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麻杏石甘汤含药肝孵育液的制备工艺及疗喘主要差异性成分研究

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时珍国医国药 2021年第9期32卷 2173-2179页

作者：张颖雷婷肖雄马嘉鑫樊学程李文宏高文军江西中医药大学药学院江西南昌330004

目的考察麻杏石甘汤(MXSGT)含药肝孵育液较优的制备工艺条件,并通过液质联用分析探讨其疗喘主要差异性成分,为该方法用于体外药理学研究提供支撑。方法选用L_(9)(3^(4))正交表,将肝细胞密度(A)、肝细胞悬液-含药肠吸收液体积比(B)、孵... 详细信息

目的考察麻杏石甘汤(MXSGT)含药肝孵育液较优的制备工艺条件,并通过液质联用分析探讨其疗喘主要差异性成分,为该方法用于体外药理学研究提供支撑。方法选用L_(9)(3^(4))正交表,将肝细胞密度(A)、肝细胞悬液-含药肠吸收液体积比(B)、孵育时间(C)作为3因素,各取3水平,采用HPLC检测MXSGT含药肝孵育液9个实验组中麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草酸铵的含量,得出较优制备条件。应用三重四级杆液质联用仪(TSQ-Quantis)技术,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),柱温40℃,流动相0.05%甲酸水-乙腈梯度洗脱,电喷雾离子源,正离子模式(ESI^(+))和负离子模式(ESI^(-))扫描,采集MXSGT含药肝孵育液质谱图数据,PLS分析找出其疗喘主要差异性成分。结果当BRL-3A细胞密度为1×10^(5)个/mL、细胞悬液:含药肠吸收液=1:12、孵育时间为10 min时,4种成分含量均最高,可选为含药肝孵育液的制备工艺条件。MXSGT含药肝孵育液中主要差异性疗喘化合物为甲基麻黄碱、麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、甘草素、甘草酸铵7种。结论建立的含药肝孵育液制备工艺简便准确、重复性好、专属性强,可为后续的体外药理作用及机制研究提供新的方法;基本明确了MXSGT口服后通过肠吸收由门静脉经肝入血的物质基础,可为深入地成分-靶点分析乃至复方配伍规律研究提供依据。

关键词：麻杏石甘汤含药肝孵育液制备工艺主要差异性成分

基于差异性成分分析的麻杏石甘汤含药肝孵育液体外药效学初步研究

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中国医院药学杂志 2022年第7期42卷 689-696页

作者：李文宏雷婷樊学程张颖肖雄马嘉鑫江西中医药大学药学院江西南昌330004

目的:以含药血清为对照,通过检测分析麻杏石甘汤(Maxing Shigan Decoction, MSD)含药肝孵育液的显著性差异成分及其含量、变异系数,为含药肝孵育液的质量控制提供参考,初步探讨其用于MSD体外药效学研究的可行性。方法:应用三重四级杆液... 详细信息

目的:以含药血清为对照,通过检测分析麻杏石甘汤(Maxing Shigan Decoction, MSD)含药肝孵育液的显著性差异成分及其含量、变异系数,为含药肝孵育液的质量控制提供参考,初步探讨其用于MSD体外药效学研究的可行性。方法:应用三重四级杆液-质联用(TSQ-Quantis)技术,采集13组MSD水煎液数据,采用正交偏最小二乘判别分析法分析得到水煎液的差异性成分;采集不同批次MSD含药肝孵育液和含药血清数据,找到二者的差异性成分,计算各成分的含量并分析其RSD。体外药效学实验分为正常组、模型组、含药肝孵育液(2.5%,5%,10%)和含药血清(2.5%,5%,10%)组,用磷酸组胺处理复制支气管上皮细胞损伤模型,分别给予相应药物孵育36 h后,Western blot检测各组磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)和蛋白激酶B(Akt)蛋白的相对表达量,并计算RSD。结果:与水煎液的8个差异性成分相比,含药肝孵育液和含药血清的差异性成分均有7个;含药肝孵育液中差异性成分的含量高,且不同批次间各成分的RSD均小于10%。含药肝孵育液组和含药血清组(2.5%)PI3K蛋白表达降低(P<0.05),含药肝孵育液和含药血清组Akt蛋白的表达均显著降低(P<0.05),且各含药肝孵育液组PI3K和Akt相对表达量的RSD均小于10%。结论:MSD含药肝孵育液中的差异性成分近似于含药血清,该体系成分含量高、稳定性好;对上皮细胞损伤模型PI3K和Akt蛋白表达的作用趋势与含药血清一致,且结果重现性好;结合其模拟口服中药肠吸收后经肝入血的全过程等优点,初步表明含药肝孵育液用于MSD体外药效学研究有一定的可行性。

