检索结果-南通市图书馆

小槐花提取物对甲型H1N1流感病毒感染的体外抑制作用

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吉林农业大学学报 2024年第1期46卷 148-154页

作者：徐国双金新郭艺迪张茂林段铭关振宏吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室长春130062

采用CCK8法测定小槐花提取物在MDCK细胞上的最大安全浓度(Maximum no-cytotoxic concentration,MNTC);建立甲型流感病毒A/PR8/34(H1N1,PR8)感染MDCK细胞模型,CCK8法检测其对病毒感染细胞病变的抑制作用;利用荧光定量PCR及免疫印迹方法,... 详细信息

采用CCK8法测定小槐花提取物在MDCK细胞上的最大安全浓度(Maximum no-cytotoxic concentration,MNTC);建立甲型流感病毒A/PR8/34(H1N1,PR8)感染MDCK细胞模型,CCK8法检测其对病毒感染细胞病变的抑制作用;利用荧光定量PCR及免疫印迹方法,检测小槐花提取物对流感病毒基因、蛋白,以及宿主炎症相关转录因子和炎性细胞因子表达的影响。细胞毒性试验结果显示,小槐花提取物对MDCK细胞的MNTC为100 mg/L;qRT-PCR结果显示,小槐花提取物能显著抑制PR8流感病毒M与NP基因的mRNA表达(P<0.01),也可显著下调病毒感染细胞的转录因子NF-κB p65、STAT3及炎性细胞因子IL-1β、TNF-α基因的表达水平,且其抑制作用与药物浓度正相关;免疫印迹法检测显示,100 mg/L的小槐花提取物极显著抑制了流感病毒M1蛋白的表达(P<0.01)。小槐花提取物具有较显著的体外抗流感病毒效果,此研究结果为从小槐花中鉴定具有抗流感病毒的确切药效成分奠定基础。

关键词：甲型流感病毒小槐花提取物 CCK8 抗病毒活性炎性细胞因子

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犬瘟热病毒跨物种传播的研究进展

中国兽医学报 2023年第3期43卷 637-642页

作者：张乐于小航苏宁赵丽丽关振宏段铭吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062

犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)是具有高度传染性的病原。最初被描述为感染家犬的病原,现已被认为是一种可感染多种食肉动物的病毒,可导致被感染宿主发病,甚至大量死亡,并且容易在易感宿主之间跨种属传播。已有的研究表明,CDV... 详细信息

犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)是具有高度传染性的病原。最初被描述为感染家犬的病原,现已被认为是一种可感染多种食肉动物的病毒,可导致被感染宿主发病,甚至大量死亡,并且容易在易感宿主之间跨种属传播。已有的研究表明,CDV暴发对野生生物种群的影响越来越大,并已经威胁到某些濒危野生物种的生存。另有研究表明,CDV甚至有成为人畜共患病原的可能。本研究拟对CDV在易感宿主范围扩大、自身基因突变和进入新宿主动态途径等方面展开综述,旨在为研究CDV跨物种传播的研究提供参考。

关键词：犬瘟热病毒宿主人畜共患跨物种传播

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用于平面单轴对称结构电磁波散射的减元技术

西南交通大学学报 2002年第2期37卷 215-217页

作者：关振宏朱峰西南交通大学电气工程学院四川成都610031

大容量与长计算时间的要求 ,是当前限制矩量法应用的主要障碍。因此 ,如何利用散射体的几何对称特征 ,有效地降低求解散射问题所需的存储空间和减少计算时间 ,具有重要的理论和实际意义。对具有轴对称的散射体 ,通过引入对称镜像分解 ,... 详细信息

大容量与长计算时间的要求 ,是当前限制矩量法应用的主要障碍。因此 ,如何利用散射体的几何对称特征 ,有效地降低求解散射问题所需的存储空间和减少计算时间 ,具有重要的理论和实际意义。对具有轴对称的散射体 ,通过引入对称镜像分解 ,能够使总的所需矩阵阶数降至直接求解的 1/2 ,运算时间缩减为直接求解的1/4 ;同时还给出了分解实现的数学公式以及分解原理。

