轴压缩试验和三轴压缩蠕变试验.试验结果表明:峰值强度、弹性模量和蠕变破坏应力因饱水软化效应而降低,围压对其降幅有削弱作用,蠕变破坏应力与峰值强度的比值在0.75~0.98之间;饱水软化效应能增强蠕变瞬时变形,减弱蠕变变形及蠕变应变速率;环向应变比轴向应变更早进入稳态蠕变阶段和加速蠕变阶段;稳态蠕变速率与偏压的变化关系符合指数函数关系;长期强度因饱水软化作用而降低,却因围压增加而增大,长期强度与峰值强度的比值在0.62~0.92之间;裂纹损伤应力与长期强度相差较大,裂纹损伤应力视为长期强度有待进一步考究.

关键词：红砂岩蠕变特性长期强度饱水软化效应裂纹损伤应力

基于物联网和卷积神经网络的智能农机安全驾驶系统

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农机化研究 2025年第3期47卷 211-216页

作者：张砚雪天津电子信息职业技术学院天津300350

基于物联网和卷积神经网络的智能农机安全驾驶系统是一种创新的农业技术应用,通过将农机设备的摄像装置连接到互联网上,实现对农机设备和驾驶员的实时监测和数据采集;再利用卷积神经网络技术对采集到的驾驶数据进行特征提取和驾驶行为... 详细信息

基于物联网和卷积神经网络的智能农机安全驾驶系统是一种创新的农业技术应用,通过将农机设备的摄像装置连接到互联网上,实现对农机设备和驾驶员的实时监测和数据采集;再利用卷积神经网络技术对采集到的驾驶数据进行特征提取和驾驶行为分类与识别,实现对驾驶行为的自动监测和预警。实验结果表明:系统对驾驶行为的类别检测准确率较高,可以提高农机驾驶安全性和驾驶效率,为农业生产提供更加智能化和高效的服务。

关键词：物联网卷积神经网络智能农机安全驾驶驾驶行为预警

国际量子认知的研究回溯、热点发掘与整合展望

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自然辩证法通讯 2025年第1期 105-116页

作者：刘燊汪澜韩逸雪周颖安徽农业大学人文社会科学学院安徽农业大学林学与园林学院中国地质大学(武汉)教育研究院

目前国内对于量子认知的研究较为薄弱，对于国际量子认知研究进行系统评述进而启发国内学者的思考十分必要。本文以2003-2022年发表的1482篇量子认知英文文献为样本，从规模、分布和趋势三个维度刻画了国际量子认知研究在发文量、地区... 详细信息

目前国内对于量子认知的研究较为薄弱，对于国际量子认知研究进行系统评述进而启发国内学者的思考十分必要。本文以2003-2022年发表的1482篇量子认知英文文献为样本，从规模、分布和趋势三个维度刻画了国际量子认知研究在发文量、地区合作、主题分布以及热点演进方面的特征，在此基础上进一步展开了对于量子认知研究未来发展趋势的分析与讨论。量子认知研究发文量呈现持续上升的趋势；心理学是量子认知研究的主要领域之一；量子认知研究的前沿热点议题包括量子理论构建认知模型的潜力、利用量子力学探究意识在大脑中的工作机制、利用量子理论解释概率判断误差中的认知现象等。

关键词：量子认知量子力学认知科学知识图谱

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数字化转型、供应链溢出与供应商ESG表现

华东经济管理 2025年第1期39卷 95-105页

作者：韩忠雪侯林湖北工业大学经济与管理学院湖北武汉430068 湖北工业大学湖北循环经济发展研究中心湖北武汉430068

环境、社会责任和公司治理表现逐渐成为衡量企业可持续发展能力的重要指标。文章以2010—2021年A股上市公司财务数据为基础,匹配上下游供应商—客户数据,实证检验了客户企业数字化转型对供应商ESG表现的影响。研究发现:客户企业数字化... 详细信息

