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羊肉是一种高蛋白、低胆固醇的肉类,能补充人体所需要的氨基酸和维生素等物质,广受消费者喜欢。脂肪是维持机体能量代谢平衡的重要组织,但过多的脂肪沉积在尾部不利于羊肉产量的提高。TPT1是一种广泛表达于各种细胞类型的基因。此前研究表明,在猪前体脂肪细胞分化过程中抑制TPT1的表达可以促进脂滴生成。然而,对于TPT1调控绵羊前体脂肪细胞分化的机制尚不清楚。本研究以绵羊7种组织为研究对象,用生物信息学分析软件,揭示TPT1的序列特征及其编码蛋白的结构与功能;用RT-q PCR检测TPT1的组织表达规律。以尾部、皮下和肾周脂肪为研究对象,用RT-q PCR检测TPT1在不同部位脂肪的表达量。以前体脂肪细胞为研究对象,用RT-q PCR检测TPT1的时序表达规律;用Western Blotting检测TPT1在绵羊前体脂肪细胞分化过程中的表达趋势;通过细胞免疫荧光蛋白试验,探究TPT1蛋白在前体脂肪细胞中的亚细胞定位;通过慢病毒包装试验介导的TPT1的过表达与抑制,探究TPT1在绵羊前体脂肪细胞中的功能;用RT-q PCR和Western Blotting检测TPT1对Fox O1表达的影响;通过PI3K/Akt通路抑制试验,探究该通路是否参与TPT1调控的分化过程。通过以上研究,旨在揭示TPT1在绵羊前体脂肪细胞分化过程中的功能及调控机制。主要结果如下:1.绵羊TPT1的生物信息学分析结果绵羊TPT1 CDS长660 bp,与山羊的相似性最高,为99.7%。说明,绵羊与山羊亲缘关系最近。TPT1编码219个氨基酸,蛋白总平均亲水性为-0.374。说明,该蛋白是一种亲水性蛋白。TPT1主要定位于线粒体和细胞核中。说明,TPT1可能在细胞内不同部位发挥功能。TPT1含有16个潜在的磷酸化位点。说明,该蛋白在细胞内可能通过蛋白质的磷酸化调控其功能。2.绵羊TPT1的时空表达规律与亚细胞定位绵羊TPT1 mRNA在肾脏中表达最高,其次是肌肉、肝和脂肪,心和脾中表达最低。说明,TPT1基因在不同组织中发挥不同的功能。在肾周、皮下和尾部脂肪中,TPT1在尾部脂肪中表达量最高。在前体脂肪细胞分化过程中,TPT1的表达量先上升后下降再上升。在绵羊前体脂肪细胞中,TPT1定位于细胞核中。说明,TPT1基因在前体脂肪细胞中主要在细胞核内发挥其功能。3.TPT1促进绵羊前体脂肪细胞的分化过表达TPT1后,一些调控成脂分化的关键基因PPARγ、Adipo Q、FABP4 m RNA的表达显著上调,但C/EBPα表达量没发生显著变化,脂滴生成增加;抑制TPT1后,这些基因的表达量下降,脂滴生成减少。说明,TPT1能调节成脂分化关键基因的表达,从而促进脂肪细胞的分化和脂滴的生成。4.TPT1通过FoxO1促进绵羊前体脂肪细胞分化过表达TPT1后,FoxO1及其编码蛋白的表达量都显著下调;相反,抑制TPT1后,Fox O1及其编码蛋白的表达量都显著上升。说明,TPT1基因可通过下调FoxO1的表达的促进绵羊前体脂肪细胞分化。5.TPT1通过PI3K/Akt通路促进绵羊前体脂肪细胞的分化过表达TPT1后,p-Akt的表达量显著上调,抑制TPT1后出现相反的结果;过表达TPT1的细胞经LY294002处理后,成脂分化关键基因PPARγ、C/EBPα、AdipoQ、FABP4的表达量显著下调,脂滴生成减少。说明,TPT1能通过激活PI3K/Akt通路促进绵羊前体脂肪细胞的分化。综上所述,TPT1对绵羊尾部脂肪细胞的分化不可或缺,通过调控Fox O1和PI3K/Akt通路参与脂肪分化过程。本研究为进一步探究TPT1对脂质沉积和脂肪生成提供了理论依据。

关键词： TPT1 绵羊前体脂肪细胞细胞分化 FoxO1 PI3K/Akt

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高氧激活肠上皮细胞MAPK途径和Nrf2并诱导IL-17D表达增加炎性因子的产生

高氧激活肠上皮细胞MAPK途径和Nrf2并诱导IL-17D表达增加炎性因子...