关键词：麻杏石甘汤含药肝孵育液含药血清差异性成分磷脂酰肌醇-3激酶蛋白激酶B

麻杏石甘汤对哮喘模型大鼠气道损伤及EGFR表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2022年第7期28卷 1-10页

作者：李文宏雷婷马嘉鑫樊学程肖雄高文军敖波周开放江西中医药大学药学院南昌330004 中信惠州医院广东惠州516006 新乡医学院三全学院河南新乡453003

目的:探讨麻杏石甘汤调节表皮生长因子受体(EGFR)表达、减轻大鼠气道损伤的作用,并找出其治疗哮喘较优的配伍比例。方法:SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(5×10^(-4)g·kg^(-1))及麻杏石甘汤1∶0.5、1∶1、1∶2组(中药A、... 详细信息

目的:探讨麻杏石甘汤调节表皮生长因子受体(EGFR)表达、减轻大鼠气道损伤的作用,并找出其治疗哮喘较优的配伍比例。方法:SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(5×10^(-4)g·kg^(-1))及麻杏石甘汤1∶0.5、1∶1、1∶2组(中药A、B、C组,剂量均为10 g·kg^(-1)),每组8只,除正常组外,其余各组用2%氯化乙酰胆碱与0.4%磷酸组胺雾化复制哮喘模型,造模前1 h,正常组和模型组大鼠灌服等体积生理盐水,其余各给药组灌服等体积相应药物,1次/d,连续7 d。第7天造模并记录引喘潜伏期后即刻麻醉,取动脉血和气管组织。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,病理切片观察各组气管组织病理形态变化及上皮细胞超微结构,原位末端标记法(TUNEL)检测上皮细胞凋亡,原位杂交和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测EGFR mRNA和蛋白表达。结果:与模型组比较,中药A、B、C组均可延长哮喘大鼠引喘潜伏期(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠IL-2水平显著降低(P<0.01),IL-4和TNF-α水平明显升高(P<0.05,P<0.01),气道病理学评分、蓝色胶原面积和气道上皮细胞凋亡指数均显著升高(P<0.01),气管组织EGFR mRNA和蛋白的表达均显著增高(P<0.01);与模型组比较,中药A组IL-2水平明显升高(P<0.05);中药A、B组IL-4水平明显降低(P<0.05,P<0.01);中药A、B、C组TNF-α水平均显著降低(P<0.01);中药A、B、C组对气管组织病理改变有不同程度的修复作用(P<0.05),中药A组可以抑制气管组织纤维化(P<0.05),且中药A组对气道上皮细胞超微结构变化的修复作用最为显著;中药A、B、C组可明显抑制气道上皮细胞的凋亡(P<0.05);中药A、B、C组均可明显抑制EGFR mRNA的过表达(P<0.05,P<0.01),中药B、C组可显著抑制气道上皮组织EGFR蛋白上调(P<0.05,P<0.01)。结论:麻杏石甘汤可以抑制哮喘模型大鼠气道上皮细胞凋亡及其结构的异常改变,减轻气道损伤,降低气管组织中EGFR的表达。麻杏石甘汤减轻哮喘大鼠气道上皮损伤的较优配伍组是中药A组,其比例为麻黄-苦杏仁-甘草-石膏1∶0.5∶4∶1。

关键词：麻杏石甘汤气道损伤表皮生长因子受体(EGFR) 白细胞介素(IL)-2 IL-4 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)

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基于含药肝孵育液法的麻杏石甘汤抗气道上皮损伤的作用机制研究

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中国药学杂志 2022年第23期57卷 2013-2023页

作者：李文宏樊学程雷婷马嘉鑫谢金根陈林林肖雄高文军江西中医药大学药学院南昌330004

目的结合体内外实验探讨含药肝孵育液法用于中药体外药理学研究的可行性及麻杏石甘汤抗气道上皮损伤的作用机制。方法SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(dexamethasone,Dex)及麻杏石甘汤组(中药配比方A、B、C、D),麻杏石甘... 详细信息

