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纳米羟基磷灰石/聚酰胺材料的体内成骨能力

中国组织工程研究 2015年第30期19卷 4769-4773页

作者：徐显春王治侯铁奇宜宾市第一人民医院骨一科四川省宜宾市644000 泸州医学院附属医院骨与关节外科四川省泸州市646000 暨南大学医学院广东省广州市510632

背景:作为骨修复重建材料,纳米羟基磷灰石具有良好生物相容性及骨传导性,但临床上中单一使用纳米羟基磷灰石尚存在许多不足。目的:观察纳米羟基磷灰石/聚酰胺材料的体内成骨能力。方法:取24只新西兰大白兔,进行纳米羟基磷灰石/聚酰胺人... 详细信息

背景:作为骨修复重建材料,纳米羟基磷灰石具有良好生物相容性及骨传导性,但临床上中单一使用纳米羟基磷灰石尚存在许多不足。目的:观察纳米羟基磷灰石/聚酰胺材料的体内成骨能力。方法:取24只新西兰大白兔,进行纳米羟基磷灰石/聚酰胺人工肱骨头置换,分别于置换后3,6,12,24周,进行X射线观察、组织学观察。结果与结论:1X射线观察:不同时间点材料上端皮质均未出现骨皮质变薄、异位骨化等发生,纳米羟基磷灰石/聚酰胺材料无碎裂迹象,材料四周皮质均可见模糊界面,密度随着时间的增加而增加。2组织学观察:置换后3周,可见大量细胞,包括间充质细胞、单核巨噬细胞等;置换后6周,仍可见界膜内的大量纤维组织、成纤维细胞、单核巨噬细胞,而软骨细胞和成骨细胞分布较少;置换后12周,大范围原始骨小梁开始形成且多呈扁平状,排列整齐有序;置换后24周,组织界膜被骨细胞充斥,骨小梁表面的细胞较规则,骨组织原始细胞开始转变为板层状骨。说明纳米羟基磷灰石/聚酰胺材料具有良好的成骨能力。

关键词：生物材料骨生物材料纳米羟基磷灰石聚酰胺成骨能力广东省自然科学基金

骨髓间充质干细胞对视网膜色素变性大鼠视网膜的修复作用

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新乡医学院学报 2021年第6期38卷 511-515页

作者：李鑫洪萌侯铁奇新乡市中心医院眼科河南新乡453000 河南大学第一附属医院眼科河南开封475000 中山大学附属第三医院眼科中心广东广州510630

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的分离制备方法及其对视网膜色素变性(RP)大鼠视网膜的修复作用。方法选取Sprague-Dawley大鼠2只,采用贴壁法分离获取BMSC,采用生长曲线、流式细胞术及细胞形态观察鉴定BMSC,并制备BMSC悬液。将45只S... 详细信息

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的分离制备方法及其对视网膜色素变性(RP)大鼠视网膜的修复作用。方法选取Sprague-Dawley大鼠2只,采用贴壁法分离获取BMSC,采用生长曲线、流式细胞术及细胞形态观察鉴定BMSC,并制备BMSC悬液。将45只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、RP组和BMSC组,每组15只。对照组大鼠正常饲养,不制备RP大鼠模型。RP组和BMSC组大鼠采用碘酸钠(NaIO 3)法建立RP大鼠模型。建模成功后,RP组大鼠局部视网膜下注射0.15 mL生理盐水,BMSC组大鼠局部视网膜下注射BMSC悬液0.15 mL(细胞密度为1×10^(9)L^(-1)),每日1次,连续注射7 d;对照组大鼠不采取任何干预措施。分别于造模前、造模后及干预后1个月检测3组大鼠血清脑源性神经营养因子(BDNF)、白细胞介素-10(IL-10)水平;干预后1个月,采用断颈法处死大鼠,取大鼠视网膜组织,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠视网膜病变部位组织形态。结果倒置显微镜观察显示,制备的BMSC培养2 h后开始贴壁生长,培养2 d后伸出伪足,且长短不一,培养4 d后快速增长,细胞开始集落排列,细胞质丰富;细胞传代后分布相对均匀,形态纤长,细胞排列一致,呈旋涡或放射状。细胞生长曲线结果显示,BMSC接种第1~2天为潜伏期,细胞生长相对缓慢;BMSC接种第3~5天为对数生长期,细胞生长迅速。第3代大鼠BMSC流式细胞术检测显示,CD45^(+)、CD29^(+)、CD44^(+)细胞率分别为1.33%、79.95%、81.49%。造模前3组大鼠血清BDNF、IL-10水平比较差异无统计学意义(P>0.05),造模后RP组和BMSC组大鼠血清BDNF、IL-10水平显著低于对照组(P0.05)。HE染色显示,对照组大鼠视网膜细胞排列整齐,细胞完好;RP组大鼠视网膜细胞排列紊乱,存在许多细胞碎片;与RP组比较,BMSC组大鼠视网膜细胞排列相对整齐,细胞碎片显著减少。结论BMSC可以显著提高RP大鼠血清BDNF、IL-10水平,促进受损视网膜修复。

