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ZnPcH1介导的光动力疗法对血液恶性肿瘤细胞的生物作用及其机制的实验研究

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ZnPcH1介导的光动力疗法对血液恶性肿瘤细胞的生物作用及其机制的...

作者：陈万紫福建医科大学

学位级别：硕士

目的:①探讨新型酞菁类光敏剂ZnPcH1介导的光动力疗法（ZnPcH1-PDT）对血液恶性肿瘤细胞的杀伤作用及其机制,为PDT应用于血液恶性肿瘤细胞的研究提供实验依据。②初步探讨ZnPcH1-PDT对血液恶性肿瘤细胞的杀伤效应及其机制,为PDT的光损... 详细信息

目的:①探讨新型酞菁类光敏剂ZnPcH1介导的光动力疗法（ZnPcH1-PDT）对血液恶性肿瘤细胞的杀伤作用及其机制,为PDT应用于血液恶性肿瘤细胞的研究提供实验依据。②初步探讨ZnPcH1-PDT对血液恶性肿瘤细胞的杀伤效应及其机制,为PDT的光损伤机制提供理论依据。③初步探讨ZnPcH1-PDT对慢性粒细胞白血病达形态学缓解骨髓的体外净化作用,为提高造血系统肿瘤患者骨髓移植物中残存瘤细胞的PDT净化效果提供实验依据。方法:①应用荧光光谱分析法检测光敏剂ZnPcH1含量正常骨髓单个核细胞（mononuclear cells,MNC）及人Burkitt’s淋巴瘤CA46细胞、鼠淋巴瘤P388细胞、K562细胞内的动态变化,应用MTT比色法和细胞集落形成实验检测ZnPcH1-PDT对CA46细胞、P388细胞以及K562细胞的生物作用;②采用AO/EB荧光染色法、DNA片段化分析、TUNEL、Annexin-V-FITC/PI双染等方法检测ZnPcH1-PDT对K562细胞的作用;以RT-PCR法检测ZnPcH1-PDT处理后的K562细胞c-myc、htert、survivin、caspase-3 mRNA表达的变化。③在正常骨髓MNC中按1:100、1:1000和1:10000的比例掺入K562细胞建立混合细胞模型,采用巢式RT-PCR检测PDT处理后K562细胞bcr/abl融合基因的表达情况;收集门诊慢性粒细胞白血病缓解期患者的骨髓标本,应用荧光定量PCR检测PDT处理前后bcr/abl融合基因表达的变化。结果:①光敏剂ZnPcH1在正常骨髓MNC与CA46、P388、K562细胞内含量的动态变化存在差异:在与ZnPcH1共孵育5h时,CA46、P388、K562细胞与正常MNC细胞内的ZnPcH1含量的比值较高。因此,选用与ZnPcH1孵育5h后再行光照。MTT比色法与细胞集落形成实验显示ZnPcH1-PDT对CA46、P388、K562细胞有杀伤作用,可以抑制CA46、P388、K562细胞的增殖,抑制率随光敏剂浓度的增加而增高;②AO/EB荧光染色法、DNA片段化分析、TUNEL、AnexinV-FITC/PI双染法结果均显示PDT能够诱导K562细胞凋亡,且呈时间依赖性。PDT处理后K562细胞中c-myc、htert、survivin的mRNA表达呈时间依赖性降低,而caspase-3 mRNA表达呈时间依赖性增强。③细胞集落形成实验显示ZnPcH1-PDT对K562细胞集落形成的抑制率高于正常CFU-GM（p<0.05）;巢式RT-PCR结果显示ZnPcH1-PDT处理可完全杀灭按l:100至l:l0000比例混入正常骨髓MNC中的K562细胞,在此浓度下,ZnPcH1-PDT对正常CFU-GM集落形成的抑制率仅为22.5%。荧光定量PCR结果显示PDT处理后骨髓标本中bcr/abl融合基因的表达较对照组有明显下调,抑制率为22.07%9.07%。结论:①光敏剂ZnPcH1含量在CA46、P388、K562三种细胞与正常骨髓MNC内呈动态变化,能够选择性积聚于肿瘤细胞,杀伤血液肿瘤细胞,而对正常骨髓MNC的影响较小。②ZnPcH1-PDT能抑制K562细胞增殖,诱导细胞凋亡。其机制可能为下调c-myc、survivin的表达,从而下调htert的表达,抑制细胞增殖;上调caspase-3 mRNA的表达,诱导其凋亡。③ZnPcH1-PDT具有良好的骨髓体外净化效果,在自体骨髓移植的骨髓净化方面有广阔的应用前景。