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作者：刘旭莹中国医科大学

学位级别：硕士

目的:为早产儿提供氧气是临床上广泛应用的治疗措施,但长时间高氧治疗会对机体多个器官造成不可逆的损伤。高浓度的氧气会破坏小肠绒毛结构,影响肠道屏障功能,使早产儿易患坏死性小肠结肠炎。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated prot... 详细信息

目的:为早产儿提供氧气是临床上广泛应用的治疗措施,但长时间高氧治疗会对机体多个器官造成不可逆的损伤。高浓度的氧气会破坏小肠绒毛结构,影响肠道屏障功能,使早产儿易患坏死性小肠结肠炎。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路广泛存在于细胞质中。哺乳动物MAPK信号通路主要包括:细胞外信号调节激酶(extracellular signal-related kinases,ERK)、P38、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)。MAPK信号通路可以被多种细胞外刺激激活参与细胞凋亡,分化,增殖等病理生理过程。细胞凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)属于MAPK激酶激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase kinase,MAPKKK)家族成员,在诱导细胞死亡,分化和炎性细胞因子的产生等多种机制中具有关键作用。然而ASK1/MAPK途径是否参与高氧对肠上皮细胞造成的损伤尚不明确。高氧条件下,氧化应激是造成肠上皮细胞损伤的主要原因。核转录因子E2-相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)作为细胞对氧化应激的主要应答者,在氧化应激发生后,Nrf2-kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(kelch-like epichlorohydrin-associated protein 1,keap1)途径被激活,高氧诱导肠上皮细胞分泌大量活性氧(reactive oxygen species,ROS),过量的ROS引起keap1构象改变,游离的Nrf2转移至细胞核中发挥作用。白细胞介素17D(interleukin 17D,IL-17D)在多种组织和细胞中均有表达,它在免疫反应中的作用是复杂的,IL-17D不仅可以诱导内皮细胞产生细胞因子间接调节免疫应答,还在Nrf2的调控下发挥抗感染以及抗肿瘤免疫作用。但高氧环境中肠上皮细胞IL-17D的表达变化以及Nrf2是否调节IL-17D的表达尚不明确。因此,本研究旨在通过检测ROS对肠上皮细胞内ASK1/MAPK途径的影响,明确高氧对肠上皮细胞造成损伤的作用机制;通过检测高氧对新生大鼠肠道IL-17D,Nrf2和keap1表达的影响,了解Nrf2对IL-17D表达的调节作用;细胞水平上,通过检测高氧环境中肠上皮细胞IL-17D,Nrf2,keap1,IL-4和IL-6的表达以及加入Nrf2激动剂和抑制剂后这些因子的变化,进一步探究Nrf2对IL-17D的调节作用以及Nrf2/IL-17D轴是否参与高氧诱导的肠上皮细胞炎症反应,为预防临床高氧治疗过程中的不良反应提供了理论依据。研究方法:1.细胞培养:Caco-2细胞培养在正常细胞孵育箱(5%CO,37℃)中,细胞传代后继续培养24小时,用不同浓度HO(100μm、200μm和400μm)和85%O(5%CO,85%O,37℃)孵育24小时;NCM460细胞培养在正常细胞孵育箱(5%CO,37℃)中,细胞传代后继续培养24小时,随机取一部分放入高氧孵育箱(5%CO,85%O,37℃)中继续培养24,48和72小时,另一部分加入Nrf2激动剂和抑制剂后放入高氧孵育箱(5%CO,85%O,37℃)中继续培养24,48和72小时。2.利用免疫荧光染色检测Caco-2细胞中ASK1的表达。3.利用Western Blot和实时定量荧光逆转录聚合酶链式反应(quantitative Real-time Fluorescent Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,q RT-PCR)检测ERK、p-ERK、P38、p-P38、JNK和p-JNK的表达变化。4.制备动物模型:将新生大鼠在出生后12小时内随机分为对照组(Fi O=20%)和模型组(Fi O=85%),于出生后的第3、7、10和14天,收集小肠组织。5.利用免疫荧光染色检测IL-17D在新生大鼠肠黏膜中的表达定位。6.通过免疫组织化学染色,Western Blot检测新生大鼠肠黏膜Nrf2、IL-17D和keap1的表达变化。7.利用免疫细胞化学染色、Western blot和q RT-PCR检测高氧培养的NCM460细胞中Nrf2、IL-17D、keap1、IL-4和IL-6的表达。8.利用Western blot检测加入Nrf2激动剂和抑制剂后培养于高氧的NCM460细胞中Nrf2、IL-17D、keap1、IL-4和IL-6的表达。结果:1.ROS对肠上皮细胞中ASK1/MAPK通路的影响:(1)用不同浓度的HO和高氧处理后,肠上皮细胞ASK1从细胞质迁移到细

