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现代食品 2024年第5期30卷 50-54,61页

作者：黄坤龙福建宏绿食品有限公司福建漳州363700

针对传统桃酥高糖、高脂的缺点,以绿豆粉代替部分低筋面粉,以木糖醇粉代替部分绵白糖,研发低糖低脂的木糖醇绿豆桃酥。以绿豆粉添加量、植物油添加量、木糖醇绵白糖总添加量和木糖醇替代绵白糖比例为试验因素,以感官评分为指标,在单因... 详细信息

针对传统桃酥高糖、高脂的缺点,以绿豆粉代替部分低筋面粉,以木糖醇粉代替部分绵白糖,研发低糖低脂的木糖醇绿豆桃酥。以绿豆粉添加量、植物油添加量、木糖醇绵白糖总添加量和木糖醇替代绵白糖比例为试验因素,以感官评分为指标,在单因素试验基础上,通过L9(34)正交试验优化木糖醇绿豆桃酥的加工工艺配方。结果表明,当低筋面粉添加量为70g、绿豆粉添加量为30g、植物油添加量为40g、木糖醇绵白糖总添加量为40 g、木糖醇替代绵白糖比例为30%时,产品感官评分最高。利用此配方制作的木糖醇绿豆桃酥口感酥脆,甜度适中、不油腻,具有绿豆香气,感官品质好。与所参考的基本配方相比,最佳配方的植物油用量减少了10%、绵白糖用量减少了22%(以低筋面粉用量为参照),能够满足人们对低糖低脂健康膳食的需求。

关键词：桃酥绿豆粉木糖醇加工工艺

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咏叹调《像迷人的帕里德》演唱分析

咏叹调《像迷人的帕里德》演唱分析

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作者：黄坤龙贵州大学

学位级别：硕士

葛塔塔·多尼采蒂(G·Donizetti,1797—1848),19世纪意大利著名作曲家,“美声学派新时期”的歌剧代表人物之一。多尼采蒂的创作对推动意大利歌剧发展以及意大利美声学派的繁荣起到了重要的作用。本文将以多尼采蒂的喜歌剧《爱之甘醇》... 详细信息

葛塔塔·多尼采蒂(G·Donizetti,1797—1848),19世纪意大利著名作曲家,“美声学派新时期”的歌剧代表人物之一。多尼采蒂的创作对推动意大利歌剧发展以及意大利美声学派的繁荣起到了重要的作用。本文将以多尼采蒂的喜歌剧《爱之甘醇》中的男中音咏叹调《像迷人的帕里德》作为研究对象,采用谱面展示和文字说明的方式,对咏叹调《像迷人的帕里德》的演唱进行分析;首先从多尼采蒂生平歌剧创作、歌剧《爱之甘醇》的简介着手介绍其成长与创作历程、歌剧《爱之甘醇》的创作背景及剧情概要;其次对语言、歌曲结构、旋律进行分析;重点对《像迷人的帕里德》中的演唱分析进行重点研究,其中华彩乐段的演唱和演唱技巧以及演唱实践,最后结合导师的建议以及自身演唱作出实践总结,希望通过笔者的研究可以让更多的声乐学习者了解多尼采蒂及其创作,为广大男中音在学习和演唱该作品时提供资料的参考,为声乐学习者提供实践经验。

关键词：多尼采蒂《像迷人的帕里德》演唱分析

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生长抑素和木聚糖酶的融合表达及重组蛋白的性质研究

生长抑素和木聚糖酶的融合表达及重组蛋白的性质研究

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作者：黄坤龙中国农业科学院

学位级别：硕士

生长抑素（Somatostatin,SS）抑制生长激素释放和胃的蠕动、胃酸分泌、营养物质的吸收,阻碍饲料转化和动物生长;在生产实践中,如果使用SS主动免疫动物产生针对SS的特异抗体和它中和,可避免SS发挥负面作用。常用免疫方法包括注射、口服... 详细信息

