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抗丁香酚单克隆抗体的研制及胶体金试纸条检测方法的建立

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核农学报 2025年第2期39卷 339-350页

作者：董晓涵翟璐黄雅丽杨加成陈青舟廖杰金仁耀浙江工商大学海洋食品研究院浙江杭州310012 杭州博岳生物技术有限公司浙江杭州310018 杭州医学院公共卫生学院浙江杭州310013 杭州南开日新生物技术有限公司浙江杭州310000 浙江华才检测技术有限公司浙江绍兴311800

为制备高特异性和高灵敏度的抗丁香酚(Eugenol)单克隆抗体,建立检测丁香酚的胶体金免疫层析法,本研究采用亲核取代法合成丁香酚半抗原(Eugenol-COOH)并进行质谱(HRMS)鉴定;采用碳二亚胺法制备丁香酚免疫抗原(Eugenol-BSA)和包被抗原(Eug... 详细信息

为制备高特异性和高灵敏度的抗丁香酚(Eugenol)单克隆抗体,建立检测丁香酚的胶体金免疫层析法,本研究采用亲核取代法合成丁香酚半抗原(Eugenol-COOH)并进行质谱(HRMS)鉴定;采用碳二亚胺法制备丁香酚免疫抗原(Eugenol-BSA)和包被抗原(Eugenol-OVA),进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和紫外扫描鉴定;利用免疫抗原Eugenol-BSA免疫小鼠,经细胞融合、筛选和克隆,最终得到1株能稳定分泌抗丁香酚单克隆抗体的杂交瘤细胞株(3D9),并准备腹水,利用间接竞争ELISA(icELISA)方法测定腹水效价;对获得的单克隆抗体进行鉴定,经条件优化建立胶体金免疫层析试纸条检测方法,对试纸条的灵敏度和稳定性进行评价。结果表明,Eugenol-BSA偶联比约为16∶1,Eugenol-OVA偶联比约为10∶1,完全抗原偶联成功;3D9细胞株的抗体类型及亚类均为免疫球蛋白G(IgG1),轻链为κ链;单克隆抗体效价达1×10^(-6);丁香酚浓度与抑制率之间的线性回归方程为y=9.671lnx+10.539(R^(2)=0.998),半数抑制浓度(IC_(50))为59.2 ng·mL^(-1),表明制备的抗丁香酚单克隆抗体具有较高的检测灵敏度。所制备的胶体金免疫试纸条优化参数为:胶体金标记最适pH值9、0.2 mol·L^(-1)K2CO3添加量12μL、抗体最佳标记量7μg·mL^(-1)、胶体金试纸条的T线消失浓度1.8μg·mL^(-1),该参数下的裸眼检出限0.3μg·mL^(-1)。本研究可为丁香酚的现场检测提供有效方法。

关键词：丁香酚单克隆抗体人工抗原胶体金试纸条

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MEC/LEC-RI法对不同产地酒制多花黄精中糖类成分的定性与定量

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中国食物与营养 2025年

作者：罗雨欣刘嘉钰李思梦陈光宇谢梦洲湖南中医药大学/湖南中医药大学药食同源功能性食品工程技术研究中心/湖南中医药大学中医心肺病证辨证与药膳食疗重点研究室/湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室

目的：建立不同产地酒制多花黄精中糖类成分的定性与定量方法。方法：以11个产地的酒制多花黄精为研究样品，采用分子排阻/配体交换色谱-示差折光检测法（MEC/LEC-RI）分析酒制多花黄精糖类成分分子量，构建MEC-RI指纹图谱，测定D-葡萄... 详细信息

