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基于PI3K/AKT/mTOR通路探讨白芍总苷对化学性肝损伤肝阴虚证大鼠的保护作用及机制

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北京中医药大学学报 2024年第3期47卷 341-351页

作者：李丽范晓旭华姞安扈觐玺冯颖童沈奕玮王祯王景霞北京中医药大学中医学院北京102488

目的基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路关键因子探讨白芍总苷对化学性肝损伤肝阴虚证大鼠的保护作用及机制。方法将40只雄性SD大鼠按照体质量随机区组分为空白组、模型组、一贯煎组、白芍... 详细信息

目的基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路关键因子探讨白芍总苷对化学性肝损伤肝阴虚证大鼠的保护作用及机制。方法将40只雄性SD大鼠按照体质量随机区组分为空白组、模型组、一贯煎组、白芍总苷组,每组10只。除空白组外,其余各组大鼠连续6周腹腔注射20%四氯化碳橄榄油溶液,并灌胃甲状腺片(30 mg/kg)以制备化学性肝损伤肝阴虚证病证结合大鼠模型。造模期间,空白组、模型组大鼠每天灌胃蒸馏水,一贯煎组及白芍总苷组大鼠分别灌胃一贯煎水煎液(635 mg/kg)及白芍总苷混悬液(50 mg/kg),连续6周。给药期间每2周检测大鼠体质量、肛温;给药结束后观察大鼠24 h摄食量和摄水量、舌面湿度;采用酶联免疫吸附测定法检测血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1Ra)含量,并计算cAMP/cGMP;采用比色法检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)含量;采用Masson染色法观察肝脏纤维化程度,并计算胶原面积百分比;采用实时荧光PCR法和蛋白质印迹法检测大鼠肝脏PI3K、AKT和mTOR mRNA及蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组大鼠第2、4、6周体质量降低,第2、4、6周肛温升高,24 h摄食量增加;cAMP升高、cGMP下降、cAMP/cGMP升高,IL-1、IL-6、TNF-α含量均升高,IL-10、IL-1Ra含量均降低,ALT、AST、γ-GT、ALP、TBIL、TBA水平均升高,肝脏胶原面积百分比增加,PI3K、AKT和mTOR mRNA及蛋白磷酸化表达升高(均P<0.05)。与模型组比较,白芍总苷组大鼠第2、4、6周肛温下降,24 h摄食量和饮水量减少,舌面湿度升高;一贯煎组和白芍总苷组大鼠cAMP降低、cGMP升高、cAMP/cGMP下降,IL-1、IL-6、TNF-α均下降,IL-10升高,肝脏胶原面积百分比降低;白芍总苷组大鼠ALT、AST、γ-GT、ALP、TBIL均下降,PI3K、AKT和mTOR mRNA及蛋白磷酸化表达降低(均P<0.05)。结论白芍总苷对化学性肝损伤肝阴虚证大鼠具有较好的保护作用,可能是通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路的激活,减少促炎细胞因子分泌,增加抗炎细胞因子释放,从而发挥白芍调节阴阳平衡的作用。

关键词：白芍总苷化学性肝损伤肝阴虚证炎症因子磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路大鼠

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糖尿病前期及其中医证候动物模型的构建策略

中草药 2024年第1期55卷 297-306页

作者：王景霞姜斯佳刘双巧高晶冯颖童张建军高学敏岳明明北京中医药大学北京100029 新疆医科大学中医学院新疆乌鲁木齐830011

糖尿病前期(prediabetes mellitus,Pre-DM)为正常糖代谢向糖尿病过渡的必经阶段,在该阶段进行有效干预和治疗是降低糖尿病发病率的关键。目前,Pre-DM发病机制尚不明确,治疗方式和手段缺乏有力依据。中医辨证保健是Pre-DM这一亚健康期的... 详细信息

