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玉米愈伤组织培养体系优化及ICE1基因的遗传转化

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吉林农业大学学报 2017年第5期39卷 518-523页

作者：刘双关淑艳孙苏魏晓禹吉林农业大学生命科学学院长春130118

选取3个骨干玉米自交系丹988、齐319、郑58幼胚为材料,利用正交试验设计L9(34),研究了基因型、幼胚大小、2,4-D浓度和AgNO_3浓度4个因素对胚性愈伤诱导率的影响。结果表明:各因素对愈伤诱导结果的影响大小依次为基因型>幼胚大小>2,4-D浓... 详细信息

选取3个骨干玉米自交系丹988、齐319、郑58幼胚为材料,利用正交试验设计L9(34),研究了基因型、幼胚大小、2,4-D浓度和AgNO_3浓度4个因素对胚性愈伤诱导率的影响。结果表明:各因素对愈伤诱导结果的影响大小依次为基因型>幼胚大小>2,4-D浓度>AgNO_3浓度,最优组合为"齐319"、幼胚为1.5~2.0 mm、2,4-D浓度为2 mg/L和AgNO_3浓度为8 mg/L,愈伤组织诱导率为60.58%。用农杆菌介导法将植物超表达载体p CAMBIA3301-ICE1-Bar转入玉米自交系"齐319"中,得到的转化植株经除草剂basta初步筛选后,通过PCR检测,获得了5棵T_0代阳性植株。

关键词：玉米幼胚愈伤组织农杆菌侵染

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Pht1家族在几种植物中的研究进展

吉林农业大学学报 2017年第4期39卷 379-385页

作者：关淑艳孙国旭徐丹丹魏晓禹孙苏马义勇吉林农业大学生命科学学院长春130118

植物磷转运蛋白是植物磷营养中必需的一种膜蛋白。植物磷转运子在植物根系中负责磷的吸收、转运,其表达受磷调控,磷元素广泛存在于动植物组织中,是植物生长所必需的大量无机营养元素之一,在诸多代谢过程中都起着举足轻重的作用。在植株... 详细信息

植物磷转运蛋白是植物磷营养中必需的一种膜蛋白。植物磷转运子在植物根系中负责磷的吸收、转运,其表达受磷调控,磷元素广泛存在于动植物组织中,是植物生长所必需的大量无机营养元素之一,在诸多代谢过程中都起着举足轻重的作用。在植株中,磷素通过磷酸盐转运蛋白吸收和转运,该蛋白在调控植株对磷素吸收、利用效率等方面具有重要作用。植物基因组中含有大量推测的以基因家族的形式存在的编码磷转运蛋白基因。目前已知的磷转运子分为五大家族Pht1、Pht2、Pht3、Pho1和Pho2。文中主要综述了水稻、大豆、玉米、小麦、拟南芥、番茄、苜蓿、马铃薯中Pht1家族的结构、功能及表达调控方面的研究进展。

关键词：磷酸盐转运蛋白 Pht1家族研究进展

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转cry1Ab13基因玉米新种质的创制

华南农业大学学报 2016年第5期37卷 31-37页

作者：陈沼汀董昭旭刘双孙国旭李晖魏晓禹孙苏关淑艳吉林农业大学生命科学学院吉林长春130118

【目的】构建包含抗鳞翅目害虫基因cry1Ab13的重组植物表达载体,并利用其创制对玉米螟Ostrinia furnacalis具有优良抗性的转基因玉米Zea may L.新种质。【方法】利用同源重组法将cry1Ab13基因连接到表达载体pCAMBIA3300-Bar上,获得以抗... 详细信息

