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作者：陶焕青安徽农业大学

学位级别：硕士

表没食子儿茶素没食子酸酯(Epi-gallocatechin-3-gallate,EGCG),是茶多酚中主要的生物活性成分,具有抗氧化、抗炎、抑菌、清除体内自由基、降血脂、降血压和降血糖、预防心脑血管疾病等作用。高脂血症是目前宠物犬常见的营养代谢性疾病... 详细信息

表没食子儿茶素没食子酸酯(Epi-gallocatechin-3-gallate,EGCG),是茶多酚中主要的生物活性成分,具有抗氧化、抗炎、抑菌、清除体内自由基、降血脂、降血压和降血糖、预防心脑血管疾病等作用。高脂血症是目前宠物犬常见的营养代谢性疾病之一,给犬的健康带来巨大的威胁。本试验通过体外培养犬肝细胞,添加不同浓度的EGCG作用于犬肝细胞后,研究EGCG对AMPKα信号转导通路中相关蛋白和基因表达的影响,初步阐明EGCG降低犬肝细胞脂合成,增加脂氧化的作用机制。选取健康幼犬,通过两步灌流法分离培养犬原代肝细胞,添加不同浓度的EGCG(0、0.01、0.1和1.0μM EGCG),作用不同时间后,确定EGCG最佳添加浓度和作用时间。犬原代肝细胞培养48 h后,添加不同浓度的EGCG和AMPKα的抑制剂BML-275(0、0.01、0.1及1.0μM EGCG、10μM BML-275、0.1μM EGCG+10μM BML-275)作用于犬肝细胞。运用倒置显微镜和透射电镜观察犬肝细胞的形态学变化;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测PPARα、SREBP-1c、ACO、CPTI、FAS、ApoE、ApoA1及ACCα基因表达量;采用蛋白质免疫印迹法(WB)检测AMPKα、p-AMPKα、PPARα、SREBP-1c、ACO、CPTI、FAS、ApoE、ApoA1、ACCα及p-ACCα蛋白的表达水平;采用细胞免疫荧光法检测PPARα和SREBP-1c核质分布情况;采用凝胶迁移滞后实验(EMSA)法检测EGCG对PPARα和SREBP-1c转录活性的影响;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测AMPKα、ACCα和CPTI的酶活性,测定AMP和ATP的含量;全自动生化分析仪检测犬肝细胞TG和VLDL的含量。结果显示:1.细胞形态学变化、细胞活性及细胞膜完整性变化:4 h后肝细胞贴壁生长,细胞边缘呈圆球形或者多边形,细胞贴附于细胞板上;培养48 h后,细胞贴壁牢固,长出伪足,呈多边形,胞浆内容物丰富,细胞排列紧密,细胞间间隙明显,细胞生长状态良好;0-48 h之间的LDH的漏出率逐渐下降,48 h以后上升至稳定状态,培养至48 h的LDH漏出率最低,说明此时肝细胞膜的完整性好,肝细胞的生长状态最好。选定48 h为肝细胞开始添加刺激因子最佳时间。***最佳添加浓度和作用时间为0.1μM,30 min。添加相同浓度0.1μM的EGCG处理后,作用10 min组、30 min组与对照组相比p-AMPKα蛋白表达量差异极显著升高(P<0.01),且在处理30 min时AMPKα的磷酸化水平最高。***α信号通路相关mRNA表达水平:与对照组相比,PPARα、ACO和CPTI的mRNA相对表达量随着EGCG的浓度增加而升高(P<0.01),BML-275抑制剂组显著降低(P<0.05或P<0.01),且与0.1μM的EGCG高浓度处理组相比,EGCG和BML-275混合组极显著降低(P<0.01);与对照组相比,SREBP-1c、FAS、ApoE、ApoA1、ACCα的mRNA相对表达量随着EGCG的浓度增加而降低(P<0.01),BML-275抑制剂组显著升高(P<0.05或P<0.01),且与0.1μM EGCG浓度处理组相比,EGCG和BML-275混合组极显著升高(P<0.01)。***α信号通路相关蛋白表达水平:与对照组相比,p-ACCα、p-AMPKα、PPARα、ACO和CPTI的蛋白表达量随着EGCG的浓度增加而升高(P<0.05或P<0.01),BML-275抑制剂组显著降低(P<0.05或P<0.01),且与0.1μM的EGCG处理组相比,EGCG和BML-275混合组极显著降低(P<0.05或P<0.01);与对照组相比,SREBP-1c、FAS、ApoE、ApoA1和ACCα的蛋白表达量随着EGCG的浓度增加而降低(P<0.05或P<0.01),BML-275抑制剂组显著升高(P<0.05或P<0.01),且与0.1μM的EGCG高浓度处理组相比,EGCG和BML-275混合组极显著升高(P<0.05或P<0.01)。5.采用激光共聚焦显微镜观察PPARα、SREBP-1c的免疫荧光结果:与对照组相比,EGCG的浓度处理组的PPARα的入核表达量明显升高,BML-275抑制剂组和EGCG和BML-275混合组入核表达量明显降低;与对照组相比,EGCG处理组SREBP-1c的入核表达量也明显,BML-275抑制剂组和EGCG和BML-275混合组的转录活性和入核表达量均显著升高。***结果显示:与对照组相比,PPARα的转录活性随着EGCG的浓度增加而升高(P<0.05或P<0.01

