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乙醇体系中金属离子催化转化人参皂苷Rb1的研究

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化学试剂 2024年第4期46卷 88-93页

作者：曹波岩徐丝瑜李冠亨王宇鱼红闪大连工业大学生物工程学院辽宁大连116000

人参皂苷Rb1是人参中的主要皂苷之一,但人体吸收量极少,而其衍生物Rg3、Rk1、Rg5却易于人体吸收,但其制备和分离成本较高。针对以上问题将人参皂苷Rb1在50%乙醇水溶液体系和无水乙醇体系中进行催化条件的优化,并分析其产物。实验发现,... 详细信息

人参皂苷Rb1是人参中的主要皂苷之一,但人体吸收量极少,而其衍生物Rg3、Rk1、Rg5却易于人体吸收,但其制备和分离成本较高。针对以上问题将人参皂苷Rb1在50%乙醇水溶液体系和无水乙醇体系中进行催化条件的优化,并分析其产物。实验发现,通过对金属离子催化效果的筛选,选取NbCl_(5)为反应催化剂;在50%乙醇水溶液体系中最优条件下反应,Rg3得率为18.29%;在无水乙醇体系中最优条件下反应,Rg3得率为49.45%。根据两组反应产物的对比,推测在50%乙醇水溶液体系反应时,水可能供给电子基团,并生成更多水合化合物即20(S)-25-OH-Rg3和20(R)-25-OH-Rg3;在无水乙醇体系反应时,电子基团可能无法供给,形成双键,生成其他化合物即Rk1和Rg5。该发现为金属离子催化人参皂苷以制备稀有人参皂苷的方法奠定了理论基础。

关键词：氯化铌人参皂苷Rg3 人参皂苷Rb1 催化转化乙醇体系

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低聚麦冬多糖的酶法制备及分离纯化

大连工业大学学报 2013年第2期32卷 85-87页

作者：解千鱼红闪大连工业大学生物工程学院辽宁大连116034

为得到较纯的低聚麦冬多糖,优化了低聚麦冬多糖的酶法制备条件,比较了不同方法对低聚麦冬多糖粗提物除蛋白的效果,并使用凝胶柱层析法对其进行了分离纯化。确定最佳酶反应条件为:料液比1∶4,温度45℃,pH 5.0,时间12h。醇沉条件为:乙醇... 详细信息

为得到较纯的低聚麦冬多糖,优化了低聚麦冬多糖的酶法制备条件,比较了不同方法对低聚麦冬多糖粗提物除蛋白的效果,并使用凝胶柱层析法对其进行了分离纯化。确定最佳酶反应条件为:料液比1∶4,温度45℃,pH 5.0,时间12h。醇沉条件为:乙醇体积分数80%,沉淀8h。比较了4种除蛋白的方法,Sevage-TCA联用法蛋白质去除率最高,为81.18%;低聚麦冬多糖损失率最低,为8.39%。除蛋白后的低聚麦冬多糖经Sephadex G-100凝胶柱分离纯化得到3种组分,分子质量均低于水提醇沉法提取的麦冬多糖。

关键词：低聚麦冬多糖酶法水解分离纯化

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酶法水解麦冬多糖及其产物的分离鉴定

食品与发酵工业 2011年第3期37卷 9-12页

作者：吕宁金凤燮鱼红闪大连工业大学生物工程学院

采用生物酶法水解纯化后的麦冬多糖,并对其产物的成分进行分析。利用葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱对麦冬粗多糖进行分离纯化,得到相对分子质量为48 347的纯麦冬多糖。使用Absidiasp.O8 s菌产酶水解纯麦冬多糖,产物经Sephadex G-100和Seph... 详细信息

采用生物酶法水解纯化后的麦冬多糖,并对其产物的成分进行分析。利用葡聚糖凝胶Sephadex G-100柱对麦冬粗多糖进行分离纯化,得到相对分子质量为48 347的纯麦冬多糖。使用Absidiasp.O8 s菌产酶水解纯麦冬多糖,产物经Sephadex G-100和Sephadex G-50柱分离,得到OP-1、OP-2、OP-3三种组分,相对分子质量分别为32 452、9 231和1 354。通过高效液相色谱分析纯麦冬多糖及其水解产物的单糖组成,结果表明,纯麦冬多糖的单糖组成为葡萄糖和果糖,其水解产物OP-1、OP-2、OP-3三种组分的单糖组成分别为果糖、果糖、葡糖糖和果糖。