关键词： ZnPcH1 光动力疗法 CA46细胞 P388 细胞 K562细胞凋亡骨髓净化

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99例伴6号染色体异常的血液病分析

中华医学遗传学杂志 2020年第6期37卷 665-668页

作者：罗清文陈万紫福建医科大学附属协和医院福建省血液病研究所福建省血液病学重点实验室福州350001

目的探讨6号染色体异常在血液病中的发生及其预后意义。方法回顾分析99例伴6号染色体异常的血液病患者的一般临床资料和核型分析结果。结果99例患者主要为急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)、淋巴瘤、多发性骨髓瘤... 详细信息

目的探讨6号染色体异常在血液病中的发生及其预后意义。方法回顾分析99例伴6号染色体异常的血液病患者的一般临床资料和核型分析结果。结果99例患者主要为急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常及慢性淋巴细胞白血病等,其中ALL占比最大,将ALL患者患者分为+6/-6、6p异常和6q异常3组,3组ALL患者的性别、血红蛋白、血小板计数差异无统计学意义(P>0.05)。而伴6q异常的ALL患者年龄和白细胞计数均明显高于+6/-6组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素COX分析显示6p/6q异常及年龄大于14岁是影响ALL患者预后的危险因素。ALL各组1年总生存率分别90.9%、20.0%、55.6%,6q和6p组1年总生存率均低于+6/-6组(P<0.05)。结论伴6号染色体异常常见于B细胞性疾病,ALL中伴6q/6p异常的患者预后较差,探讨6号染色体异常对患者预后具有一定的意义。

关键词： 6号染色体异常细胞遗传学核型分析恶性血液病

儿童和成人Burkitt淋巴瘤59例临床病理特征与预后分析

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临床与实验病理学杂志 2020年第12期36卷 1464-1466页

作者：李国平陈万紫福建医科大学附属第一医院病理科福州350004 福建医科大学附属协和医院血液病研究所福州350001

目的探讨儿童和成人Burkitt淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma,BL)的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析59例BL患者的临床资料,采用Kaplan-Meier和Log-rank分析其生存率,并进行Cox多因素分析患者预后因素。结果59例患者以男性为主... 详细信息

目的探讨儿童和成人Burkitt淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma,BL)的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法回顾性分析59例BL患者的临床资料,采用Kaplan-Meier和Log-rank分析其生存率,并进行Cox多因素分析患者预后因素。结果59例患者以男性为主,中位年龄14岁,晚期(Ⅲ+Ⅳ期)患者占67.80%,伴骨髓浸润占40.68%,免疫组化联合遗传学方法可提高其检出率。儿童组30例,以淋巴结肿大和胃肠症状为主,成人组则以淋巴结肿大和口、咽、鼻部症状为主。两组在患者性别、白细胞计数、血红蛋白、LDH和URIC差异均无统计学意义(P>0.05),成人组的PLT明显高于儿童组(P=0.004)。儿童组的1年总生存期(64.8%)高于成人组(27.6%),差异有统计学意义(P=0.038)。Cox多因素分析显示:患者年龄、白细胞计数>10×109/L和LDH水平高是影响患者预后的因素。结论BL患者发病部位以淋巴结和胃肠道多见,具有高侵袭性,联合遗传学方法可提高检出率,年龄≥14岁、白细胞计数>10×109/L和LDH水平高患者预后差。

