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高产ε-聚赖氨酸白色链霉菌的诱变育种与发酵优化

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高产ε-聚赖氨酸白色链霉菌的诱变育种与发酵优化

作者：余明洁江南大学

学位级别：硕士

ε-聚赖氨酸(ε-polylysine,ε-PL)是80年代由日本首先发现由微生物发酵产生的一种新型食品抑菌剂,其化学组成是由人体必需氨基酸L-赖氨酸构成的多肽,它经消化后又可变成单一的赖氨酸而成为人体营养的强化剂,已作为GRAS物质通过了美国FD... 详细信息

ε-聚赖氨酸(ε-polylysine,ε-PL)是80年代由日本首先发现由微生物发酵产生的一种新型食品抑菌剂,其化学组成是由人体必需氨基酸L-赖氨酸构成的多肽,它经消化后又可变成单一的赖氨酸而成为人体营养的强化剂,已作为GRAS物质通过了美国FDA认证,CAS登记号为28211-04-3,标志着ε-聚赖氨酸已被国际标准所认可。故聚赖氨酸作为食品防腐剂,具有无毒副作用,安全性高的特点。本课题对实验室保存的一株具有ε-聚赖氨酸生产能力菌株白色链霉菌Streptomyces albulus SA进行研究,通过对其分泌产物与带电染料的静电作用及Dragendorff试剂反应和产物的氨基酸组成分析可以得出,ε-聚赖氨酸带正电荷,是一种生物碱物质并且为L-赖氨酸的聚合物。通过以上实验,为筛选和验证具有ε-聚赖氨酸生产能力的菌株提供了简便而快捷的方法。对白色链霉菌Streptomyces albulus SA进行诱变选育,首先研究了紫外线复合氯化锂诱变中不同的照射剂量对细胞存活率的影响得到了致死率曲线,根据遗传育种的经验,正向突变较多发生在偏低剂量中,确定了以25 s作为最适紫外诱变剂量。初筛采用打孔琼脂柱抑菌圈法可以大批量并快速选出抑菌效果显著的菌株,经过复筛得到一株产量为1.33 g/L的突变株UL2-7,产量提高了27.9%。以紫外诱变获得的突变株UL2-7作为出发菌株,进行亚硝酸诱变筛选AEC抗性菌株,根据诱变剂量对细胞存活率的影响得到了致死率曲线,确定20 min的处理时间作为最适亚硝酸诱变剂量。通过复筛得到高产菌株UN2-71,ε-聚赖氨酸产量为1.64 g/L,提高了57.7%。对诱变得到的菌株UN2-71进行发酵稳定性能研究,经过5次传代实验结果表明突变株性状稳定,并对白色链霉菌UN2-71的培养特性及生理生化特性进行了观察。对不同碳源和氮源对ε-聚赖氨酸产量的影响进行了研究,得到可溶性淀粉是最佳碳源,而(NH)SO和酵母提取物的组合是最佳氮源。在碳源、氮源优化的基础上,进行摇瓶发酵培养基的优化,对培养基八种成分可溶性淀粉、硫酸铵、酵母提取物、K2HPO4、KHPO、MgSO·7HO、ZnSO·7HO、FeSO·7HO进行了Plackett-Burman筛选试验,得到可溶性淀粉、硫酸铵和酵母提取物为显著影响因素,对这三因子进行三水平的Box-Behnken试验,通过RSM分析得到优化模型,优化后的培养基组成为:可溶性淀粉40 g、硫酸铵8 g、酵母提取物6.4557 g、K2HPO4 0.8 g、KHPO4 1.36 g、MgSO·7HO 0.75 g、ZnSO·7HO 0.06 g、FeSO·7HO 0.045 g。在最优条件下,ε-聚赖氨酸预测产量达到2.54 g/L,验证实验结果为2.48 g/L。

关键词： ε-聚赖氨酸白色链霉菌生物防腐剂诱变发酵优化

地质聚合物及其原位合成沸石去除水溶液中氟离子研究

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环境科学与技术 2022年第7期45卷 145-151页

作者：黄毅黄丽萍余明洁湖南城市学院材料与化学工程学院湖南益阳413002

以NaOH和KOH混合碱液作激发剂,偏高岭土为固体原料,利用相同的工艺,分别制得地质聚合物和沸石样品,采用X射线衍射、扫描电子显微镜、比表面积和孔径分布分析对样品的物相和结构进行了表征,并将其用于水溶液中氟离子的吸附处理,探讨了其... 详细信息

