骨髓间充质干细胞对视网膜色素变性大鼠视网膜的修复作用

作     者：李鑫 洪萌 侯铁奇 LI Xin;HONG Meng;HOU Tieqi

作者机构：新乡市中心医院眼科河南新乡453000 河南大学第一附属医院眼科河南开封475000 中山大学附属第三医院眼科中心广东广州510630 

出 版 物：《新乡医学院学报》 (Journal of Xinxiang Medical University)

年 卷 期：2021年第38卷第6期

页      面：511-515页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：开封市科技发展计划项目(编号:1903065) 

主　　题：骨髓间充质干细胞 视网膜色素变性 视网膜修复 

摘      要：目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的分离制备方法及其对视网膜色素变性(RP)大鼠视网膜的修复作用。方法选取Sprague-Dawley大鼠2只,采用贴壁法分离获取BMSC,采用生长曲线、流式细胞术及细胞形态观察鉴定BMSC,并制备BMSC悬液。将45只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、RP组和BMSC组,每组15只。对照组大鼠正常饲养,不制备RP大鼠模型。RP组和BMSC组大鼠采用碘酸钠(NaIO 3)法建立RP大鼠模型。建模成功后,RP组大鼠局部视网膜下注射0.15 mL生理盐水,BMSC组大鼠局部视网膜下注射BMSC悬液0.15 mL(细胞密度为1×10^(9)L^(-1)),每日1次,连续注射7 d;对照组大鼠不采取任何干预措施。分别于造模前、造模后及干预后1个月检测3组大鼠血清脑源性神经营养因子(BDNF)、白细胞介素-10(IL-10)水平;干预后1个月,采用断颈法处死大鼠,取大鼠视网膜组织,苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠视网膜病变部位组织形态。结果倒置显微镜观察显示,制备的BMSC培养2 h后开始贴壁生长,培养2 d后伸出伪足,且长短不一,培养4 d后快速增长,细胞开始集落排列,细胞质丰富;细胞传代后分布相对均匀,形态纤长,细胞排列一致,呈旋涡或放射状。细胞生长曲线结果显示,BMSC接种第1~2天为潜伏期,细胞生长相对缓慢;BMSC接种第3~5天为对数生长期,细胞生长迅速。第3代大鼠BMSC流式细胞术检测显示,CD45^(+)、CD29^(+)、CD44^(+)细胞率分别为1.33%、79.95%、81.49%。造模前3组大鼠血清BDNF、IL-10水平比较差异无统计学意义(P0.05),造模后RP组和BMSC组大鼠血清BDNF、IL-10水平显著低于对照组(P0.05)。HE染色显示,对照组大鼠视网膜细胞排列整齐,细胞完好;RP组大鼠视网膜细胞排列紊乱,存在许多细胞碎片;与RP组比较,BMSC组大鼠视网膜细胞排列相对整齐,细胞碎片显著减少。结论BMSC可以显著提高RP大鼠血清BDNF、IL-10水平,促进受损视网膜修复。