糖尿病前期(prediabetes mellitus,Pre-DM)为正常糖代谢向糖尿病过渡的必经阶段,在该阶段进行有效干预和治疗是降低糖尿病发病率的关键。目前,Pre-DM发病机制尚不明确,治疗方式和手段缺乏有力依据。中医辨证保健是Pre-DM这一亚健康期的优势干预措施,中医证候模型有利于更好地评价中药复方保健产品,是其深入研究的基础和支撑。通过对Pre-DM的诊断标准、临床研究现状、中医病因病机和辨证分型及现有造模方法进行全面的梳理和总结,并在此基础上提出Pre-DM动物模型造模方法和评价策略,进一步探讨其中医证候模型的合理性,为阐释Pre-DM病理生理变化与中医证候间的关系,为中医有效预防和保健措施提供参考。

关键词：糖尿病前期辨证分型中医证候模型评价策略以方测证

社区团购市场乱象对农村经济发展的影响——基于乡村振兴视角

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科技和产业 2022年第9期22卷 189-193页

作者：黄雯珺陈佳明冯颖童戴慧深五邑大学经济管理学院广东江门529000

从社区团购的不正当竞争行为、市场垄断行为、社区团购的消费者权益保护问题、团长管理问题等4个方面入手,研究社区团购助力乡村振兴的同时,其自身的发展乱象给农村经济带来的种种挑战。探讨社区团购对农村价格体系、市场格局、农民就... 详细信息

从社区团购的不正当竞争行为、市场垄断行为、社区团购的消费者权益保护问题、团长管理问题等4个方面入手,研究社区团购助力乡村振兴的同时,其自身的发展乱象给农村经济带来的种种挑战。探讨社区团购对农村价格体系、市场格局、农民就业、增收、维权等方面的负面影响,并呼吁政府及相关企业重视相关风险和问题,及时采取措施,正确引导社区团购助力乡村振兴。

关键词：乡村振兴社区团购新零售

枳术郁李方对脾-肠气机升降失调便秘小鼠的通便机制研究

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世界中医药 2024年第15期19卷 2260-2264页

作者：贾岚刘佳琪扈觐玺冯颖童刘双巧姜斯佳冯广旭王景霞北京中医药大学北京100029

目的:基于气机升降理论研究枳术郁李方对脾-肠气机升降失调便秘小鼠的通便作用机制,为其临床应用提供实验依据。方法:将雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、枳术郁李方组,每组10只,阳性药组给予麻仁软胶囊混悬液0.1 g/kg、... 详细信息

目的:基于气机升降理论研究枳术郁李方对脾-肠气机升降失调便秘小鼠的通便作用机制,为其临床应用提供实验依据。方法:将雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、枳术郁李方组,每组10只,阳性药组给予麻仁软胶囊混悬液0.1 g/kg、枳术郁李方组给予枳术郁李方溶液0.483 g/kg,空白组与模型组给予同体积溶剂。连续给药14 d后,采用灌胃给予造模药物盐酸洛哌丁胺(剂量为4 mg/kg),建立小鼠脾-肠气机升降失调便秘模型。测定小肠墨汁推进率,首粒黑便时间,小鼠6 h内黑便粒数及重量,血清血管活性肠肽(VIP)、5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)、一氧化氮(NO)、胃动素(MTL)、胆囊收缩素(CCK)、酪酪肽(PYY)、降钙素基因相关肽(CGRP)的含量。结果:与模型组比较,枳术郁李方组小鼠小肠墨汁推进率明显升高(P<0.01),首便时间明显缩短(P<0.01),6 h内粪便粒数,重量及含水量明显增加(P<0.01),血清中VIP、NO、CCK、PYY水平明显降低(P<0.01)、SP、CGRP、MTL水平明显升高(P<0.01)。结论:枳术郁李方具有明显的缓解便秘的作用,其作用机制可能与调节脾-肠气机的升降失常,恢复胃肠神经递质和激素的动态平衡,调节气机升降,维持气机畅达相关。