关键词：高氧 ASK1 MAPK信号通路 Nrf2 IL-17D keap1 炎症

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杭州第19届亚运会棋类项目公共信号制作实践

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广播电视信息 2023年第S01期30卷 80-83页

作者：刘旭莹国际传媒港(上海)文化发展有限公司

本文以杭州第19届亚运会棋类项目公共信号制作为例,从智力运动项目的特殊性出发,分析此次棋类项目公共信号制作区规划与系统构成,总结如何应对该类项目的特殊性以及解决制作问题的经验,以期为后亚运时代棋类项目比赛的转播提供借鉴。

关键词：公共信号制作杭州亚运会智力运动棋类项目

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高职护理专业学生心理幸福感与原生家庭相关性分析

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心理月刊 2022年第9期 11-13页

作者：刘旭莹陕西能源职业技术学院

目的分析高职护理专业学生心理幸福感与原生家庭相关性。方法 2019年9月～2021年6月，选取90例在校高职护理专业学生为研究对象，采用一般资料问卷、心理幸福感量表(PWB)、奥尔松婚姻质量问卷(ENRICH)对其进行调查评估。计数资料采用 x... 详细信息

目的分析高职护理专业学生心理幸福感与原生家庭相关性。方法 2019年9月～2021年6月，选取90例在校高职护理专业学生为研究对象，采用一般资料问卷、心理幸福感量表(PWB)、奥尔松婚姻质量问卷(ENRICH)对其进行调查评估。计数资料采用 x~2 检验。数据分析采用单因素分析、多因素分析及Pearson程序分析。结果幸福感好者生源地、是否为独生子女、父母文化程度、经济情况、亲子关系、父母对婚姻满意度与幸福感不好者相比差异显著(P<0.05)。生源地在农村、非独生子女、父母文化程度低、经济情况较差、亲子关系不和谐、父母对婚姻满意度低等为影响高职护理专业学生心理幸福感的关键因素。高职护理专业学生心理幸福感与生源地在农村、非独生子女、父母文化程度低、经济情况较差、亲子关系不和谐、父母对婚姻满意度低等呈负相关(P<0.05)。结论高职护理专业学生心理幸福感与原生家庭有显著相关性，高职学校需定期展开心理咨询工作，在实现高职护理专业学生自我价值的同时，提高其心理幸福感。

关键词：高职护理专业学生心理幸福感原生家庭经济情况婚姻满意度

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外周血NLR、NGAL在糖尿病肾病早期诊断中的意义

外周血NLR、NGAL在糖尿病肾病早期诊断中的意义

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作者：刘旭莹河南大学

学位级别：硕士

背景糖尿病(diabetes mellitus,DM)作为我国乃至全球最常见的慢性疾病之一严重影响着人们的日常生活。人们饮食方式的改变、运动量减少、肥胖增加等因素,导致DM患病率不断增加,尤其是2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)。而糖尿... 详细信息