【目的】构建包含抗鳞翅目害虫基因cry1Ab13的重组植物表达载体,并利用其创制对玉米螟Ostrinia furnacalis具有优良抗性的转基因玉米Zea may L.新种质。【方法】利用同源重组法将cry1Ab13基因连接到表达载体pCAMBIA3300-Bar上,获得以抗除草剂Bar基因为筛选标记的植物表达载体pCAMBIA3300-cry1Ab13-Bar。通过农杆菌介导法转化玉米自交系H99幼胚,对再生植株进行逐代除草剂筛选、PCR检测及T2代植株的Southern blotting检测、实时荧光定量PCR检测,并对转基因植株进行田间及室内抗虫性鉴定。【结果】构建了cry1Ab13基因的植物表达载体,转化玉米获得3株高抗玉米螟和1株抗玉米螟的T2代转基因植株。Southern blotting证明cry1Ab13基因已经整合到玉米基因组中,实时荧光定量PCR结果表明cry1Ab13基因已经在玉米植株内表达。抗虫性鉴定结果表明,与对照相比转基因植株对玉米螟的抗性显著提高。【结论】将cry1Ab13基因导入玉米并成功表达,显著提高了转基因玉米对玉米螟的抗性,为抗虫玉米新种质的创制奠定了基础。

关键词：抗虫性 cry1Ab13基因转基因玉米玉米螟

植物磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶的调控机制及功能研究进展

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吉林农业大学学报 2017年第5期39卷 505-512页

作者：关淑艳孙苏马义勇魏晓禹费建博刘冀王丕武吉林农业大学生命科学学院长春130118 吉林农业大学农学院长春130118

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)是开花植物中普遍存在的一类重要的代谢调控酶,在特定的组织细胞中表达,且活性受磷酸化调节。PEPCK通过多种代谢途径间接参与植物氮代谢、pH平衡、果实成熟及种子萌发的糖异生、C_4及景天科代谢(CAM)植物... 详细信息

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)是开花植物中普遍存在的一类重要的代谢调控酶,在特定的组织细胞中表达,且活性受磷酸化调节。PEPCK通过多种代谢途径间接参与植物氮代谢、pH平衡、果实成熟及种子萌发的糖异生、C_4及景天科代谢(CAM)植物光合作用的CO_2浓缩等重要过程,在植物生长过程中发挥了重要作用。文中概述了PEPCK的调控机制及其在植物生长过程中的主要功能,展望了PEPCK在植物基因工程中的应用前景。

关键词：磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶磷酸化调控机制生理功能

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玉米新品种“吉农玉387”选育报告

吉林农业大学学报 2017年第6期39卷 748-750页

作者：马义勇董昭旭孙苏魏晓禹刘振库关淑艳吉林农业大学农学院长春130118 吉林农业大学生命科学学院长春130118 长春市种子管理站长春130033

玉米新品种"吉农玉387"是以外引系"M54"为母本、自选系"甸12164"为父本,杂交选育而成的玉米单交种。2014—2015年2年区域试验平均产量为12 987.1 kg/hm^2,比对照品种"郑单958"增产11.0%。2015年生产试验平均产量为12 320.1 kg/hm^2,比... 详细信息

玉米新品种"吉农玉387"是以外引系"M54"为母本、自选系"甸12164"为父本,杂交选育而成的玉米单交种。2014—2015年2年区域试验平均产量为12 987.1 kg/hm^2,比对照品种"郑单958"增产11.0%。2015年生产试验平均产量为12 320.1 kg/hm^2,比对照品种"郑单958"增产11.3%。该品种于2016年3月通过吉林省农作物品种审定委员会审定,其主要特点是高产、多抗、适应性广,适宜吉林省玉米中晚熟区种植。

关键词：玉米单交种吉农玉387

Spartin和白脂素在糖尿病心脏微血管内皮损伤中的作用及其机制探讨

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四川大学学报（医学版） 2019年第6期50卷 827-834页

作者：陈莎汪雄邱琛茗侯娟妮魏晓禹向朝雪唐名扬张睿裴海峰西南交通大学临床医学院成都610000 西部战区总医院心血管内科成都610083 西部战区总医院检验科成都610083