关键词：骨髓间充质干细胞视网膜色素变性视网膜修复

卵泡液 FoxO1 mRNA、 Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与优质胚胎数的相关性及其预测不孕患者IVF-ET临床妊娠的效能研究

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中华生殖与避孕杂志 2022年第4期42卷 364-371页

作者：张雪莹曹海英侯铁奇刘秀玲驻马店市中心医院妇科驻马店463000 郑州大学第三附属医院郑州450052

目的探讨卵泡液中叉头框转录因子O亚族1(Forkhead box transcription factor O1, FoxO1)mRNA、天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)mRNA、生长分化因子-9(growth differentiation factor-9, GDF-9)水平与优质胚胎数的相关性及其预测不孕患者体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)临床妊娠的效能。方法选取2017年2月至2020年1月期间驻马店市中心医院收治的468例接受IVF-ET治疗的不孕患者进行病例对照研究, 根据是否妊娠分为妊娠组(n=248)、未妊娠组(n=220), 比较两组一般资料、取卵日性激素水平、卵泡液FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平。采用Pearson分析卵泡液FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9之间及其与优质胚胎数的相关性, 采用logistic回归方程分析IVF-ET临床妊娠的相关因素并以受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线分析卵泡液FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9预测临床妊娠的效能。结果妊娠组优质胚胎数多于未妊娠组[(2.59±0.68)枚比(1.78±0.62)枚, P<0.001], 基础卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)水平、基础黄体生成素(luteinizing hormone, LH)水平低于未妊娠组[(7.16±0.29)U/L比(6.21±0.34)U/L, (8.72±1.24)U/L比(10.65±1.01)U/L, 均P<0.001], 取卵日雌二醇高于未妊娠组[(848.18±50.68)ng/L比(605.35±46.79)ng/L, P<0.001]。妊娠组FoxO1 mRNA、GDF-9水平高于未妊娠组, Caspase-3 mRNA水平低于未妊娠组(均P<0.001);FoxO1 mRNA与Caspase-3 mRNA呈负相关, 与GDF-9呈正相关(均P<0.001);Caspase-3 mRNA与GDF-9呈负相关(均P<0.001);FoxO1 mRNA、GDF-9与优质胚胎数呈正相关, Caspase-3 mRNA与优质胚胎数呈负相关(均P<0.001)。多元线性回归分析显示, 在排除混杂因素后, FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与优质胚胎数相关(均P<0.001)。以IVF-ET临床妊娠为因变量, 纳入优质胚胎数、基础FSH、基础LH、取卵日雌二醇、FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9为自变量进行logistic回归方程分析, 结果显示优质胚胎数、基础FSH、基础LH、取卵日雌二醇、FoxO1 mRNA、Caspase-3、GDF-9均与临床妊娠结局显著相关(均P<0.001)。FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平联合预测IVF-ET临床妊娠的曲线下面积(area under curve, AUC)值为0.891, 大于FoxO1 mRNA指标单独检测(AUC=0.796, P=0.012)。结论 FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与胚胎发育及性激素水平有关, 且FoxO1 mRNA、GDF-9水平升高, Caspase-3 mRNA水平降低有利于临床妊娠, 三者联合检测可为评价IVF-ET临床妊娠提供参考。

关键词：受精体外胚胎移植优质胚胎数卵泡刺激素叉头框转录因子O亚族天冬氨酸蛋白水解酶-3 生长分化因子-9

蒲葵子提取物对膀胱癌细胞增殖凋亡的影响及其相关机制

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中华泌尿外科杂志 2022年第1期43卷 67-72页

作者：刘太阳李杰沈雁冰闫泽晨桂琦文秀华侯铁奇驻马店市中心医院泌尿外科驻马店463000 郑州大学第一附属医院泌尿外科郑州450052

目的探讨蒲葵子提取物对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制。方法将T24细胞分别用含蒲葵子提取物且终浓度分别为0、25、50、100 mg/L的培养液培养,分别记为对照组和蒲葵子低、中、高剂量组。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞存活... 详细信息

