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作者：亓旗北京中医药大学

学位级别：硕士

诃子是使君子科榄仁树属植物诃子Terminalia chebular Retz.及其变种绒毛诃子Terminalia chebula *** Kurt.的干燥成熟果实,在藏医蒙医药中应用十分广泛,有“藏药之王”之称。在中医中用于治疗久泻久痢、便虚脱肛、肺虚咳喘和咽痛喑哑... 详细信息

诃子是使君子科榄仁树属植物诃子Terminalia chebular Retz.及其变种绒毛诃子Terminalia chebula *** Kurt.的干燥成熟果实,在藏医蒙医药中应用十分广泛,有“藏药之王”之称。在中医中用于治疗久泻久痢、便虚脱肛、肺虚咳喘和咽痛喑哑之疾。在藏、蒙药中用于祛风(气)、火(胆)、痰、寒,并能行气活血,镇静解毒。诃子含有多酚类,黄酮类、多糖类、萜类和甾醇类等多种化学成分,其中含量最多的是鞣质类,以可水解类鞣质为主。诃子具有明显的抗氧化活性,可抑制多种癌细胞的增殖,预防并治疗大鼠肾结石,增强小鼠非特异性免疫功能,诃子有广泛的抑菌、抗病毒、保肝、抗炎、降血糖,调血脂、镇咳和止痛等多种药理作用。但大剂量使用诃子醇提物或水煎液时,均会对小鼠产生肝损伤。鞣质具有较强的抗氧化能力,可以抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长。本论文建立了诃子鞣质部位提取纯化工艺,诃子药材和鞣质部位质量控制方法,为诃子质量控制、药效研究和资源开发提供依据。1诃子鞣质部位制备工艺研究建立了诃子鞣质部位的提取工艺。单因素考察不同粒度对诃子中总鞣质成分提取率的影响,并采用L9(34)正交试验,以总鞣质和4种指标性成分(没食子酸、五没食子酰葡萄糖、柯里拉京、鞣花酸)的提取量为考察指标,分别对提取溶剂、提取倍量、提取时间、提取次数进行考察,采用SAS对实验数据进行分析,得到了诃子鞣质的最优提取工艺,即B2倍量A2%乙醇提取D3次,每次C2小时。对最优提取工艺进行了验证,结果表明建立的诃子鞣质部位提取工艺合理、稳定。建立了诃子鞣质部位大孔吸附树脂纯化工艺。以总鞣质及指标性成分没食子酸、安石榴苷、没食子酸甲酯、五没食子酰葡萄糖、柯里拉京、鞣花酸的含量、吸附解吸附率和转移率为指标,优化大孔吸附树脂法纯化诃子总鞣质部位的工艺。确定最佳工艺为:以最佳提取工艺提取得到的药液,浓缩至相当于H2g生药/mL的药液,离心(Q r/min,Rmin),得上清液。按生药量与树脂体积比为S1,上样于B型大孔树脂上,树脂柱径高比为I2,进行动态吸附,吸附流速为J2BV·h-1,待吸附完成后,用K1%乙醇洗脱L2 BV,除杂流速为M2 BV·h-1,洗脱剂为N2%乙醇,洗脱体积为O2BV,洗脱流速为P2BV·h-1,收集N2%乙醇洗脱液,减压回收溶剂,真空干燥,即得诃子鞣质部位。对富集工艺进行验证,制备3批诃子鞣质部位中鞣质含量达到60%以上,转移率达到60%以上,表明该方法重现性较好,且稳定可行。2诃子药材和鞣质部位质量控制研究建立了可见分光光度法测定诃子药材和鞣质部位中总鞣质含量的方法。以没食子酸为对照品,干酪素沉淀鞣质,采用磷钼钨酸比色法(药典法)测定总鞣质含量,得到没食子酸的回归方程:Y=102.1469X+0.0087,r=0.9982(n=6),结果表明,没食子酸在1.080～10.080μg·mL-1浓度范围内线性良好。方法学评价表明,本研究建立的方法重复性和重现性良好。建立了 HPLC法同时测定诃子药材中没食子酸、安石榴苷、五没食子酰葡萄糖、柯里拉京、鞣花酸和没食子酸甲酯7种成分含量的方法。没食子酸Y=2597250.9110X+26.6861,r=0.9998;没食子酸甲酯Y=2974518.9674X+4.7036,r=0.9997;安石榴苷A Y=2469081.4701 X-23.5474,r=0.9995;安石榴苷 B Y=2260093.9649X+5.4562,r=0.9993;柯里拉京Y=1701356.1444X+6.3150,r=0.9998;五没食子酰葡萄糖 Y=2682438.5283 X+8.1821,r=0.9998;鞣花酸Y=9324243.5299X+109.4421,r=0.9994。没食子酸、安石榴苷A、安石榴苷B、没食子酸甲酯、安石榴苷B、柯里拉京、五没食子酰葡萄糖和鞣花酸分别在0.186～3.720μg、0.046～0.552 μg、0.029～0.192μg、0.182～2.730μg、0.069～1.388μg、0.324～6.480μg、0.167～1.672μg范围内具有良好的线性关系。方法学考察表明,本研究建立的诃子鞣质部位中没食子酸、安石榴苷A、没食子酸甲酯、安石榴苷B、柯里拉京、五没食子酰葡萄糖和鞣花酸含量测定方法准确、稳定。建立了 HPLC法同时测定诃子鞣质部位中没食子酸、安石榴苷A、安石榴苷B、柯里拉京、五没食子酰葡萄糖和鞣花酸等6个成分含量的方法。经方法学考察,所建立的测定方法准确、稳定,可作为诃子鞣质部位的质量控制的方法。建立了诃子药材指纹图谱的研究方法。采用相似度评价系统对10批诃子药材色谱数据进行分析,进行相似度评价,10批诃子药材相似度分别为0.984～0.999之