目的结合体内外实验探讨含药肝孵育液法用于中药体外药理学研究的可行性及麻杏石甘汤抗气道上皮损伤的作用机制。方法SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组(dexamethasone,Dex)及麻杏石甘汤组(中药配比方A、B、C、D),麻杏石甘汤干预大鼠哮喘模型,记录引喘潜伏期,病理切片观察气管组织病理形态和气道上皮细胞超微结构变化,原位杂交和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测表皮生长因子受体(EGFR)mRNA和蛋白表达;SD雄性大鼠离体气管随机分为正常组、模型组、布地奈德福莫特罗组(budesonide and formoterol fumarate powder for inhalation,BF)及麻杏石甘汤含药肝孵育液组(中药配比方A、B、C、D),麻杏石甘汤含药肝孵育液干预大鼠离体气管损伤模型,记录气管张力变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测气管EGFR、血管内皮生长因子(VEGF)和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)含量水平,原位杂交和免疫组化分别检测磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)mRNA和蛋白表达;大鼠气道上皮细胞(RTE)随机分为正常组、模型组、地塞米松组及麻杏石甘汤含药肝孵育液组(中药配比方A、B、C、D),麻杏石甘汤含药肝孵育液干预RTE细胞损伤模型,流式细胞术检测RTE细胞损伤率,Western blot检测RTE细胞EGFR、PI3K蛋白表达。结果整体研究表明,与正常组比较,模型组气管组织EGFR mRNA和蛋白表达显著升高,气管组织结构形态和上皮细胞超微结构受损;与模型组比较,给药组均可延长大鼠引喘潜伏期,修复气管组织结构形态和上皮细胞超微结构损伤,并下调EGFR mRNA和蛋白表达,以A组药效最为显著。离体组织研究表明,与正常组比较,模型组气管EGFR、VEGF、GM-CSF含量水平显著升高,PI3KmRNA和蛋白表达显著升高;与模型组比较,给药组均可舒张气管环张力,降低EGFR、VEGF、GM-CSF含量水平,并下调PI3K mRNA和蛋白的表达,以A组药效最为显著。离体细胞研究表明,与正常组比较,模型组RTE细胞损伤率显著增加,EGFR、PI3K蛋白表达显著升高;与模型组比较,给药组均可降低RTE细胞损伤,下调EGFR、PI3K蛋白表达,以A组药效最为显著。结论含药肝孵育液法用于体外药理学研究对各药效指标影响的作用趋势与体内药理作用相一致,具备较好的可行性;麻杏石甘汤减轻气道上皮损伤可能是通过调节EGFR/PI3K信号通路和抑制气道重塑发挥作用。

关键词：麻杏石甘汤含药肝孵育液支气管哮喘气道上皮损伤表皮生长因子受体/磷酸肌醇-3-激酶信号通路气道重塑

葛根与粉葛抗H9c2细胞OGD/R损伤的有效成分及作用机制初步研究

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中国药学杂志 2023年第3期58卷 243-253页

作者：谢金根刘荣华马嘉鑫樊学程雷婷陈林林肖雄高文军李文宏江西中医药大学药学院南昌330004

目的初步探讨葛根(Puerariae Lobatae Radix,PLR)与粉葛(Puerariae Thomsonii Radix,PTR)抗心肌细胞损伤的物质基础、作用及机制的异同;比较二者不同含药体系中有效成分相对含量及抗心肌(H9c2)细胞氧-糖剥夺/复氧(oxygen-glucose depriv... 详细信息

