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产气荚膜梭菌选择性显色培养基的研制

卫生研究 2013年第4期42卷 656-659页

作者：王静陈萍李倩倩任常菲吉林农业大学食品科学与工程学院长春130118 吉林省产品质量监督检验院

目的通过筛选各种选择性成分添加至培养基中以快速筛选产气荚膜梭菌,研制产气荚膜梭菌选择性显色培养基。方法通过单因素试验评价促生长因子甘露醇、丙酮酸钠、硫酸镁对目标菌生长的促进作用,比较抗生素环丝氨酸、新霉素、多粘菌素和磺... 详细信息

目的通过筛选各种选择性成分添加至培养基中以快速筛选产气荚膜梭菌,研制产气荚膜梭菌选择性显色培养基。方法通过单因素试验评价促生长因子甘露醇、丙酮酸钠、硫酸镁对目标菌生长的促进作用,比较抗生素环丝氨酸、新霉素、多粘菌素和磺胺嘧啶对目标菌和非目标菌的抑制作用,比较显色剂5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸二钠盐(BCIP)、对硝基苯磷酸二钠(PNPP)、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷(X-Gal)、4-甲基伞形酮酰-β-D-吡喃糖苷(Mu-Gal)、邻硝基苯β-D-半乳吡喃糖苷(ONPG)对目标菌的显色效果,将酶促因子硫酸镁、硫酸钙、硫酸锰、硫酸锌与目标菌反应筛选最佳成分并确定其用量,制成产气荚膜梭菌选择性显色培养基。结果筛选出的培养基最佳成分促生长因子为丙酮酸钠,用量200mg,抗生素环丝氨酸0.5mg,显色剂为BCIP和Mu-Gal,用量均为6mg,酶促因子硫酸镁72mg,以上成分加入到100ml营养肉汤基础培养基中,制备的选择性培养基培养效果与TSC培养基、SPS培养基无差异。结论本实验所研制的选择性培养基可以用于产气荚膜梭菌的检测。

关键词：产气荚膜梭菌显色底物显色培养基

多重荧光定量PCR检测沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌

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卫生研究 2012年第2期41卷 256-259页

作者：陈萍魏琼史艳宇任常菲吉林农业大学食品科学与工程学院长春130118 吉林省产品质量监督检验院

目的基于SYBR Green I染料建立沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌的多重荧光定量PCR检测方法。方法针对沙门菌invA基因、志贺菌ipaH基因和virA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因和femA基因片段设计引物,根据Tm值的差异分析确定荧光定量PCR扩增... 详细信息

目的基于SYBR Green I染料建立沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌的多重荧光定量PCR检测方法。方法针对沙门菌invA基因、志贺菌ipaH基因和virA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因和femA基因片段设计引物,根据Tm值的差异分析确定荧光定量PCR扩增的靶基因和特异性引物,通过优化PCR反应体系,建立了用SYBR GreenⅠ多重荧光定量PCR熔解曲线来检测多种致病菌的方法。结果该方法检测的菌液灵敏度分别是沙门菌168 CFU/ml,志贺菌136CFU/ml,金黄色葡萄球菌1240CFU/ml,特异性强,整个过程只需要2h。结论该方法能快速、灵敏、特异检出沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌。

关键词：沙门菌志贺菌金黄色葡萄球菌多重荧光定量PCR

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不同磁珠对致病菌吸附性能的比较研究

卫生研究 2012年第2期41卷 293-297页

作者：李倩倩陈萍任常菲吉林农业大学食品科学与工程学院长春130118 吉林省产品质量技术监督检验院

目的通过对裸磁珠、单一抗体和混合抗体包被的免疫磁珠的吸附性能的比较,建立一种快速、同时富集多种致病菌的方法。方法通过沉淀法制备Fe3O4磁珠,对其进行表面修饰,用抗体进行偶联制备成免疫磁珠,比较不同磁珠对致病菌的吸附性能。结... 详细信息