目的探讨spartin和白脂素(Asp)在高糖性心脏微血管内皮(CMECs)细胞损伤中的作用及其作用机制。方法培养小鼠CMECs,将其分为正常组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L)和高糖组(HG组,葡萄糖浓度为30 mmol/L),实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blo... 详细信息

目的探讨spartin和白脂素(Asp)在高糖性心脏微血管内皮(CMECs)细胞损伤中的作用及其作用机制。方法培养小鼠CMECs,将其分为正常组(葡萄糖浓度为5.5 mmol/L)和高糖组(HG组,葡萄糖浓度为30 mmol/L),实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot分别检测CMECs痉挛性截瘫基因20型(spastic paraplegia 20,SPG20) mRNA和spartin蛋白的表达。利用腺病毒(Ad)转染上调spartin表达、小干扰RNA(siRNA)转染下调,采用抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)、Asp对下调了spartin表达、并在48 h后用30 mmol/L葡萄糖干预24 h的CMECs进行干预,采用流式细胞学技术检测各组细胞凋亡率,一氧化氮(nitric oxide, NO)荧光探针染色检测NO的生成、超氧化物阴离子荧光探针染色及ELISA试剂盒检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)的生成。建立2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)小鼠模型,分为T2DM组和T2DM+Asp组,模型建立成功后(随机血糖大于16.7 mmol/L)予以Asp(1μg/g)每天腹腔注射1次,2周后小鼠心脏超声检查心脏舒张功能,心脏微血管腐蚀铸型后扫描电镜观察心脏微血管内皮完整性。结果与正常组相比,HG组小鼠CMECs中SPG20 mRNA及spartin蛋白表达均降低(P<0.05)。在HG培养条件下,Ad感染后CMECs内ROS含量减少(P<0.05),细胞凋亡水平降低(P<0.05), NO生成增加;相反,siRNA干预后得到相反的结果。NAC能够部分逆转siRNA的上述作用。Asp能够上调CMECs SPG20 mRNA及spartin蛋白表达,减少ROS的生成,减少细胞凋亡,增加NO的生成,但下调spartin后给予Asp干预,Asp减少ROS生成、减少CMECs凋亡、 NO生成增加效应被部分逆转。体内实验发现,Asp可改善2型糖尿病模型小鼠心脏功能和增加心脏微血管内皮的完整性和光滑性。结论 Asp可通过上调spartin表达途径抑制CMECs内的氧化应激反应,从而减轻糖尿病心脏微血管内皮损伤。

关键词：糖尿病心脏微血管内皮细胞白脂素 Spartin 氧化应激

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农杆菌介导的玉米幼胚遗传转化体系的建立

吉林农业大学学报 2017年第6期39卷 640-647页

作者：魏晓禹邵诗迪孙苏金栋梁刘智博焦鹏关淑艳吉林农业大学生命科学学院长春130118 吉林省实验中学长春130012

采用玉米幼胚为受体材料,利用农杆菌介导植物表达载体p CAMBIA1300-35S-GUS-Nos侵染玉米幼胚,以GUS基因瞬时表达率为指标,通过单因素试验及四因素三水平正交试验研究了基因型、幼胚大小、侵染菌液浓度及侵染时间对幼胚遗传转化率的影响... 详细信息

采用玉米幼胚为受体材料,利用农杆菌介导植物表达载体p CAMBIA1300-35S-GUS-Nos侵染玉米幼胚,以GUS基因瞬时表达率为指标,通过单因素试验及四因素三水平正交试验研究了基因型、幼胚大小、侵染菌液浓度及侵染时间对幼胚遗传转化率的影响。结果表明:各因素对幼胚遗传转化率影响的大小依次为基因型>幼胚大小>侵染菌液浓度>侵染时间;最佳侵染组合基因型为H99、幼胚为1.1~2.0 mm、侵染菌液OD600=0.6、侵染时间为30 min,GUS基因对幼胚的瞬时表达率可达(34.44±1.11)%。