关键词：犬肝细胞 EGCG AMPK 脂代谢

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基于运动生理反馈的高校体育馆天然光环境评价方法与优化设计研究

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建筑学报 2024年第S1期 154-159页

作者：史立刚李玉青陶露露哈尔滨工业大学建筑与设计学院寒地城乡人居环境科学与技术工业和信息化部重点实验室南京大学建筑与规划学院

基于高动态范围成像测量技术，结合主观调查问卷和客观生理反馈，三角互证评价室内光环境，确定影响使用者视觉舒适的因素和相应的光环境舒适阈值。在此基础上，提炼高校体育馆典型模型进行计算机光环境模拟分析，得出严寒地区高校体育... 详细信息

基于高动态范围成像测量技术，结合主观调查问卷和客观生理反馈，三角互证评价室内光环境，确定影响使用者视觉舒适的因素和相应的光环境舒适阈值。在此基础上，提炼高校体育馆典型模型进行计算机光环境模拟分析，得出严寒地区高校体育馆天然光环境优化设计策略。

关键词：天然光高校体育馆生物反馈仪高动态范围测量技术生理反馈

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高脂饮食对犬生化指标及血液流变学的影响

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中国兽医学报 2018年第7期38卷 1412-1415,1429页

作者：李玉陶焕青何坤徐怡钟郝宁邹苏萍李敏冯士彬王希春吴金节安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 安徽农业大学植物保护学院安徽合肥230036

本试验旨在研究高脂饮食对犬生化指标和血液流变学指标的影响。选取本地50只健康的45日龄杂交犬，随机分为两组，正常组15只，高脂组35只，分别饲喂基础饲料（正常组）、高脂饲料（高脂组）。试验为12周。每隔1周，采集1次血清，用于检... 详细信息

本试验旨在研究高脂饮食对犬生化指标和血液流变学指标的影响。选取本地50只健康的45日龄杂交犬，随机分为两组，正常组15只，高脂组35只，分别饲喂基础饲料（正常组）、高脂饲料（高脂组）。试验为12周。每隔1周，采集1次血清，用于检测血清生化指标。于试验最后1d，每组随机选择15只犬，采集抗凝血，用于检测血液流变学指标。结果表明：与正常组检测结果相比，高脂组犬血清中TC、TG和LDL-C浓度均显著升高（P〈0．01或P〈0．05）。高脂组犬的全血黏度、红细胞压积、血浆黏度、全血高低切相对指标和全血高切还原黏度均显著升高（P〈0．01或P〈0．05）。由此可见，给予犬高脂饮食可出现高脂血症，并且血液流变学指标会发生明显的变化，对于犬高脂血的临床诊断，具有理论指导意义。

