利用重组酶高效转化制备稀有人参皂苷C-Mc1和C-Mc

作     者：关猛猛 刘春莹 鱼红闪 GUAN Mengmeng;LIU Chunying;YU Hongshan

作者机构：大连工业大学生物工程学院辽宁大连116034 大连大学生命科学与技术学院辽宁大连116622 

出 版 物：《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期：2022年第48卷第19期

页      面：30-35页

核心收录：

学科分类：081702[工学-化学工艺] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基　　金：国家高端外国专家项目(GDT20152100019) 

主　　题：人参皂苷3-O-β-D-葡萄糖苷酶 高效制备 酶转化 人参皂苷C-Mc1 人参皂苷C-Mc 

摘      要：为了高效制备稀有人参皂苷C-Mc和CMc1,调取了Terrabacter ginsenosidimutans中的人参皂苷酶基因,构建载体GST-bgpA,并转化到Escherichia coli C41(DE3)中表达,得到人参皂苷3-O-β-D-葡萄糖苷酶。该酶分子质量为72.4 kDa,转化人参皂苷Rc的最适pH为7.0,最适温度为40℃,米氏常数K_(m)值为6.25 mmol/L,V_(m)值为19.6 mmol/(h·L)。为了降低成本,利用粗酶转化人参皂苷Rc制备C-Mc1和C-Mc。粗酶制备C-Mc1的反应条件:20 g/L的人参皂苷Rc在40℃下酶反应24 h;制备C-Mc的反应条件:5 g/L的人参皂苷Rc在40℃下酶反应60 h。此条件下,粗酶转化制备并分离纯化得到C-Mc1和C-Mc的单体,并经HPLC检测,其纯度均在90%以上。C-Mc1的酶转化制备:产物得到C-Mc和C-Mc1,其摩尔得率分别为74.9%和11.1%。C-Mc的酶转化制备:C-Mc的摩尔得率为93.2%。该研究为稀有人参皂苷C-Mc和C-Mc1产业化提供了依据。