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PAX3基因沉默对P19细胞向心肌样细胞分化的影响及其机制

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吉林大学学报（医学版） 2023年第3期49卷 647-655页

作者：万朝辉曾良李晶雷长城南华大学衡阳医学院附属第二医院急诊科湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属第三医院急诊科湖南衡阳421900 南华大学衡阳医学院附属第二医院心血管内科湖南衡阳421001

目的:探讨配对盒转录因子3(PAX3)基因沉默对P19细胞向心肌样细胞分化的影响,并阐明其可能作用机制。方法:采用二甲基亚砜(DMSO)诱导P19细胞向心肌样细胞分化,观察诱导分化过程中细胞形态表现,并收集诱导分化第0天(0d组)和第10天(10 d组... 详细信息

目的:探讨配对盒转录因子3(PAX3)基因沉默对P19细胞向心肌样细胞分化的影响,并阐明其可能作用机制。方法:采用二甲基亚砜(DMSO)诱导P19细胞向心肌样细胞分化,观察诱导分化过程中细胞形态表现,并收集诱导分化第0天(0d组)和第10天(10 d组)的细胞。采用shPAX3慢病毒感染P19细胞,将细胞分为对照组、sh-NC组(阴性对照)和sh-PAX3组(PAX3干扰),实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测PAX3基因沉默的P19细胞构建情况。采用Notch信号激动剂Jagged1处理慢病毒感染后的P19细胞,并采用DMSO诱导分化10 d,将细胞分为DMSO组、DMSO+sh-NC组、DMSO+sh-PAX3组、DMSO+Jagged1组和DMSO+sh-PAX3+Jagged1组。RT-qPCR法检测各组细胞中GATA结合蛋白4(GATA4)、心房利钠尿多肽(ANP)、心肌肌钙蛋白(cTn)T、PAX3、Notch1、Notch胞内结构域(NICD)及Hes家族bHLH转录因子1(Hes1)mRNA表达水平。Western blotting法检测各组细胞中PAX3、Notch1、NICD和Hes1蛋白表达水平。免疫荧光染色法检测各组细胞中cTnI阳性表达情况和心肌样细胞分化率。结果:诱导分化第10天,可观察到自发性节律收缩的心肌样细胞簇。RT-qPCR和Western blotting法检测,慢病毒感染后,与对照组和sh-NC组比较,sh-PAX3组P19细胞中PAX3 mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05),表明PAX3基因沉默的P19细胞构建成功。RT-qPCR法检测,与0d组比较,10 d组细胞中GATA4、ANP和cTnT mRNA表达水平均升高(P<0.05),PAX3、Notch1、NICD和Hes1 mRNA表达水平均升高(P<0.05);与DMSO组和DMSO+sh-NC组比较,DMSO+sh-PAX3组细胞中GATA4、ANP和cTnT mRNA表达水平均降低(P<0.05),DMSO+Jagged1组细胞中GATA4、ANP和cTnT mRNA表达水平均升高(P<0.05);与DMSO+sh-PAX3组比较,DMSO+shPAX3+Jagged1组细胞中GATA4、ANP和cTnT mRNA表达水平均升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与0d组比较,10 d组细胞中PAX3、Notch1、NICD和Hes1蛋白表达水平均升高(P<0.05);与DMSO组和DMSO+sh-NC组比较,DMSO+sh-PAX3组细胞中Notch1、NICD和Hes1蛋白表达水平均降低(P<0.05),DMSO+Jagged1组细胞中Notch1、NICD和Hes1蛋白表达水平均升高(P<0.05);与DMSO+sh-PAX3组比较,DMSO+sh-PAX3+Jagged1组细胞中Notch1、NICD和Hes1蛋白表达水平均升高(P<0.05)。免疫荧光法检测,慢病毒感染后,各组细胞中均有cTnI蛋白阳性表达,与DMSO组和DMSO+sh-NC组比较,DMSO+sh-PAX3组细胞中cTnI蛋白阳性表达减少,心肌样细胞分化率降低(P<0.05);与DMSO组和DMSO+sh-NC组比较,DMSO+Jagged1组细胞中cTnI蛋白阳性表达增加,心肌样细胞分化率升高(P<0.05);与DMSO+sh-PAX3组比较,DMSO+sh-PAX3+Jagged1组细胞中cTnI蛋白阳性表达增加,心肌样细胞分化率升高(P<0.05)。结论:PAX3基因沉默可抑制P19细胞向心肌样细胞分化,其机制可能是通过降低PAX3基因表达抑制Notch信号通路活化实现的。