关键词： Burkitt淋巴瘤免疫组织化学荧光原位杂交

125例伴3号染色体异常血液病患者的临床特征及预后

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中国实验血液学杂志 2020年第5期28卷 1459-1463页

作者：陈万紫罗清文黄慧芳福建医科大学附属协和医院福建省血液病研究所福建省血液病学重点实验室福建福州3550001 福建医科大学附属协和医院中心实验室福建福州350001

目的:探讨3号染色体异常在血液病患者中的临床特征及其预后的意义。方法:回顾分析2011年1月-2018年6月来于院就诊的125例伴3号染色体异常的血液病患者的临床资料。采用R显带技术进行常规核型分析,根据主要遗传学异常将患者分为3组:3q异... 详细信息

目的:探讨3号染色体异常在血液病患者中的临床特征及其预后的意义。方法:回顾分析2011年1月-2018年6月来于院就诊的125例伴3号染色体异常的血液病患者的临床资料。采用R显带技术进行常规核型分析,根据主要遗传学异常将患者分为3组:3q异常、3p异常及+3/-3。结果:3组中以3q异常最常见,其次为+3和3p异常。各组在年龄、性别、WBC、Plt计数和Hb水平方面无明显差异(P>0.05)。125例患者中未治疗即死亡或放弃治疗的42例,治疗2个疗程以上的共83例;3组患者的2年总生存率分别为30.25%、43.0%和58.7%。3q异常组患者的2年总生存率明显低于+3/-3组(P=0.041)。而3q异常中以涉及3q21/3q26位点异常的检出率最高,其2年的总生存率(41.1%)明显高于其它的3q位点异常(11.1%)(P=0.044)。结论:患者伴有3号染色体异常尤其是3q异常预后较差,而3q异常中涉及3q21/3q26位点异常的患者预后相对较好。

关键词： 3号染色体细胞遗传学核型分析血液病

ZnPcH1介导的光动力疗法净化白血病SHI-1细胞

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中国实验血液学杂志 2012年第4期20卷 842-846页

作者：林晓岚黄慧芳陈万紫福建医科大学附属协和医院检验科福建福州350001 福建医科大学附属协和医院血液病研究所福建省血液病学重点实验室福建福州350001

本研究探讨新型酞菁类光敏剂二磺基二邻苯二甲酰亚胺甲基酞菁锌(ZnPcH1)介导的光动力疗法(PDT)对急性单核细胞白血病SHI-1细胞的杀伤作用及其机制,为PDT应用于白血病自体骨髓体外净化提供理论依据。以SHI-1细胞作为研究对象,应用MTT比... 详细信息

本研究探讨新型酞菁类光敏剂二磺基二邻苯二甲酰亚胺甲基酞菁锌(ZnPcH1)介导的光动力疗法(PDT)对急性单核细胞白血病SHI-1细胞的杀伤作用及其机制,为PDT应用于白血病自体骨髓体外净化提供理论依据。以SHI-1细胞作为研究对象,应用MTT比色法检测细胞增殖。采用AO/EB复合染色、TUNEL、DNA二倍体分析、An-nexin-Ⅴ-FITC/PI双染法等分析细胞的死亡方式。SHI-1细胞与正常骨髓单个核细胞(MNC)以1∶100-1∶10 000混合建立混合细胞模型,通过巢式RT-PCR检测SHI-1细胞融合基因MLL/AF6 mRNA的表达以研究ZnPcH1-PDT对骨髓MNC中所掺入的SHI-1细胞的净化效果。结果表明,ZnPcH1-PDT对SHI-1细胞有杀伤作用,且呈量效关系。Zn-PcH1-PDT能诱导细胞凋亡,且呈时间依赖性。0.5μmol/L ZnPcH1-PDT可完全杀灭模拟缓解骨髓中掺入的SHI-1细胞。结论:ZnPcH1-PDT有希望成为新的高效而简便的骨髓净化手段。

