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基于IFNγ-STAT1、IL-4-STAT6信号通路探究复方五凤草液治疗结核性溃疡的作用机制

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中药药理与临床 2024年

作者：黄子慧钱佳燕洪练青郭丹丹马朝群南京中医药大学南京中医药大学附属南京市中西医结合医院南京中医药大学附属医院

目的：观察复方五凤草液治疗结核性溃疡的临床疗效，并基于干扰素-γ（interferon-γ，INF-γ）/信号转导和转录激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1，STAT1)、白细胞介素-4(interleukin-4，IL-4)/信号转导和转录激活因子6(signal transducer and activator of transcription 6，STAT6)信号通路和卡介苗（Bacillus Calmette Guerin，BCG）诱导巨噬细胞极化模型探讨其作用机制。方法：（1）临床试验：将135 例结核性溃疡患者分为观察组、中医对照组和西医对照组。在规范抗结核治疗基础上，观察组予复方五凤草液，中医对照组予康复新液，西医对照组予异烟肼液局部外用治疗，观察周期28 d。分别观察三组患者观察安全性指标、创面愈合总有效率、创面组织病理学形态及创面组织、血液中IFN-γ、IL-4、STAT1、STAT6的表达水平，填写中医评分量表(Traditional Chinese Medicine Syndrome Score Scale， TCMSSS）病例报告表(Case Report Form， CRF)。（2）细胞实验：建立BCG诱导THP-1巨噬细胞模型，分别予不同药物处理后分为BCG组、BCG+康复新液组、BCG+异烟肼液组、BCG+复方五凤草液组。镜下观察各组BCG菌落情况，收集细胞上清液并离心，蛋白质印迹（Western Blot）、实时荧光定量(Real Time Quantitative PCR，RT-qPCR）技术检测IFN-γ、IL-4、STAT1、STAT6的表达水平，流式细胞术检测药物对CD11b、CD86、CD163、CD206表达的影响。结果：（1）临床试验：治疗期间，3组患者安全性指标无明显差异；观察组总有效率（95.56%）高于中医对照组（82.22%）、西医对照组（75.56%）；治疗28 d后，与中、西医对照组比较，观察组创面组织病理学形态改善更为明显，观察组患者IFN-γ、STAT1的表达低于中、西医对照组，IL-4、STAT6的表达高于中、西医对照组；与中、西医对照组比较，观察组中医证候积分显著降低。（2）细胞实验：THP-1巨噬细胞在感染BCG后吞噬泡明显增多，自噬小体增多；各组药物干预后胞内结核分枝杆菌的存活率降低。Western blotting、RT-qPCR、流式实验结果显示与对照组相比，BCG组M1型巨噬细胞所占比例较多，另3组M2型巨噬细胞所占比例较多。其中，BCG+复方五凤草液组中M2巨噬细胞占比显著，高于其他3组。BCG+复方五凤草液组IFN-γ、STAT1表达降低，IL-4、STAT6表达增高，CD86表达明显下调，CD206的表达显著上调。结论：复方五凤草液治疗结核性溃疡临床疗效显著，其作用机制可能与抑制病原菌，干预IFN-γ/STAT1、IL-4/STAT6信号通路以介导M1/M2巨噬细胞极化平衡有关。

关键词：复方五凤草液结核性溃疡 IFN-γ/STAT1 IL-4/STAT6 BCG 巨噬细胞极化

基于网络药理学探讨槲皮素治疗结核性溃疡的机制

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中国医科大学学报 2024年第6期53卷 509-515,524页

作者：郭丹丹钱佳燕陈悦翁嘉晨黄子慧南京中医药大学附属南京市中西医结合医院瘰疬科南京210014

目的基于网络药理学及分子对接方法探讨槲皮素治疗结核性溃疡的分子机制。方法通过PubChem、SwissTarget和TargetNet数据库检索槲皮素的药物靶点,结合课题组前期结核性溃疡基因测序结果,获得交集靶点。利用DAVID数据库完成交集靶点的基... 详细信息

