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乙烯生物合成途径中的两个关键酶基因的研究进展

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广西农业生物科学 2004年第2期23卷 164-169页

作者：王爱勤王自章杨丽涛韦宇拓李杨瑞广西大学农学院广西南宁530005 广西大学生命科学与技术学院广西南宁530005

本文对植物激素乙烯生物合成途径中的两个关键酶基因即ACC合成酶基因(ACS)和ACC氧化酶基因(ACO)的克隆研究现状、表达及反馈调节等方面进行了评述。

关键词：乙烯 ACC合成酶 ACC氧化酶基因克隆反馈调节

宏基因组中不依赖辅酶B12甘油脱水酶基因的筛选和表达

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基因组学与应用生物学 2013年第6期32卷 729-733页

作者：韦旭钦陈云来吴杰群韦宇拓杜丽琴黄日波广西大学生命科学与技术学院广西亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530004 广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心南宁530007

通过特定的引物,以土壤宏基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增获得3.3 kb的DNA片段,该片段连接于pSE380载体构建重组质粒pSE380-dhaB12用于测序和表达。序列分析表明,该DNA片段编码的氨基酸序列与已报导的丁酸梭菌不依赖辅酶B12甘油脱水酶... 详细信息

通过特定的引物,以土壤宏基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增获得3.3 kb的DNA片段,该片段连接于pSE380载体构建重组质粒pSE380-dhaB12用于测序和表达。序列分析表明,该DNA片段编码的氨基酸序列与已报导的丁酸梭菌不依赖辅酶B12甘油脱水酶的相似性达99%。通过IPTG诱导,dhaB12基因在大肠杆菌中表达成功,SDS-PAGE分析表明有88 kD和34 kD两条蛋白质条带,在没有辅酶B12存在的情况下,所表达的酶具有明显的甘油脱水酶活性。

关键词：宏基因组不依赖辅酶B12 甘油脱水酶筛选表达

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巴斯德毕赤酵母新型分泌表达载体构建

广西农业生物科学 2003年第1期22卷 37-40页

作者：韦宇拓甘凤琼苏华波赵颖怡汪嵘黄日波广西大学生物技术实验中心广西南宁530005

巴斯德毕赤酵母分泌表达载体 p PICINU是利用来源于克鲁维酵母 ( Kluyveromycesmarxianus)的菊粉酶基因信号肽 DNA序列 ( ISP)构建的。表达实验结果表明 ,带有分泌表达载体 p PICINU的β-1 ,3 -1 ,4葡聚糖酶基因重组菌 ,具有与带有表达... 详细信息

巴斯德毕赤酵母分泌表达载体 p PICINU是利用来源于克鲁维酵母 ( Kluyveromycesmarxianus)的菊粉酶基因信号肽 DNA序列 ( ISP)构建的。表达实验结果表明 ,带有分泌表达载体 p PICINU的β-1 ,3 -1 ,4葡聚糖酶基因重组菌 ,具有与带有表达载体 p PIC 9K (带有α因子信号肽 )的β-1 ,3 -1 。

关键词：巴斯德毕赤酵母克鲁维酵母菊粉酶基因信号肽分泌表达 α因子信号肽

大肠杆菌甘油激酶基因(glpK)和甘油脱氢酶基因(gldA)的敲除及其对甘油产量的影响

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工业微生物 2010年第3期40卷 39-43页

作者：郭铃蒋珂杜丽琴韦宇拓庞宗文黄日波广西大学生命科学与技术学院发酵与酶工程研究所广西南宁530005 国家非粮生物质能源工程技术研究中心广西南宁530007

利用Red重组系统构建了大肠杆菌JM109甘油激酶基因(glpK)和甘油脱氢酶基因(gldA)缺失的双突变菌株JM109B,然后将表达酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶基因(GPD1)和3-磷酸甘油酯酶基因(HOR2)的质粒pSE-gpd1-hor2转化到JM109B突变菌株中,在含1%... 详细信息

利用Red重组系统构建了大肠杆菌JM109甘油激酶基因(glpK)和甘油脱氢酶基因(gldA)缺失的双突变菌株JM109B,然后将表达酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶基因(GPD1)和3-磷酸甘油酯酶基因(HOR2)的质粒pSE-gpd1-hor2转化到JM109B突变菌株中,在含1%葡萄糖的摇瓶发酵培养基中37℃发酵24 h,甘油的最高产量为5.61 g/L,是原始菌株JM109/pSE-gpd1-hor2甘油产量的1.59倍;在30 L发酵罐中发酵28 h,甘油的最高产量为103.12 g/L,是原始菌株JM109/pSE-gpd1-hor2甘油产量的1.59倍,是原始菌株BL21/pSE-gpd1-hor2甘油产量的1.41倍,葡萄糖转化率为50.39%。

关键词：甘油基因敲除 Red重组系统大肠杆菌突变菌株

环境胁迫和激素诱导甘蔗ACC合成酶基因家族三个成员的表达

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作物学报 2006年第5期32卷 734-737页

作者：王爱勤杨丽涛王自章韦宇拓何龙飞李杨瑞广西大学农学院广西南宁530005 中国科学院植物研究所北京100093 广西大学生命科学与技术学院广西南宁530005

ACC合成酶(ACS)是高等植物乙烯生物合成途径中的限速酶。在克隆到甘蔗ACC合成酶基因家族3个成员Sc-ACS1、Sc-ACS2和Sc-ACS3的基础上,分别以它们作为探针,检测了激素诱导和环境胁迫对甘蔗苗期该3成员表达的影响。结果表明,乙烯利诱导Sc-A... 详细信息