目的探讨蒲葵子提取物对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制。方法将T24细胞分别用含蒲葵子提取物且终浓度分别为0、25、50、100 mg/L的培养液培养,分别记为对照组和蒲葵子低、中、高剂量组。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞存活率;克隆形成实验检测细胞克隆形成数量;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测Caspase 3、脾酪氨酸激酶(Syk)、Ki-67表达。将Syk过表达载体质粒及其阴性对照分别转染至T24细胞中,转染后再分别用100 mg/L蒲葵子提取物处理,按上述方法检测细胞存活率、克隆形成数量及细胞凋亡率。用不同浓度蒲葵子提取物处理裸鼠膀胱癌模型,观察裸鼠一般情况和肿瘤生长情况;免疫组化染色检测膀胱癌组织Caspase 3、Syk、Ki-67蛋白表达。结果蒲葵子低、中、高剂量组较对照组T24细胞存活率显著降低[(88.50±3.65)%、(70.58±2.47)%、(48.90±2.37)%与(98.25±4.26)%],克隆形成数量显著减少[(101.33±3.40)、(84.00±2.94)、(60.00±2.16)个与(121.33±4.64)个],细胞凋亡率显著升高[(11.45±0.59)%、(17.71±0.64)%、(21.33±0.83)%与(7.86±0.43)%],Ki-67蛋白表达水平显著降低,Caspase3、Syk蛋白表达水平显著升高,且均呈浓度依赖性(均P<0.05)。pcDNA3.1-Syk组较pcDNA3.1组细胞存活率显著降低[(63.87±2.53)%与(98.45±3.54)%],克隆形成数量显著减少[(74.33±2.87)个与(121.33±3.68)个],细胞凋亡率显著升高[(18.39±0.63)%与(7.89±0.45)%](均P<0.05)。pcDNA3.1-Syk+蒲葵子高剂量组较pcDNA3.1+蒲葵子高剂量组的细胞存活率显著降低[(29.80±1.63)%与(49.33±2.76)%],克隆形成数量显著减少[(33.00±2.94)个与(59.67±3.30)个],细胞凋亡率显著升高[(26.93±0.68)%与(21.25±0.78)%](均P<0.05)。膀胱癌模型裸鼠实验结果显示,对照组和蒲葵子低、中、高剂量组裸鼠移植瘤体积分别为(1209.75±64.37)、(1006.31±40.49)、(530.58±42.87)、(267.58±16.73)mm^(3),移植瘤重量分别为(0.36±0.08)、(0.30±0.04)、(0.26±0.03)、(0.18±0.06)g,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组化染色检查结果显示,与对照组相比,蒲葵子中、高剂量组膀胱癌裸鼠中Sky和Caspase3表达增加,Ki-67表达降低。结论蒲葵子提取物可通过上调Syk表达抑制膀胱癌细胞增殖,促进细胞凋亡。

关键词：膀胱肿瘤蒲葵子提取物脾酪氨酸激酶增殖凋亡

紫花牡荆素通过抑制7次跨膜超蛋白家族成员4的表达抑制膀胱癌细胞增殖迁移和侵袭

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中华肿瘤杂志 2022年第4期44卷 334-340页

作者：徐豪石红林郝建伟束坤鹏张云天侯铁奇河南省人民医院泌尿外科郑州450000 河南大学医学院开封475004

目的探讨紫花牡荆素(CAS)对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法体外培养T24细胞, 分为对照组、5、10、20 μmol/L CAS组、si-NC组、si-TM7SF4组、CAS+pcDNA组和CAS+pcDNA-TM7SF4组, 采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检... 详细信息