关键词：枳术郁李方便秘气机升降胃肠激素神经递质活性肠肽胃动素小鼠

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基于临床新用的青钱柳中药药性探讨

世界中医药 2024年第12期19卷 1701-1707页

作者：刘佳琪扈觐玺张维刘双巧冯颖童王淳张建军高学敏王景霞北京中医药大学北京100029 北京澳特舒尔保健品开发有限公司北京102400

青钱柳为双子叶植物纲胡桃科青钱柳属速生乔木,主要分布于我国的南部亚热带的山区,是我国独有的珍贵树种,目前在我国已有大规模种植。青钱柳作为药物最早记载于1975年出版的《全国中草药汇编》,之后又陆续被《中国中药资源志要》《中华... 详细信息

青钱柳为双子叶植物纲胡桃科青钱柳属速生乔木,主要分布于我国的南部亚热带的山区,是我国独有的珍贵树种,目前在我国已有大规模种植。青钱柳作为药物最早记载于1975年出版的《全国中草药汇编》,之后又陆续被《中国中药资源志要》《中华本草》等中药专著以及4个地方药材标准收载。但是没有形成统一的药用部位、采收时间、性味归经、功能主治、用法用量的标准,功能主治与当前实际应用存在一定差异,没有紧跟临床进展不断总结并及时更新,尤其缺乏系统的“方-证-症”与之相对应,难以指导青钱柳临床辨证用药和合理用药。青钱柳叶作为别样茶已经有500年以上的悠久历史,于2013年被国家卫生健康委员会列入新资源食品目录。因而青钱柳是一味药食两用中药。以临床应用为依据、实验研究为参考,总结青钱柳现有的研究成果,运用中医药思维对其中药药性进行再探索,完善其中药药性,总结和归纳了功能主治,为统一和提升青钱柳药材标准,为其合理配伍配方和辨证用药提供参考与指导。基于临床新用深入探讨青钱柳中药药性对进一步挖掘其价值,提高使用的准确性、规范性及科学性,更好地为人民群众健康服务具有重要意义。

关键词：青钱柳中药药性临床应用药理作用功能主治性味归经用法用量辨证用药

基于网络药理学与分子对接探讨渴络欣胶囊“异病同治”治疗糖尿病微血管并发症的作用机制

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中医临床研究 2024年第26期16卷 1-8页

作者：范晓旭姜斯佳华姞安冯颖童沈奕玮王祯王景霞北京中医药大学北京100029

目的:基于网络药理学与分子对接探讨渴络欣胶囊“异病同治”治疗糖尿病微血管并发症的潜在机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和BATMAN-TCM数据库检索药物的化合物成分及靶点,利用GeneCards、NCBI、OMIM和DisGeNET... 详细信息

目的:基于网络药理学与分子对接探讨渴络欣胶囊“异病同治”治疗糖尿病微血管并发症的潜在机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)和BATMAN-TCM数据库检索药物的化合物成分及靶点,利用GeneCards、NCBI、OMIM和DisGeNET数据库筛选疾病靶点,绘制韦恩图并取药物-疾病交集靶点。采用String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,使用Cytoscape 3.8.0软件构建“药物-成分-靶点-疾病-通路”网络。采用R 4.1.2软件及微生信平台进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。利用AutoDock Vina和Pymol软件对关键活性成分和核心靶点进行分子对接和可视化处理。结果:共获得药物靶点350个、糖尿病微血管并发症靶点2259个,两者的交集靶点为186个;拓扑分析结果表明,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF)、白细胞介素-6、磷酸甘油醛脱氢酶等靶点度值较大;GO富集分析共获得2973个条目,KEGG信号通路有180条;分子对接结果显示,关键活性成分与核心靶点具有良好的结合能力。结论:渴络欣胶囊可通过多成分、多靶点、多通路治疗糖尿病微血管并发症,其机制可能与有效成分通过磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B、晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体、缺氧诱导因子-1和TNF等通路发挥抗炎、抗氧化应激、调控新生血管生成等“异病同治”作用有关。