目的：建立不同产地酒制多花黄精中糖类成分的定性与定量方法。方法：以11个产地的酒制多花黄精为研究样品，采用分子排阻/配体交换色谱-示差折光检测法（MEC/LEC-RI）分析酒制多花黄精糖类成分分子量，构建MEC-RI指纹图谱，测定D-葡萄糖、D-果糖含量，采用硫酸-蒽酮-紫外光谱法测定酒制多花黄精中黄精多糖含量，对糖类成分定性与定量结果进行关联性分析。结果：酒制多花黄精水浸液中主要含有分子量低于1 000 Da的低聚多糖，从MEC-RI指纹图谱中指认了5个共有峰，分子量分别约为220k、160k、100k、14.5k、0.95k Da,11个产地样品相似度均大于0.9。酒制多花黄精中D-葡萄糖、D-果糖含量在58.771～116.684、143.087～162.054 mg/g范围之间，黄精多糖含量在42.769～76.065 mg范围之间。结论：建立了不同产地酒制多花黄精中糖类成分的定性与定量方法，比较了不同产地酒制多花黄精中糖类成分的差异，可为多花黄精质量标准研究、资源分布及产品开发提供科学依据。

关键词：多花黄精配体交换色谱分子排阻色谱示差折光多糖

综合微阵列数据分析与动脉粥样硬化程序性细胞死亡相关的lncRNA-miRNA-mRNA竞争内源性网络

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中国药理学通报 2025年第1期41卷 156-163页

作者：杨琼宋月月贾雨涵盖秩舶杨雯晴张丹山东中医药大学中医药创新研究院山东济南250355

目的基于生物信息学挖掘与程序性细胞死亡相关的ceRNA网络在AS病理生理过程中的作用,以期为AS的诊断和治疗提供新的靶点。方法从GEO数据库筛选GSE97210和GSE28858数据集,筛选差异表达的lncRNA、mRNA和miRNA,而后基于ceRNA理论在Cytoscap... 详细信息

目的基于生物信息学挖掘与程序性细胞死亡相关的ceRNA网络在AS病理生理过程中的作用,以期为AS的诊断和治疗提供新的靶点。方法从GEO数据库筛选GSE97210和GSE28858数据集,筛选差异表达的lncRNA、mRNA和miRNA,而后基于ceRNA理论在Cytoscape3.7.2软件中构建lncRNA-miRNA-mRNA调控网络。其次对ceRNA网络中的mRNA进行GO和KEGG富集分析。再将ceRNA网络中的mRNA与自噬、焦亡和铁死亡相关的基因取交集,构建与程序性细胞死亡相关的ceRNA网络。结果共获得1208个DElncRNA、4723个DEmRNA和139个DEmiRNA。构建了一个由64个lncRNA、8个miRNA和167个mRNA组成的ceRNA网络。ceRNA网络中的mRNA主要在转录和迁移的正调控以及蛋白结合等生物功能和PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路等信号通路中显著富集。最终,构建了7种lncRNA介导的ceRNA对焦亡的调控途径和23种lncRNA介导的对铁死亡与自噬的调控途径。结论该研究构建了与程序性细胞死亡相关的ceRNA网络,有助于我们了解程序性细胞死亡导致AS的作用机制。

关键词：动脉粥样硬化 GEO数据库铁死亡自噬焦亡 CeRNA网络

HILIC-MS-MS测定不同产地酒制多花黄精中游离氨基酸成分含量

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中国食物与营养 2025年

作者：刘嘉钰李思梦罗雨欣陈光宇谢梦洲湖南中医药大学/湖南中医药大学药食同源功能性食品工程技术研究中心/湖南中医药大学中医心肺病证辨证与药膳食疗重点研究室/湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室

目的：建立不同产地酒制多花黄精中12种游离氨基酸成分的含量测定方法。方法：采用亲水色谱-三重四极杆质谱法（HILIC-MS/MS）测定新化（野生）、南平、郴州、邵阳、湘西、凯里、新化（人工）、岳阳、眉山、玉溪、铜仁等11个产地酒制多... 详细信息