目的基于网络药理学及分子对接方法探讨槲皮素治疗结核性溃疡的分子机制。方法通过PubChem、SwissTarget和TargetNet数据库检索槲皮素的药物靶点,结合课题组前期结核性溃疡基因测序结果,获得交集靶点。利用DAVID数据库完成交集靶点的基因本体(GO)功能富集分析和京都基因和基因组数据库(KEGG)信号通路富集分析。交集靶点经STRING数据库与Cytoscape软件分析其相互作用关系并筛选枢纽节点,采用PyMOL与AutoDock Tolls软件完成槲皮素与枢纽节点的分子对接,筛选以槲皮素为核心的药物靶点,最后构建巨噬细胞模型,对上述核心基因进行验证。结果经筛选共得到54个药物靶点,富集分析结果显示,槲皮素治疗结核性溃疡可涉及的信号通路有代谢通路、脂质与动脉粥样硬化、MAPK信号通路等,另外,ALOX5、TNF、SRC、MMP9、EGFR等基因可能是槲皮素治疗结核性溃疡的关键基因,细胞实验结果表明槲皮素干预后,M1、M2巨噬细胞SRC、EGFR表达水平显著升高,MMP9表达水平显著下降。结论槲皮素可能通过影响SRC、EGFR及MMP9表达发挥其调控巨噬细胞极化的作用。

关键词：复方五凤草液槲皮素结核性溃疡网络药理学分子对接技术

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基于真实世界中西医结合治疗淋巴结结核疗效观察

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现代中西医结合杂志 2024年第1期33卷 42-47页

作者：柳叶许费昀黄子慧南京市中西医结合医院江苏南京210014

目的比较西医与中西医结合治疗淋巴结结核的实际临床疗效,并分析不同类型结核(结节型、浸润型、脓肿型、溃疡型)之间的疗效差异,为临床提供更好的治疗依据。方法基于真实世界,对南京市中西医结合医院瘰疬科与镇江市第三人民医院、淮... 详细信息

目的比较西医与中西医结合治疗淋巴结结核的实际临床疗效,并分析不同类型结核(结节型、浸润型、脓肿型、溃疡型)之间的疗效差异,为临床提供更好的治疗依据。方法基于真实世界,对南京市中西医结合医院瘰疬科与镇江市第三人民医院、淮安市第四人民医院、南通市第六人民医院门诊及病房2017年1月—2020年1月诊治的符合纳入标准的2 538例淋巴结结核患者资料进行回顾性分析,根据患者是否采用中医药治疗分为中西医结合治疗组和西医治疗组,比较2组患者基线特征、治疗疗程、手术率、手术切口Ⅰ期愈合率、结核耐药发生率、不良反应发生率、随访3年复发率。结果 2 538例淋巴结结核患者中,女性患者(1 621例)多于男性患者(917例);患者平均年龄37岁左右,平均病程7个月左右;有肺结核病史或接触史者668例(26.32%);头颈部为最常见发病部位,其次为腋窝、腹股沟;脓肿型和溃疡型更多(916例和762例),合并基础疾病的患者中脓肿型、溃疡型占比较高。治疗疗程在11~18个月。中西医结合治疗组总有效率、治愈率均明显高于西医治疗组[97.79%(1 724/1 763)比78.71%(610/775),P均0.05);中西医结合治疗组中浸润型、脓肿型、溃疡型患者切口Ⅰ期愈合率均明显高于同类型西医治疗组[96.17%(176/183)、94.97%(566/596)、91.92%(455/495)比78.16%(68/87)、71.97%(190/264)、69.63%(149/214),P均<0.05];中西医结合治疗组结核耐药发生率、不良反应发生率、复发率均明显低于西医治疗组[10.21%(180/1 763)、16.28%(287/1 763)、 2.78%(49/1 763)比16.00%(124/775)、23.35%(181/775)、9.94%(77/775),P均<0.05]。结论真实世界研究发现,中西医结合治疗可以提高淋巴结结核的临床疗效,促进手术切口Ⅰ期愈合,并能有效减少结核耐药、药物不良反应及复发。