目的探讨紫花牡荆素(CAS)对膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法体外培养T24细胞, 分为对照组、5、10、20 μmol/L CAS组、si-NC组、si-TM7SF4组、CAS+pcDNA组和CAS+pcDNA-TM7SF4组, 采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组细胞的增殖抑制情况, Transwell法检测细胞迁移和侵袭的能力, Western blot法检测细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9和7次跨膜超蛋白家族成员4(TM7SF4)蛋白的表达水平, 实时荧光定量PCR检测TM7SF4 mRNA的表达水平。结果 5、10、20 μmol/L CAS组T24细胞增殖抑制率分别为(17.68±1.41)%、(33.54±3.16)%和(61.44±5.50)%, 均高于对照组[(0.00±0.00)%, 均P<0.001]。5、10、20 μmol/L CAS组细胞迁移数分别为(72.83±5.66)个、(59.13±4.27)个和(41.25±3.22)个, 细胞侵袭数分别为(55.83±5.15)个、(42.19±3.06)个和(31.13±3.22)个, 均低于对照组[分别为(86.11±5.16)个和(68.82±5.29)个, 均P<0.001]。5、10、20 μmol/L CAS组T24细胞中cyclin D1、MMP-2、MMP-9、TM7SF4蛋白表达水平、TM7SF4 mRNA表达水平均低于对照组(均P<0.001), p21蛋白表达水平高于对照组(P<0.001)。si-TM7SF4组T24细胞增殖抑制率[(50.35±4.67)%]高于si-NC组[(6.31±0.58)%, P<0.001], si-TM7SF4组细胞迁移数[(53.51±4.18)个]和细胞侵袭数[(42.92±3.81)个]均低于si-NC组[分别为(85.26±4.99)个和(67.93±4.64)个, 均P<0.001]。si-TM7SF4组T24细胞中TM7SF4、cyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均低于si-NC组(均P<0.001), p21蛋白表达水平高于si-NC组(P<0.001)。CAS+pcDNA-TM7SF4组T24细胞增殖抑制率[(21.45±2.46)%]低于CAS+pcDNA组[(64.06±4.49)%, P<0.001], CAS+pcDNA-TM7SF4组细胞迁移数[(75.66±6.57)个]和侵袭数[(59.35±5.40)个]均高于CAS+pcDNA组[分别为(40.43±3.85)个和(30.25±3.32)个, 均P<0.001]。CAS+pcDNA-TM7SF4组T24细胞中TM7SF4、cyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平均高于CAS+pcDNA组(均P<0.001), p21蛋白表达水平低于CAS+pcDNA组(P<0.001)。结论 CAS可能通过抑制TM7SF4表达抑制膀胱癌T24细胞增殖、迁移和侵袭。

关键词：膀胱肿瘤紫花牡荆素 7次跨膜超蛋白家族成员4 增殖迁移侵袭

骨髓间充质干细胞及其来源的微泡在慢性肾衰竭中的修复机制

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中国免疫学杂志 2019年第4期35卷 398-403,408页

作者：秦军建邢艳芳莫江彬刘筱萍侯铁奇广州医科大学附属第三医院广州510150 暨南大学附属第一医院广州510630

目的:探讨骨髓间充质干细胞及其来源的微泡制备方法及在慢性肾衰竭中的修复机制,为慢性肾衰竭治疗提供方法。方法:①骨髓间充质干细胞制备。选择2只SD大鼠,取大鼠胫骨、股骨髓,利用密度梯度离心法完成单一核细胞分离,采用贴壁方法完成... 详细信息

目的:探讨骨髓间充质干细胞及其来源的微泡制备方法及在慢性肾衰竭中的修复机制,为慢性肾衰竭治疗提供方法。方法:①骨髓间充质干细胞制备。选择2只SD大鼠,取大鼠胫骨、股骨髓,利用密度梯度离心法完成单一核细胞分离,采用贴壁方法完成细胞的培养,采用流式细胞仪制备细胞表面特异性抗原,完成细胞的鉴定。②慢性肾衰竭模型制备及处理方法。选择2015年5月～2016年3月医院实验室进行试验的SD大鼠40只,取10只大鼠设为空白对照组,30只大鼠采用肾切除六分之五合并高盐饮食三个月方法建立大鼠慢性肾衰竭模型,随机数字法分为阳性对照组(n=10)、干细胞组(n=10)及微泡干预组(n=10)。阳性对照组建模成功后不采取任何措施处理,干细胞组建模成功后采用移植制备的骨髓间充质干细胞进行治疗,微泡干预组移植骨髓间充质干细胞后采用超声微泡辐照,比较不同组大鼠慢性肾衰竭修复效果。结果:①细胞换液一次细胞纯化呈梭状、纺锤状,以旋涡方式生长,细胞贴壁后生长迅速,细胞传代一次需要3 d,经过三代培养后细胞数量相对较多;②流式细胞仪测定结果表明:对照组细胞表面CD29几乎不表达,而MSC细胞表面CD29阳性率为91. 54%,符合骨髓间充质细胞表面特征;③Western blot法结果表明:HGF蛋白在4组相对分子量为82 000部位存在特异性条带,而EGF蛋白则在4组相对分子量为5 500部位存在特异性条带;④微泡干预组TNF-α水平低于干细胞组与阳性对照组(P<0. 05),微泡干预组细胞黏附分子1水平高于干细胞组与阳性对照组(P<0. 05);⑤阳性对照组建模后未经任何处理,肾脏损伤明显,存在大量炎性细胞;空白对照组未参与建模,肾脏组织完整,未见肾脏组织损伤,干细胞组修复30 d后肾脏损伤缓解,仍存在少许炎性细胞,微泡干预组修复后30 d肾脏组织损伤改善,未见炎性细胞。结论:采用全骨髓法能分离培养骨髓间充质干细胞,将频率为1 MHz、强度1. 0 W/cm2脉冲超声辐照微泡用于慢性肾衰竭大鼠骨髓间充质干细胞修复中能抑制炎性反应。