关键词：犬高血脂血液流变学生化指标

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NEFA对体外培养奶牛肝细胞氧化还原状态的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2017年第6期45卷 37-43页

作者：董记红吴金节林根祥王希春冯士彬郝宁邹苏萍陶焕青李玉王哲刘国文李心慰安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 吉林大学动物医学学院吉林长春130062

【目的】研究高非酯化脂肪酸(NEFA)对体外培养奶牛肝细胞的氧化应激状态、氧化抗氧化酶活性及mRNA表达的影响。【方法】分离奶牛肝细胞,培养72h后,添加不同浓度(0.0,0.3,0.6,1.2和2.4mmol/L)的NEFA继续培养12,24和36h,采用酶联免疫吸附... 详细信息

【目的】研究高非酯化脂肪酸(NEFA)对体外培养奶牛肝细胞的氧化应激状态、氧化抗氧化酶活性及mRNA表达的影响。【方法】分离奶牛肝细胞,培养72h后,添加不同浓度(0.0,0.3,0.6,1.2和2.4mmol/L)的NEFA继续培养12,24和36h,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,检测过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(TAC)、羟自由基抑制能力和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测GSH-Px、SOD、CAT基因mRNA的相对表达量。【结果】随着NEFA浓度的增加,添加NEFA 12,24和36h时,各处理组肝细胞中H2O2和MDA含量增加,TAC含量、SOD、GSH-Px、CAT的活性以及羟自由基抑制能力降低。与对照组相比,添加NEFA 12和36h时,SOD mRNA相对表达量均随NEFA浓度的增加呈剂量依赖性降低;添加NEFA 24h时,0.6,1.2和2.4mmol/L NEFA处理组的SOD mRNA相对表达量均极显著降低(P<0.01)。添加NEFA 12h时,各浓度NEFA处理组GSH-Px mRNA相对表达量均极显著降低(P<0.01);添加NEFA 24h时,1.2和2.4mmol/L NEFA处理组的GSH-Px mRNA相对表达量均极显著降低(P<0.01),0.6mmol/L NEFA处理组的GSH-Px mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);添加NEFA 36h时,GSH-Px mRNA相对表达量随NEFA浓度的增加呈剂量依赖性降低。添加NEFA 12h时,0.6和2.4mmol/L NEFA处理组的CAT mRNA相对表达量均极显著降低(P<0.01);添加NEFA 24和36h时,CAT mRNA相对表达量呈剂量依赖性降低。【结论】NEFA诱导体外培养的奶牛肝细胞发生氧化还原失衡,尤其以高浓度NEFA诱导的氧化应激更为严重。

关键词：非酯化脂肪酸奶牛肝细胞氧化应激

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NEFAs在酮病奶牛脂肪动员以及氧化应激中的作用

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生物学杂志 2018年第3期35卷 99-101,117页

作者：邹苏萍郝宁陶焕青明鹏飞徐怡钟梁婷冯士彬王希春吴金节李玉安徽农业大学动物科技学院合肥230036

糖脂代谢紊乱导致的营养代谢性疾病是奶牛酮病的病因,在围产奶牛中比较多见。由于围产期奶牛泌乳需要消耗大量能量,而此时能量摄入不足,因此机体需要动员脂肪,大量的脂肪动员会导致血液非酯化脂肪酸和酮体浓度上升。将以围产期酮病奶牛... 详细信息

糖脂代谢紊乱导致的营养代谢性疾病是奶牛酮病的病因,在围产奶牛中比较多见。由于围产期奶牛泌乳需要消耗大量能量,而此时能量摄入不足,因此机体需要动员脂肪,大量的脂肪动员会导致血液非酯化脂肪酸和酮体浓度上升。将以围产期酮病奶牛脂肪动员产物NEFAs的产生、利用和作用为重点一一论述,旨在为深入研究奶牛酮病的发病机制提供理论依据。