关键词：诃子鞣质部位提取工艺纯化工艺质量控制

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一测多评技术在3种丹参制剂质量控制中的可行性分析

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中草药 2016年第23期47卷 4179-4185页

作者：梁文仪袁永兵陈文静吴玲芳李师亓旗崔雅萍张兰珍北京中医药大学中药学院北京100102 天津药物研究院天津300193

目的建立一测多评法(QAMS)同时测定3种丹参制剂(丹参片、复方丹参片和冠心丹参胶囊)中丹参酮类成分[丹参酮IIA(TIIA)、二氢丹参酮I(DTI)、隐丹参酮(CT)、丹参酮I(TI)]量,探讨QAMS技术在中药制剂质量评价中的准确性和可行性。方法采用HPL... 详细信息

目的建立一测多评法(QAMS)同时测定3种丹参制剂(丹参片、复方丹参片和冠心丹参胶囊)中丹参酮类成分[丹参酮IIA(TIIA)、二氢丹参酮I(DTI)、隐丹参酮(CT)、丹参酮I(TI)]量,探讨QAMS技术在中药制剂质量评价中的准确性和可行性。方法采用HPLC法测定TIIA、DTI、CT和TI;以丹参片、复方丹参片和冠心丹参胶囊为研究对象,采用QAMS技术,以TIIA为内参物,建立DTI、CT、TI与TIIA之间的相对校正因子(fi/s),比较保留时间差、相对保留值和线性回归定位法对待测成分的定位效果;并用外标法对样品进行定量计算,比较实测值与QAMS计算值之间的差异,以验证其准确性。结果所建立的HPLC法测定TIIA、DTI、CT和TI准确可行;在线性范围内,DTI、CT、TI与TIIA之间的fi/s分别为0.734、0.916、0.774,在不同测试条件下待测成分的fi/s准确可靠;相对保留值法能够对待测成分进行准确定位,DTI、CT、TI与TIIA之间的相对保留值分别是0.314、0.518、0.561,外标法和QAMS测定结果无显著性差异。3种丹参制剂定量测定结果显示不同厂家即使是同一厂家不同批次,产品的内在质量存在一定差异。结论所建立的丹参酮类成分QAMS适用于多种丹参制剂的质量控制,可为其他丹参制剂的质量评价提供参考;同时,应进一步加强对以上3种中药制剂的控制与监管。