关键词：骨髓间充质干细胞慢性肾衰竭脉冲超声辐照贴壁方法密度梯度离心法流式细胞仪高盐饮食

胃癌侵袭转移中的胃癌干细胞鉴定价值及其分子机制

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中华普通外科杂志 2020年第5期35卷 401-404页

作者：徐勇超黄涛唐礼恭李星任莹坤侯铁奇河南省肿瘤医院普外科郑州450008 新乡医学院第三附属医院普外科河南省453000

目的探究胃癌侵袭转移中的胃癌干细胞鉴定价值及其分子机制.方法采用成球培养法将胃癌干细胞成功分离或者富集,鉴定其生物学特性,分析胃癌干细胞在多药耐药、侵袭转移中的作用,通过基因芯片对可能参与胃癌干细胞生物学行为的重要分子和... 详细信息

目的探究胃癌侵袭转移中的胃癌干细胞鉴定价值及其分子机制.方法采用成球培养法将胃癌干细胞成功分离或者富集,鉴定其生物学特性,分析胃癌干细胞在多药耐药、侵袭转移中的作用,通过基因芯片对可能参与胃癌干细胞生物学行为的重要分子和信号通路进行筛选,发现炭疽热毒素受体2(ANTXR2)在胃癌细胞侵袭转移、成球、成瘤中发挥重要作用,同时分析其分子机制.结果SGC7901、MGC803细胞球细胞在Sox2和Bmi1表达上明显比单层培养细胞高,为15.39±3.23;SGC7901、MGC803细胞球细胞在Oct4表达上明显比单层培养细胞高,为4.19±***7901-SC细胞中干性相关基因Bmi1、Sox2和Oct4表达水平分别为(3.29±0.52)、(3.12±0.49)、(2.58±0.35),高于SGC7901-MN细胞的(1.41±0.39)、(2.04±0.33)、(1.39±0.32),差异均有统计学意义(t=5.392、7.316、6.449,均P<0.05).在原代细胞XN0422-SC和SGC7901-SC细胞中miR-638呈现高表达(0.69±0.11),miR-181b、miR-181a呈现低表达(0.12±0.05)、(0.15±0.07).SGC7901-SC细胞中ANTXR2的miRNA表达水平明显高于SGC7901-MN细胞,差异有统计学意义(t=6.216,P<0.05).SGC7901-SC中ANTXR2阳性细胞增加比例达到85.48%,而在SGC7901中为4.98%.受PLVT713作用,胃癌细胞XN0422和SGC7901的ANTXR2蛋白表达水平下降.结论ANTXR2通过激活Src/ERk信号通路发挥调控作用.

关键词：胃肿瘤肿瘤干细胞测定肿瘤侵润肿瘤转移

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成人鼻腔呼吸黏膜内间充质干细胞的分化特征及其多向诱导分化潜能研究

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中国耳鼻咽喉颅底外科杂志 2019年第4期25卷 412-418页

作者：郭照萌侯铁奇深圳市龙岗区耳鼻咽喉医院广东深圳518000 暨南大学附属第一医院耳鼻咽喉科广东广州510630

目的研究成人鼻腔呼吸黏膜内间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分化特征及其多向诱导分化潜能。方法取材及细胞外培养成人鼻腔呼吸黏膜,鼻黏膜组织切片及MSCs免疫荧光染色(体外培养),鼻黏膜MSCs向成骨细胞诱导分化及向神经... 详细信息

