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U87细胞来源的脑胶质瘤干细胞样细胞B7-H6表达上调且与其生物学特性相关

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第9期32卷 1168-1173页

作者：陈翰卿时正朋高兵傅丰庆张学光苏州大学医学部基础医学与生物科学学院苏州大学附属第一医院临床免疫研究所江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室江苏苏州215000

目的探讨B7家族分子B7-H6在脑胶质瘤干细胞样细胞(GSLC)中的表达及其意义。方法使用亚克隆的方法并利用GSLC在体外形成神经细胞球的特性,从U87细胞株中筛选得到脑GSLC;通过实时定量PCR和流式细胞术检测干细胞标志分子c-myc、性别决定区... 详细信息

目的探讨B7家族分子B7-H6在脑胶质瘤干细胞样细胞(GSLC)中的表达及其意义。方法使用亚克隆的方法并利用GSLC在体外形成神经细胞球的特性,从U87细胞株中筛选得到脑GSLC;通过实时定量PCR和流式细胞术检测干细胞标志分子c-myc、性别决定区基因Y盒2(Sox2)、CD133、神经上皮干细胞蛋白(nestin)、CXC趋化因子受体4(CXCR4)的表达;通过化疗药物多柔比星、顺铂、卡铂杀伤鉴定其是否具有耐药特性;通过实时定量PCR及流式细胞术获得脑GSLC中B7家族的表达;采用小干涉RNA(si RNA)干扰下调B7-H6表达,CCK-8法检测细胞增殖的变化。结果使用亚克隆方法分离获得的脑GSLC能在体外形成神经细胞球,上调表达多种干细胞标志分子CD133、nestin、CXCR4,具有显著的耐药特性。B7家族分子B7-H1、B7-H3、B7-H4和B7-H6在得到脑GSLC中均表达,与原代U87细胞相比,细胞膜上的B7-H6的表达发生显著上调,使用si RNA干扰B7-H6表达后,细胞的增殖受到抑制,且c-myc基因的表达也下调。结论 U87细胞来源的脑GSLCB7-H6表达上调,并且与GSLC生物学特性相关。

关键词：脑胶质瘤胶质瘤干细胞样细胞(GSLC) B7-H6 细胞增殖

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基于B7-H3靶点的放射免疫治疗研究进展

中国新药杂志 2023年第7期32卷 687-694页

作者：郑梦王燕傅丰庆缪丽燕苏州大学附属第一医院临床药理实验室苏州215006 苏州大学药学院药物研究与转化交叉研究所苏州215123 苏州大学附属第一医院临床免疫研究所苏州215006 苏州大学放射医学与辐射防护国家重点实验室苏州215123

近年来,放射免疫治疗(radioimmunotherapy,RIT)因其精准靶向治疗而备受关注。寻找特异性免疫治疗靶点分子用于放射免疫治疗是一种极具临床应用价值的治疗模式。B7-H3(CD276)是B7家族中的一种免疫检查点,因其独特的表达特性和生物学功能... 详细信息

近年来,放射免疫治疗(radioimmunotherapy,RIT)因其精准靶向治疗而备受关注。寻找特异性免疫治疗靶点分子用于放射免疫治疗是一种极具临床应用价值的治疗模式。B7-H3(CD276)是B7家族中的一种免疫检查点,因其独特的表达特性和生物学功能,成为RIT药物的一个理想候选分子。本文从B7-H3的表达特点及其生物学功能等方面进行综述,并总结了以B7-H3为靶点的放射免疫治疗最新研究进展。

关键词： B7-H3 CD276 放射免疫治疗靶向治疗肿瘤

基于B7-H3靶点的分子影像技术在肿瘤诊断方面的研究进展

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中国免疫学杂志 2023年第11期39卷 2439-2445页

作者：郑梦王燕傅丰庆缪丽燕(指导) 苏州大学附属第一医院苏州215006 苏州大学药物研究与转化交叉研究所苏州215123 苏州大学放射医学与辐射防护国家重点实验室苏州215123