关键词：丹参制剂一测多评丹参酮类成分斜率校正法线性回归定位法丹参片复方丹参片冠心丹参胶囊丹参酮IIA 二氢丹参酮I 隐丹参酮丹参酮I 中药制剂质量评价相对校正因子

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基于总鞣质和7种成分同时测定的诃子药材质量控制研究

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世界科学技术-中医药现代化 2018年第9期20卷 1638-1644页

作者：梁林金亓旗叶婷梁文仪周坤简平张兰珍北京中医药大学中药学院北京102488

目的:建立分光光度法测定诃子药材总鞣质含量和HPLC法同时测定7种成分没食子酸、安石榴苷A、没食子酸甲酯、安石榴苷B、柯里拉京、五没食子酰葡萄糖和鞣花酸含量。方法:以没食子酸为对照品,采用磷钼钨酸比色法(药典法),测定总鞣质含量... 详细信息

目的:建立分光光度法测定诃子药材总鞣质含量和HPLC法同时测定7种成分没食子酸、安石榴苷A、没食子酸甲酯、安石榴苷B、柯里拉京、五没食子酰葡萄糖和鞣花酸含量。方法:以没食子酸为对照品,采用磷钼钨酸比色法(药典法),测定总鞣质含量。采用色谱柱Agilent ZORBAX SB-Aq-C18(250×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸水(0.1%)-甲醇,流速1 mL·min-1,柱温30℃,检测波长为270 nm,梯度洗脱,同时测定诃子药材中7种成分含量。结果:诃子总鞣质平均含量为30.31%,RSD为0.55%;平均加样回收率为99.70%,RSD为21.97%(n=6)。没食子酸、安石榴苷A、安石榴苷B、没食子酸甲酯、柯里拉京、五没食子酰葡萄糖和鞣花酸在各自范围线性良好,加样回收率在100.10%-102.77%。结论:建立诃子药材中总鞣质、没食子酸、安石榴苷A、安石榴苷B、没食子酸甲酯、柯里拉京、五没食子酰葡萄糖和鞣花酸含量测定方法简便,准确度高,专属性强,可用于诃子药材的质量控制。

关键词：诃子总鞣质比色法高效液相色谱法含量测定

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基于指纹图谱分析和多成分同时定量的藏药毛诃子质量评价研究

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中草药 2017年第6期48卷 1210-1215页

作者：陈文静梁文仪李师吴玲芳崔雅萍亓旗袁永兵张兰珍北京中医药大学中药学院北京100102 天津药物研究院天津300193

目的建立藏药毛诃子药材HPLC指纹图谱,测定毛诃子中没食子酸、柯里拉京、鞣花酸和没食子酸甲酯量,为毛诃子药材质量控制提供依据。方法采用Atlantic T3(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.2%冰醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0... 详细信息

目的建立藏药毛诃子药材HPLC指纹图谱,测定毛诃子中没食子酸、柯里拉京、鞣花酸和没食子酸甲酯量,为毛诃子药材质量控制提供依据。方法采用Atlantic T3(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.2%冰醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min,进样量20μL,柱温30℃。建立11批毛诃子药材HPLC指纹图谱共有模式,并采用化学计量学分析方法分析隐藏信息。采用HPLC-MSn对毛诃子药材色谱峰进行指认,并对特征峰进行定量分析。结果得到毛诃子HPLC指纹图谱,标示出21个共有峰,相似度均在0.9以上。采用HPLC-MSn方法指认了18个化合物。主成分分析和聚类分析将样品大致分为3类。并结合偏最小二乘判别分析方法发现区分毛诃子样品的5个标志性化合物,其中指认出12号峰为诃子鞣酸。定量分析条件通过方法学验证,平均加样回收率在97.24%~98.58%。结论对HPLC指纹图谱和主要成分量同时进行分析,方法快速、简便、重复性好,可作为藏药毛诃子质量控制有效方法之一。