关键词：麦冬多糖酶法水解相对分子质量高效液相色谱

不同种类人参及其各部位中皂苷组成和比例的研究

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食品与发酵工业 2002年第2期28卷 24-28页

作者：鱼红闪陈琪金凤燮大连轻工业学院食品科学与生物工程系博士副教授大连116001

研究了不同种类人参中皂苷含量 ,以及人参不同部位中的皂苷成分及比例。总皂苷含量测定结果为 ,三七参根中含 14 .2 % ,西洋参须中含 10 .1% ,人参根中含 4.4% ,人参头中含 8.6% ,人参皮中含 6.7% ,人参叶中含 7.7% ,人参须中含 9.9%。... 详细信息

研究了不同种类人参中皂苷含量 ,以及人参不同部位中的皂苷成分及比例。总皂苷含量测定结果为 ,三七参根中含 14 .2 % ,西洋参须中含 10 .1% ,人参根中含 4.4% ,人参头中含 8.6% ,人参皮中含 6.7% ,人参叶中含 7.7% ,人参须中含 9.9%。对西洋参须、三七参根及吉林产的人参头、人参皮、人参叶、人参根、人参须中的总皂苷作TLC检测及薄层扫描表明 ,三七参根中Rg1含量最高 ,西洋参须中Rb1含量最高 ,人参根中Rd的含量可以忽略 ,人参叶中含有特征皂苷F2 ;它们的Rb1/Rg1值分别为 ,西洋参须中 2 2 .2 ,三七参根中 0 .6,人参头中 4.3 ,人参皮中 6.7,人参叶中 0 .2 ,人参根中 2 .4,人参须中 11.9。

关键词：人参人参皂苷组成比例含量测定

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薯蓣皂苷糖苷酶基因的克隆及同源性分析

安徽农业科学 2011年第8期39卷 4438-4439,4442页

作者：吴宁金凤燮鱼红闪大连工业大学生物工程学院辽宁大连116034

[目的]从分子生物学水平上研究Absidia sp.G3d产薯蓣皂苷糖苷酶,对该酶基因CDS区的序列进行调取和分析。[方法]根据薯蓣皂苷糖苷酶的N端序列设计简并引物,以总RNA为模板进行RT-PCR调取cDNA,然后采用3'RACE和5'RACE技术,调取CDS区基因全... 详细信息

[目的]从分子生物学水平上研究Absidia sp.G3d产薯蓣皂苷糖苷酶,对该酶基因CDS区的序列进行调取和分析。[方法]根据薯蓣皂苷糖苷酶的N端序列设计简并引物,以总RNA为模板进行RT-PCR调取cDNA,然后采用3'RACE和5'RACE技术,调取CDS区基因全序列。[结果]测序得到序列长度为1 497 bp。该基因的同源性比较分析表明,薯蓣皂苷糖苷酶基因与α-鼠李糖苷酶没有同源性,与α-淀粉酶的基因序列具有很高的同源性,达到93%以上。[结论]蛋白质结构存在差异,酶反应特性不同。

关键词：薯蓣皂苷糖苷酶 RT-PCR 序列分析

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人参皂苷β-葡萄糖苷酶基因的毕赤酵母载体构建及生物转化

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高等学校化学学报 2018年第11期39卷 2451-2457页

作者：刘欣茹刘春莹徐龙权宋建国鱼红闪大连工业大学生物工程学院大连116034 大连大学生命科学与技术学院大连116622

将人参皂苷β-葡萄糖苷酶(Glu GF)基因与表达载体p PIC9K连接,构建重组质粒,转化至毕赤酵母中表达,并用于人参皂苷Rb1的催化转化.研究结果表明,成功构建了重组表达质粒p PIC9K-GluGF,转化后筛选到阳性重组毕赤酵母菌.重组菌产酶的最佳... 详细信息

将人参皂苷β-葡萄糖苷酶(Glu GF)基因与表达载体p PIC9K连接,构建重组质粒,转化至毕赤酵母中表达,并用于人参皂苷Rb1的催化转化.研究结果表明,成功构建了重组表达质粒p PIC9K-GluGF,转化后筛选到阳性重组毕赤酵母菌.重组菌产酶的最佳甲醇诱导体积为0. 5%,诱导时间为168 h.重组菌诱导培养制备的粗酶液具有Glu GF的活性,可以水解人参皂苷Rb1,产物中皂苷C-K含量达到0. 09 mg/mL,粗酶液中Glu GF的比活力为0. 67 U/mg.