目的：建立不同产地酒制多花黄精中12种游离氨基酸成分的含量测定方法。方法：采用亲水色谱-三重四极杆质谱法（HILIC-MS/MS）测定新化（野生）、南平、郴州、邵阳、湘西、凯里、新化（人工）、岳阳、眉山、玉溪、铜仁等11个产地酒制多花黄精中L-丙氨酸、L-精氨酸、L-谷氨酸、L-甘氨酸、L-组氨酸、L-赖氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-酪氨酸、L-缬氨酸等12种游离成分含量，采用多组独立样本比较的秩和检验评价不同产地酒制多花黄精12种成分含量高低，主成分（PCA）分析差异性。结果：所建的含量测定方法良好，12种游离氨基酸含量之和在0.6～4.8 mg/g之间，L-苏氨酸、L-精氨酸含量相对较高，11个产酒制多花黄精中12种成分由高到低排序为：新野>邵阳>玉溪>新林>铜仁>南平>湘西>凯里>眉山>郴州>岳阳，L-丙氨酸和L-组氨酸为对PCA差异性贡献度最大的两个成分。结论：建立了酒制多花黄精中12种游离氨基酸成分的含量测定方法，比较了不同产地酒制多花黄精中氨基酸成分的差异，可为多花黄精质量标准研究、资源分布及产品开发提供实验依据。

关键词：多花黄精亲水作用色谱-串联质谱法氨基酸秩和检验

超声引导下针刀松解黄韧带对兔退变腰椎间盘整合素α5、β1表达的影响

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中国组织工程研究 2025年第2期29卷 331-338页

作者：陈灿赵宇胡斌涵杜梦凡刘俊宁牛素生张燕福建中医药大学中医学院福建省福州市350122 福建中医药大学中医骨伤及运动康复教育部重点实验室福建省福州市350122

背景:针刀松解黄韧带可有效改善腰椎退行性患者的症状,超声引导可增加针刀松解的精准性,但针刀松解黄韧带后对退变椎间盘的具体影响及可能的机制尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解黄韧带对兔腰椎间盘退变的作用。方法:取24只新西兰... 详细信息

背景:针刀松解黄韧带可有效改善腰椎退行性患者的症状,超声引导可增加针刀松解的精准性,但针刀松解黄韧带后对退变椎间盘的具体影响及可能的机制尚待明确。目的:探讨超声引导下针刀松解黄韧带对兔腰椎间盘退变的作用。方法:取24只新西兰兔,采用随机数字表法分为对照组(n=6)与造模组(n=18)。造模组采用横断L5/6、L6/7节段棘上、棘间韧带并保持站立姿势对腰椎施加轴向载荷的方式建立兔腰椎间盘退变模型,造模成功后再随机分为模型组、超声针刀组、假针刀组,每组6只,超声针刀组在超声引导下使用针刀松解L7/S1右侧黄韧带,假针刀组针刀入路同超声针刀组,但不松解黄韧带,1次/周,共4次。针刀干预后30 d,利用MRI观察L7/S1椎间盘髓核信号强度变化,苏木精-伊红染色观察L7/S1椎间盘形态变化,免疫组化染色检测L7/S1椎间盘髓核内Ⅰ,Ⅱ型胶原表达,RT-PCR、Western Blot检测L7/S1椎间盘中整合素α5、β1、p38、核因子κB的表达。结果与结论:①MRI成像显示,模型组兔椎间盘髓核呈灰-黑色,髓核灰度值明显低于对照组(P<0.01);超声针刀组兔椎间盘髓核亮度较模型组升高,髓核灰度值高于模型组(P<0.01);②苏木精-伊红染色显示,模型组髓核形状不规则,髓核细胞数量减少,细胞外基质被压缩,纤维环破裂,终板结构与边界不清,软骨细胞排列紊乱;与模型组相比,超声针刀组髓核细胞数量增多,纤维环破裂情况有改善,软骨终板细胞排列较为规则;③免疫组化染色显示,与对照组比较,模型组髓核内Ⅰ型胶原阳性表达增加(P<0.01),Ⅱ型胶原阳性表达减少(P<0.01);与模型组比较,超声针刀组髓核内Ⅰ型胶原阳性表达减少(P<0.01),Ⅱ型胶原阳性表达增加(P<0.01);④RT-PCR、Western Blot检测显示,与对照组比较,模型组兔椎间盘中整合素α5、整合素β1、p38、核因子κB的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.01);与模型组比较,超声针刀组兔椎间盘中整合素α5、整合素β1、p38、核因子κB的mRNA与蛋白表达均降低(P<0.01);⑤结果表明,超声引导下针刀松解黄韧带可改善兔腰椎间盘退变程度,该作用与通过调控整合素α5、β1表达、抑制p38和核因子κB表达有关。

