检索结果-南通市图书馆

抑瘤基因NGX6启动子的克隆及初步功能研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤基因NGX6启动子的克隆及初步功能研究

作者：刘敏姬中南大学

学位级别：硕士

研究背景NGX6基因是中南大学肿瘤研究所分子遗传室采用定位侯选克隆策略克隆的一个侯选抑瘤基因(基因登陆号:AF188239),定位于染色体9p13.3区域。开放阅读框编码的338个氨基酸,分子量为37kDa,具有两个跨膜结构域。胞外区含有一个EGF-lik... 详细信息

研究背景NGX6基因是中南大学肿瘤研究所分子遗传室采用定位侯选克隆策略克隆的一个侯选抑瘤基因(基因登陆号:AF188239),定位于染色体9p13.3区域。开放阅读框编码的338个氨基酸,分子量为37kDa,具有两个跨膜结构域。胞外区含有一个EGF-like domain,3个N-糖基化位点。胞内区较短,含有一个酪氨酸激酶磷酸化位点。研究表明,NGX6基因在鼻咽癌和结直肠癌中表达明显下降。前期研究发现NGX6基因能够延缓细胞周期的进程;抑制肿瘤增殖和种植瘤的生长;并能抑制肿瘤血管的生成;降低肿瘤细胞体外侵袭能力,同时恢复肿瘤细胞间隙通讯;并通过抑制核内β-catenin的表达负调控Wnt/β-catenin通路;负调控SPAK/JNK通路并抑制P-JNK核移位;下调EGFR-PKC-IKK-NF-κB通路的关键分子和转录因子;下调Ezrin下游与侵袭相关的通路中信号分子的表达。研究证实,NGX6蛋白的EGF样结构域和胞内区是其调控细胞黏附的重要功能域,胞内区是其调节运动迁移的关键结构域。这些功能研究结果高度提示NGX6在可能肿瘤的发生、发展中发挥一定作用,且与肿瘤的侵袭转移相关。本课题在前期工作的基础上,研究了NGX6基因的上游分子事件即转录调控研究,希望从调控该基因表达的上游基因的角度,明确该基因具体的表达调控机制,以进一步揭示NGX6基因在肿瘤的增殖、侵袭、转移中的分子机制,深入阐明NGX6基因的生物学功能。生物信息学分析NGX6基因转录调控区域首先应用生物信息学方法对NGX6基因5′侧翼区序列进行分析。在线软件PromoterInspector的预测结果显示NGX6基因的调控区-157/+91的区间为其候选启动子区,而在线程序FirstEF分析结果表明-257/+407的区间为NGX6的候选启动子区。运用软件CpGplot和CpGFinder在线扫描NGX6基因的5′侧翼区序列,分别发现其5′上游-107/+299或-21/+310的区间存在一个CpG岛。这两个软件的预测结果大部分重叠,且与NGX6基因候选启动子区域重叠。而TSSW和TRED预测NGX6基因的可能存在多个转录起始位点,这种情况在GC富集启动子区中是常见的,位于-50/+50区间。在线软件MatInspector和TFSEARCH的分析结果显示:NGX6基因启动子区为一个不含TATA盒,而含有CAAT盒的GC富集区。它含有多种转录因子结合位点,其中较重要的结合位点有:Sp1、Egr-1、RREB、P53、MYC-MAX和AP2等。NGX6基因启动子的克隆及鉴定以正常人外周血细胞基因组DNA为模板,利用PCR技术,获得了NGX6基因调控区长片段-357/+769,并通过荧光素酶活性检测系统证实该区域具有与病毒SV40启动子同等强度的启动活性。接着以该长片段为模板,依据转录因子结合位点预测结果,构建了一系列的缺失突变体报告质粒,定位了NGX6基因的近距离启动子为-159/+276区域。而同时采用绿色荧光蛋白活体检测法进一步验证了-159/+276区域的启动子活性。转录因子Sp1对NGX6基因表达的影响真核基因表达调控体系中最关键的是转录起始水平的调控,其基本机制主要包括顺式作用元件、反式作用因子和RNA聚合酶三者之间的相互协同作用,其实质是蛋白质与DNA、蛋白质与蛋白质之间的相互作用。在线软件MatInspector和TFSEARCH分析NGX6基因的近距离启动子区,发现该区域中以转录因子Sp1的结合位点最多,且Threshold值较高。转录因子Sp1结合位点的特异性竞争剂光辉酶素A(Mithramycin A)可大幅度地抑制NGX6启动子活性,并明显下调NGX6基因内源性mRNA表达水平。总之,我们成功获得了NGX6的启动子区域,并确定了其近距离启动子区域。NGX6基因启动子区域是一个不含TATA盒,而含有CAAT盒的GC富集区,且该调控区内存在一个CpG岛。初步发现转录因子Sp1的抑制剂mithramycin A能够明显地抑制NGX6启动子地活性和NGX6基因的表达。对NGX6基因调控区的CpG岛甲基化的探讨以及其他的顺式作用元件和反式作用因子对NGX6基因表达的调控的研究将是我们下一步的研究目标,以期待能更好的了解NGX6基因在肿瘤发生、发展中的作用和地位,并寻找新的针对鼻咽癌或结直肠癌相关基因转录调控失调的药物提供一个基础平台。

