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Notch信号通路在人羊膜间充质干细胞移植治疗宫腔粘连中的作用

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第三军医大学学报 2021年第14期43卷 1346-1357页

作者：于结张文文黄佳月勾亚婷毛艳华张应凤孙聪聪吴本媛李长江刘拟舟王婷婷黄吉仁王佳重庆医科大学附属大学城医院妇产科重庆401331

目的探讨Notch信号通路在人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells, hAMSCs)移植治疗宫腔粘连(intrauterine adhesions, IUA)过程中的作用。方法体外实验:将细胞分为3组,即hAMSCs空白对照组、AdRFP腺病毒转染hAMSCs组、AdR-dnNotch1腺病毒转染hAMSCs组;RT-PCR检测各组中Notch1 mRNA水平,Western blot检测NICD的蛋白表达改变。体内实验:40只Sprague-Dawley (SD)雌性大鼠分为4组,即假手术组、IUA组、hAMSCs移植治疗组、腺病毒(AdR-dnNotch1)转染hAMSCs后移植治疗组;取各组子宫组织,HE染色检测子宫内膜腺体数目和子宫内膜厚度变化,Masson染色检测纤维化程度变化,免疫组化检测Vimentin、Notch1、NICD、Hes1蛋白表达变化,Western blot检测各组子宫组织中NICD的蛋白表达量,RT-PCR检测各组中Hes1 mRNA水平。通过雌雄合笼评估各组SD大鼠生育力的变化。结果体外实验:Notch1显性负性突变腺病毒(AdR-dnNotch1)可成功抑制Notch信号通路。体内实验:HE、Masson染色结果显示,与IUA组比较,hAMSCs移植组可使腺体数目增多,子宫内膜厚度变薄,纤维化面积比减少(P<0.05),而与IUA组比较,AdR-dnNotch1转染hAMSCs组变化不明显。免疫组化结果显示,与假手术组比较,IUA组中Vimentin表达升高,Notch1、NICD、Hes1表达降低(P<0.05)。与IUA组比较,hAMSCs移植组中Vimentin表达下降,Notch1、NICD、Hes1表达增加(P<0.05),AdR-dnNotch1腺病毒转染组Vimentin、Notch1、NICD、Hes1蛋白表达变化差异无统计学意义;Western blot、RT-PCR结果显示,Notch信号通路在hAMSCs移植治疗组中处于激活状态;雌雄合笼结果显示,与IUA组比较,hAMSCs移植组胚胎数量明显增加(P<0.05),而AdR-dnNotch1转染hAMSCs移植组胚胎数量无明显增加。结论 Notch信号通路参与调控hAMSCs生物学功能,抑制Notch信号通路后,hAMSCs移植治疗宫腔粘连的作用降低。

关键词：宫腔粘连 Notch信号通路人羊膜间充质干细胞生育力

下调NF-κB信号通路促进人羊膜间充质干细胞上皮化

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陆军军医大学学报 2023年第16期45卷 1712-1721页

作者：刘拟舟毛艳华张文文张应凤王佳李长江陈秋宏吴莎莎王婷婷黄玺玥谢乐乐孙聪聪重庆医科大学附属大学城医院妇产科重庆401331

目的探讨NF-κB信号通路在诱导人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)上皮化的过程中发挥的作用。方法分离和培养hAMSCs,将hAMSCs分为对照组和诱导组(n=3),采用RT-qPCR检测上皮化标志物(CK-7、CK-19、E-cadherin)、间质标志物(Vimentin)、NF-κB信号通路关键因子(IκBα、p65)和NF-κB信号通路靶基因cyclin D1的mRNA表达水平;采用免疫荧光检测CK-7、E-cadherin、Vimentin、IκBα、p65和p-p65的蛋白表达水平;为确认NF-κB信号通路在hAMSCs上皮化中的作用,将hAMSCs分为诱导组、抑制剂组、Ad-GFP组(空白腺病毒)、Ad-IκBα组(腺病毒过表达IκBα)、LV-GFP组(空白慢病毒)、LV-RELA-RNAi组(慢病毒沉默p65)(n=3)。RT-qPCR检测CK-7、CK-19、E-cadherin、Vimentin、IκBα和p65的mRNA表达水平,免疫荧光检测CK-7、E-cadherin、Vimentin和IκBα、p65、p-p65的蛋白表达水平。结果与对照组比较,诱导组中CK-7、CK-19、E-cadherin的mRNA表达升高(P<0.01),CK-7、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),Vimentin的mRNA表达降低(P<0.01),蛋白表达降低(P<0.05),IκBα、p65、cyclin D1的mRNA表达降低(P<0.001),IκBα、p65、p-p65蛋白表达降低(P<0.05);抑制剂组、Ad-IκBα组、LV-RELA-RNAi组中CK-7、CK19、E-cadherin的mRNA表达较诱导组明显升高(P<0.01),CK-7、E-cadherin蛋白表达较诱导组升高(P<0.05),Vimentin的mRNA表达明显下降(P<0.01),蛋白表达降低(P<0.05)。结论NF-κB信号通路参与hAMSCs上皮化的调控,下调NF-κB信号通路能有效促进hAMSCs上皮化。