关键词：电磁波散射扩展边界条件减元分解矩量法平面单轴对称散射体对称镜像分解分解原理

利用GST pull-down联合质谱技术鉴定H7N9禽流感病毒PA-X的互作蛋白

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广东农业科学 2022年第1期49卷 121-127页

作者：徐国双姜童潇郭艺迪段铭张茂林关振宏吉林大学人兽共患病研究所/人兽共患病教育部重点实验室吉林长春130062

【目的】为探究H7N9亚型禽流感病毒(AIV)PA-X蛋白的功能,采用GST pull-down联合质谱技术筛选与鉴定与PA-X相互作用的宿主蛋白。【方法】构建PA-X的重组表达载体pGEX-4T-PA-X,转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白,并利用GST亲合树脂进... 详细信息

【目的】为探究H7N9亚型禽流感病毒(AIV)PA-X蛋白的功能,采用GST pull-down联合质谱技术筛选与鉴定与PA-X相互作用的宿主蛋白。【方法】构建PA-X的重组表达载体pGEX-4T-PA-X,转化大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白,并利用GST亲合树脂进行纯化得到GST-PA-X融合蛋白。利用GST pull-down技术,将GST-PA-X和GST对照蛋白分别与A549细胞裂解液总蛋白进行体外孵育,得到的蛋白复合物经SDS-PAGE分离后进行质谱检测分析。【结果】经GST pull-down筛选与质谱分析鉴定后得到39个高可信度的可能与PA-X互作的候选蛋白质。通过GO注释和KEGG等通路富集分析发现,这些蛋白主要参与RNA的代谢及加工、mRNA翻译及运输、多肽生物合成及基因表达的转录后调节等生物学过程。对其中评分最高的蛋白Hsp70-2与PA-X的相互作用作进一步验证,免疫荧光试验结果表明Hsp70-2与PA-X可以在细胞浆中共定位。【结论】利用GST pulldown联合质谱技术筛选到39种与PA-X互作的候选蛋白,且经免疫荧光试验证明候选蛋白Hsp70-2与PA-X存在共定位,为深入探讨PA-X在AIV生命周期中的作用机制奠定基础。

关键词：禽流感病毒H7N9 PA-X GST pull-down 质谱 Hsp70-2 蛋白互作

大熊猫犬冠状病毒S基因的扩增、克隆和序列分析

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大熊猫犬冠状病毒S基因的扩增、克隆和序列分析

作者：关振宏吉林农业大学

学位级别：硕士

1997年5月，重庆动物园3只大熊猫发病，经强心，补液和抗菌消炎等治疗措施，收效甚微，于6月22日两只26岁的大熊猫死亡。胡桂学等人利用犬肾传代细胞对送检的死亡大熊猫肝、脾等病料进行了病毒的分离和鉴定研究，结果成功地分离获得了1... 详细信息