生长抑素（Somatostatin,SS）抑制生长激素释放和胃的蠕动、胃酸分泌、营养物质的吸收,阻碍饲料转化和动物生长;在生产实践中,如果使用SS主动免疫动物产生针对SS的特异抗体和它中和,可避免SS发挥负面作用。常用免疫方法包括注射、口服和喷雾等多种方式,其中口服免疫应用方便,可直接将疫苗投放于饲料中使用。但既往对使用SS免疫动物提高生产性能的研究多以DNA疫苗为载体,极少见到重组功能性SS蛋白的高效制备方法。饲用酶是常见的饲料添加剂,动物经口摄入饲用酶在胃肠道中发挥降解底物、促生长和调节肠道菌群等功效,因此饲用酶作为功能小肽（例如SS）的融合表达载体具有天然优越性;其中木聚糖酶在猪、鸡甚至反刍动物的饲料中均有成功应用实例,它的应用能降低食糜粘度、提高饲料转化率。和另一种常用的饲料酶制剂纤维素酶不同,目前使用的木聚糖酶常常是单一酶类;而且我国使用毕赤酵母发酵制备重组木聚糖酶技术已经非常成熟。因此,理论上可以将木聚糖酶和SS进行融合表达以高效制备SS重组蛋白并口服免疫。本研究尝试将三个不同微生物来源的木聚糖酶Np Xyl74（来自Neocallimastix patriciarum）、CbXyn10C（来自***）和Bs Xyl11A（来自Bispora sp.）分别与生长抑素SS-14进行融合表达。将SS-14置于C端时三个融合蛋白均能在毕赤酵母中成功的异源表达。融合表达未对木聚糖酶的理化和酶学性质造成较大负面影响,仅仅使得木聚糖酶的最适温度和热稳定性稍有下降。通过Western blot,我们发现融合表达的Cb Xyn10C-SS、Bs Xyl11A-SS均能和针对SS的兔多克隆抗体发生特异反应,证明融合蛋白中的SS仍保留了抗原性。而在Western blot试验中,NpXyl74-SS和抗体的反应不如对照Np Xyl74和其反应能力。考虑到该蛋白在毕赤酵母表达时的高度糖基化,有可能糖基化修饰的侧链影响了抗体对于融合蛋白的识别。我们将三种融合蛋白分别通过皮下注射免疫BALB/c小鼠制备了抗血清。Dot blot显示三种血清均可以和合成的SS-14抗原发生反应,说明无论使用哪种木聚糖酶和SS融合,均能诱导机体产生特异抗体。将三种融合蛋白以灌胃的方式饲喂BALB/c小鼠,初步观测在增重方面实验组和对照组没有出现明显差异,原因可能是生长周期过短、使用剂量不合适及需要适当的佐剂等原因所致。最后,我们将重组毕赤酵母在发酵罐中进行了高密度发酵。通过甲醇诱导,114 h后发酵液中的NpXyl74-SS和CbXyn10C-SS木聚糖酶活分别为8564 U/mL和541 U/mL,蛋白浓度最高为3640 mg/L和2001 mg/L;发酵液中Bs Xyl11A-SS木聚糖酶酶活为5011 U/mL,蛋白浓度最高为3697 mg/L。综上所述,木聚糖酶-SS融合蛋白既保留了木聚糖酶的催化活性和热稳定性、pH稳定性,又能刺激动物机体产生针对SS-14的特异抗体;通过上罐发酵可以大量获取该重组融合蛋白。因此该法是大量制备功能性SS的有效方法。实验中所获得的融合蛋白是双功能蛋白,未来将使用鸡、猪、羊等生长周期较长及体型较大的动物进一步进行促生长测试。研究为拓展传统饲用酶的功能,实现饲用酶的升级换代提供了新的思路。