关键词：腰椎间盘退变针刀黄韧带超声引导整合素

不同产地法半夏化学核苷类成分及其对寒饮蕴肺模型小鼠的作用研究

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世界中医药 2025年

作者：宋敏刁婷婷齐琪琪耿晓雪孙梦涵乔新荣毕晶晶陈琼朱乃亮信阳农林学院药学院

目的:比较河南、河北和甘肃3个产地法半夏7种核苷类成分的含量,并观察其对寒饮蕴肺模型小鼠的作用。方法:应用高效液相色谱法（HPLC）测定3个产地法半夏中7种核苷类成分的含量。以OVA、Al（OH）3和冷水浴刺激建立小鼠寒饮蕴肺模型并将... 详细信息

目的:比较河南、河北和甘肃3个产地法半夏7种核苷类成分的含量,并观察其对寒饮蕴肺模型小鼠的作用。方法:应用高效液相色谱法（HPLC）测定3个产地法半夏中7种核苷类成分的含量。以OVA、Al（OH）3和冷水浴刺激建立小鼠寒饮蕴肺模型并将不同产地的法半夏应用于寒饮蕴肺模型小鼠中,用酚红排泄量、氨水引咳评价化痰和镇咳作用,苏木精-伊红（HE）染色观察肺和气管组织病理变化,F4/80免疫组织化学法染色检测巨噬细胞浸润,酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测炎症介质肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素10（IL-10）水平。结果:不同产地法半夏核苷含量有较大差异,河南半夏的尿嘧啶和腺苷的含量高（P 河北组>甘肃组;咳嗽次数:河北组>甘肃组>河南组),支气管管腔病变明显减轻,气管组织增生和纤维化降低,肺和气管中巨噬细胞减少（P<0.05）,血清中TNF-α水平降低（P<0.05）,IL-10水平升高。结论:河南、河北和甘肃3个产地法半夏的核苷类成分含量有差别,3个产地法半夏均能减轻寒饮蕴肺模型小鼠中气道炎症反应水平和病理损伤,其中以河南产法半夏的祛痰镇咳效果最佳。

关键词：法半夏核苷寒饮蕴肺气道炎症反应产地差异祛痰镇咳肿瘤坏死因子α 白细胞介素10

MetaDTA：一款诊断试验准确性Meta分析在线应用程序

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中国全科医学 2025年第8期28卷 1023-1032页

作者：杨水华姚桂英田晨晏毅龙刘嘉艺王佳佳田金徽牛猛葛龙兰州大学公共卫生学院卫生政策与管理学系甘肃省循证医学重点实验室兰州大学循证社会科学研究中心山东省济南市妇幼保健院兰州大学第一临床医学院兰州大学基础医学院循证医学中心兰州大学第一医院放射科

MetaDTA是一款对诊断试验准确性研究进行Meta分析的在线、交互式应用程序，该应用程序调用R软件中lme4和shiny程序包实现统计分析并建立交互式用户界面。该应用程序无需用户了解任何有关统计和编程的知识，也无需安装任何专业软件，便... 详细信息

MetaDTA是一款对诊断试验准确性研究进行Meta分析的在线、交互式应用程序，该应用程序调用R软件中lme4和shiny程序包实现统计分析并建立交互式用户界面。该应用程序无需用户了解任何有关统计和编程的知识，也无需安装任何专业软件，便于无专业统计知识的用户使用。本文将重点介绍MetaDTA平台诊断试验准确性的量化、结果可视化、交互式功能等，结合实例向用户介绍该应用程序的具体操作方法，旨在帮助相关研究人员完成诊断准确性研究Meta分析、绘制汇总受试者工作特征（SROC）曲线、绘制纳入研究质量评价结果以及进行敏感性分析。