关键词：奶牛酮病 NEFAs MAPK NF-κB 氧化应激

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绿茶粉和绿茶多酚对犬的抗氧化作用

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动物营养学报 2017年第10期29卷 3737-3749页

作者：李玉陶焕青张玉蝶徐怡钟郝宁邹苏萍冯士彬王希春周裔彬王一君张梁吴金节宛晓春安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室合肥230036 安徽农业大学动物科技学院合肥230036

本试验旨在探究绿茶粉及绿茶多酚对犬的抗氧化作用。选用5月龄杂交幼犬15只,随机分为3个组,每组5只。对照组饲喂基础饲粮,绿茶粉组饲喂基础饲粮+1.0%的绿茶粉,绿茶多酚组饲喂基础饲粮+0.25%的绿茶多酚。试验期为84 d。结果表明:与试验... 详细信息

本试验旨在探究绿茶粉及绿茶多酚对犬的抗氧化作用。选用5月龄杂交幼犬15只,随机分为3个组,每组5只。对照组饲喂基础饲粮,绿茶粉组饲喂基础饲粮+1.0%的绿茶粉,绿茶多酚组饲喂基础饲粮+0.25%的绿茶多酚。试验期为84 d。结果表明:与试验开始时相比,试验结束时对照组犬体重增长了162%,绿茶粉组犬体重增长了101%,绿茶多酚组犬体重增长了132%,且绿茶粉组和绿茶多酚组试验结束时犬体重显著低于对照组(P<0.05),比对照组分别降低了61%和30%。试验第84天,绿茶粉组及绿茶多酚组犬血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)活性均显著或极显著低于对照组(P<0.05或P<0.01),血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著高于对照组(P<0.01),血清丙二醛(MDA)含量极显著低于对照组(P<0.01),肝脏抗氧化基因[谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)、谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰亚基(GCLM)、血红素氧合酶1(HO-1)、过氧化氢酶(CAT)]和Ⅱ相解毒酶基因[谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)和醌氧化还原酶1(NQO1)]的mRNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。综上所述,在本试验条件下,在犬饲粮中添加1.0%的绿茶粉或0.25%的绿茶多酚均具有保护肝脏、抗氧化、促进Ⅱ相解毒酶基因表达及控制体重的作用。

关键词：犬绿茶粉绿茶多酚肝功能抗氧化基因 n相解毒酶基因

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儿童耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌脓毒症特点以及中医治疗的研究进展

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中华中医药学刊 2024年

作者：王燕凌菁菁周丹丽葛焕青无锡市儿童医院药学部

随着近年来抗菌药物的广泛应用，其耐药性不断上升，耐药发展远大于抗菌药物的研发，严重威胁人类生命，加重医疗卫生经济负担。我国儿科病房对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌（Carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae， CRKP）检出... 详细信息

随着近年来抗菌药物的广泛应用，其耐药性不断上升，耐药发展远大于抗菌药物的研发，严重威胁人类生命，加重医疗卫生经济负担。我国儿科病房对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌（Carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae， CRKP）检出率不断增长。儿童CRPK脓毒症缺乏特异临床表现，起病隐匿，但致病性强、进展迅速，容易出现多器官衰竭等。碳青霉烯类抗菌药物仍为治疗CRKP感染的主要手段。随着中医对CRKP脓毒症的深入研究，中医药用于CRKP脓毒症方面的治疗越来越受到重视。本文旨在对儿童耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌脓毒症特点以及中医治疗的研究进展作一综述。

关键词：儿童耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌脓毒症中医研究进展

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奶牛脂肪肝的诊断及监测

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生物学杂志 2018年第1期35卷 101-103页

作者：郝宁邹苏萍陶焕青明鹏飞徐怡钟聂星灿冯士彬王希春吴金节李玉安徽农业大学动物科技学院合肥230036

奶牛脂肪肝是奶牛饲养过程中重要且常见的群发性疾病,主要与能量的代谢平衡有关。由于其发病一般伴随着体况、繁殖能力以及产奶量的下降,因此对于规模化的奶牛饲养,及早对脂肪肝奶牛做出诊断和检测是一项节约成本的必要之举。从奶牛产... 详细信息

