检索结果-南通市图书馆

宜春学院学报 2024年第3期46卷 45-48,56页

作者：肖勋立黄聪聪武利雪胡慧怡何学珍胡立业喻理德井冈山大学附属医院药剂科江西吉安343000 江西中医药大学药学院江西南昌330004

目的:探索一种高效、稳定的小鼠原代肝细胞分离方法,并延长其体外培养的时间。方法:取成年雄性C57BL/6小鼠,以含双抗的D-Hanks灌流液经肝门静脉充分灌注肝脏,然后以0.2 mg/mL的Ⅳ型胶原酶灌注消化,接着过滤、离心、洗涤,获得小鼠原代肝... 详细信息

目的:探索一种高效、稳定的小鼠原代肝细胞分离方法,并延长其体外培养的时间。方法:取成年雄性C57BL/6小鼠,以含双抗的D-Hanks灌流液经肝门静脉充分灌注肝脏,然后以0.2 mg/mL的Ⅳ型胶原酶灌注消化,接着过滤、离心、洗涤,获得小鼠原代肝细胞。通过台盼蓝染色检验小鼠原代肝细胞活率,利用倒置显微镜观察肝细胞的形态变化,糖原染色鉴定细胞纯度,添加ITS-X和HGF细胞因子延长小鼠原代肝细胞的体外培养时间。结果:平均每只成年小鼠肝脏可提取获得原代肝细胞约2×107个,台盼蓝染色显示细胞活率均超过95%,糖原染色结果表明此方法获得的原代肝细胞纯度高于95%,通过添加HGF和ITS-X两种细胞因子能够有效地延长肝细胞形态的体外维持时间。结论:本实验在原有小鼠原代肝细胞两步灌流分离法和培养的基础上,经过优化,成功建立了一种高效、稳定的小鼠原代肝细胞分离和培养方法,为肝脏的体外研究提供了技术保障。

关键词：原代小鼠肝细胞两步灌流分离法体外培养

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Efp介导14-3-3η泛素化降解影响心肌细胞IPC保护作用

Efp介导14-3-3η泛素化降解影响心肌细胞IPC保护作用

引用

作者：何学珍南昌大学

学位级别：硕士

目的:心肌缺血预适应(Ischemic preconditioning,IPC)指的是长时间缺血前,先对心肌进行一至多次短暂性缺血,每次缺血后紧接着进行短暂性再灌注。IPC可提高心肌抵抗长时间缺血损伤的能力。本实验旨在探讨心肌细胞IPC作用中,雌激素效应环... 详细信息

目的:心肌缺血预适应(Ischemic preconditioning,IPC)指的是长时间缺血前,先对心肌进行一至多次短暂性缺血,每次缺血后紧接着进行短暂性再灌注。IPC可提高心肌抵抗长时间缺血损伤的能力。本实验旨在探讨心肌细胞IPC作用中,雌激素效应环指蛋白(Estrogen responsive finger protein,Efp)是否与14-3-3η存在相互作用;上调或下调Efp表达水平对14-3-3η表达水平及其泛素化状态的影响,以及对IPC保护作用的影响。期许对IPC保护作用机制有进一步了解。方法:本实验采用H9c2心肌样细胞,构建缺氧预适应(Anoxic preconditioning,APC)模型、缺氧复氧(Anoxic/Reoxygenation,A/R)损伤模型。采用AD-Efp、AD-EfpRNAi重组腺病毒载体感染H9c2细胞,上调、下调Efp表达水平;Efp、14-3-3η和ubiquitin(ub)蛋白表达水平采用免疫印迹(Western blotting)法检测;免疫共沉淀(Co-ip)法检测Efp与14-3-3η是否存在相互作用,及上调或下调Efp表达水平对14-3-3η泛素化程度的影响;MTS法检测细胞存活率;分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性;流式细胞仪检测细胞内活性氧水平(ROS)、线粒体膜电位稳定性(Δψm)及细胞凋亡水平,用于评价上调或下调Efp表达水平对心肌细胞APC保护作用的影响。结果:***组、A/R模型预处理组、APC模型预处理组H9c2心肌样细胞蛋白裂解液与Efp或14-3-3η一抗孵育后可以检测到14-3-3η或Efp蛋白印迹。2.与APC组比较,APC+AD-Efp组14-3-3η蛋白表达水平明显下降(p<0.01),APC+AD-Efp RNAi组14-3-3η蛋白表达水平明显上升(p<0.01);与APC+AD-Efp组,加入蛋白酶体抑制剂MG-132显著上调14-3-3η蛋白表达水平(p<0.01)。3.与APC+MG-132组比较,APC+AD-Efp+MG-132组14-3-3η蛋白泛素化程度显著加强。4.与APC组比较,APC+AD-Efp组细胞存活率显著下降,LDH活性显著上调,ROS生成量增多,线粒体膜电位(Δψm)稳定性显著下降,细胞凋亡水平明显上升(p<0.01);APC+AD-EfpRNAi组细胞存活率显著上升,LDH活性显著下调,ROS生成量减少,Δψm稳定性显著上升,细胞凋亡水平明显下降(p<0.01)。结论:在H9c2心肌样细胞中,Efp与14-3-3η存在相互作用。在H9c2心肌样细胞APC保护作用中,Efp介导14-3-3η发生泛素化及降解;上调Efp表达水平APC保护作用减弱,下调Efp表达水平APC保护作用增强,此作用结果可能与Efp对14-3-3η蛋白表达水平的影响有关。