关键词：酞菁类光敏剂光动力疗法白血病 SHI-1细胞骨髓净化

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教材二次开发中的课堂设置片段探究

新课程学习(中) 2012年第5期 40-43页

作者：陈万紫浙江省温州市第五十一中学

课程改革后,新教材起点高、内容鲜活、容量大、学生基础训练不够、知识体系难以把握等问题成为教学的突出问题。新理念下,面对新课标的要求与现实的突出矛盾,摆脱各种束缚,基于学情和教学目标,对教材进行二次开发已经成为教学中一股不... 详细信息

课程改革后,新教材起点高、内容鲜活、容量大、学生基础训练不够、知识体系难以把握等问题成为教学的突出问题。新理念下,面对新课标的要求与现实的突出矛盾,摆脱各种束缚,基于学情和教学目标,对教材进行二次开发已经成为教学中一股不可阻挡的潮流。只有在实践中持续地体验和思考,才能真正感悟二次开发的理念和精彩。

关键词：二次开发教材学情文本解读

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中职民族民间音乐欣赏教学研究

新课程研究（中旬） 2014年第2期 96-98页

作者：陈万紫江苏省昆山花桥国际商务城中等专业学校

由于民族民间音乐的风格等特点,加之外界音乐的潮流,很难让中专阶段的学生习惯去欣赏。文章从学生心理实际出发,分析了教与学、欣赏中主客观等方面的关系,试图寻找一种恰当的教学方法,激发学生的学习兴趣。

关键词：中职民乐欣赏教学

荧光原位杂交在诊断骨髓形态学拟诊的再生障碍性贫血中的应用

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中华医学遗传学杂志 2016年第1期33卷 5-8页

作者：林晓岚陈万紫傅蔷陈加弟黄慧芳福建省血液病研究所、福建省血液病学重点实验室、福建医科大学附属协和医院福州350001

目的探讨采用骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes，MDS）组套探针的荧光原位杂交（fluorescentin situ hybridization，FISH）检测在鉴别诊断再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）与MDS中的临床价值。方法应用针对MDS常... 详细信息

目的探讨采用骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes，MDS）组套探针的荧光原位杂交（fluorescentin situ hybridization，FISH）检测在鉴别诊断再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）与MDS中的临床价值。方法应用针对MDS常见异常的组套探针，对94例形态学拟诊为AA患者的骨髓标本进行FISH检测，检出具有MDS诊断价值的遗传学异常，并比较MDS与AA两组患者临床特征的差异。结果（1）94例AA患者中11例存在遗传学异常，其中8号三体5例，20q缺失和Y缺失各1例；检出具有MDS诊断价值的遗传学异常4例：包括5q缺失3例，其中1例伴有20q缺失；7q缺失1例。（2）遗传学MDS与AA两组在临床特征，如年龄、性别、人院时血常规的中性粒细胞绝对值、血红蛋白与血小板计数等方面的差别均无统计学意义。结论通过FIsH检测发现部分形态学拟诊AA的患者存在具有MDS诊断价值的细胞遗传学异常。

关键词：荧光原位杂交再生障碍性贫血骨髓增生异常综合征 8号染色体三体

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光动力疗法在淋巴瘤治疗中的应用现状

白血病．淋巴瘤 2009年第1期18卷 54-56页

作者：陈万紫(综述) 黄慧芳林东红(审校) 福建医科大学医学技术与工程学院检验系 350004 福建医科大学附属协和医院血液病研究所

随着光动力疗法（PDT）作用机制的深入研究，PDT在血液系统疾病中的应用已成为医学研究的新课题。复发、难治性淋巴瘤的治疗是血液学领域迄今未能解决的难题，目前有关PDT在淋巴瘤中应用的研究正成为国内外学者关注的热点。

关键词：光动力化学疗法淋巴瘤研究