关键词： MetaDTA 诊断试验准确性研究 Meta分析双变量模型

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温敏水凝胶抑制VEGFA依赖的新生血管形成治疗动脉粥样硬化（英文）

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Science China Materials 2025年第1期 280-291页

作者：段诣林江涛岳江李媛媛廖静涵孙颖汪权段友容李朝军 State Key Laboratory of Systems Medicine for Cancer Shanghai Cancer Institute Renji Hospital School of Medicine Shanghai Jiao Tong University Department of Endocrinology and Metabolism Renji Hospital School of Medicine Shanghai Jiao Tong University Department of Ultrasound Shanghai General Hospital School of Medicine Shanghai Jiao Tong University

动脉粥样硬化仍然是全球发病率和死亡率的主要原因,斑块内新生血管形成显著促进了动脉粥样硬化的进展和不稳定性.血管内皮生长因子A (VEGFA)通过诱导内皮细胞增殖和迁移,刺激斑块中异常微血管的生长.色素上皮衍生因子(PEDF)能够高效抑制...

动脉粥样硬化仍然是全球发病率和死亡率的主要原因,斑块内新生血管形成显著促进了动脉粥样硬化的进展和不稳定性.血管内皮生长因子A (VEGFA)通过诱导内皮细胞增殖和迁移,刺激斑块中异常微血管的生长.色素上皮衍生因子(PEDF)能够高效抑制VEGFA依赖的新生血管形成.本研究介绍了一种由泊洛沙姆407(F127)和海藻酸钠(SA)制备的温敏水凝胶(PFSgel),将PEDF局部递送至动脉粥样硬化斑块周围. PFSgel在体温(37°C)下表现出优异的液固转变,随后在SA与生理环境中的Ca2+凝胶化后形成稳定的三维网络结构,实现控制释放的效果.流变学分析证实其相变温度为28.7°C,并具有显著的自愈特性.体外实验显示, PFSgel可通过调节CD31和MMP-2/MMP-9信号通路,抑制VEGFA诱导的内皮细胞增殖和迁移.体内降解测试验证了PFSgel的控制释放性能.在Apoe缺陷的动脉粥样硬化小鼠中,超声引导的PFSgel注射到腹主动脉周围,可逐步在原位释放包封的PEDF,有效减少了斑块负担、新生血管形成和腔狭窄.总之,这一原位注射的PFSgel凝胶通过CD31和MMP-2/MMP-9通路,有效抑制病理性新生血管形成,通过干预VEGFA依赖的新生血管形成来稳定动脉粥样硬化中的高风险斑块.

关键词：

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旴江医学文化的现代魅力

文化产业 2025年第1期 16-19页

作者：姚书涵胡伟菊杨静怡江西中医药大学马克思主义学院华润江中制药集团有限责任公司

江西地域性的中医药文化主要以旴江医学为典型代表,其传播的核心理念深受儒家“三不朽”思想——立德、立功、立言的影响,具有丰富的文化内涵和时代价值。在谱写中国式现代化的江西画卷中,旴江医学文化承载着优秀的核心理念,发扬其在人... 详细信息

江西地域性的中医药文化主要以旴江医学为典型代表,其传播的核心理念深受儒家“三不朽”思想——立德、立功、立言的影响,具有丰富的文化内涵和时代价值。在谱写中国式现代化的江西画卷中,旴江医学文化承载着优秀的核心理念,发扬其在人才培养、文化传承、服务保障上的优势,夯实了中医药文化的根基,让中华传统文化有了广阔深远的历史维度以及深厚的文化底蕴;促进了中医药教育事业更新发展,为更好发挥教育的社会功能开启了广阔空间;提升了中医药医疗服务质量与水平,拓宽了中医学的学术视野和思路;更好地将中医药文化的精神理念和价值转变成促进中医药事业和产业发展与化解新时代社会主要矛盾的内生驱动力,促进江西省中医药强省战略目标的实现。

关键词：社会主要矛盾中医药文化文化承载中国式现代化旴江医学中医药教育立德中医药事业