以NaOH和KOH混合碱液作激发剂,偏高岭土为固体原料,利用相同的工艺,分别制得地质聚合物和沸石样品,采用X射线衍射、扫描电子显微镜、比表面积和孔径分布分析对样品的物相和结构进行了表征,并将其用于水溶液中氟离子的吸附处理,探讨了其吸附去除氟离子的效率和特性。研究结果表明,沸石样品主要以I型钾沸石和F型钾沸石为主,比表面积为74.4 m^(2)/g,远高于地质聚合物的41.1 m^(2)/g。地质聚合物及其原位合成沸石对水溶液中氟离子都具有较好的吸附性能。在pH<4,温度为30℃条件下,地质聚合物样品最大氟离子吸附容量可达236.97 mg/g,沸石样品的吸附容量略大于地质聚合物。地质聚合物样品对氟离子的吸附等温线符合Langmuir模型,而沸石更符合Freundlich模型;两者的吸附动力学可用准二级动力学模型描述,属化学吸附过程。

关键词：地质聚合物原位合成沸石吸附氟离子

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论学生数学问题解决中的元认知训练

吉林省教育学院学报 2006年第4期22卷 81-82页

作者：余明洁浙江师范大学数理学院浙江金华321004

元认知训练成为提高教学质量的有效手段。而数学中的问题解决是一个需在元认知指导下的复杂的思维过程,本文就元认知训练提出4方面的实践操作:1．丰富元认知知识;2．教师的元认知解题示范;3．设计元认知监控单;4．大声思维。

关键词：元认知元认知监控大声思维

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对钢琴曲《二泉映月》曲式结构的民族性分析

教育戏剧在小学心理健康教育中的实施逻辑及路径

文艺生活·下旬刊 2018年第11期 85-86页

作者：余明洁四川师范大学舞蹈学院四川成都610101

钢琴曲《二泉映月》是储望华先生根据同名二胡作品(华彦钧著)改编而成.此曲深刻反映了二胡版本原作者在旧社会饱尝的种种辛酸和他坚忍不拔的性格,曲中丰富复杂的曲式及调式特性能充分展现作品的民族性等特点,是一篇具有探索意义的文章.

关键词：《二泉映月》曲式调式民族性

来源：评论

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中文科技期刊数据库（全文版）教育科学 2023年第3期 137-140页

作者：余明洁杭州市钱江新城实验小学浙江杭州310020

小学心理健康教育对于学生的身心健康成长意义重大,必须通过有效的教学方法来实现教学目的。教育戏剧是戏剧和教育的有效载体融合,通过教育元素在戏剧表演中的充分挖掘和运用,能够从教学效果层面充分激活小学心理健康教育的潜力,引导学... 详细信息

小学心理健康教育对于学生的身心健康成长意义重大,必须通过有效的教学方法来实现教学目的。教育戏剧是戏剧和教育的有效载体融合,通过教育元素在戏剧表演中的充分挖掘和运用,能够从教学效果层面充分激活小学心理健康教育的潜力,引导学生在精心设计的内容表演中丰富自己的人生感悟,增强生活中的抗挫折能力,因此,小学心理健康教育中应该引入教育戏剧,并从引入时机、导入环节、内容选择等方面,做好其实施路径的安排,实现课程教学效应的最大化。

关键词：小学教育教育戏剧载体融合实施路径

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抓住特点，清楚介绍

作文成功之路 2023年第24期 27-28页

作者：余明洁江苏省宝应县宝楠学校

“猜猜他是谁”是统编版小学语文教材三年级上册第一单元的写作练习，主要学习目标是抓住人物特点介绍人物，通过外貌描写等使人物形象更加清晰。可以运用思维导图安排文章结构，确定文章写作内容。一、认真观察，确定对象在“猜猜他是...