关键词： NF-κB信号通路人羊膜间充质干细胞宫腔粘连上皮化

LncRNA H19促进子宫内膜蜕膜化的作用研究

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陆军军医大学学报 2023年第16期45卷 1722-1730页

作者：王婷婷黄靖麟毛艳华张应凤孙聪聪王佳李长江刘拟舟辜鸿黄玺玥陈秋宏吴莎莎谢乐乐张文文重庆医科大学附属大学城医院妇产科重庆401331

目的探究LncRNA H19对子宫内膜蜕膜化的作用。方法采用RT-qPCR检测自然流产和人工流产蜕膜组织中的LncRNA H19表达情况;检测非妊娠子宫内膜和不同孕周蜕膜组织中LncRNA H19的表达;使用MPA和8-Br-cAMP诱导剂诱导子宫内膜间质细胞(transfo... 详细信息

目的探究LncRNA H19对子宫内膜蜕膜化的作用。方法采用RT-qPCR检测自然流产和人工流产蜕膜组织中的LncRNA H19表达情况;检测非妊娠子宫内膜和不同孕周蜕膜组织中LncRNA H19的表达;使用MPA和8-Br-cAMP诱导剂诱导子宫内膜间质细胞(transformed human endometrial stromal cells,THESCs)使其蜕膜化,RT-qPCR检测蜕膜化标志物催乳素(prolactin,PRL)和胰岛素样生长因子结合蛋白1(insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1)的表达;检测蜕膜化后LncRNA H19和FOXO1的表达变化;使用慢病毒分别过表达和干扰THESCs中的LncRNA H19,CCK-8检测THESCs的增殖情况。慢病毒转染成功后再诱导蜕膜化,RT-qPCR检测空白对照组、LV-GFP诱导组、LV-H19-RNAi诱导组和LV-H19诱导组的PRL、IGFBP-1和FOXO1的表达。结果自然流产组LncRNA H19表达低于人工流产组(P<0.01);LncRNA H19在孕早期人工流产蜕膜组织第7周达到高峰(P<0.01);THESCs蜕膜化后,PRL、IGFBP-1、LncRNA H19和FOXO1的mRNA表达较对照组增高(P<0.05,P<0.01)。CCK-8结果显示干扰LncRNA H19后THESCs的增殖被抑制(P<0.01),而过表达LncRNA H19后THESCs的增殖被促进(P<0.01)。分别干扰和过表达THESCs的LncRNA H19后再进行蜕膜化诱导,与空白对照组比较,LV-GFP诱导组的PRL(P<0.05)、IGFBP-1(P<0.01)和FOXO1(P<0.01)的mRNA表达升高。与LV-GFP诱导组比较,LV-H19诱导组PRL(P<0.05)和IGFBP-1(P<0.01)的mRNA表达升高,而LV-H19-RNAi诱导组的PRL(P<0.05)、IGFBP-1(P<0.01)和FOXO1(P<0.01)的mRNA表达降低。结论LncRNA H19促进子宫内膜间质细胞增殖和蜕膜化。

关键词： LncRNA H19 FOXO1 蜕膜化自然流产

“鲜活”起来“有效”起来 “真实”起来“丰盈”起来

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小学科学 2025年第2期 50-52页

作者：胡云舟丹阳市界牌中心小学江苏

随着《义务教育科学课程标准(2022年版)》颁布,小学科学教育也迎来了新的发展契机。“课标”要求“面向全体学生,立足素养发展”,在教学中以学生为主体,通过发现问题、探究实践的过程,为学生核心素养的发展提供坚实的基础。为了更好地... 详细信息