目的研究成人鼻腔呼吸黏膜内间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的分化特征及其多向诱导分化潜能。方法取材及细胞外培养成人鼻腔呼吸黏膜,鼻黏膜组织切片及MSCs免疫荧光染色(体外培养),鼻黏膜MSCs向成骨细胞诱导分化及向神经细胞诱导分化。结果Vimentin抗体及Nestin抗体免疫荧光染色成人下鼻甲黏膜冷冻切片显示,双标记的阳性细胞为卵圆形或圆形,在鼻黏膜固有层中广泛分布。免疫荧光染色结果显示干细胞标志蛋白Sall4、CD133、Nestin、Vimentin受传代培养的MSCs表达。钙结节的茜素红染色结果:向成骨细胞诱导培养鼻黏膜MSCs 2周后,茜素红染色显示有大量红色钙结节存在于细胞表面,没有显著钙结节存在于未经诱导的MSCs表面,只有少量茜素红着色;碱性磷酸酶染色结果:碱性磷酸酶染色在向成骨细胞诱导培养鼻黏膜MSCs2周后呈紫蓝色,未经诱导的MSCs具有极浅的染色。用神经诱导培养液进行2周的诱导后,细胞向神经细胞样显著分化,可见大部分细胞呈BM88与NF-200免疫染色阳性,细胞将多根细长突起发出并相互连接,对照组细胞具有极弱的荧光染色,为长梭形。结论成人鼻腔呼吸黏膜内MSCs广泛存在,具有多向诱导分化潜能,在对骨与软组织损伤进行自体移植修复的过程中可以作为种子细胞得到有效应用,期待临床进一步验证。

关键词：鼻腔呼吸黏膜成人内间充质干细胞分化特征多向诱导分化潜能

富血小板血浆-琼脂凝胶修复兔关节软骨缺损的实验研究

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中国骨与关节杂志 2019年第11期8卷 862-867页

作者：吴辉郭明岗李亮罗旭伟侯铁奇南华大学附属第一医院骨外科

目的探讨基于富血小板血浆-琼脂糖凝胶支架制备方法、理化性能及在促进软骨缺损中的修复效果。方法(1)支架制备。购置7~9个月龄成年新西兰大白兔30只,10只用于软骨细胞的分离、培养,制备富血小板血浆,接种在琼脂糖凝胶及富血小板血浆中... 详细信息

目的探讨基于富血小板血浆-琼脂糖凝胶支架制备方法、理化性能及在促进软骨缺损中的修复效果。方法(1)支架制备。购置7~9个月龄成年新西兰大白兔30只,10只用于软骨细胞的分离、培养,制备富血小板血浆,接种在琼脂糖凝胶及富血小板血浆中,制备琼脂糖凝胶支架及富血小板血浆-琼脂糖凝胶支架,测定支架的理化性能;(2)取剩余20只成年新西兰大白兔,建立股骨远端关节面骨软骨缺损模型,随机分为琼脂糖凝胶支架组(n=10)和复合支架组(n=10)。琼脂糖凝胶支架组采用琼脂糖凝胶支架进行修复,复合支架组采用富血小板血浆-琼脂糖凝胶支架修复,比较两组修复效果。结果两组实验细胞从第1~21天保持增长状态,细胞在两种支架上起初OD值差异无统计学意义(P>0.05);细胞培养7~21天细胞在复合支架组上增殖率,高于琼脂糖凝胶支架组(P<0.05);复合支架组在4周及8周支架中GAG、胶原及DNA含量,高于琼脂糖凝胶支架组(P<0.05);复合支架组修复后4周模型缺损部位得到愈合;修复后8周缺损部位修复,新生组织部位与正常组织无明显界限,光泽;琼脂糖凝胶支架组修复后4周缺损部位明显,但是缺损部位较小;修复后8周缺损部位愈合,但是与正常组织界限明显;复合支架组修复后4周支架部分降解,可见残余材料,与软骨下骨间间隙消失;修复后8周支架完全降解,高度与正常软骨组织一致,软骨下骨链接紧密,多以透明软骨细胞为主。琼脂糖凝胶支架组修复后4周支架开始降解,与周围软骨结合较好,但是软骨下骨存在较大间隙;修复后8周缺损部位得到修复,但是存在明显凹陷,无光泽。结论富血小板血浆-琼脂糖凝胶支架能促进缺损部位修复。

关键词：富血小板血浆琼脂糖凝胶支架股骨远端关节面骨软骨缺损修复效果软骨细胞