关键词：毛诃子指纹图谱聚类分析主成分分析偏最小二乘法没食子酸柯里拉京鞣花酸没食子酸甲酯

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藏药诃子化学成分的高效液相色谱-质谱联用技术快速鉴定研究

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世界科学技术-中医药现代化 2018年第9期20卷 1627-1637页

作者：简平亓旗周坤梁文仪梁林金叶婷张兰珍北京中医药大学中药学院北京102488

目的:建立高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱组合式高分辨质谱联用(HPLC-LTQ-Orbitrap MS)技术分析藏药诃子化学成分的方法。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.2%乙酸水为流动相进行梯度洗脱。在负离子... 详细信息

目的:建立高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱组合式高分辨质谱联用(HPLC-LTQ-Orbitrap MS)技术分析藏药诃子化学成分的方法。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.2%乙酸水为流动相进行梯度洗脱。在负离子模式下,采集LTQ-Orbitrap线性离子阱高分辨质谱数据,依据高分辨质谱提供的分子离子峰和碎片离子的精确分子质量,并与文献或对照品对照,确定化合物可能的结构。结果:从诃子中鉴定出62种化学成分,包括酚酸类和可水解鞣质类60个,三萜类2个,其中,14个化合物在该植物中首次检出。结论:该方法可为诃子的化学成分质谱裂解规律和质量控制提供参考。

关键词：诃子 HPLC-LTQ-Orbitrap MS 酚酸类成分可水解鞣质类成分

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基于化学计量学分析的诃子药材高效液相色谱指纹图谱研究

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世界科学技术-中医药现代化 2018年第9期20卷 1645-1649页

作者：梁文仪亓旗梁林金叶婷周坤简平张兰珍北京中医药大学中药学院北京102488

目的:建立诃子药材HPLC指纹图谱。方法:安捷伦ZORBAX SB-Aq C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm);流动相为0.1%磷酸水-甲醇,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温35℃,检测波长270 nm,进样量20μL。采用相似度软件和SPSS、SIMCA软件对10批诃子药材的... 详细信息

目的:建立诃子药材HPLC指纹图谱。方法:安捷伦ZORBAX SB-Aq C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm);流动相为0.1%磷酸水-甲醇,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温35℃,检测波长270 nm,进样量20μL。采用相似度软件和SPSS、SIMCA软件对10批诃子药材的色谱数据进行化学计量学分析。结果:标定17个共有峰,10批药材相似度在0.984-0.999之间,表明所含化学成分基本相同,差异不大。聚类分析可将样品分为4类,与主成分分析、偏最小二乘判别分析结果一致,VIP分析结果显示色谱峰5(没食子酸甲酯)、11、1(没食子酸)、10、12可能是鉴别诃子样品最主要的色谱峰。结论:所建立的诃子药材HPLC指纹图谱方法准确、稳定,通过化学计量学分析寻找区分不同品质诃子样品的标志性成分,可为诃子质量控制及评价提供参考。

关键词：诃子指纹图谱化学计量学偏最小二乘判别分析

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基于多成分和总鞣质测定的藏药大三果及其鞣质部位质量研究

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世界科学技术-中医药现代化 2018年第9期20卷 1615-1621页

作者：叶婷崔雅萍梁林金梁文仪简平周坤吴玲芳李师亓旗张兰珍北京中医药大学中药学院北京102488

目的建立HPLC法测定大三果中3种特征成分含量,建立分光光度法测定大三果中总鞣质含量。方法采用Agilent ZORBAX SB-Aq(250×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1%甲酸/水;流速为1 mL·min-1;检测波长为270 nm,测定大三果药材和鞣质部... 详细信息