背景糖尿病(diabetes mellitus,DM)作为我国乃至全球最常见的慢性疾病之一严重影响着人们的日常生活。人们饮食方式的改变、运动量减少、肥胖增加等因素,导致DM患病率不断增加,尤其是2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)。而糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是全世界终末期肾病(end stage renal disease,ESRD)的最常见原因,是导致DM患者死亡的主要原因。DKD早期缺乏特异的临床症状,一旦出现持续性蛋白尿、肾功能损害,则病情常不可逆转,往往发展至终末期肾衰竭,如果能够尽早发现DKD并给予积极干预,可以延缓其进展,因此DKD临床早期诊断显得尤为重要。近年来,关于DKD的早期诊断指标的研究越来越多,这些指标的特异性、敏感性、可行性、检测成本等不尽相同,本研究主要探讨了外周血中性粒细胞淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)及血浆中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)在DKD早期诊断中的意义,为DKD的临床早期发现提供一定的临床参考依据。目的通过观察分析健康对照组及T2DM各组研究对象外周血NLR、NGAL的差异变化,探讨两者同DKD病情发生发展的关系,比较它们与尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate,UAER)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、空腹血糖(fasting blood-glucose,FBG)各指标的差异及相关性。进一步了解外周血NLR、NGAL对DKD早期诊断的灵敏度、特异度,为临床上早期发现DM肾脏损伤提供实践依据及参考价值。方法选取2017年11月至2018年9月期间就诊于河南大学淮河医院的临床诊断为T2DM的患者60例,其中男性30例,女性30例,年龄436岁,平均年龄(56.25±9.03)岁。排除感染、原发性和其他继发性肾脏疾病、肾结石、肾动脉狭窄、肝炎、血液病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、中毒、近期特殊用药史、糖尿病急性并发症等因素。同时选取在此期间于河南大学淮河医院体检的健康者20例作为对照组,其中男性9例,女性11例,年龄460岁,平均年龄(54.00±7.02)岁,既往无糖尿病、高血压、肾炎、慢性感染性疾病、其他代谢性疾病、心脑血管病史等,且无急性感染性疾病。根据Mogensen分期标准,按照UAER的不同程度,将DM组患者分成三组:A组:正常白蛋白尿组(UAER300mg/24h),共20例(男性9例,女性11例)。平均年龄(57.05±9.26)岁。收集所有研究对象的空腹静脉血样本,测定NGAL水平,且留置24小时尿液,记录其总量,在试管中摇匀后,取10ml尿液送检微量白蛋白,最后计算出UAER。严格收集及记录对照组及患病各组的观察指标,如性别、年龄、空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血肌酐(Scr)、血中性粒细胞绝对值、淋巴细胞绝对值,并计算出NLR。结果1.各组研究对象在性别、年龄之间差异无统计学意义(p>0.05),具有良好的同质基础。2.FBG、TG水平在对照组、A组、B组、C组间依次升高,各组间的差异有统计学意义(p0.05);TC在其他各组间两两比较时,差异均有统计学意义(p<0.001)。3.Scr在对照组、A组、B组、C组间依次升高。C组显著高于对照组、A组、B组,差异有统计学意义(p<0.001);对照组与A组(p=0.852)差异无统计学意义;对照组与B组间(p=0.060)差异无统计学意义;A组与B组(p=0.089)差异无统计学意义。UAER在对照组、A组、B组、C组间依次升高。A组与对照组(p=0.934)差异无统计学意义;B组与对照组(p=0.012)差异有统计学意义;A组与B组(p=0.015)差异有统计学意义。C组与对照组、A组、B组相比,差异均有统计学意义(p<0.001)。NGAL、NLR在对照组、A组、B组、C组间依次升高,差异有统计学意义。四个组NGAL、NLR的水平进行组间两两比较时,差异均有统计学意义(p<0.001)。4.NGAL、NLR与FBG、TG、TC、Scr、UAER这几个指标呈正相关性(p<0.001),与年龄、性别无

关键词： NLR NGAL 糖尿病肾病早期诊断

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基于改进遗传蚁群算法的低压PLC网络路由方法

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电力自动化设备 2022年第3期42卷 210-217页

作者：崔莹广东电网有限责任公司珠海供电局广东珠海519000

在低压电力线通信网络组网过程中,节点间距离较远或信道环境较为恶劣的条件下,节点上电会形成多个网络短时共存现象,严重影响网络通信的可靠性,因此探讨基于带有冲突避免的载波侦听多路访问+时分多址(CSMA/CA+TDMA)混合协议的多网络快... 详细信息

在低压电力线通信网络组网过程中,节点间距离较远或信道环境较为恶劣的条件下,节点上电会形成多个网络短时共存现象,严重影响网络通信的可靠性,因此探讨基于带有冲突避免的载波侦听多路访问+时分多址(CSMA/CA+TDMA)混合协议的多网络快速融合方法。该方法可智能识别区域内存在多个网络,自主选取介质访问控制(MAC)地址最小的网络为多网络融合方向,解散MAC地址较大的网络,解决多网络不确定性融合问题。在此基础上,针对遗传算法在服务质量(QoS)参数约束下局部搜索能力差、难以得到按需路由最优解的问题,在非对称信道环境下提出基于改进遗传蚁群算法的路由热备份方法,该方法中源节点和目的节点不参与交叉、变异操作,有效避免了无效染色体的生成。采用最佳保留机制找到较优解,将较优解转换为蚁群算法的初始信息素,从而得到全局的路由最优解。仿真结果表明,相较于传统算法,所提方法更为有效。

关键词：泛在电力物联网低压电力线通信网络融合路由方法改进遗传蚁群算法

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