目的初步探讨葛根(Puerariae Lobatae Radix,PLR)与粉葛(Puerariae Thomsonii Radix,PTR)抗心肌细胞损伤的物质基础、作用及机制的异同;比较二者不同含药体系中有效成分相对含量及抗心肌(H9c2)细胞氧-糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤效应的差异。方法应用网络药理学方法找出PLR和PTR抗H9c2细胞OGD/R损伤的有效成分,结合超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)检测鉴定二者含药肠吸收液(intestinal absorption fluid,IAF)和含药血清(medicated serum,MS)中的主要有效成分及相对含量;建立H9c2细胞OGD/R损伤模型,PLR与PTR不同含药体系干预后,CCK-8检测细胞活力,生化试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞丝裂原活化蛋白激酶p38(MAPKp38)和核转录因子-κBp65(NFκBp65)蛋白表达。结果研究发现PLR和PTR抗H9c2细胞OGD/R损伤的有效成分为葛根素、滨蒿内酯、大豆素、芒柄花素、染料木素,且MS中各有效成分相对含量均远低于IAF;与正常组比较,模型组SOD活性降低(P<0.01),LDH活性升高(P<0.01),MAPKp38和NFκBp65蛋白表达增加(P<0.05);与模型组比较,各给药组均可以升高SOD活性(P<0.01),降低LDH活性(P<0.01),下调MAPKp38和NFκBp65蛋白表达(P<0.05)。比较发现,PLR抗H9c2细胞损伤的作用优于PTR;IAF对各药效指标的影响优于MS。结论PLR和PTR均可不同程度的保护OGD/R引起的H9c2细胞损伤,而PLR的作用较强,其作用机制可能是通过调控MAPKp38和NFκBp65蛋白表达发挥作用;IAF中有效成分相对含量较高,对各药效指标影响的较强而重现性较好,适合于中药体外药理学研究。

关键词：葛根粉葛含药肠吸收液氧-糖剥夺/复氧心肌细胞

麻黄-杏仁药对对磷酸组胺诱导的RTE细胞损伤的保护作用

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亚太传统医药 2021年第9期17卷 13-18页

作者：张颖李文宏肖雄雷婷周开放敖波马嘉鑫廖玉群江西中医药大学药学院江西南昌330000 新乡医学院三全学院河南新乡453000 惠州市中信惠州医院药学部广东惠州516000 江西药都仁和制药有限公司江西樟树331200

目的:观察麻黄-杏仁药对对大鼠气道细胞损伤的保护作用,探讨其缓解哮喘症状与调控EGFR、PI3K和Bax表达以及大分子通透性的相关作用。方法:选用U6(64)均匀设计表安排药对配比,以磷酸组胺孵育建立气道上皮细胞损伤模型,给予不同配比麻黄-... 详细信息

目的:观察麻黄-杏仁药对对大鼠气道细胞损伤的保护作用,探讨其缓解哮喘症状与调控EGFR、PI3K和Bax表达以及大分子通透性的相关作用。方法:选用U6(64)均匀设计表安排药对配比,以磷酸组胺孵育建立气道上皮细胞损伤模型,给予不同配比麻黄-杏仁药对的含药肠吸收液进行干预,采用RT-PCR检测气道上皮细胞EGFR、PI3K、Bax mRNA的表达,采用Western blotting检测气道上皮细胞EGFR、PI3K和Bax蛋白的表达,采用电阻测量仪检测跨细胞单层电阻值(TEER),采用荧光酶标仪检测FITC-BSA的荧光强度,采用荧光显微镜检测气道上皮细胞损伤模型对FITC-BSA的通透性。结果:麻黄-杏仁药对各组含药肠吸收液中,N1A-N5A均可下调EGFR和PI3K mRNA表达,N_(2)A和N_(3)A均可下调Bax mRNA表达;N_(1)A-N_(6)A均可下调EGFR蛋白相对含量,N_(3)A-N_(6)A均可下调PI3K蛋白含量,N_(1)A-N_(6)A均可下调Bax蛋白含量;N_(3)A、N_(5)A和N_(6)A均可增加TEER,N_(2)A-N_(6)A均可降低FITC-BSA的透过率。结论:麻黄-杏仁药对可下调EGFR、PI3K和Bax的表达,提高细胞膜完整性,增加TEER,降低大分子通透性,从而维持机体内环境稳态,抑制气道损伤,达到缓解哮喘症状的目的;进一步表明含药肠吸收液用于中药复方体外药理研究是客观、可行的。

关键词：麻黄-杏仁药对气道损伤含药肠吸收液 EGFR PI3K Bax 大分子通透性

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中药逆转白血病多药耐药机制研究进展

江西中医药大学学报 2022年第4期34卷 120-124页

作者：马嘉鑫刘永忠李文宏雷婷段丽婷廖玉群江西中医药大学南昌330004 江西药都仁和制药有限公司江西樟树331200

白血病细胞在化疗后继发的多药耐药(MDR)是化疗失败和白血病复发的主要原因。目前寻求安全、有效的MDR逆转剂,探索治疗过程中产生MDR的机理,提高白血病细胞对化疗药物的敏感性,是科研工作者和临床医生共同奋斗的目标。由于西药价格昂贵... 详细信息