“猜猜他是谁”是统编版小学语文教材三年级上册第一单元的写作练习，主要学习目标是抓住人物特点介绍人物，通过外貌描写等使人物形象更加清晰。可以运用思维导图安排文章结构，确定文章写作内容。一、认真观察，确定对象在“猜猜他是谁”的写作练习中，应先确定写作对象，然后认真观察，对写作对象进行全方位多角度分析，为写作打好基础。

关键词：

佛山市多层次医疗保障体系研究——以苯丙酮尿症为例

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中国医疗保险 2023年第7期 63-73页

作者：马路宁余明洁靳娟林楚芝向国春中山大学附属第一医院广州510080 广东药科大学广州510310 南方医科大学广州510515

目的:了解佛山市苯丙酮尿症(phenylketonuria)患者医疗保障及疾病负担情况,探讨建立完善佛山市苯丙酮尿症多层次医疗保障体系的具体路径。方法:通过政策文献研究、问卷调查、专题访谈、数据收集和比较分析等方法,总结国内外相关经验,全... 详细信息

目的:了解佛山市苯丙酮尿症(phenylketonuria)患者医疗保障及疾病负担情况,探讨建立完善佛山市苯丙酮尿症多层次医疗保障体系的具体路径。方法:通过政策文献研究、问卷调查、专题访谈、数据收集和比较分析等方法,总结国内外相关经验,全面了解佛山市苯丙酮尿症实际保障情况,模拟测算提升苯丙酮尿症患者保障水平后医保基金可负担情况。结果:佛山市苯丙酮尿症患者疾病负担较重,其特医食品可及性较低;提高特医食品保障水平,对作为主要保障来源的佛山市妇幼保健院新筛专项基金影响较大,保障可持续性不足;将特医食品纳入普惠型商业补充医疗保险保障范围,补充医疗保险基金可承受;将苯丙酮尿症纳入门诊特定病种保障范围,基本医疗保险基金可承受。结论:可以将治疗苯丙酮尿症的特医食品纳入普惠型商业补充医疗保险保障范围,将苯丙酮尿症纳入基本医疗保险门诊特殊病种管理,适当放宽苯丙酮尿症医疗救助认定条件;加强多部门合作,充分发挥慈善捐赠和社会救助保障作用,建立苯丙酮尿症多层次保障体系,提高佛山市苯丙酮尿症患者的保障水平。

关键词：苯丙酮尿症多层次医疗保障特医食品

冷冻及微波复热条件对预油炸面拖食品脆性的影响

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食品工业科技 2008年第9期29卷 94-97页

作者：陈卫范大明赵建新余明洁潘薇娜张灏江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122 爱芬食品(北京)有限公司北京100027

利用微波工作站实时测定预油炸冷冻面拖食品在冷冻和微波复热过程中内部温度的变化,研究了不同冷冻方式、冷冻速率、冻藏温度及微波复热参数条件对产品脆性的影响。对微波预油炸面拖食品微波复热过程中功率和时间对产品脆性的影响也进... 详细信息

利用微波工作站实时测定预油炸冷冻面拖食品在冷冻和微波复热过程中内部温度的变化,研究了不同冷冻方式、冷冻速率、冻藏温度及微波复热参数条件对产品脆性的影响。对微波预油炸面拖食品微波复热过程中功率和时间对产品脆性的影响也进行了探讨。结果表明,冷冻速率和冷藏温度与产品脆性存在正相关,相同温度下强制通风冷冻的产品脆性高,强制通风样品的超微结构较自然降温样品平整致密,水分阻隔性能力强。

关键词：脆性面拖食品冷冻条件冷藏条件微波加热

高产ε-聚赖氨酸白色链霉菌的复合诱变选育研究

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食品工业科技 2008年第7期29卷 99-101,104页

作者：余明洁田丰伟范大明赵建新陈卫张灏江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122

为了进一步提高ε-聚赖氨酸的产量,本实验以白色链霉菌SA为出发菌株,采取紫外照射复合氯化锂(15W,25s,0.5%LiCl)诱变选育及0.025mol/L亚硝酸诱变选育,得到一株具有遗传标记AEC的抗性突变高产菌株UN2-71,在液体摇瓶发酵培养基中,ε-聚赖... 详细信息

为了进一步提高ε-聚赖氨酸的产量,本实验以白色链霉菌SA为出发菌株,采取紫外照射复合氯化锂(15W,25s,0.5%LiCl)诱变选育及0.025mol/L亚硝酸诱变选育,得到一株具有遗传标记AEC的抗性突变高产菌株UN2-71,在液体摇瓶发酵培养基中,ε-聚赖氨酸产量达到1.64g/L,较出发菌株提高57.7%。

关键词： ε-聚赖氨酸白色链霉菌诱变