关键词：玉米幼胚农杆菌介导法遗传转化率体系优化

舌下微循环成像系统在心肌梗死后远端微循环变化观察中的应用

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解放军医学杂志 2019年第4期44卷 276-280页

作者：冯健朱忠立李运明向朝雪唐名扬沈阳魏晓禹裴海峰西部战区总医院心血管内科成都610083 西部战区总医院重症医学科成都610083 西部战区总医院信息科成都610083

目的探索舌下微循环成像系统(简称微视系统)应用于心脏微血管检测的可行性,并探讨其在冠脉微循环障碍诊断、治疗及预后评估中的临床价值。方法以正常SD大鼠作为研究对象,利用微视系统对大鼠冠脉主干及其分支微循环进行检测。另取40只SD... 详细信息

目的探索舌下微循环成像系统(简称微视系统)应用于心脏微血管检测的可行性,并探讨其在冠脉微循环障碍诊断、治疗及预后评估中的临床价值。方法以正常SD大鼠作为研究对象,利用微视系统对大鼠冠脉主干及其分支微循环进行检测。另取40只SD大鼠随机分为心肌梗死组(n=20)与假手术组(n=20),心肌梗死组大鼠结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死模型,假手术组与心肌梗死组接受同样处理但不结扎。利用微视系统对假手术组及心肌梗死组大鼠手术前及手术后5、10、20min左前降支远端微血管进行检测和分析,检测指标包括总血管密度(TVD)、灌注血管密度(PVD)、灌注血管比例(PPV)、微血管流动指数(MFI)、异质性指数(HI)。结果微视系统下,正常大鼠心脏左右冠脉及其分支微血管清晰可见,血流灌注连续,血管密集、分布均匀。在心肌梗死组大鼠中,结扎时间越长,微血管脉络越模糊不清,血流显影中断,血管分布不均,心肌梗死20min时点微循环基本不显像,血流基本消失。与心肌梗死5min时点比较,心肌梗死10、20min的TVD、PVD、PPV、MFI均降低(P<0.05),HI升高(P<0.05)。与假手术组比较,心肌梗死组TVD、PVD、PPV、MFI均降低(P<0.05),HI升高(P<0.05)。结论微视系统可用于正常及病变状态下大鼠心脏微循环的检测。

关键词：心肌梗死心脏微循环舌下微循环成像系统大鼠

耐密玉米新品种“豫禾358”和“豫禾368”的选育及栽培技术

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吉林农业大学学报 2018年第6期40卷 767-770页

作者：关淑艳金栋梁魏晓禹费建博刘智博马义勇吉林农业大学生命科学学院长春130118 吉林农业大学农学院长春130118

"豫禾358"是以"甸M383"为母本、以"F784"为父本杂交选育而成,2014—2015年2年区域试验平均产量12 897. 5 kg/hm^2,比对照"先玉335"增产6. 2%。2015年生产试验平均产量12 544. 9 kg/hm^2,比对照"先玉335"增产6. 9%,该品种于2016年3月通... 详细信息

"豫禾358"是以"甸M383"为母本、以"F784"为父本杂交选育而成,2014—2015年2年区域试验平均产量12 897. 5 kg/hm^2,比对照"先玉335"增产6. 2%。2015年生产试验平均产量12 544. 9 kg/hm^2,比对照"先玉335"增产6. 9%,该品种于2016年3月通过吉林省农作物品种审定委员会审定。"豫禾368"是以外引系"M287"为母本、以"F784"为父本杂交选育而成,2014—2015年2年区域试验平均产量13 198. 6 kg/hm^2,比对照"先玉335"增产5. 5%。2016年生产试验平均产量12 693. 8 kg/hm^2,比对照"先玉335"增产6. 6%。该品种于2017年4月通过吉林省农作物品种审定委员会审定。2个品种主要特点是耐密、高产、广适、优质、高效、抗性好,适合吉林省玉米中晚熟区和中熟区高密种植。

关键词：玉米单交种豫禾358 豫禾368