关键词：生长抑素木聚糖酶融合表达抗原性免疫原性

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生长抑素和耐热木聚糖酶的融合表达及性质研究

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生物技术通报 2020年第9期36卷 235-243页

作者：黄坤龙苏小运姚斌中国农业科学院饲料研究所农业部饲料生物技术重点开放实验室北京100081

旨在获得具有抗原性和免疫原性的融合蛋白CbXyn10C-SS,并对其进行高效表达和酶学性质分析。生长抑素(Somatostatin,SS)从多途径阻碍饲料转化效率和动物生长,使用SS免疫动物可避免其抑制作用。然而SS免疫的研究多以DNA疫苗为载体,少见重... 详细信息

旨在获得具有抗原性和免疫原性的融合蛋白CbXyn10C-SS,并对其进行高效表达和酶学性质分析。生长抑素(Somatostatin,SS)从多途径阻碍饲料转化效率和动物生长,使用SS免疫动物可避免其抑制作用。然而SS免疫的研究多以DNA疫苗为载体,少见重组功能性SS蛋白的高效制备方法。木聚糖酶提高饲料转化率并在饲料中广泛应用,且微生物法发酵制备重组木聚糖酶技术已经非常成熟。将SS基因连接在细菌Caldicellulosiruptor bescii来源的耐热木聚糖酶基因CbXyn10C的3'端进行融合表达。融合蛋白CbXyn10C-SS具有抗原性和免疫原性,且该蛋白的理化性质和催化常数与CbXyn10C非常相似,具高度的热稳定性和较强的催化性能,适合饲料制粒。成功高效表达了能同时作为饲用木聚糖酶和生长抑素抗原的融合蛋白CbXyn10C-SS。

关键词：生长抑素木聚糖酶融合表达抗原表位

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施光南艺术歌曲演唱分析与钢琴伴奏运用探析——以《多情的土地》《摇篮曲》《吐鲁番的葡萄熟了》为例

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当代音乐 2022年第4期 100-102页

作者：黄坤龙贵州大学音乐学院贵阳550025

施光南是我国著名的作曲家,创作了大量艺术歌曲,作品具有鲜明的时代性、大众性、民族性。艺术歌曲演唱与钢琴伴奏是呈现完整艺术歌曲表演中必不可少的两个要素,在音乐表现上各具特点。在施光南艺术歌曲的演绎上,二者之间相互依存、相辅... 详细信息

施光南是我国著名的作曲家,创作了大量艺术歌曲,作品具有鲜明的时代性、大众性、民族性。艺术歌曲演唱与钢琴伴奏是呈现完整艺术歌曲表演中必不可少的两个要素,在音乐表现上各具特点。在施光南艺术歌曲的演绎上,二者之间相互依存、相辅相成,其艺术歌曲表演中将演唱与钢琴伴奏完美结合运用,使艺术歌曲表演达到完美的艺术效果。基于此,本文将从其艺术歌曲演唱与钢琴伴奏着手,就其作品中艺术歌曲演唱与钢琴伴奏结合运用进行详尽地阐述,以期为声乐演唱与钢琴伴奏的深度融合提供理论指导。

关键词：施光南艺术歌曲演唱钢琴伴奏结合运用

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广东省中药保健药品（1993～1994年）申报资料分析

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中药新药与临床药理 1995年第2期6卷 61-62页

作者：黄坤龙广东省药品检验所

中药保健药品的审查，各省、市掌握尺度不同。本文针对广东省的研究单位（１９９３～１９９４年）申报中药保健药品过程中出现的情况，结合广东省申报程序，提出了首先报送研究计划立项论证的重要性和必要性，并重点对申报资料药学研究... 详细信息

中药保健药品的审查，各省、市掌握尺度不同。本文针对广东省的研究单位（１９９３～１９９４年）申报中药保健药品过程中出现的情况，结合广东省申报程序，提出了首先报送研究计划立项论证的重要性和必要性，并重点对申报资料药学研究方面存在的问题进行了分析，目的是使申报资料质量逐步科学化、规范化，以促进中药保健药品健康发展。

关键词： @保健药品 @申报资料分析广东省

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