关键词：淋巴结结核真实世界研究中西医结合疗法

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复方五凤草液负压滴灌治疗Ⅲ-Ⅳ期压力性损伤的疗效及其作用机制

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解放军医学杂志 2024年第4期49卷 396-407页

作者：曹丽敏黄子慧王裕玲钱佳燕高贝贝陈思琪翁嘉晨南京中医药大学附属南京市中西医结合医院瘰疬科江苏南京210014

目的观察复方五凤草液负压滴灌治疗(NPWTi)Ⅲ-Ⅳ期压力性损伤(PI)的临床疗效,并初步探索其作用机制。方法(1)临床研究:选取2019年1月-2022年10月于南京市中西医结合医院瘰疬科病区及伤口护理门诊就诊的60例PI患者,随机分为生理盐水NPWT... 详细信息

目的观察复方五凤草液负压滴灌治疗(NPWTi)Ⅲ-Ⅳ期压力性损伤(PI)的临床疗效,并初步探索其作用机制。方法(1)临床研究:选取2019年1月-2022年10月于南京市中西医结合医院瘰疬科病区及伤口护理门诊就诊的60例PI患者,随机分为生理盐水NPWTi组与复方五凤草液NPWTi组,每组30例。两组均在全身基础治疗的前提下进行NPWTi,分别于治疗前及治疗第1、2、3周拆除负压装置后统计PI愈合计分量表(PUSH)评分、创面细菌培养检出率及创面愈合时间,并用ELISA法检测创面组织血管内皮生长因子(VEGF)的含量。(2)动物实验:24只SD大鼠随机分为空白组、模型组、生理盐水NPWTi组与复方五凤草液NPWTi组,每组6只,通过局部组织缺血/再灌注损伤法建立PI大鼠模型,每天治疗结束后将负压装置拆除。分别于治疗前及治疗3、7、10 d观察各组大鼠创面形态,HE染色观察创面组织病理情况,免疫组化检测创面组织CD34阳性细胞百分比,并用ELISA法及RT-qPCR分别检测各组大鼠血液、创面组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、核因子-κB p65(NF-κB p65)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、精氨酸酶-1(Arg-1)、转化生长因子-β(TGF-β)的表达水平。结果(1)临床研究:两组均能有效降低PUSH评分和创面细菌培养检出率,缩短创面愈合时间,促进创面组织VEGF表达,复方五凤草液NPWTi组优于生理盐水NPWTi组(P<0.05)。(2)动物实验:与空白组相比,模型组大鼠创面炎症反应及组织损伤明显,CD34阳性细胞百分比,以及血液和创面组织p38 MAPK、NF-κB p65、iNOS、TNF-α水平明显升高,Arg-1、TGF-β水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,生理盐水NPWTi组与复方五凤草液NPWTi组治疗7 d后创面形态评分明显降低,组织病理学形态明显改善,CD34阳性细胞百分比明显升高,血液及创面组织p38 MAPK、NF-κB p65、iNOS、TNF-α水平明显降低,Arg-1、TGF-β水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),且复方五凤草液NPWTi组优于生理盐水NPWTi组(P<0.05)。结论复方五凤草液NPWTi可有效促进PI创面的愈合,其作用机制可能是通过抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路的活化及表达,进而调节M1/M2巨噬细胞极化平衡。

关键词：压力性损伤负压滴灌治疗复方五凤草液巨噬细胞极化 p38 MAPK/NF-κB信号通路

消瘰膏联合手术治疗溃疡型淋巴结结核临床疗效观察

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湖北中医杂志 2024年第4期46卷 11-16页

作者：金全永黄子慧曹丽敏许费昀南京中医药大学附属南京市中西医结合医院瘰疬科江苏南京210014

目的观察消瘰膏联合手术治疗溃疡型淋巴结结核的临床疗效。方法将83例符合纳入标准的溃疡型淋巴结结核患者随机分为对照组41例与消瘰膏组42例。对照组在基础抗结核治疗的基础上行创面常规外科换药,4周后手术治疗,消瘰膏组在对照组治... 详细信息