关键词：人参皂苷β-葡萄糖苷酶人参皂苷Rb1 载体构建毕赤酵母生物转化

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丹参药渣中丹参酮的提取研究

安徽农业科学 2010年第9期38卷 4539-4541页

作者：石岭鱼红闪金凤燮大连工业大学生物与食品工程学院辽宁大连116034

[目的]从水浸丹参和三七后药渣中提取丹参酮并确定丹参酮成分。[方法]采用有机溶剂法提取丹参药渣中丹参酮,以薄层层析法检测确定最佳提取溶剂;通过高效液相色谱法确定丹参药渣中丹参酮成分。[结果]乙醚为丹参药渣中提取丹参酮的最佳溶... 详细信息

[目的]从水浸丹参和三七后药渣中提取丹参酮并确定丹参酮成分。[方法]采用有机溶剂法提取丹参药渣中丹参酮,以薄层层析法检测确定最佳提取溶剂;通过高效液相色谱法确定丹参药渣中丹参酮成分。[结果]乙醚为丹参药渣中提取丹参酮的最佳溶剂。水浸丹参和三七后干药渣,先经乙醇提取得到脂溶性提取物,再以乙醚为溶剂进行索氏提取,丹参酮混合物得率为2.17%;高效液相色谱法检测,丹参酮混合物中丹参酮ⅡA、次甲丹参醌、隐丹参酮、丹参酮I含量分别为3.62%、1.02%、2.56%、2.75%。[结论]丹参药渣中丹参酮成分与药材丹参基本一致,丹参药渣可以作为一种丹参酮资源,具有开发利用的价值。

关键词：丹参药渣丹参酮提取

利用重组酶高效转化制备稀有人参皂苷C-Mc1和C-Mc

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食品与发酵工业 2022年第19期48卷 30-35页

作者：关猛猛刘春莹鱼红闪大连工业大学生物工程学院辽宁大连116034 大连大学生命科学与技术学院辽宁大连116622

为了高效制备稀有人参皂苷C-Mc和CMc1,调取了Terrabacter ginsenosidimutans中的人参皂苷酶基因,构建载体GST-bgpA,并转化到Escherichia coli C41(DE3)中表达,得到人参皂苷3-O-β-D-葡萄糖苷酶。该酶分子质量为72.4 kDa,转化人参皂苷Rc的最适pH为7.0,最适温度为40℃,米氏常数K_(m)值为6.25 mmol/L,V_(m)值为19.6 mmol/(h·L)。为了降低成本,利用粗酶转化人参皂苷Rc制备C-Mc1和C-Mc。粗酶制备C-Mc1的反应条件:20 g/L的人参皂苷Rc在40℃下酶反应24 h;制备C-Mc的反应条件:5 g/L的人参皂苷Rc在40℃下酶反应60 h。此条件下,粗酶转化制备并分离纯化得到C-Mc1和C-Mc的单体,并经HPLC检测,其纯度均在90%以上。C-Mc1的酶转化制备:产物得到C-Mc和C-Mc1,其摩尔得率分别为74.9%和11.1%。C-Mc的酶转化制备:C-Mc的摩尔得率为93.2%。该研究为稀有人参皂苷C-Mc和C-Mc1产业化提供了依据。

关键词：人参皂苷3-O-β-D-葡萄糖苷酶高效制备酶转化人参皂苷C-Mc1 人参皂苷C-Mc

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北五味子的液相色谱指纹图谱的建立

色谱 2008年第1期26卷 64-67页

作者：付绍平杨博陈彤鱼红闪金凤燮大连工业大学生物与食品工程学院辽宁省发酵工程重点实验室辽宁大连116034

利用反相高效液相色谱法建立中药材北五味子的指纹图谱,为科学评价及有效控制北五味子质量提供了新方法。实验分析了10个不同产地的北五味子样品,采用国家食品药品监督管理局推荐的"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)"计算处理,... 详细信息

利用反相高效液相色谱法建立中药材北五味子的指纹图谱,为科学评价及有效控制北五味子质量提供了新方法。实验分析了10个不同产地的北五味子样品,采用国家食品药品监督管理局推荐的"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)"计算处理,建立了由26个指纹峰和19个共有峰组成的北五味子指纹图谱,确定了5个主要的指纹峰。通过夹角余弦法和相关系数法计算了北五味子10个样本与指纹图谱间的相似度,得到了满意的结果。所建立的指纹图谱可以用来区别不同产地北五味子药材的优劣,为进一步控制北五味子的质量提供依据。

关键词：液相色谱指纹图谱北五味子质量控制