关键词： NGX6基因启动子 Sp1 光辉霉素A

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

论高校校园网络舆情的特点、监测及管理应对

湖北社会科学 2011年第10期 171-174页

作者：刘敏姬李伟东仲恺农业工程学院广东广州510225

高校校园网络舆情的辐射和影响程度较为广泛和深刻、政治敏感性较强但易受情绪和环境影响、舆情信息在网上传播速度极为快速、网络舆情信息的难辨性等特点都容易造成学生群体的盲从与冲动。只有建立网络舆情信息监测机制,改革创新高校管... 详细信息

高校校园网络舆情的辐射和影响程度较为广泛和深刻、政治敏感性较强但易受情绪和环境影响、舆情信息在网上传播速度极为快速、网络舆情信息的难辨性等特点都容易造成学生群体的盲从与冲动。只有建立网络舆情信息监测机制,改革创新高校管理,才能面对校园网络舆情带来的挑战,保持校园稳定、促进高校的改革与发展。

关键词：校园网络舆情监测高校管理

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

论大学生网络舆情监控与校园稳定维护

教育与职业 2010年第21期 71-73页

作者：李伟东刘敏姬仲恺农业工程学院

随着校园网络的不断发展,形成了相应的大学生网络舆情,并呈现出不同于其他群体和其他领域舆情的特征,这给高校管理与维护校园稳定工作带来了新的机遇和挑战。为此,应该充分认识、把握和研究网络舆情,加强引导与管理,建立相应的网络舆情... 详细信息

随着校园网络的不断发展,形成了相应的大学生网络舆情,并呈现出不同于其他群体和其他领域舆情的特征,这给高校管理与维护校园稳定工作带来了新的机遇和挑战。为此,应该充分认识、把握和研究网络舆情,加强引导与管理,建立相应的网络舆情信息监控机制,改进网络思想政治教育,形成网上网下思想政治教育的合力,这对维护校园稳定将起到积极的作用。

关键词：网络舆情监控网络思想政治教育

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

论网络思想政治教育评价的特性

湖北社会科学 2010年第3期 187-189页

作者：李伟东刘敏姬仲恺农业工程学院广东广州510225

网络思想政治教育评价由于其运作方式、载体、环境等的不同而显示出其与传统思想政治教育评价或其他教育评价不同的特性,这些特性主要包括网络思想政治教育评价主体的多元性与专业性;评价客体的虚拟性与现实性;评价方法的智能性与自主性... 详细信息

网络思想政治教育评价由于其运作方式、载体、环境等的不同而显示出其与传统思想政治教育评价或其他教育评价不同的特性,这些特性主要包括网络思想政治教育评价主体的多元性与专业性;评价客体的虚拟性与现实性;评价方法的智能性与自主性;评价内容的全面性与针对性;评价标准的客观性与政策性。把握网络思想政治教育的特性为有效开展网络思想政治教育评价、促进网络思想政治教育发展奠定基础。

关键词：网络思想政治教育评价特性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

抑瘤基因NGX6启动子的克隆与功能鉴定

生物化学与生物物理进展 2010年第10期37卷 1082-1089页

作者：刘敏姬王晓艳沈守荣李楠张德才彭娅郭勤李桂源中南大学湘雅三医院消化内科长沙410013 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078

NGX6是一个结直肠癌候选抑瘤基因,其转录调控机制不明.采用生物信息学技术预测其启动子区,并构建NGX6启动子荧光素酶报告基因重组体pGL3/Enhancer/1126.荧光素酶活性检测结果表明该区域具有强启动子活性.应用PromoterInspector program,... 详细信息

NGX6是一个结直肠癌候选抑瘤基因,其转录调控机制不明.采用生物信息学技术预测其启动子区,并构建NGX6启动子荧光素酶报告基因重组体pGL3/Enhancer/1126.荧光素酶活性检测结果表明该区域具有强启动子活性.应用PromoterInspector program,FistEF,CpGplot和MatInspector Professional软件分析发现,NGX6基因转录调控区为一个不含TATA盒,而含有CAAT盒的GC富集区.凝胶迁移阻滞实验确定NGX6基因启动子区域具有Sp1特异性结合位点,Sp1特异性阻断剂光神霉素(mithramycin A)能明显抑制NGX6启动子的活性和NGX6基因的表达;封闭内源性Sp1能下调NGX6基因mRNA表达水平.