关键词： P19细胞配对盒转录因子3 Notch信号通路心肌样细胞

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重楼皂苷Ⅶ通过抑制NF-κB信号通路对重症急性胰腺炎大鼠急性肺损伤的保护作用

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吉林大学学报（医学版） 2022年第3期48卷 668-675页

作者：万朝辉曾良周辉李晶雷长城南华大学衡阳医学院附属第二医院急诊科湖南衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属第三医院急诊科湖南衡阳421900 南华大学衡阳医学院附属第二医院心血管内科湖南衡阳421001

目的:观察重楼皂苷Ⅶ(PPⅦ)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠急性肺损伤的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法:将75只大鼠随机分成假手术组、模型组、地塞米松组(阳性对照,给予2 mg·kg^(-1)地塞米松)、低剂量PPⅦ组(给予50 mg·kg^(-1) PP... 详细信息

目的:观察重楼皂苷Ⅶ(PPⅦ)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠急性肺损伤的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法:将75只大鼠随机分成假手术组、模型组、地塞米松组(阳性对照,给予2 mg·kg^(-1)地塞米松)、低剂量PPⅦ组(给予50 mg·kg^(-1) PPⅦ)和高剂量PPⅦ组(给予150 mg·kg^(-1) PPⅦ),每组15只。除假手术组外,其他各组大鼠采用逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠溶液法建立SAP大鼠模型,术后立即给予相应药物处理。检测各组大鼠动脉血氧合指数(OI)和肺组织湿/干质量(W/D)比值,ELISA法检测各组大鼠血清脂肪酶和淀粉酶水平及支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,HE染色观察各组大鼠胰腺组织和肺组织病理形态表现,Western blotting法检测各组大鼠肺组织中核因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠胰腺和肺组织损伤严重,动脉血OI值明显降低(P<0.01),肺组织W/D比值、血清脂肪酶和淀粉酶水平、BALF中IL-1β、IL-6和TNF-α水平及肺组织中核因子-κB抑制因子α(IκBα)和磷酸化NF-κB(p-NF-κB)p65(Ser536)蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,地塞米松组和高剂量PPⅦ组大鼠胰腺组织和肺组织损伤程度得到明显改善,动脉血OI比值明显升高(P<0.01),肺组织W/D比值、血清脂肪酶和淀粉酶水平、BALF中IL-1β、IL-6和TNF-α水平及肺组织中IκBα和p-NF-κB p65(Ser536)蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:PPⅦ可能通过抑制NF-κB信号通路对SAP大鼠急性肺损伤发挥保护作用。

关键词：重楼皂苷Ⅶ 重症急性胰腺炎急性肺损伤核因子κB信号通路炎症因子

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巨噬细胞炎症蛋白1α与冠状动脉粥样硬化斑块病变相关性

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中国动脉硬化杂志 2009年第5期17卷 399-402页

作者：黄斌曾高峰雷长城南华大学附属第二医院心内科湖南省衡阳市421001

目的研究血浆巨噬细胞炎症蛋白1α水平在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者的变化及与冠状动脉粥样硬化斑块病变严重程度及斑块稳定性的关系。方法选择正常对照组25例及冠心病组84例(稳定型心绞痛26例,不稳定型心绞痛30例,急性心肌梗死28例)... 详细信息

目的研究血浆巨噬细胞炎症蛋白1α水平在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者的变化及与冠状动脉粥样硬化斑块病变严重程度及斑块稳定性的关系。方法选择正常对照组25例及冠心病组84例(稳定型心绞痛26例,不稳定型心绞痛30例,急性心肌梗死28例),均采血测血浆巨噬细胞炎症蛋白1α;冠心病组患者均行冠状动脉造影记录冠状动脉病变支数及Gensin i冠状动脉病变积分,并与血浆巨噬细胞炎症蛋白1α水平进行相关分析。结果冠心病组血浆巨噬细胞炎症蛋白1α水平明显高于正常对照组(P0.05)。血浆巨噬细胞炎症蛋白1α水平与Gensin i冠状动脉病变积分存在正相关(r=0.28,P<0.05)。结论冠心病患者血浆巨噬细胞炎症蛋白1α升高,可能是评价冠状动脉粥样硬化斑块病变严重程度及斑块稳定性的有效指标。

关键词：巨噬细胞炎症蛋白1α 冠状动脉粥样硬化斑块

血清淀粉样蛋白A对高密度脂蛋白功能影响的研究现状

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现代医药卫生 2017年第4期33卷 538-541页

作者：黄冰雷长城南华大学附属第二医院湖南衡阳421000

高密度脂蛋白（HDL）是最重要的内源性心血管保护标志物之一。HDL在寻找新的药物治疗和预防心血管事件方面是一个非常有吸引力的研究对象。然而,对于不同类型的患者群体来说,HDL的功能会变得十分复杂。在相关物质变化情况下,HDL的预防... 详细信息