关键词：渴络欣胶囊糖尿病微血管并发症异病同治网络药理学作用机制

基于Src-NR2-nNOS通路的芍药甘草汤对PC12细胞兴奋性损伤的神经保护作用（英文）

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Journal of Traditional Chinese Medical Sciences 2024年第3期 293-302页

作者：范晓旭马洪艳周恬恬付敏乔治园冯颖童王祯沈奕玮王景霞北京中医药大学中医学院新疆医科大学中医学院转化生物学中心麦吉尔大学健康中心研究所

目的：探讨芍药甘草汤（SGD）对PC12细胞兴奋性损伤的神经保护作用以及Src-NR2-nNOS通路介导的SGD调节GABA-Glu平衡作用。方法：采用NMDA建立PC12细胞兴奋性损伤模型。为了探究SGD的神经保护作用，采用CCK-8法测定PC12细胞活力；Annexin... 详细信息

目的：探讨芍药甘草汤（SGD）对PC12细胞兴奋性损伤的神经保护作用以及Src-NR2-nNOS通路介导的SGD调节GABA-Glu平衡作用。方法：采用NMDA建立PC12细胞兴奋性损伤模型。为了探究SGD的神经保护作用，采用CCK-8法测定PC12细胞活力；Annexin V/PI双染法测定PC12细胞凋亡；激光共聚焦显微镜检测Ca2+浓度。GABA受体激动剂和拮抗剂用于分析GABA和NMDA受体之间的神经保护作用。此外，利用分子生物学技术测定Src-NR2-nNOS通路的mRNA和蛋白质表达水平。从分子水平分析GABA和NMDA相互作用的调控位点、兴奋性神经毒性和脑损伤之间的相关性。结果：NMDA兴奋毒性损伤表现为细胞活性显著降低、细胞凋亡和Caspase-3蛋白表达增加以及细胞内Ca2+浓度显著升高。给予SGD、GABAA受体激动剂（muscimol）或GABAB受体激动剂（baclofen）可降低细胞内Ca2+浓度，减轻细胞凋亡，并逆转NMDA诱导的Caspase-3、Src、NMDAR2A、NMDAR2B和nNOS的上调。意想不到的是，GABAA受体拮抗剂（bicuculline）和GABAB受体拮抗剂（saclofen）未能显著增加兴奋性神经毒性。结论：综上所述，这些结果不仅为SGD在中枢神经系统损伤疾病的临床治疗中提供实验依据，还表明Src-NR2A-nNOS通路可能是兴奋性毒性治疗的一个有价值的靶点。

关键词：芍药甘草汤 PC12 NMDA GABA Src nNOS

白芍多糖对肝阴虚证模型大鼠证候表征及内分泌/能量代谢的影响

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环球中医药 2024年第1期17卷 2-10页

作者：高晶范晓旭冯颖童王祯沈奕玮李伟王景霞北京中医药大学中医学院 100029

目的在建立肝阴虚证病证结合实验模型的基础上,研究白芍多糖对大鼠化学性肝损伤肝阴虚证证候表征及内分泌/能量代谢的影响。方法SPF级雄性SD大鼠,体质量(200±20)g,适应性喂养一周后,根据体质量随机区组法分为空白组、模型组、一贯煎组... 详细信息