目的观察消瘰膏联合手术治疗溃疡型淋巴结结核的临床疗效。方法将83例符合纳入标准的溃疡型淋巴结结核患者随机分为对照组41例与消瘰膏组42例。对照组在基础抗结核治疗的基础上行创面常规外科换药,4周后手术治疗,消瘰膏组在对照组治疗的基础上服用消瘰膏。治疗4周后比较两组总有效率、中医证候积分变化、伤口床评估系统评分(WBS)情况。ELISA检测外周血白介素-10(IL-10)、白介素-35(IL-35)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,流式细胞术(FCM)检测外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+),并统计两组一次手术成功率。结果治疗后,消瘰膏组的总有效率明显高于对照组(P<0.05);两组中医症候积分逐渐降低,与对照组比较,消瘰膏组在治疗第4周时降低更明显(P<0.05);两组WBS积分在治疗第3周时均显著升高,而与对照组比较,在治疗第4周时消瘰膏组升高更明显(<0.05);两组IL-10、IL-35、TGF-β水平在治疗过程中呈下降趋势,第4周时明显降低,且消瘰膏组优于对照组(P<0.05);随着治疗的进行,两组外周血免疫指标CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)逐渐升高,治疗第4周时升高更为显著(P<0.05),且与对照组相比,消瘰膏组升高更为明显(P<0.05);消瘰膏组的一次手术成功率明显高于对照组(P<0.05)。结论消瘰膏治疗溃疡型淋巴结结核临床效果良好,可有效改善溃疡创面,提升机体免疫,提高手术成功率,值得更深入的研究。

关键词：溃疡型淋巴结结核抗结核治疗消瘰膏

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中药白及在治疗慢性创面修复中的应用进展

世界中医药 2024年第3期19卷 449-454页

作者：陈悦郭丹丹钱佳燕高贝贝翁嘉晨曹丽敏陈思琪黄子慧南京中医药大学附属南京市中西医结合医院南京210014

白及Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.是一种传统中药,具有收敛止血、消肿生肌等功效,常用于外伤出血、疮疡肿毒等。古籍记载及现代临床发现白及具有治疗慢性难愈性创面的功效,为深入研究白及治疗慢性难愈性创面的活性物质基础、药理... 详细信息

白及Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.是一种传统中药,具有收敛止血、消肿生肌等功效,常用于外伤出血、疮疡肿毒等。古籍记载及现代临床发现白及具有治疗慢性难愈性创面的功效,为深入研究白及治疗慢性难愈性创面的活性物质基础、药理作用及机制,因此对近年来国内外有关白及的报道进行了综述。在创面修复过程中,白及具有止血、抗炎、抗病原微生物、抗氧化、免疫调节、促进表皮生长因子增殖、分泌胶原蛋白等药理作用,可以通过调节伤口的微环境来促进慢性难愈性伤口的愈合。同时提出了白及在临床应用中存在的问题和解决办法,展望了白及在慢性创面修复中的应用前景,为合理开发白及资源用于临床伤口护理提供理论依据。

关键词：白及创面愈合慢性创面药理作用临床应用中药制剂研究进展综述

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遗嘱严格要式主义的缓和

遗嘱严格要式主义的缓和

作者：黄子慧华侨大学

学位级别：硕士

经过长期的理论研究与司法实践,《民法典》继承编将打印遗嘱纳入法定遗嘱类型,并完善了其他遗嘱类型形式要件的法律规定,但并未回应形式瑕疵遗嘱效力争议。统计发现,民众未采用法定形式订立遗嘱的情况并未随着《民法典》的施行而减少,... 详细信息