高密度脂蛋白（HDL）是最重要的内源性心血管保护标志物之一。HDL在寻找新的药物治疗和预防心血管事件方面是一个非常有吸引力的研究对象。然而,对于不同类型的患者群体来说,HDL的功能会变得十分复杂。在相关物质变化情况下,HDL的预防心血管事件发生和保护血管的能力会显著下降,甚至HDL会成为促进动脉粥样硬化形成的物质之一。

关键词：脂蛋白类,HDL 动脉粥样硬化血清淀粉样蛋白A 炎症反应综述

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骨髓干细胞治疗心脏病的研究与进展

临床和实验医学杂志 2010年第5期9卷 382-383,387页

作者：龚怡雷长城南华大学附属第二医院湖南衡阳421000

各种心脏病发展到晚期大多导致心力衰竭,心力衰竭严重影响着心脏病患者的预后及生活质量.而常规治疗手段效果有限,骨髓干细胞的临床研究越来越多.现就骨髓干细胞的分类、作用机制、途径、存在的问题及前景等作简要介绍.

关键词：骨髓干细胞心血管疾病移植

组织因子及其抑制物与急性冠脉综合征研究进展

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社区医学杂志 2008年第23期6卷 31-32页

作者：刘乐雷长城南华大学附属第二医院湖南衡阳421001

急性冠脉综合征(acute coronary synclrome,ACS)的发生与血栓形成关系密切,组织因子(tissuc factor,TF)途径所启动的凝血系统在动脉血栓形成中起重要作用.

关键词：急性冠脉综合征组织因子外源性凝血系统抑制物动脉血栓形成病理生理机制级联反应血液凝固

C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白1在疾病中的研究进展

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世界最新医学信息文摘 2017年第A2期 76-77+80页

作者：王颖雷长城南华大学附属第二医院心内科

补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白家族是近些年来新发现的一个脂肪因子超家族,到目前为止该家族已经发现了15个家族成员,他们都能在人体里多种组织细胞中表达,CTRP家族的成员在调节内分泌,代谢,免疫和心血管的病理生理学方面起着不同的作用... 详细信息

补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白家族是近些年来新发现的一个脂肪因子超家族,到目前为止该家族已经发现了15个家族成员,他们都能在人体里多种组织细胞中表达,CTRP家族的成员在调节内分泌,代谢,免疫和心血管的病理生理学方面起着不同的作用。CTRP家族成员(除CTRP4外)在结构上都与脂联素相似[33],包含四部分:一个信号肽氨基末端和三个结构域(胶原样结构域、羧基末端的球形结构域、短的可变结构域)。CRTP1是CTRP超家族中的一员。本文将对CRTP1的分子生物学特征、组织分布及生物学功能进行概述。

关键词： CTRP1 分子结构心血管生物学功能

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左西孟旦治疗心力衰竭研究进展

人人健康 2016年第18期 44-44页

作者：郭丹雷长城南华大学附属第二医院

通常心血管疾病发展至最末阶段,就会出现心力衰竭,并且最终导致患者死亡。对于这种较为复杂且难以逆转的临床综合征应如何进行治疗,一直以来都是医学界相当棘手的问题。相关研究证实,以左西孟旦为代表的钙离子增敏剂是一种新兴的正性肌... 详细信息

通常心血管疾病发展至最末阶段,就会出现心力衰竭,并且最终导致患者死亡。对于这种较为复杂且难以逆转的临床综合征应如何进行治疗,一直以来都是医学界相当棘手的问题。相关研究证实,以左西孟旦为代表的钙离子增敏剂是一种新兴的正性肌力药物,在不影响心肌舒张功能、不增加心肌耗氧量的情况下,能有效地增强心肌收缩力,并且对于改善心力衰竭的临床症状具有良好的作用,但目前对于患者的远期预后效果仍不明朗。

关键词：左西孟旦心力衰竭预后

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心性猝死的危险因素分析（附61例分析）

衡阳医学院学报 1995年第4期23卷 273-274页

作者：蒋克强雷长城衡阳医学院第二附属医院

对６１例心性猝死进行回顾性分析，发现引起心性猝死常见原因以室性心律失常为最多，约占心性猝死的５０％；其次是心力衰竭、心脏扩大，当ＥＦ＜４０％时猝死率增高；ＱＴ间期延长，ＶＬＰ阳性也是猝死的危险因素。

关键词：猝死心性猝死危险因素心律失常病因