寻找新的治疗靶点用于准确的癌症早期诊断是目前肿瘤精准治疗亟待解决的问题之一。B7-H3(CD276)曾被称为“肿瘤相关抗原”,在肿瘤组织中广泛异常高表达,在正常组织上表达受限,使其成为各种靶向肿瘤的造影剂及肿瘤治疗的理想分子。分子... 详细信息

寻找新的治疗靶点用于准确的癌症早期诊断是目前肿瘤精准治疗亟待解决的问题之一。B7-H3(CD276)曾被称为“肿瘤相关抗原”,在肿瘤组织中广泛异常高表达,在正常组织上表达受限,使其成为各种靶向肿瘤的造影剂及肿瘤治疗的理想分子。分子影像通过分子影像探针以非侵入性形式显示肿瘤病理生理特征,可用于诊断、治疗及各种靶向治疗(包括免疫治疗)的效果评估。因此,本文主要综述以B7-H3为靶点的分子影像在肿瘤诊断中的最新研究进展。

关键词： B7-H3(CD276) 分子影像肿瘤探针靶向治疗早期诊断

一株特异性识别B7-H3杂交瘤单克隆抗体Y4F11的分析和鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第10期32卷 1402-1406,1411页

作者：时正朋胡玉敏陈翰卿傅丰庆张学光苏州大学基础医学与生物科学学院苏州大学附属第一医院江苏省临床免疫研究所江苏省干细胞与生物医用材料重点实验室江苏苏州215000

目的研制小鼠抗人恶性胸水细胞表面分子的单克隆抗体(m Ab),并对其中Y4F11识别的抗原进行鉴定和验证。方法以胸水细胞为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠、采用杂交瘤技术进行细胞融合和筛选阳性杂交瘤克隆;选取Y4F11为实验对象,采用流式细胞... 详细信息

目的研制小鼠抗人恶性胸水细胞表面分子的单克隆抗体(m Ab),并对其中Y4F11识别的抗原进行鉴定和验证。方法以胸水细胞为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠、采用杂交瘤技术进行细胞融合和筛选阳性杂交瘤克隆;选取Y4F11为实验对象,采用流式细胞术分析其在初始和活化免疫细胞(T细胞、B细胞、NK细胞和单核细胞)上的结合情况;通过免疫共沉淀法获得与Y4F11特异性结合的条带、割胶、蛋白质谱测序后拼接出肽段,并进行BLAST分析比对;采用Western blot法、Dot-blot法及流式细胞术验证Y4F11与B7同源物3(B7-H3)的抗体抗原关系。结果获得78株能持续分泌识别恶性胸水细胞表面表达分子的抗体的杂交瘤细胞株,其中Y4F11与胸水细胞结合最高;Y4F11特异识别的条带相对分子质量(Mr)大小约为50 000,质谱结果经BLAST比对为B7-H3分子;继而的结合实验显示,Y4F11可以与B7-H3的转基因细胞结合,也可以与B7-H3融合蛋白有效地结合,B7-H3在免疫细胞表面表达的模式与Y4F11抗体在这些细胞上的结合一致,表明Y4F11识别的抗原分子为B7-H3。结论成功获得1株持续表达B7-H3 m Ab的杂交瘤细胞株Y4F11,为进一步研究分析B7-H3的生物学功能提供了物质基础。

关键词：恶性胸水 B7-H3 单克隆抗体质谱测序

剪切因子SC35体外调节B7-H3分子的表达

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第8期28卷 815-817页

作者：易丽娴高兵高菲傅丰庆张学光孙静苏州卫生职业技术学院检验药学系江苏苏州215009 苏州大学生物技术研究所江苏苏州215006

目的:利用生物信息学及分子生物学体外探讨剪切因子SC35对协同刺激分子B7-H3的表达调控机制。方法:通过生物信息方法筛选可能参与协同刺激分子B7-H3表达的调控蛋白,再通过定量PCR及RNA干扰实验验证剪切因子是否参与该分子的调控。结果:... 详细信息