1997年5月，重庆动物园3只大熊猫发病，经强心，补液和抗菌消炎等治疗措施，收效甚微，于6月22日两只26岁的大熊猫死亡。胡桂学等人利用犬肾传代细胞对送检的死亡大熊猫肝、脾等病料进行了病毒的分离和鉴定研究，结果成功地分离获得了1株病毒(命名为DXMV)。电镜负染检查细胞培养物，见有冠状病毒样粒子。为进一步鉴定，胡等人利用能扩增出11种冠状病毒的简并核苷酸引物进行RT-PCR扩增，结果证明该病毒是冠状病毒属中的一员。根据国外已发表的CCV-K378株的S基因序列设计了一对引物，扩增出了1086bp的目的基因片段(S基因第81-1166位)，通过基因的序列测定和分析比较，证明了该株病毒为犬冠状病毒(CCV)。本研究是在完成大熊猫肝脏分离病毒的鉴定的基础之上，对CCVDXMV的S基因其它部分进行基因扩增、克隆和序列测定，并与其它CCV株的S基因序列进行同源性分析。犬冠状病毒只有一个血清型，但不同地区和动物来源的毒株在毒力和分子生物学方面不尽相同。病毒基因的克隆和序列测定是分析病毒遗传特征的最佳方法。CCV的S基因所编码的S蛋白是病毒最大的结构蛋白，由1452个氨基酸组成(Insavc-1株)，是病毒粒子中较保守的蛋白质。病毒进入机体后，首先接触到的就是S蛋白，其作用是与细胞受体结合，引起细胞融合，刺激机体产生中和抗体和细胞介导的细胞毒成分。因此S蛋白是CCV致病力和宿主特异性的主要决定因子，但目前有关犬冠状病毒S蛋白和基因的变异研究报道较少。本研究以测定该株CCV的S基因序列为主要研究内容，目的在于研究其分子生物学特征，探讨其S基因与其它株的差异，从而为犬冠状病毒病的基因工程疫苗研究提供科学依据，也为大熊猫的病毒性疾病的防治奠定基础。由于CCV的S基因很大，一次扩增整个基因的难度很大。该株病毒是新分离古林农业大学硕士学位论文大熊猫犬冠状病毒s墓因的扩增、克隆和序列分析的ccv毒株，病毒滴度低，增加了RT一PcR的难度。所以本实验设计了半套式PcR引物分段扩增s基因。根据GeneBank中发表的ccv K378株基因序列，利用软件Primer Premiers .0共设计了六条引物(sFZ一sRZ，sF3一sR，，sR工3，sF工，)，其中sF:一sRZ扩增出了792bP的基因片段;sF3一sR，为外层的半套式引物，sR工3、sF工3分别为内层的半套式引物，分别扩增出了737bP和1178bP的基因片段。同时根据ccv工n。av。一i株基因序列设计了引物sF:一sR:，sF。一sR。和sP工.。sF:一sR:扩增368bp的片段，sP。一sR.和sFI‘用于套式扩增985bP的基因片段。将各部分的PcR产物纯化，并分别克隆入PGEM一T载体中，用PcR和限制酶酶切两种方法鉴定重组质粒，然后将阳性重组菌送生物公司测序。5个s基因片段合并起来囊括了s基因的81一1 166位以外的全部序列，序列用生物软件编辑除去各部分重复序列和引物序列，得到s基因的全部序列。将eev DxMV的s基因序列和其它eev毒株、Te卿卿2 002和F工Pv 79一11连6的s基因序列用DNAStar和DNAsi。作多重比较，并绘制了进化树。核普酸序列分析比较表明，该病毒与ccv NvsL和K378株的同源性最高，可达到9 9 .5%;而与eev 23/03的同源性最低，为56 .9急;与F工四和TGEv分别有90.理龟和52 .1龟的同源性。DxMV与K3 78、eev6、eev v54、FxPv79一1146、TGEv姗2002和eCv 23/03的氨基酸序列同源性分别为:99.0龟、97.1龟、96.1龟、92.7龟、81.3%和50.0%。本研究对大熊猫分离的犬冠状病毒的部分s基因进行了克隆和序列分析，为大熊猫的疾病防治工作提供了必要的信息和资料，同时也丰富了犬冠状病毒的分子生物学研究内容。

关键词：大熊猫犬冠状病毒 S基因克隆序列分析

免疫共沉淀筛选细胞内与A型流感病毒M2蛋白相互作用的蛋白

同方学位论文库评论

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同方学位论文库

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微生物学报 2009年第8期49卷 1081-1085页

作者：李耀东关振宏严景华中国科学院微生物研究所北京100101 中国科学院研究生院北京100049 吉林大学畜牧兽医学院北京130062

【目的】筛选细胞内与A型流感病毒M2蛋白(A/M2)相互作用的蛋白质。【方法】将A/M2编码序列插入真核表达载体pCAGGS-CFlag,重组质粒pCAGGS-CFlag-A/M2转染HEK-293T细胞,裂解细胞,以Flag单抗偶联的琼脂糖球珠免疫沉淀A/M2-Flag蛋白,清洗... 详细信息

【目的】筛选细胞内与A型流感病毒M2蛋白(A/M2)相互作用的蛋白质。【方法】将A/M2编码序列插入真核表达载体pCAGGS-CFlag,重组质粒pCAGGS-CFlag-A/M2转染HEK-293T细胞,裂解细胞,以Flag单抗偶联的琼脂糖球珠免疫沉淀A/M2-Flag蛋白,清洗去除非特异性结合的杂蛋白后,SDS-PAGE银染法显示与A/M2共沉淀的蛋白,从胶上切下此蛋白条带进行质谱分析。【结果】成功构建了A/M2的表达质粒,免疫印迹证实了A/M2蛋白在293T细胞中能够表达,免疫共沉淀筛选到与A/M2结合的多种蛋白,分析质谱结果,确定ataxin 10和3个真核翻译起始因子(eIF)为候选蛋白。【结论】ataxin 10与A/M2相互作用为流感病毒感染或接种流感疫苗引发小脑性共济失调提供了解释,eIF与A/M2相互作用表明A/M2可能在调控病毒蛋白合成方面起重要作用。