关键词：雌激素效应环指蛋白(Efp) 缺氧预适应(APC) 14-3-3η 泛素化 H9c2心肌样细胞

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

“调皮王”得到了奖状

引用

四川教育 1984年第Z1期 76-77页

作者：何学珍彭山县城关二小

人们说,每个学生都有优点缺点,可我接受一个新班,遇到一个全校闻名的“调皮王”学生小贾,在他身上总找不到有什么优点.失望之余,我翻开《教育学》.“有的学生的缺点往往和他的优点联系着。如在班上常常会遇到一些顽皮的学生,他们精力充... 详细信息

人们说,每个学生都有优点缺点,可我接受一个新班,遇到一个全校闻名的“调皮王”学生小贾,在他身上总找不到有什么优点.失望之余,我翻开《教育学》.“有的学生的缺点往往和他的优点联系着。如在班上常常会遇到一些顽皮的学生,他们精力充沛,能力较强,在同学中还有一定的‘威信’.”这几句话启示了我。我分析小贾的表现,感到他爱出坏点

关键词：《教育学》

来源：

同方期刊数据库评论

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

CDK4/6抑制剂联合内分泌药物治疗HR阳性/HER2阴性乳腺癌疗效与安全性的Meta分析

引用

中国药房 2023年第22期34卷 2787-2792页

作者：黄聪聪彭靖肖勋立何学珍井冈山大学附属医院药剂科江西吉安343000

目的评价4种周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂(达尔西利、阿贝西利、瑞波西利、哌柏西利)联合内分泌药物治疗激素受体(HR)阳性/人表皮生长因子受体2(HER2)阴性乳腺癌的疗效和安全性。方法计算机检索PubMed、the Cochrane Library... 详细信息

目的评价4种周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂(达尔西利、阿贝西利、瑞波西利、哌柏西利)联合内分泌药物治疗激素受体(HR)阳性/人表皮生长因子受体2(HER2)阴性乳腺癌的疗效和安全性。方法计算机检索PubMed、the Cochrane Library、Web of Science、Embase、中国知网、万方数据、维普网,收集CDK4/6抑制剂联合内分泌药物(试验组)对比单用内分泌药物或联用安慰剂(对照组)的随机对照试验(RCT),检索时限为建库至2023年4月。筛选文献、数据提取和质量评价后,采用RevMan 5.4.1软件进行Meta分析。结果共纳入22篇文献,涉及15项RCT,合计18 574例患者。Meta分析结果显示,试验组患者的无进展生存期[HR=0.77,95%CI(0.74,0.79),P<0.000 01]、总生存期[HR=0.91,95%CI(0.87,0.94),P<0.000 01]、客观缓解率[OR=1.71,95%CI(1.51,1.93),P<0.000 01]、临床获益率[OR=1.73,95%CI(1.52,1.95),P<0.000 01]均显著优于对照组。试验组患者的≥3级不良反应[OR=10.28,95%CI(6.97,15.17),P<0.000 01]、中性粒细胞减少[OR=65.09,95%CI(36.43,116.31),P<0.000 01]、白细胞减少[OR=22.90,95%CI(15.40,34.04),P<0.000 01]、贫血[OR=5.71,95%CI(4.51,7.22),P<0.000 01]、腹泻[OR=3.00,95%CI(1.19,7.51),P<0.05]、恶心[OR=1.99,95%CI(1.52,2.60),P<0.00001]发生率均显著高于对照组。结论CDK4/6抑制剂联合内分泌药物治疗HR阳性/HER2阴性乳腺癌的疗效显著,不良反应发生率较高,尤其是血液毒性反应。

关键词：周期蛋白依赖性激酶4/6抑制剂内分泌药物激素受体阳性/人表皮生长因子受体2阴性乳腺癌疗效安全性

来源：

维普期刊数据库博看期刊

同方期刊数据库评论