目的:利用生物信息学及分子生物学体外探讨剪切因子SC35对协同刺激分子B7-H3的表达调控机制。方法:通过生物信息方法筛选可能参与协同刺激分子B7-H3表达的调控蛋白,再通过定量PCR及RNA干扰实验验证剪切因子是否参与该分子的调控。结果:剪切因子SC35、SRP40、SF55可能参与B7-H3的表达调控,体外发现T细胞活化后B7-H3表达上调,SC35同时也表达上调;继而通过RNA干扰抑制SC35的表达,发现B7-H3的表达也同时降低。结论:剪切因子SC35可能参与了B7-H3的表达调控,对研究该分子的生物学功能奠定了基础。

关键词：剪切因子 B7-H3 SC35 调控

MiR-29a下调共刺激分子B7-H3的表达及其对脑胶质瘤细胞侵袭的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第1期22卷 28-33页

作者：高兵陈翰卿时正鹏孙静严茹红傅丰庆张学光苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215000 苏州大学医学生物技术研究所江苏苏州215000 苏州卫生职业技术学院江苏苏州215000 苏州大学附属第二医院检验科江苏苏州215000 苏州大学附属第一医院江苏省临床免疫研究所江苏苏州21500

目的:探讨miR-29a调控共刺激分子B7-H3在脑胶质瘤中的表达及其对脑胶质瘤细胞侵袭能力的影响。方法:通过Real-time PCR检测miR-29a和B7-H3在正常脑组织、脑胶质瘤组织及人胶质瘤细胞株U87中的表达,并利用脂质体将miR-29a的模拟物(mimics... 详细信息

目的:探讨miR-29a调控共刺激分子B7-H3在脑胶质瘤中的表达及其对脑胶质瘤细胞侵袭能力的影响。方法:通过Real-time PCR检测miR-29a和B7-H3在正常脑组织、脑胶质瘤组织及人胶质瘤细胞株U87中的表达,并利用脂质体将miR-29a的模拟物(mimics)和抑制剂(inhibitors)转入U87细胞,流式术验证miR-29a对B7-H3表达的调节效果;采用CCK-8和Transwell实验观察miR-29a对U87细胞的增殖和侵袭能力的影响,并通过流式术分析miR-29a干预前后U87细胞上与细胞侵袭相关的化学趋化因子的表达变化,以miRtarbase等软件预测miR-29a与CXCR4的结合能力。结果:胶质瘤组织及细胞株中miR-29a低表达而B7-H3 mRNA高表达,且均与瘤组织病理分级相关。转染miR-29a mimics可以有效下调U87细胞中B7-H3 mRNA的表达。转染miR-29a mimics可以显著抑制U87细胞的侵袭能力(P<0.05),但对细胞增殖并无显著影响。miR-29a过表达可同时下调U87细胞中CXCR4的表达,但软件分析CXCR4基因上并不存在miR-29a的结合位点。结论:miR-29a可有效下调B7-H3分子的表达,进而抑制脑胶质瘤细胞的侵袭能力,其作用机制可能与CXCR4途径相关。

关键词： B7-H3 miR-29a 胶质瘤 U87细胞侵袭增殖 CXCR4

协同刺激分子B7-H3在脊椎动物中的分布及其演化

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中国免疫学杂志 2012年第8期28卷 675-680页

作者：孙静傅丰庆顾文超申志勇张学光苏州卫生职业技术学院苏州215009 苏州大学生物技术研究所苏州215000

目的:探讨B7-H3分子2种异构体在不同物种中的分布及其演化模式以辅助研究B7-H3分子的生物学功能。方法:通过生物信息学方法从各类数据库中搜索脊椎动物各物种的B7-H3分子序列,分析其结构域的数量及剪切形式预测异构体的分布;获取代表性... 详细信息