关键词：免疫共沉淀 A型流感病毒M2蛋白质谱蛋白相互作用

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改进的单相脉冲整流器模型预测电流控制策略

电网技术 2020年第5期44卷 1845-1851页

作者：宋智威黄路熊成林关振宏西南交通大学电气工程学院四川省成都市610031

传统的模型预测算法中给定值与实际值存在静态误差,这是由模型预测控制算法的基本原理决定的。针对该问题,首先该文基于内模原理推导了比例积分的补偿环节,并对模型预测电流控制中给定电流进行修正,实现给定值与实际值的无静差跟踪。其... 详细信息

传统的模型预测算法中给定值与实际值存在静态误差,这是由模型预测控制算法的基本原理决定的。针对该问题,首先该文基于内模原理推导了比例积分的补偿环节,并对模型预测电流控制中给定电流进行修正,实现给定值与实际值的无静差跟踪。其次,为了避免网压畸变对锁相环的相位检测造成影响,提出一种基于相位偏移补偿的电压信号检测方法,并将其用于模型预测电流控制算法。实验表明,所提补偿环节能改善模型预测的静态跟踪性能;相位检测方法能有效地检测网压基波相位信息,证明所提方法的正确性和有效性。

关键词：单相脉冲整流器 PI补偿静态误差相位检测

基于双重补偿相位检测方法在单相脉冲整流器中的应用

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电网技术 2020年第10期44卷 3983-3990页

作者：宋智威黄路熊成林关振宏西南交通大学电气工程学院四川省成都市610031

为解决传统锁相环方法存在的缺陷,有学者提出基于参考频率的无锁相环同步相位检测方法。但该方法存在着电压频率与参考频率不匹配时会产生相位偏移,频率波动时动态响应较慢等问题。为解决上述问题,该文提出一种双重补偿相位检测方法,该... 详细信息

为解决传统锁相环方法存在的缺陷,有学者提出基于参考频率的无锁相环同步相位检测方法。但该方法存在着电压频率与参考频率不匹配时会产生相位偏移,频率波动时动态响应较慢等问题。为解决上述问题,该文提出一种双重补偿相位检测方法,该方法利用单相电网电压,无需锁相环便可获得与电网电压的同步信号。针对无锁相环中控制器给定参考频率与电网频率不匹配时,会造成电网相位检测产生相位偏移的情况,引入相位补偿策略;同时为了提高相位检测的动态响应,通过引入q轴电压闭环反馈,实时校准补偿信号。最后,通过建立单相脉冲整流器模型预测数学模型,实验对比了所提算法和未补偿前的无锁相环算法,证明了该算法的有效性和正确性。

关键词：单相脉冲整流器无锁相环双重补偿电压反馈

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基于数学推导的级联多电平逆变器性能研究

电气传动 2009年第10期39卷 42-46页

作者：唐顺关振宏磁浮技术与磁浮列车教育部重点实验室四川成都610031

载波相移SPWM技术应用于级联型多电平逆变器,可以达到提高等效开关频率,改善输出性能的效果。而载波相移角度差π/N和2π/N两种移相方式,对不同级联数目的逆变器输出有不同影响。当三相逆变器中功率单元发生故障被切除后,输出电压不再... 详细信息

载波相移SPWM技术应用于级联型多电平逆变器,可以达到提高等效开关频率,改善输出性能的效果。而载波相移角度差π/N和2π/N两种移相方式,对不同级联数目的逆变器输出有不同影响。当三相逆变器中功率单元发生故障被切除后,输出电压不再平衡。而利用中性点偏移技术,可使逆变器输出线电压重新达到平衡,从而具备较好的容错能力。通过对载波相移PWM技术和中性点偏移原理的数学推导,得出采用载波相移角π/N方式与中性点偏移技术,逆变器输出性能有较大提高的结论。最后对级联型9电平逆变器A相中某一功率单元故障后状况进行仿真实验,验证了数学推导的正确性。

关键词：载波相移正弦脉冲调制中性点偏移级联型多电平逆变器容错