ACC合成酶(ACS)是高等植物乙烯生物合成途径中的限速酶。在克隆到甘蔗ACC合成酶基因家族3个成员Sc-ACS1、Sc-ACS2和Sc-ACS3的基础上,分别以它们作为探针,检测了激素诱导和环境胁迫对甘蔗苗期该3成员表达的影响。结果表明,乙烯利诱导Sc-ACS1在叶中表达,在根中不表达;Sc-ACS2在根、叶中表达;Sc-ACS3主要在根部表达,在叶中不表达。在甘蔗叶片中,Sc-ACS1对冷胁迫、暗培养和LiCl胁迫均有应答,并受植物生长激素IAA诱导而表达;Sc-ACS2无论是在生长激素诱导还是环境胁迫下,其mRNA均维持较低水平。

关键词：甘蔗 ACC合成酶基因家族表达

一株新型产淀粉酶中度嗜热菌的分离鉴定及酶学性质研究

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工业微生物 2011年第5期41卷 17-21页

作者：王治宾薛蓓杜丽琴庞宗文黄日波韦宇拓广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室广西南宁530005

用稀释分离法从广西象州温泉筛选分离到一株可水解淀粉的中度嗜热细菌GXS1,该菌株革兰氏染色为阳性,端生芽孢,细胞呈杆状,最适生长温度为60℃～65℃,最适生长pH为6.0～7.0。结合生理生化特征和16S rDNA序列分析,初步鉴定该菌株为Geobaci... 详细信息

用稀释分离法从广西象州温泉筛选分离到一株可水解淀粉的中度嗜热细菌GXS1,该菌株革兰氏染色为阳性,端生芽孢,细胞呈杆状,最适生长温度为60℃～65℃,最适生长pH为6.0～7.0。结合生理生化特征和16S rDNA序列分析,初步鉴定该菌株为Geobacillus ***1。对该菌所产高温淀粉酶的性质研究表明:酶的最适反应温度为80℃,在40℃～60℃范围内稳定,70℃保温30 min仍保留77%残余酶活,最适pH为7.0,稳定pH范围为4.0～10.0。产物经HPLC分析证明,该酶能水解淀粉产生麦芽三糖、麦芽糖和葡萄糖的混合物,对α-环糊精、β-环糊精不起作用。

关键词：嗜热菌分离鉴定 Geobacillus 酶学性质

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香蕉茎叶资源化利用研究进展

广西科学 2018年第3期25卷 279-289页

作者：米慧芝韦宇拓潘世优黎贞崇广西大学生命科学与技术学院广西南宁530005 广西科学院广西南宁530007

香蕉是世界主要经济作物,人们在收获大量香蕉产品的同时也产生几乎等量的香蕉茎叶等农业废弃物。为缓解环境压力、扩大香蕉产业链、增加蕉农收入,须对香蕉茎叶进行回收利用。香蕉茎叶水分含量高、营养物质丰富,是可以肥料化、饲料化、... 详细信息

香蕉是世界主要经济作物,人们在收获大量香蕉产品的同时也产生几乎等量的香蕉茎叶等农业废弃物。为缓解环境压力、扩大香蕉产业链、增加蕉农收入,须对香蕉茎叶进行回收利用。香蕉茎叶水分含量高、营养物质丰富,是可以肥料化、饲料化、基质化、纤维化以及能源化等资源化利用的植物资源。本文综述了近年来香蕉茎叶的国内外利用现状,期望为开发香蕉茎叶的资源化利用、延长香蕉产业链提供借鉴。

关键词：香蕉茎叶资源化综合利用

大肠杆菌K-12中PFL家族基因的生物信息学分析

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广西农业生物科学 2005年第1期24卷 18-22,42页

作者：韦宇拓杨登峰黄日波广西大学生命科学与技术学院

从生物信息学角度,利用生物学数据库( Gen Bank、Swiss-Prot、PDB)和分子生物学分析软件VectorNTI8.0 ,对大肠杆菌K-1 2中的多个丙酮酸甲酸裂解酶( pyruvate formate-lyase,PFL)进行序列的比较分析和结构预测,进而分析其活性位点、相关... 详细信息

从生物信息学角度,利用生物学数据库( Gen Bank、Swiss-Prot、PDB)和分子生物学分析软件VectorNTI8.0 ,对大肠杆菌K-1 2中的多个丙酮酸甲酸裂解酶( pyruvate formate-lyase,PFL)进行序列的比较分析和结构预测,进而分析其活性位点、相关保守位点和特殊结构域及序列的二级结构。

关键词：丙酮酸甲酸裂解酶生物信息学序列分析比对结构域

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从甘油富集菌宏基因组中克隆甘油脱水酶基因

微生物学通报 2006年第6期33卷 52-56页

作者：吴杰群周文广杨登峰齐向辉韦宇拓黄日波广西大学生命科学与技术学院广西科学院广西科学院南宁530022

采用一种简便快速的方法从经甘油富集培养的土样中提取出质量较好宏基因组DNA。然后以此DNA为模板,以扩增肺炎克雷伯氏菌、弗氏柠檬酸菌和丁酸梭菌甘油脱水酶基因的引物进行PCR,分别扩增出目的条带,并将其克隆至T载体中。进行测序分析显... 详细信息

采用一种简便快速的方法从经甘油富集培养的土样中提取出质量较好宏基因组DNA。然后以此DNA为模板,以扩增肺炎克雷伯氏菌、弗氏柠檬酸菌和丁酸梭菌甘油脱水酶基因的引物进行PCR,分别扩增出目的条带,并将其克隆至T载体中。进行测序分析显示,PCR扩增出来的片段与其引物相应的甘油脱水酶序列同源性分别达到99%,90%和99%。这表明克隆出来的这3个基因为相应的甘油脱水酶基因。

关键词：宏基因组甘油脱水酶基因克隆