目的建立HPLC法测定大三果中3种特征成分含量,建立分光光度法测定大三果中总鞣质含量。方法采用Agilent ZORBAX SB-Aq(250×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1%甲酸/水;流速为1 mL·min-1;检测波长为270 nm,测定大三果药材和鞣质部位没食子酸、柯里拉京和鞣花酸含量。以没食子酸为对照品,采用分光光度法测定大三果药材和鞣质部位总鞣质含量。结果 HPLC测定中没食子酸、柯里拉京和鞣花酸线性范围分别为0.91-4.55μg、0.274-1.368μg和0.329-2.634μg。药材中3种成分平均回收率依次分别为101.06%、101.72%和100.27%,鞣质部位中3种成分平均回收率分别为100.4%、100.85%和101.70%。分光光度法中没食子酸在1.008-10.08μg·mL-1成线性。药材和鞣质部位中总鞣质回收率分别为100.25%和100.52%。结论本方法快速、准确、重复性较好,可为大三果及其鞣质部位的质量控制提供依据。

关键词：大三果鞣质部位分光光度法高效液相色谱法含量测定

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藏药余甘子与诃子化学和药理作用比较

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世界科学技术-中医药现代化 2016年第7期18卷 1171-1176页

作者：亓旗崔雅萍梁文仪陈文静李师吴玲芳张兰珍北京中医药大学中药学院北京100102

余甘子和诃子均为常用藏药,藏药中余甘子、毛诃子、诃子3种药物配伍使用称为大三果,是大多数常用方剂的基础方。本文对余甘子和诃子化学成分与药理作用进行归纳总结和比较,为两种常用藏药的应用提供依据。

关键词：藏药诃子余甘子化学成分药理作用

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余甘子在藏医药中的应用

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世界科学技术-中医药现代化 2016年第7期18卷 1154-1158页

作者：陈文静李师梁文仪吴玲芳崔雅萍亓旗张兰珍北京中医药大学中药学院北京100102

余甘子为常用藏药,具有清热凉血、健胃消食、生津止咳等功效。余甘子与诃子、毛诃子组成的三果汤散常单独使用,或与其他藏药组成复方在藏医药临床中使用。本文分析余甘子在藏医药中的传统用法,并对余甘子在藏药复方中的应用进行总结,为... 详细信息

余甘子为常用藏药,具有清热凉血、健胃消食、生津止咳等功效。余甘子与诃子、毛诃子组成的三果汤散常单独使用,或与其他藏药组成复方在藏医药临床中使用。本文分析余甘子在藏医药中的传统用法,并对余甘子在藏药复方中的应用进行总结,为余甘子的藏医药研究和现代应用提供参考。

关键词：余甘子藏医药传统应用藏药复方

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基于现代药理研究的余甘子藏医药理论分析

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世界科学技术-中医药现代化 2016年第7期18卷 1166-1170页

作者：梁文仪陈文静吴玲芳李师崔雅萍亓旗张兰珍北京中医药大学中药学院北京100102

目的:基于现代药理研究对余甘子传统藏医药理论进行分析,为余甘子研究及开发提供依据。方法:查阅藏医药典籍、文献,并结合临床实践,总结余甘子在传统藏医药中的应用,探讨余甘子的藏医药理论基础与现代药理研究的相关性。结果:余甘子在... 详细信息

目的:基于现代药理研究对余甘子传统藏医药理论进行分析,为余甘子研究及开发提供依据。方法:查阅藏医药典籍、文献,并结合临床实践,总结余甘子在传统藏医药中的应用,探讨余甘子的藏医药理论基础与现代药理研究的相关性。结果:余甘子在传统藏医药临床实践中主要用于治疗血病、培根病、赤巴病、高血压、消化不良、腹胀、咳嗽、骨节不利等消化系统、血液循环系统、呼吸道和关节骨骼疾病,各国学者通过现代科学技术和方法研究证实了余甘子对以上疾病具有较好的治疗作用。结论:现代药理研究从多方面、多层次阐释了余甘子在传统藏医药理论指导下临床应用的科学性。

关键词：余甘子传统应用藏医药药理活性

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