目的在建立肝阴虚证病证结合实验模型的基础上,研究白芍多糖对大鼠化学性肝损伤肝阴虚证证候表征及内分泌/能量代谢的影响。方法SPF级雄性SD大鼠,体质量(200±20)g,适应性喂养一周后,根据体质量随机区组法分为空白组、模型组、一贯煎组、白芍多糖组。除空白组外,其余各组大鼠腹腔注射浓度20%四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl 4)橄榄油溶液,联合甲状腺片30 mg/kg同时灌胃给药,连续6周。6周后观察大鼠体质量、易激惹程度、毛发光泽度、小便颜色、大便颜色及质地等并进行评分,测量体质量、肛温、舌面干湿度、摄食量、摄水量,测定血清环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)含量,计算cAMP/cGMP比值。测定血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aliquot aminotransferase,AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、总胆红素(total bilirubin,TBIL)、总胆汁酸(total bile acid,TBA)的含量变化并取肝脏进行苏木精—伊红染色病理切片检查;测定血清睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E 2)、皮质类固醇(crticosteroid,COR)水平,测定肝脏Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^( 2+)-Mg ^(2+)-ATP酶活性。结果与模型组相比,白芍多糖组大鼠大便评分升高(P0.05);实验第2、4周,白芍多糖组肛温下降(P0.05);白芍多糖组血清cAMP降低,cGMP升高,cAMP/cGMP下降(P0.05);病理染色显示肝组织结构中度异常,视野内部分肝细胞轻度脂肪变性,胞质内可见大量小空泡,部分肝细胞气球样变性,肝实质内少量炎症细胞浸润,且未见明显炎症细胞浸润,肝脏组织病理状态有所恢复。白芍多糖组血清E_(2)水平降低,COR水平升高(P0.05);白芍多糖组肝脏Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶活性均降低(P<0.01)。结论白芍多糖能有效保护肝阴虚型化学性肝损伤,调节环核苷酸、内分泌紊乱和能量代谢亢进,这可能是白芍发挥保护肝损伤肝阴虚证的作用机制之一,从一定程度上揭示了白芍养肝阴的科学内涵。

关键词：白芍多糖化学性肝损伤肝阴虚证内分泌能量代谢

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西洋参红景天复配方对氧化损伤模型小鼠的抗氧化作用及机制

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国际老年医学杂志 2024年第4期45卷 397-402页

作者：冯颖童扈觐玺刘佳琪刘双巧贾岚冯广旭王景霞北京中医药大学中医学院北京100029

目的评价西洋参红景天复配方对乙醇诱导的氧化损伤模型小鼠的抗氧化作用,并探讨其作用机制,为保健食品的开发提供科学依据。方法小鼠按体质量随机均分为空白对照组、急性氧化损伤模型组、西洋参红景天复配方低剂量(330 mg/kg)、中剂量... 详细信息

目的评价西洋参红景天复配方对乙醇诱导的氧化损伤模型小鼠的抗氧化作用,并探讨其作用机制,为保健食品的开发提供科学依据。方法小鼠按体质量随机均分为空白对照组、急性氧化损伤模型组、西洋参红景天复配方低剂量(330 mg/kg)、中剂量(660 mg/kg)、高剂量(990 mg/kg)组,每组10只,各剂量组经口灌胃给予受试样品,空白对照组和模型组给予等容量蒸馏水,连续灌胃30 d后,除空白对照组外各组禁食16 h后按12 mL/kg灌胃给予50%乙醇,6 h后取小鼠血、肝。检测小鼠血清的丙二醛(MDA)、8-表氢氧异前列腺素(8-Isoprostane)、蛋白质羰基(PCO)、谷胱甘肽(GSH)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,肝脏组织的MDA、PCO、GSH含量和SOD活性,利用蛋白印迹方法检测p-p38,p-ERK和p-JNK的蛋白表达。结果与模型组相比较,西洋参红景天复配方低剂量组小鼠血清中MDA含量下降(P<0.05),各剂量组8-Isoprostane、PCO含量均降低(P<0.05),各剂量组GSH含量及GSH-Px、SOD活力均上升(P<0.05),各剂量组TNF-α、IL-1β、IL-6水平均降低(P<0.05),各剂量组ALT、AST活力下降(P<0.05)。低中剂量组小鼠肝脏中MDA含量下降(P<0.05),各剂量组PCO、TG含量均下降(P<0.05),低中剂量组SOD活性和低剂量组GSH含量上升(P<0.05)。低剂量组能抑制p-p38和p-JNK的表达(P<0.05),中高剂量组能抑制p-p38、p-ERK和p-JNK的表达(P<0.05)。结论以红景天、西洋参、针叶樱桃粉及葡萄籽提取物组成的药食同源复配方具有较强的抗氧化保健作用。

关键词：抗氧化西洋参红景天复配方酒精性肝损伤

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