关键词： NGX6 转录调控启动子 Spl

高校成人教育学生学习动机支撑与后续激发策略

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

继续教育研究 2012年第12期 36-38页

作者：刘敏姬仲恺农业工程学院继续教育学院广东广州510225

获得学历、完善自我、社交需求及外界影响构成成人教育学生学习动机。由于文凭含金量低、自身学习自控力下降及成教质量下降又影响他们的学习动机,造成学习动力不足的问题较为突出。通过明确目标、培养兴趣、加强师生沟通、完善监督管... 详细信息

获得学历、完善自我、社交需求及外界影响构成成人教育学生学习动机。由于文凭含金量低、自身学习自控力下降及成教质量下降又影响他们的学习动机,造成学习动力不足的问题较为突出。通过明确目标、培养兴趣、加强师生沟通、完善监督管理、调整学习动机水平、营造良好学习环境、加强心理疏导以进一步激发学生的学习动机。

关键词：成人教育动机心理

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

从制度建设的角度思考高校行政管理效率提高

中山大学学报论丛 2007年第7期27卷 127-130页

作者：刘敏姬仲恺农业技术学院广东广州510225

当前高校行政管理效率较低,存在机构繁杂,层级过多,管理的方式方法不尽科学;服务意识不强,民主气氛不够,官本位意识严重;管理的规章制度陈旧落后不完善等问题。针对高校行政管理效率低下的问题,分析了制度建设在提高高校行政管理效率中... 详细信息

当前高校行政管理效率较低,存在机构繁杂,层级过多,管理的方式方法不尽科学;服务意识不强,民主气氛不够,官本位意识严重;管理的规章制度陈旧落后不完善等问题。针对高校行政管理效率低下的问题,分析了制度建设在提高高校行政管理效率中的意义,结合高校的实际,从制度建设的角度提出了提高高校行政管理效率的若干对策。

关键词：高校行政管理制度建设效率改革

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

结直肠癌诊断技术述评

医学与哲学（B） 2009年第10期30卷 53-55页

作者：刘敏姬沈守荣中南大学湘雅三医院消化内科湖南长沙410013

结直肠癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一。目前结直肠癌诊断技术的研究涵盖了分子生物学、肿瘤学、影像学等多个学科,得到不断发展。在以往的诊断技术的基础上,结合新的理论和方法,采用正确的诊断策略及早发现结直肠癌对控制其发病率和... 详细信息

结直肠癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一。目前结直肠癌诊断技术的研究涵盖了分子生物学、肿瘤学、影像学等多个学科,得到不断发展。在以往的诊断技术的基础上,结合新的理论和方法,采用正确的诊断策略及早发现结直肠癌对控制其发病率和病死率起着重要作用。

关键词：结直肠癌诊断肿瘤

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

结直肠癌组织中Egr-1的表达及意义

数理医药学杂志 2016年第1期29卷 1-3页

作者：刘敏姬沈守荣湖南省株洲市中心医院消化内科株洲412007 中南大学湘雅三医院消化内科非可控炎症与肿瘤湖南省重点实验室

目的:研究Egr-1(early growth responsive gene-1,Egr-1)在结直肠癌组织、癌旁粘膜以及癌旁正常粘膜中的表达差异,分析Egr-1核蛋白表达与结肠癌临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测结直肠癌组织、癌旁粘膜以及癌旁正常... 详细信息

目的:研究Egr-1(early growth responsive gene-1,Egr-1)在结直肠癌组织、癌旁粘膜以及癌旁正常粘膜中的表达差异,分析Egr-1核蛋白表达与结肠癌临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测结直肠癌组织、癌旁粘膜以及癌旁正常粘膜中Egr-1的表达。结果:Egr-1表达在结直肠癌组织中显著低于癌旁组织及癌旁正常组织(P<0.05);结直肠癌组织中Egr-1表达水平与远处转移密切相关(P<0.01)。结论:Egr-1基因在结直肠癌中表达下调,并在结直肠癌的发生和转移中起着一定的作用。

关键词： Egr-1 结直肠