Notch信号通路在人羊膜间充质干细胞移植治疗宫腔粘连中的作用

作     者：于结 张文文 黄佳月 勾亚婷 毛艳华 张应凤 孙聪聪 吴本媛 李长江 刘拟舟 王婷婷 黄吉仁 王佳 YU Jie;ZHANG Wenwen;HUANG Jiayue;GOU Yating;MAO Yanhua;ZHANG Yingfeng;SUN Congcong;WU Benyuan;LI Changjiang;LIU Nizhou;WANG Tingting;HUANG Jiren;WANG Jia

作者机构：重庆医科大学附属大学城医院妇产科重庆401331 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2021年第43卷第14期

页      面：1346-1357页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0402[教育学-心理学(可授教育学、理学学位）] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 071007[理学-遗传学] 10[医学] 

基　　金：重庆市渝中区基础研究与前沿探索项目(20190122) 重庆市研究生科研创新项目(CYS19195)。 

主　　题：宫腔粘连 Notch信号通路 人羊膜间充质干细胞 生育力 

摘      要：目的探讨Notch信号通路在人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells, hAMSCs)移植治疗宫腔粘连(intrauterine adhesions, IUA)过程中的作用。方法体外实验:将细胞分为3组,即hAMSCs空白对照组、AdRFP腺病毒转染hAMSCs组、AdR-dnNotch1腺病毒转染hAMSCs组;RT-PCR检测各组中Notch1 mRNA水平,Western blot检测NICD的蛋白表达改变。体内实验:40只Sprague-Dawley (SD)雌性大鼠分为4组,即假手术组、IUA组、hAMSCs移植治疗组、腺病毒(AdR-dnNotch1)转染hAMSCs后移植治疗组;取各组子宫组织,HE染色检测子宫内膜腺体数目和子宫内膜厚度变化,Masson染色检测纤维化程度变化,免疫组化检测Vimentin、Notch1、NICD、Hes1蛋白表达变化,Western blot检测各组子宫组织中NICD的蛋白表达量,RT-PCR检测各组中Hes1 mRNA水平。通过雌雄合笼评估各组SD大鼠生育力的变化。结果体外实验:Notch1显性负性突变腺病毒(AdR-dnNotch1)可成功抑制Notch信号通路。体内实验:HE、Masson染色结果显示,与IUA组比较,hAMSCs移植组可使腺体数目增多,子宫内膜厚度变薄,纤维化面积比减少(P0.05),而与IUA组比较,AdR-dnNotch1转染hAMSCs组变化不明显。免疫组化结果显示,与假手术组比较,IUA组中Vimentin表达升高,Notch1、NICD、Hes1表达降低(P0.05)。与IUA组比较,hAMSCs移植组中Vimentin表达下降,Notch1、NICD、Hes1表达增加(P0.05),AdR-dnNotch1腺病毒转染组Vimentin、Notch1、NICD、Hes1蛋白表达变化差异无统计学意义;Western blot、RT-PCR结果显示,Notch信号通路在hAMSCs移植治疗组中处于激活状态;雌雄合笼结果显示,与IUA组比较,hAMSCs移植组胚胎数量明显增加(P0.05),而AdR-dnNotch1转染hAMSCs移植组胚胎数量无明显增加。结论 Notch信号通路参与调控hAMSCs生物学功能,抑制Notch信号通路后,hAMSCs移植治疗宫腔粘连的作用降低。