目的通过对裸磁珠、单一抗体和混合抗体包被的免疫磁珠的吸附性能的比较,建立一种快速、同时富集多种致病菌的方法。方法通过沉淀法制备Fe3O4磁珠,对其进行表面修饰,用抗体进行偶联制备成免疫磁珠,比较不同磁珠对致病菌的吸附性能。结果通过化学合成和修饰的方法制备出裸磁珠和Fe3O4/SiO2的免疫磁珠。免疫磁珠对细菌的吸附率与裸磁珠比较差异显著(t=7.55,P<0.05),平均吸附率分别为96.62%和80.89%。通过洗涤优化,免疫磁珠对目标菌的吸附率从97.03%降到93.67%,对非目标菌的吸附率从53.33%降到16.67%;裸磁珠对目标菌和非目标菌的吸附率从81%降到13.33%;免疫磁珠对单一菌和混合菌的吸附性能无显著差异(P=0.427)。结论单一抗体和混合抗体包被的免疫磁珠能特异性富集目标菌,通过富集程序优化可以达到良好的吸附效果。

关键词：裸磁珠免疫磁珠吸附性能食源性致病菌

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不同生姜提取物对小鼠精子畸形的影响

毒理学杂志 2008年第5期22卷 381-382页

作者：沈雪王昊卢静王菲黄玉艾张存花任常菲吉林大学军需科技学院食品质量与安全系吉林长春130062 吉林省产品质量技术监督检验院

生姜为姜科植物姜的新鲜根茎，多年生草本宿根植物，属于药食两用的生物资源。生姜所含的成分复杂，目前已经发现的就有100多种，其中有姜精油、姜辣素、黄酮和姜酚等，还含有氨基酸、维生素及铁、铜、锰、锌、铬、镍、钴和锗等多种微... 详细信息

生姜为姜科植物姜的新鲜根茎，多年生草本宿根植物，属于药食两用的生物资源。生姜所含的成分复杂，目前已经发现的就有100多种，其中有姜精油、姜辣素、黄酮和姜酚等，还含有氨基酸、维生素及铁、铜、锰、锌、铬、镍、钴和锗等多种微量元素。生姜味辛性温，具有解表散寒、温中止呕及抗癌抗氧化之功效旧。被广泛应用于药品、功能食品以及保健品中。尤其是抗肿瘤的药理作用倍受人们关注。

关键词：生姜水提物生姜醇提物精子畸形

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实时荧光PCR方法检测食品中痕量荞麦成分

食品科学 2009年第20期30卷 312-315页

作者：史艳宇刘金华逄晓阳张晓惠任常菲吉林省产品质量监督检验院吉林长春130022 吉林出入境检验检疫局吉林长春130062

目的:建立一种快速、特异、灵敏的荞麦成分检测方法。方法:针对荞麦内转录间隔区ITS(internal transcribed spacer)和5.8SrRNA基因序列设计一对PCR引物及探针,建立实时荧光PCR检测方法;以同源性(27个荞麦属相关物种)及非同源性(食品中... 详细信息

目的:建立一种快速、特异、灵敏的荞麦成分检测方法。方法:针对荞麦内转录间隔区ITS(internal transcribed spacer)和5.8SrRNA基因序列设计一对PCR引物及探针,建立实时荧光PCR检测方法;以同源性(27个荞麦属相关物种)及非同源性(食品中常见的栽培型植物)参考植物物种作特异性检测;以50mg/kg小麦DNA作为稀释液对荞麦DNA进行梯度稀释,做灵敏度检测。结果:该方法能够有效对荞麦成分进行快速检测,具有较强的特异性,灵敏度较高(可达0.1μg/kg)并且小麦成分的存在对荞麦灵敏度检测没有影响。结论:该方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测食品中含有的痕量荞麦成分。

关键词：荞麦过敏原内转录间隔区ITS 荧光定量PCR 检测

雌二醇分子印迹聚合物的合成及其吸附性能研究

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中国兽药杂志 2011年第11期45卷 12-15页

作者：侯彦飞陈萍任常菲吉林农业大学食品科学与工程学院长春130118 吉林省产品质量监督检验院长春130022

采用表面分子印迹技术和溶胶-凝胶技术,以3-氨基丙基三乙氧基硅烷为功能单体,四乙氧基硅烷为交联剂,合成了以雌二醇为模板的分子印迹聚合物。研究了该聚合物的合成条件,并用平衡结合实验研究了该聚合物的识别性能。结果表明,在所研究的... 详细信息