目的:探讨B7-H3分子2种异构体在不同物种中的分布及其演化模式以辅助研究B7-H3分子的生物学功能。方法:通过生物信息学方法从各类数据库中搜索脊椎动物各物种的B7-H3分子序列,分析其结构域的数量及剪切形式预测异构体的分布;获取代表性物种的组织抽提RNA,PCR验证预测结果;计算各物种B7-H3分子中V1C1和V2C2的dN和dS比。结果:获取了38个物种的B7-H3序列,其中豚鼠、家犬、非洲象、牛、熊猫、蝙蝠及高级灵长类动物如黑猩猩、大猩猩、猴等物种中存在2种剪切体;RT-PCR方法证实了2种剪切体的表达。各物种V1C1与V2C2序列的非同义突变(dN)大于同义突变(dS)值。结论:B7-H3分子最早以2IgB7-H3形式存在于硬骨鱼动物中,在高级哺乳动物中出现了2种异构体;且在自然界压力选择下发生了净化选择,并未产生新的生物学功能。

关键词： B7-H3 异构体表达演化

共刺激分子B7-H6在脑胶质瘤干样细胞中上调表达并影响细胞增殖

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共刺激分子B7-H6在脑胶质瘤干样细胞中上调表达并影响细胞增殖

第十三届全国免疫学学术大会

作者：陈翰卿傅丰庆张学光苏州大学附属第一医院江苏省(高校)临床免疫学重点实验室江苏省(科教强卫)胃肠道肿瘤免疫重点实验室

B7-H6是B7共刺激分子家族的新成员,被证明在多种肿瘤组织中存在表达。目前已有研究表明B7-H6分子能通过激活NK细胞受体NKp30来激活NK细胞杀伤的作用,但是肿瘤细胞中B7-H6的高表达对肿瘤自身作用的研究仍然较少。本研究发现,B7-H6在脑胶... 详细信息

B7-H6是B7共刺激分子家族的新成员,被证明在多种肿瘤组织中存在表达。目前已有研究表明B7-H6分子能通过激活NK细胞受体NKp30来激活NK细胞杀伤的作用,但是肿瘤细胞中B7-H6的高表达对肿瘤自身作用的研究仍然较少。本研究发现,B7-H6在脑胶质瘤组织中上调表达,然而在脑胶质瘤细胞株中却很少存在膜表达,因此我们假设B7-H6可能高表达于体外培养条件中很少存在的肿瘤干样细胞中。我们首先构建了U87来源的肿瘤干样细胞株(GSLCs),使用RT-PCR证明其mRNA水平高表达肿瘤干细胞相关标志物(CD133、Sox2、nestin)以及对化疗药物耐受。然后使用RT-PCR和流式检测了GSLCs上B7-H6分子的表达情况,并发现其表达相对U87而言显著上调。通过构建和转染干扰B7-H6的siRNA并有效下调GSLCs细胞B7-H6表达后,通过CCK-8检测到细胞增殖能力的抑制;通过WB检测到细胞增殖相关的PI3K/Akt,ERK/MAPK信号通路中,磷酸化ERK和Akt的显著下调;通过RT-PCR也检测到了原癌基因c-Myc的显著下调。此外,B7-H6对细胞增殖的抑制作用在利用CRISPR-Cas9系统敲除B7-H6基因的293T细胞中也得到验证。另一方面,NK细胞杀伤实验表明B7-H6的下调能有效抑制NK细胞毒作用。本研究表明,B7-H6分子具有成为脑胶质瘤,特别基于肿瘤干细胞的靶向治疗当中的有效临床干预靶点的潜力。

关键词：脑胶质瘤肿瘤干样细胞 B7-H6 细胞增殖 c-Myc

来源： cnki会议评论

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B7分子在胶质瘤干细胞上的表达及意义研究

B7分子在胶质瘤干细胞上的表达及意义研究