经过长期的理论研究与司法实践,《民法典》继承编将打印遗嘱纳入法定遗嘱类型,并完善了其他遗嘱类型形式要件的法律规定,但并未回应形式瑕疵遗嘱效力争议。统计发现,民众未采用法定形式订立遗嘱的情况并未随着《民法典》的施行而减少,在遗嘱严格要式主义缓和的理论背景下,司法实践认可了部分形式瑕疵遗嘱的效力,通过对形式瑕疵遗嘱案件判决书的系统分析,提炼出形式瑕疵遗嘱效力的裁判要点,即对于法定遗嘱类型的形式瑕疵,在存在与缺失的形式要件具有同等效力的替代性要件或能够证实被继承人真实意思表示时,不影响遗嘱效力;对于非法定遗嘱类型,或参照格式最接近的法定遗嘱类型认定其效力,或灵活变通,根据遗嘱特点适用不同规则。据此,笔者分别就法定类型遗嘱和非法定类型遗嘱提出遗嘱严格要式主义缓和的司法建议和立法建议。在司法实践中,应当将遗嘱形式要件作为当事人证明责任的一种分配手段,通过当事人提供的证据,查明被继承人的真实意思表示,对遗嘱效力的认定遵从真意优先的原则,此外,为了限制法官的自由裁量权,顺应司法体制改革的趋势,对尚未形成统一裁判规则的形式瑕疵遗嘱的效力认定,应推行类案检索制度。立法方面,借鉴打印遗嘱的立法实践,探索夫妻共同遗嘱的法律规制。

关键词：遗嘱严格要式主义缓和司法裁判真意优先

趋化因子受体3及其配体参与结核病免疫机制和诊断的研究进展

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中国免疫学杂志 2023年第4期39卷 890-892页

作者：翁嘉晨黄子慧高璐珏南京中医药大学南京210023 南京市中西医结合医院瘰疬科南京210014

趋化因子(CXCL)9、CXCL10、CXCL11是目前研究较多且与结核免疫密切相关的3种趋化因子,同属于趋化因子受体3(CXCR3)配体。CXCL9、CXCL10、CXCL11主要作用于活化的CD4细胞(CD4+T细胞)、细胞毒性T淋巴细胞(CD8+T细胞)和自然杀伤(NK)细胞,... 详细信息

趋化因子(CXCL)9、CXCL10、CXCL11是目前研究较多且与结核免疫密切相关的3种趋化因子,同属于趋化因子受体3(CXCR3)配体。CXCL9、CXCL10、CXCL11主要作用于活化的CD4细胞(CD4+T细胞)、细胞毒性T淋巴细胞(CD8+T细胞)和自然杀伤(NK)细胞,参与结核病发病及免疫过程,在细胞免疫中发挥重要作用。本文总结了近5年CXCL9、CXCL10及CXCL11在结核病免疫机制和检测中作用的相关研究,以期为结核病诊断和疗效评估提供新的方法。

关键词：趋化因子9 趋化因子10 趋化因子11 结核病免疫机制

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芦可替尼联合羟基脲治疗原发性血小板增多症引起多发性皮肤结核一例

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中国麻风皮肤病杂志 2023年第11期39卷 822-825页

作者：郭丹丹钱佳燕黄子慧南京中医药大学附属南京市中西医结合医院江苏南京210014

本文报道一例脾脏切除后原发性血小板增多症患者,服用羟基脲及芦可替尼后诱发结核,抗结核治疗后好转,后出现腰腹部、手臂、大腿处多发性结核性皮肤溃疡,经局部处理(脓肿切开引流+清创+VSD负压吸引术/缝合术/局部换药)后痊愈。目前继续... 详细信息

本文报道一例脾脏切除后原发性血小板增多症患者,服用羟基脲及芦可替尼后诱发结核,抗结核治疗后好转,后出现腰腹部、手臂、大腿处多发性结核性皮肤溃疡,经局部处理(脓肿切开引流+清创+VSD负压吸引术/缝合术/局部换药)后痊愈。目前继续服用羟基脲及芦可替尼,未发生不良反应。

关键词：原发性血小板增多症芦可替尼羟基脲结核性皮肤溃疡