葛根与粉葛抗H9c2细胞OGD/R损伤的有效成分及作用机制初步研究

作     者：谢金根 刘荣华 马嘉鑫 樊学程 雷婷 陈林林 肖雄 高文军 李文宏 XIE Jin-gen;LIU Rong-hua;MA Jia-xin;FAN Xue-cheng;LEI Ting;CHEN Lin-lin;XIAO Xiong;GAO Wen-jun;LI Wen-hong

作者机构：江西中医药大学药学院南昌330004 

出 版 物：《中国药学杂志》 (Chinese Pharmaceutical Journal)

年 卷 期：2023年第58卷第3期

页      面：243-253页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家重点研发计划项目资助(2017YFC1702902) 

主　　题：葛根 粉葛 含药肠吸收液 氧-糖剥夺/复氧 心肌细胞 

摘      要：目的初步探讨葛根(Puerariae Lobatae Radix,PLR)与粉葛(Puerariae Thomsonii Radix,PTR)抗心肌细胞损伤的物质基础、作用及机制的异同;比较二者不同含药体系中有效成分相对含量及抗心肌(H9c2)细胞氧-糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤效应的差异。方法应用网络药理学方法找出PLR和PTR抗H9c2细胞OGD/R损伤的有效成分,结合超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)检测鉴定二者含药肠吸收液(intestinal absorption fluid,IAF)和含药血清(medicated serum,MS)中的主要有效成分及相对含量;建立H9c2细胞OGD/R损伤模型,PLR与PTR不同含药体系干预后,CCK-8检测细胞活力,生化试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞丝裂原活化蛋白激酶p38(MAPKp38)和核转录因子-κBp65(NFκBp65)蛋白表达。结果研究发现PLR和PTR抗H9c2细胞OGD/R损伤的有效成分为葛根素、滨蒿内酯、大豆素、芒柄花素、染料木素,且MS中各有效成分相对含量均远低于IAF;与正常组比较,模型组SOD活性降低(P0.01),LDH活性升高(P0.01),MAPKp38和NFκBp65蛋白表达增加(P0.05);与模型组比较,各给药组均可以升高SOD活性(P0.01),降低LDH活性(P0.01),下调MAPKp38和NFκBp65蛋白表达(P0.05)。比较发现,PLR抗H9c2细胞损伤的作用优于PTR;IAF对各药效指标的影响优于MS。结论PLR和PTR均可不同程度的保护OGD/R引起的H9c2细胞损伤,而PLR的作用较强,其作用机制可能是通过调控MAPKp38和NFκBp65蛋白表达发挥作用;IAF中有效成分相对含量较高,对各药效指标影响的较强而重现性较好,适合于中药体外药理学研究。