奶牛脂肪肝是奶牛饲养过程中重要且常见的群发性疾病,主要与能量的代谢平衡有关。由于其发病一般伴随着体况、繁殖能力以及产奶量的下降,因此对于规模化的奶牛饲养,及早对脂肪肝奶牛做出诊断和检测是一项节约成本的必要之举。从奶牛产生脂肪肝的病因、如何诊断及监测等多方面问题进行综述。

关键词：奶牛脂肪肝诊断

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基于天鹰算法的交通自洽能源系统优化控制方法

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吉林大学学报(工学版) 2024年

作者：陈光勇周逸凯陶楚青万利魏巍吉林大学交通学院山东省交通规划设计院集团有限公司隧道与地下工程设计研究院

光伏供电系统在交通自洽能源中扮演着重要角色，然而光伏阵列受到外界环境影响，局部阴影效应限制了系统的发电效率。为了解决这一问题，本文提出了一种优化控制方法，利用Logistics混沌序列初始化和自适应权重法构建了自适应搜索的天... 详细信息

光伏供电系统在交通自洽能源中扮演着重要角色，然而光伏阵列受到外界环境影响，局部阴影效应限制了系统的发电效率。为了解决这一问题，本文提出了一种优化控制方法，利用Logistics混沌序列初始化和自适应权重法构建了自适应搜索的天鹰算法。该算法能够实时获取光伏阵列的最大功率点，从而实现交通自洽能源系统的最优控制。通过在仿真平台上设计不同光照条件下的实验，结果表明本文提出的算法相较于扰动观察法、粒子群算法和传统天鹰算法具有更好的跟踪精度和速度，并且不易陷入局部最优解。这种方法对于提高光伏发电系统的发电效率和降低交通运输运营成本具有一定的参考意义。

关键词：交通工程交通自洽能源光伏优化控制局部阴影天鹰算法

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绿茶粉和绿茶多酚对犬的降脂作用

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动物营养学报 2018年第12期30卷 5107-5117页

作者：李玉徐怡钟梁婷陶焕青何坤郝宁邹苏萍冯士彬王希春周裔彬王一君张劲松吴金节宛晓春安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室合肥230036 安徽农业大学动物科技学院合肥230036

本试验旨在研究绿茶粉和绿茶多酚对犬的降脂作用,并初步揭示其降脂作用的机理。试验选择15只健康的5月龄本地田园犬,随机分为3组,每组5只。对照组饲喂基础饲粮,绿茶粉组饲喂在基础饲粮中添加1.00%绿茶粉的试验饲粮,绿茶多酚组饲喂在基... 详细信息

本试验旨在研究绿茶粉和绿茶多酚对犬的降脂作用,并初步揭示其降脂作用的机理。试验选择15只健康的5月龄本地田园犬,随机分为3组,每组5只。对照组饲喂基础饲粮,绿茶粉组饲喂在基础饲粮中添加1.00%绿茶粉的试验饲粮,绿茶多酚组饲喂在基础饲粮中添加0.25%绿茶多酚的试验饲粮。试验期为12周。结果显示:1)在整个试验过程中,3组犬的体重整体呈增长趋势。与对照组相比,绿茶粉组体重于第4周开始出现显著降低(P 0. 05),在最后2周(第11、12周)又出现显著差异(P 0.05),而绿茶多酚组犬肝组织CD36 mRNA的相对表达量则显著升高(P<0.05)。由此得出,本试验条件下,在饲粮中添加1.00%绿茶粉或0.25%绿茶多酚均能够有效控制犬的体重,调节犬体内的脂代谢,降低犬肝组织中ACCα、FAS、ApoB-100 mRNA的相对表达量,提高犬肝组织中ApoA-1、CD36、PPARα、ACO mRNA的相对表达量,从而发挥降脂作用。

关键词：犬绿茶粉绿茶多酚降脂基因表达

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