采用表面分子印迹技术和溶胶-凝胶技术,以3-氨基丙基三乙氧基硅烷为功能单体,四乙氧基硅烷为交联剂,合成了以雌二醇为模板的分子印迹聚合物。研究了该聚合物的合成条件,并用平衡结合实验研究了该聚合物的识别性能。结果表明,在所研究的浓度范围内,雌二醇分子印迹聚合物的饱和吸附容量为6.689 mg/g,而非模板聚合物的饱和吸附容量为4.491 mg/g。二者相比,雌二醇分子印迹聚合物表现出很高的吸附容量。

关键词：雌二醇分子印迹聚合物合成

出血性大肠杆菌O157主要毒力因子单克隆抗体的制备

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中国人兽共患病学报 2009年第2期25卷 122-126页

作者：黄海燕陈萍陈亮任常菲李月红吉林农业大学食品工程学院长春130118 吉林省产品质量技术监督检验院长春130022

目的利用两种抗原制备针对出血性大肠杆菌EHECO157主要毒力因子的特异性单克隆抗体。方法分别用纯化融合蛋白Eae-Stx1/2B和EHECO157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)全菌免疫BALB/C小鼠,通过细胞融合和EHECO157标准株EDL933间接ELISA筛... 详细信息

目的利用两种抗原制备针对出血性大肠杆菌EHECO157主要毒力因子的特异性单克隆抗体。方法分别用纯化融合蛋白Eae-Stx1/2B和EHECO157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)全菌免疫BALB/C小鼠,通过细胞融合和EHECO157标准株EDL933间接ELISA筛选稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株,纯化抗体并鉴定。结果纯化融合蛋白免疫获得了2株单抗2H9和3B4,EHECO157Δler/stx(pBR322::stx1/2B::eae)免疫获得了1株单抗4H7。2H9、3B4和4H7亚类鉴定分别为lgG2b、lgM和lgM;纯化腹水ELISA效价分别为1∶1.28×105、1∶3.2×104、1∶6.4×104,亲和力常数分别为2.9×106、1.4×106、2.6×105。结论3株单克隆抗体均具有较高特异性,2H9效价和亲和力最高,可作为产志贺毒素EHECO157的检测抗体。

关键词：出血性大肠杆菌O157 主要毒力因子单克隆抗体

用于富集食源性致病菌的裸磁珠的制备及吸附条件优化

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农产食品科技 2011年第3期5卷 20-23页

作者：李倩倩陈萍任常菲吉林农业大学食品科学与工程学院长春130118 吉林省产品质量技术监督检验院长春130022

采用改良共沉淀法制备Fe3O4磁珠，以沙门氏菌、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌为实验菌，对裸磁珠的吸附条件进行优化并进行吸附性能研究。结果表明：50mg的自制裸磁珠37℃水浴40min对细菌有较好的吸附效果，对三种实验菌的吸附率达到97％以... 详细信息

采用改良共沉淀法制备Fe3O4磁珠，以沙门氏菌、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌为实验菌，对裸磁珠的吸附条件进行优化并进行吸附性能研究。结果表明：50mg的自制裸磁珠37℃水浴40min对细菌有较好的吸附效果，对三种实验菌的吸附率达到97％以上，食品基质对磁珠的吸附率有一定的影响，吸附率最低为52％。

关键词：磁珠吸附率食源性致病菌

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快速检测方法在食品微生物检测中的应用

现代食品 2019年第21期4卷 110-111页

作者：任常菲李滢倩王潇吉林省食品检验所

随着人们生活质量水平的不断提升,当前时代下,人们对于食品安全的防范意识也在不断增强,为了进一步提高食品的安全性能,保证人们的生产生活健康质量,需要对食品中的微生物进行安全高效的检测,微生物是影响食品质量的关键因素,所以通过... 详细信息

随着人们生活质量水平的不断提升,当前时代下,人们对于食品安全的防范意识也在不断增强,为了进一步提高食品的安全性能,保证人们的生产生活健康质量,需要对食品中的微生物进行安全高效的检测,微生物是影响食品质量的关键因素,所以通过对微生物的检测,可以有效预防食品变质,提升食品的安全性能。基于此,文章简要分析了快速检测方法在食品微生物检测中的应用。

关键词：快速检测方法食品微生物检测食品安全