随着《义务教育科学课程标准(2022年版)》颁布,小学科学教育也迎来了新的发展契机。“课标”要求“面向全体学生,立足素养发展”,在教学中以学生为主体,通过发现问题、探究实践的过程,为学生核心素养的发展提供坚实的基础。为了更好地实现新时期小学科学教育目标,要让科学教育鲜活起来、有效起来、真实起来、丰盈起来,促进学生学习力、创造力、生活力的发展。

关键词：小学科学核心素养实践探究

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《撬重物的窍门》课的追问教学

小学科学 2025年第3期 79-81页

作者：黄平胡云舟丹阳市界牌中心小学江苏

小学科学课程是以促进学生核心素养发展为宗旨的基础课程。《义务教育科学课程标准(2022年版)》明确将科学思维作为四大核心素养之一,而科学思维是科学教育的核心。在课堂教学中,笔者通过对《撬重物的窍门》课的追问教学,深挖思维内涵... 详细信息

小学科学课程是以促进学生核心素养发展为宗旨的基础课程。《义务教育科学课程标准(2022年版)》明确将科学思维作为四大核心素养之一,而科学思维是科学教育的核心。在课堂教学中,笔者通过对《撬重物的窍门》课的追问教学,深挖思维内涵和影响因素,让学生亲历探究实践,促使其科学思维形成,促进学生科学素养发展。

关键词：小学科学追问科学思维

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不同胚层来源成体干细胞修复周围神经损伤

中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4102-4110页

作者：郑家晨杨恩同朱弈舟刘芳海军军医大学基础医学院上海市200433 海军军医大学人体解剖学教研室上海市200433

背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一。中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能。而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研... 详细信息

背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一。中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能。而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研究人员的关注。目的:对来自外胚层和中胚层的多功能成体干细胞在周围神经损伤修复与再生中的作用及机制进行简要综述,探究不同来源成体干细胞的研究进展与应用前景,并结合临床研究,探讨成体干细胞疗法潜在的应用价值以及亟待解决的问题。方法:第一作者于2024年2月应用计算机在PubMed和SinoMed数据库检索2001年12月至2024年2月相关文献,以“ectodermal stem cells,mesenchymal stem cells,peripheral nerve injury,repair,regeneration”为英文检索词,以“外胚层干细胞、间充质干细胞、周围神经损伤、修复、再生”为中文检索词,最终纳入69篇文献进行分析论述。结果与结论:①外胚层来源成体干细胞具有优异的分化和再生潜能,尤其是毛囊神经嵴干细胞、嗅干细胞、牙外胚层干细胞等,具有神经源性,可在体外表达神经特异性标志物,但目前缺少临床试验研究。②中胚层来源成体干细胞种类多、易获得及纯化,其中骨髓间充质干细胞和脐带间充质干细胞在周围神经损伤修复的应用疗效及安全性方面有相关临床试验支持,能改善感觉及运动神经传导,且在随访中未出现并发症和明显不良反应。骨髓间充质干细胞的获取需行侵入性外科手术且要求患者与捐赠者骨髓配型吻合,应用受到一定限制;而脐带间充质干细胞虽无需侵入性获取,但分离较困难且表型不稳定。③内胚层来源成体干细胞常难以在体外生长,应用受限,目前应用于临床的可能性低。④综合来看,骨髓间充质干细胞仍为周围神经损伤干细胞治疗的首选细胞,适用于无外科手术禁忌且符合配型要求的情况,其次为脐带间充质干细胞,辅以分离方法的改进和表型稳定性的提高策略。⑤牙外胚层干细胞以及脂肪间充质干细胞具有较高应用潜能,有待进一步临床试验,其他外胚层、中胚层来源成体干细胞各以其优异特性在动物及细胞实验研究中具有显著优势。