环境、社会责任和公司治理表现逐渐成为衡量企业可持续发展能力的重要指标。文章以2010—2021年A股上市公司财务数据为基础,匹配上下游供应商—客户数据,实证检验了客户企业数字化转型对供应商ESG表现的影响。研究发现:客户企业数字化转型可以提升供应商ESG表现;在供应商地位较低、上下游企业关系密切、供应商营运环境较好以及上下游企业数字化转型差距较小的样本中,客户企业数字化转型对供应商ESG表现的促进作用更明显;进一步研究发现,客户企业数字化转型主要通过减少对供应链资金的占用、促进供应商绿色创新以及推动供应商绿色转型来提升供应商ESG表现。研究结论对提升产业链供应链韧性、促进经济可持续发展具有一定实践意义。

关键词：数字化转型供应链溢出 ESG表现财务溢出知识溢出

卡拉胶-变性淀粉-蛋清蛋白复合凝胶的制备及特性表征

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食品科学 2025年第2期46卷 72-80页

作者：崔亚雪李文钊杨晓飞颜凤张家萍阮美娟天津科技大学食品科学与工程学院天津300457

以卡拉胶、羟丙基二淀粉磷酸酯和蛋清粉为原料,制备卡拉胶-羟丙基二淀粉磷酸酯-蛋清蛋白三元复合凝胶并对其凝胶特性和微观结构特性进行表征,同时探究不同改性蛋清粉与复合多糖的相互作用及其对复合凝胶特性的影响。结果显示,与单体卡... 详细信息

以卡拉胶、羟丙基二淀粉磷酸酯和蛋清粉为原料,制备卡拉胶-羟丙基二淀粉磷酸酯-蛋清蛋白三元复合凝胶并对其凝胶特性和微观结构特性进行表征,同时探究不同改性蛋清粉与复合多糖的相互作用及其对复合凝胶特性的影响。结果显示,与单体卡拉胶、卡拉胶/变性淀粉二元复合凝胶相比,多糖-蛋白复合凝胶的凝胶强度和持水性增大,弹性模量G’值显著提高,弛豫时间T_(23)显著缩短,其相对峰面积占比A23减小,可冻结水分含量下降。多糖-蛋白复合凝胶红外光谱出现振幅增大以及峰位弱移现象。利用X射线衍射仪分析凝胶的结晶特性,多糖-蛋白复合凝胶的衍射峰强度减弱,结晶度存在一定程度的降低。利用扫描电子显微镜观察凝胶的微观结构发现复合多糖与蛋清蛋白的相互作用可以促成稳定的复合凝胶,形成致密均匀的凝胶网络结构。与此同时,不同改性蛋清粉(P10、PHG14、PHG21)与多糖结合的三元复合凝胶在以上所运用的各种分析工具结果中呈现出不同程度的改善,其中PHG14、PHG21参与形成的多糖-蛋白复合凝胶表现出相对更显著的效果,具有更稳定的凝胶特性和微观结构特性。

关键词：卡拉胶变性淀粉蛋清蛋白复合凝胶凝胶特性

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交易习惯在消费者合同中适用的困境及化解

商场现代化 2025年第2期 31-34页

作者：陈双雪兰州大学法学院

《最高人民法院关于适用合同编通则若干问题的解释》第2条对交易习惯的具体情形作出了进一步阐明。在司法实践中尤其是消费者合同中,由于利益失衡,交易习惯逐渐逃逸成为经营者损害消费者合法权益的工具,披上“合同自由”的外衣便可轻易... 详细信息

《最高人民法院关于适用合同编通则若干问题的解释》第2条对交易习惯的具体情形作出了进一步阐明。在司法实践中尤其是消费者合同中,由于利益失衡,交易习惯逐渐逃逸成为经营者损害消费者合法权益的工具,披上“合同自由”的外衣便可轻易逃脱法律的惩罚。行业内部通行的惯例与法律上交易习惯之间横亘着适法性审查这座“大山”,应当充分考虑消费者合同的特殊性,在适法性审查之外充分考量公平原则和诚信原则,只有在消费者“知情同意”的情况下才有交易习惯适用的空间,所谓的交易习惯不能成为合同解释的唯一适用标准。

关键词：交易习惯利益平衡消费者权益适法性