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现代生物医学进展 2024年第2期24卷 201-205页

作者：沈凝香罗鸣宇顾玮铭张墨聪沈瑛上海交通大学医学院药理学与化学生物学系上海200025

目的:探究谷胱甘肽转移酶ω1(Glutathione S-Transferase Omega 1,GSTO1)关键酶活位点Cys32与肺腺癌恶性进展的关系与初步作用机制。方法:构建GSTO1野生型与酶活失活点突变C32A型过表达的肺腺癌细胞系,观察过表达细胞的形态变化及增殖... 详细信息

目的:探究谷胱甘肽转移酶ω1(Glutathione S-Transferase Omega 1,GSTO1)关键酶活位点Cys32与肺腺癌恶性进展的关系与初步作用机制。方法:构建GSTO1野生型与酶活失活点突变C32A型过表达的肺腺癌细胞系,观察过表达细胞的形态变化及增殖能力的变化。以临床数据生物信息学分析探究GSTO1调控的促肿瘤蛋白,使用免疫印迹法验证该蛋白在GSTO1野生型与酶活失活点突变C32A型过表达的肺腺癌细胞系中的表达差异,并结合临床公共数据库分析该蛋白与患者预后的关联。结果:发现过表达野生型GSTO1能够引起肺腺癌细胞PC9的形态变化并促进PC9细胞增殖,而过表达C32A突变型GSTO1的PC9细胞与空载体组细胞形态及增殖能力相似;临床数据提示GSTO1与波形蛋白(Vimentin,VIM)表达呈现正相关,免疫印迹法显示野生型GSTO1过表达能够引起Vimentin蛋白表达上调,而C32A酶活失活点突变型GSTO1过表达无法引起Vimentin蛋白表达上调;通过临床样本数据观察GSTO1与Vimentin共同高表达的肺腺癌患者肿瘤恶性程度更高、发生转移的比例更大,同时无病生存期与总生存期更短。结论:GSTO1基于其酶活位点调控Vimentin表达,改变肺腺癌细胞形态并促进肺腺癌细胞增殖,研究结果为靶向GSTO1的肺腺癌治疗提供了新思路。

关键词：谷胱甘肽转移酶ω1 波形蛋白肺腺癌

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丝氨酸生物合成途径介导肺腺癌细胞EGFR-TKIs靶向治疗适应性耐药

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现代生物医学进展 2019年第17期19卷 3218-3224页

作者：周烨顾玮铭梁倩罗鸣宇沈瑛上海交通大学医学院药理学与化学生物学系

目的:研究丝氨酸生物合成途径(SSP)在肺腺癌使用表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)治疗后引起的适应性耐药中发挥的作用,探究早期适应性耐药机制以寻找抗耐药靶标。方法:使用EGFR-TKIs药物短时刺激肺腺癌细胞系后,利用Wester... 详细信息

目的:研究丝氨酸生物合成途径(SSP)在肺腺癌使用表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)治疗后引起的适应性耐药中发挥的作用,探究早期适应性耐药机制以寻找抗耐药靶标。方法:使用EGFR-TKIs药物短时刺激肺腺癌细胞系后,利用Western blotting和qRT-PCR技术检测丝氨酸生物合成途径中关键酶的蛋白及m RNA水平变化,同时利用LC-MS检测细胞内丝氨酸生物合成途径产物及相关代谢产物变化情况。通过CCK8法检测敲低关键酶对细胞增殖的影响。体内实验进行肺腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤注射,采用剂量爬坡法构建体内适应性耐药模型,检测肿瘤组织中关键酶表达情况。结果:1.细胞内丝氨酸生物合成途径关键酶PHGDH、PSAT1、PSPH的蛋白表达水平在不同药物作用时间和浓度下有不同程度上调,且m RNA水平也上调了20-50%左右(P<0.05);***827细胞中SSP及下游代谢通路产物如P-Serine、Serine、Glycine、AMP等均有显著性上调(P<0.01);3.敲低关键酶PSAT1及PSPH后可抑制细肺腺癌细胞HCCC827及PC9的增殖,与对照组相比最高抑制率可达60%左右(P<0.01);4.体内诱导PC9细胞适应性耐erlotinib后,肿瘤组织中的PHGDH及PSAT1表达均有明显上调。结论:丝氨酸生物合成途径介导了肺腺癌EGFR-TKIs靶向治疗的适应性耐药,其关键酶有望作为抗耐药靶标进行联合治疗,从而提高EGFR-TKIs靶向药物的早期疗效并最终克服耐药性的产生。

关键词：丝氨酸生物合成途径肺腺癌 EGFR-TKIs 适应性耐药

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多条件在线光度法测定桑葚色素稳定性

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中国食品学报 2021年第5期21卷 377-382页

作者：张凯龙倪貌貌顾玮宋亚萍郭斌汪财生浙江万里学院生物与环境学院浙江宁波315100 宁波鄞州中铭农业科技有限公司浙江宁波315100

为提高天然色素稳定性测定效率,开发一种多条件在线光度法实时动力学数据采集装置,采用初始动力学法测定桑葚色素褪色动力学参数,考察温度、光照、氧化剂等对其稳定性的影响。结果表明,该装置功能丰富、准确稳定,适用于慢速液体均相过... 详细信息

为提高天然色素稳定性测定效率,开发一种多条件在线光度法实时动力学数据采集装置,采用初始动力学法测定桑葚色素褪色动力学参数,考察温度、光照、氧化剂等对其稳定性的影响。结果表明,该装置功能丰富、准确稳定,适用于慢速液体均相过程实时动力学数据自动采集,特别是天然色素稳定性的监测。桑葚色素颜色与酸碱度相关,当pH值为3时呈现鲜艳红色。热、光、氧化降解均符合一级动力学,热降解表观活化能为60.2 kJ/mol,高温、紫外线暴露和氧化剂会加速色素破坏,低温、紫外阻隔材料及适量维生素C对色素具有保护作用。

关键词：分光光度法在线测量实时动力学桑葚色素稳定性

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