关键词：成体干细胞周围神经损伤毛囊神经嵴干细胞嗅干细胞牙外胚层干细胞骨髓间充质干细胞脐带间充质干细胞羊水间充质干细胞皮肤干细胞肌肉间充质干细胞

激光结合螺旋藻增强FeSO4诱导鼠伤寒沙门氏菌和单核细胞增生李斯特菌铁死亡的发生机制

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食品科学 2025年第2期46卷 8-19页

作者：孙晋跃潘佳能陈奕颖刘人诚周文文浙江大学生物系统工程与食品科学学院浙江杭州310058

为探究激光(laser,L)结合螺旋藻(Spirulina platensis,SP)增强FeSO4(Fe)诱导鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella enterica serovar Typhimurium,ST)和单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM)铁死亡发生的机制,研究不同处理后菌体细胞脂质过氧化、活性氧、谷胱甘肽变化,形态特征、细胞膜损伤和关键基因的表达等。结果表明,经L结合SP处理后FeSO4的杀菌效果显著增强,且4 mmol/L Fe+SP+L处理后ST和LM的菌数均降低至<1.4(lg(CFU/mL))。此外,Fe+SP+L处理使得微生物细胞的脂质过氧化水平和活性氧升高,谷胱甘肽的比例降低,菌体细胞膜完整性受到破坏,细胞膜的通透性增加,膜电位降低,进而导致菌体的核酸和蛋白泄漏增加,最终导致菌体死亡。此外,抑制生物被膜实验和生物被膜杀菌实验表明4 mmol/L Fe+SP+L处理对2种菌生物被膜的形成具有很好的控制作用。最后,4 mmol/L Fe+SP+L处理可使得生菜上ST和LM的数量分别显著降低至4.63(lg(CFU/g))和4.60(lg(CFU/g))。综上,Fe+SP+L处理可以显著降低游离状态和生物膜状态下ST和LM的数量,具有较好的控制生菜等食品表面食源性致病菌的潜力。

关键词：激光螺旋藻铁死亡脂质过氧化生物被膜

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铜银纳米合金团簇结构转变的原子模拟

原子与分子物理学报 2025年第6期42卷 101-112页

作者：李博宇刘贯惟张林东北大学材料科学与工程学院沈阳110819 东北大学材料各向异性与织构教育部重点实验室沈阳110819

采用基于嵌入原子方法势的分子动力学方法对熔融Cu_(n)Ag_(53-n)(n=0~53)和Cu_(n)Ag_(54-n)(n=0~54)合金团簇的降温凝结过程进行模拟.通过结构相图、自由能、原子化能、形状因子、对分布函数、熵和直观可视化的原子堆积结构等多种计算... 详细信息

采用基于嵌入原子方法势的分子动力学方法对熔融Cu_(n)Ag_(53-n)(n=0~53)和Cu_(n)Ag_(54-n)(n=0~54)合金团簇的降温凝结过程进行模拟.通过结构相图、自由能、原子化能、形状因子、对分布函数、熵和直观可视化的原子堆积结构等多种计算分析手段,在原子尺度上探究温度、组分和初始构型等对小尺寸Cu-Ag合金团簇在降温凝结中的结构转变以及热力学量的影响.模拟结果表明,在室温下含有少量Cu原子的二元合金团簇可以形成的核壳式二十面体几何结构,同时Cu原子取代Ag原子也有助于合金团簇的稳定.组分的改变和温度的降低使堆积结构由无序变为有序,同时伴随着原子势能、形状因子、熵的振荡下降,低温阶段熵值下降明显.

关键词：纳米合金降温凝结分子动力学结构转变

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基于认知诊断的教学设计——流体模型中用动量定理求解作用力问题

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中学物理 2025年第1期 63-65页

作者：刘堂锦杭州市余杭第一中学

学生在处理用动量定理求解流体的作用力问题时会出现的错误,首先是无法正确选取研究对象;其次是在计算Δt时间内参与作用的流体质量时遇到困难,无法顺利建模求解;最后是在运用动量定理列式求解时不够规范,从而出错.为了突破这些难点和... 详细信息

学生在处理用动量定理求解流体的作用力问题时会出现的错误,首先是无法正确选取研究对象;其次是在计算Δt时间内参与作用的流体质量时遇到困难,无法顺利建模求解;最后是在运用动量定理列式求解时不够规范,从而出错.为了突破这些难点和易错点,需要对学生的错误进行诊断并有针对性地进行教学设计.

关键词：流体模型作用力认知诊断教学设计