白血病细胞在化疗后继发的多药耐药(MDR)是化疗失败和白血病复发的主要原因。目前寻求安全、有效的MDR逆转剂,探索治疗过程中产生MDR的机理,提高白血病细胞对化疗药物的敏感性,是科研工作者和临床医生共同奋斗的目标。由于西药价格昂贵且副作用大,而中药以其多靶点,多阶段,毒副作用小,安全有效的优势成为白血病MDR研究领域的热点。本文从中药作用于白血病MDR相关作用机制入手,就这一方面研究进展做一综述。

关键词：白血病多药耐药中药逆转机制

基于前馈补偿的轮腿式平台多任务复合运动解耦控制

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北京理工大学学报 2025年第1期45卷 26-33页

作者：刘辉马嘉勇杨海洋郝伟赫北京理工大学机械与车辆学院北京理工大学前沿技术研究院

轮腿式平台在执行复杂作战环境载运任务时,由于其动态协调腿部与车轮运动是复杂耦合的，其行驶速度的稳定性、位姿控制的精确性都十分困难.文中基于轮腿式平台通过有限高度场景的动态协调任务，提出了一种基于前馈补偿的多任务优先级复... 详细信息

轮腿式平台在执行复杂作战环境载运任务时,由于其动态协调腿部与车轮运动是复杂耦合的，其行驶速度的稳定性、位姿控制的精确性都十分困难.文中基于轮腿式平台通过有限高度场景的动态协调任务，提出了一种基于前馈补偿的多任务优先级复合运动解耦控制框架.首先，分别建立了关节和车轮动力学模型，降低模型复杂度；然后，搭建了基于任务优先级的前馈关节力矩解算，叠加轮端前馈交互力和反馈控制力矩降低实时位姿调整对质心速度的影响；最后，采用转速闭环PI控制器，并引入车轮滚动阻力实现车轮速度到质心速度的有效传递.仿真结果表明，所提出控制方法在受限场景运动过程中平台质心速度最大跟踪误差小于3%，为轮腿式平台复杂环境下执行任务提供了可行控制框架.

关键词：轮腿式平台前馈补偿任务优先级解耦控制

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面向私有问答系统的检索增强式大模型稳定输出方法

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计算机科学与探索 2025年第1期19卷 132-140页

作者：李铂鑫小米人工智能实验室中国科学院软件研究所中文信息处理实验室

基于大模型的问答系统受大模型语义不一致性问题的影响，会出现“输出结果不稳定”的现象，从而制约着问答系统的安全性、鲁棒性和可信度，严重影响了用户体验。针对上述问题，提出一种面向私有问答系统的检索增强式大模型稳定输出方法... 详细信息

基于大模型的问答系统受大模型语义不一致性问题的影响，会出现“输出结果不稳定”的现象，从而制约着问答系统的安全性、鲁棒性和可信度，严重影响了用户体验。针对上述问题，提出一种面向私有问答系统的检索增强式大模型稳定输出方法。该方法通过优化提示词，让大模型首先输出num＿k个用户查询的同义查询，然后输出答案；目的是在大模型输出答案时，可以参考已经输出的num＿k个同义查询，从而使大模型的输出结果更加稳定。针对开源大模型因指令理解能力弱而出现的“同义查询生成数目不稳定、输出格式无法解析”等问题，提出通过数据蒸馏的方式，利用闭源大模型自动构建了一个开放域上的检索增强式指令数据集，在该指令集上对开源大模型进行微调。构建了一个私有问答场景下的评估集以验证该方法的有效性。在上述评估集上的实验结果表明，该方法在一致性指标和效果指标上，均显著优于基线方法。与基线方法相比，该方法的一致性指标ROUGE-1、ROUGE-2、ROUGE-L和BLEU分别提升了18.9、30.1、24.5和30.6个百分点，效果指标正确率提升了17.4个百分点。

关键词：大模型检索增强生成大模型稳定性问答系统

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