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CRISPR-Cas9基因编辑报道系统应用于AAVS1安全港的定点整合

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华中科技大学学报（医学版） 2022年第6期51卷 825-829页

作者：曹淳陈耀何佳佳张毛雪钱正韬周小明江苏大学医学院基础医学与医学技术学院镇江212013

目的利用ZFN与TALEN基因编辑以及同源重组技术将Cas9表达框、基因编辑效率荧光报道系统以及真核细胞筛选标记的DNA超长片段定点插入HEK-293T细胞基因组AAVS1安全港,建立可用于衡量CRISPR-Cas9基因编辑的稳定细胞株。方法利用分子克隆技... 详细信息

目的利用ZFN与TALEN基因编辑以及同源重组技术将Cas9表达框、基因编辑效率荧光报道系统以及真核细胞筛选标记的DNA超长片段定点插入HEK-293T细胞基因组AAVS1安全港,建立可用于衡量CRISPR-Cas9基因编辑的稳定细胞株。方法利用分子克隆技术构建AAVS1-all-in-one-CRISPR质粒。利用脂质体将识别并切割AAVS1基因组序列的ZFN和TALEN质粒以及AAVS1-all-in-one-CRISPR质粒共转染入HEK-293T细胞。使用嘌呤霉素筛选获得单克隆细胞后,利用杀稻瘟菌素S筛选、红色荧光检测、Cas9 Western blot以及基因组PCR鉴定等方法获得CRISPR-Cas9基因编辑报道系统完整整合入AAVS1安全港的稳定细胞株。继而,将EGFP修复模板单链DNA及EGFP sgRNA瞬时转染入这些稳定细胞株,对失去荧光的EGFP进行基因编辑,恢复其发光功能,并通过荧光检测技术验证基因编辑结果。结果成功获得3株同时具有嘌呤霉素和杀稻瘟菌素S抗性以及表达红色荧光蛋白的单克隆细胞,Western blot证实其成功表达Cas9蛋白,基因组PCR鉴定目的基因成功整合入基因组AAVS1位点。经EGFP基因编辑后,细胞恢复绿色荧光。结论利用ZFN与TALEN将完整的CRISPR-Cas9基因编辑报道系统成功整合入HEK-293T细胞基因组的AAVS1安全港,整合DNA片段长度达11.5 kb,并利用Cas9成功编辑EGFP报道基因。

关键词： AAVS1 CRISPR ZFN TALEN 基因编辑

协同换道避障模型和轨迹数据驱动的车辆协同避障策略

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吉林大学学报（工学版） 2024年第5期54卷 1311-1322页

作者：秦雅琴钱正富谢济铭昆明理工大学交通工程学院昆明650500

考虑车辆类型、驾驶风格及不同阶段影响车辆换道的关键目标,将车辆避障过程中的“车-车交互”机理描述为力的关系,构建协同换道避障模型(CLAM),提取并建立适用于突发事件的车辆避障微观轨迹数据集,将车辆避障转化为多约束优化控制问题,... 详细信息

考虑车辆类型、驾驶风格及不同阶段影响车辆换道的关键目标,将车辆避障过程中的“车-车交互”机理描述为力的关系,构建协同换道避障模型(CLAM),提取并建立适用于突发事件的车辆避障微观轨迹数据集,将车辆避障转化为多约束优化控制问题,以优化算法(OA)为纽带,设计车辆协同避障控制(CLAM-OA)策略。结果表明:相较于数据驱动的长短时记忆模型,CLAM-OA策略输出的误差均显著减小、车速与位移在不同时域的输出结果也更加稳定。

关键词：交通运输系统工程避障策略混合驱动车辆控制换道行为微观轨迹数据

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2023年8月6日山东德州平原M 5.5地震同震变形及地震活动性变化数值模拟

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地质学报 2024年第7期98卷 2101-2109页

作者：孟秋王子韬张怀中国科学院大学地球与行星科学学院中国科学院计算地球动力学重点实验室北京100049 中国地震局地震预测研究所北京100036 南方海洋科学与工程广东省实验室(珠海) 广东珠海519080 北京燕山地球关键带国家野外科学观测研究站中国科学院大学北京101408

2023年8月6日,山东省德州市平原县发生M 5.5地震,造成了严重的经济损失,打破了山东省近40年未发生M≥5.0地震的平静期。平原地震震中区域人口稠密,经济发展迅速,其引起的区域地震活动性变化与未来强震发生的可能性是社会关注的热点。本... 详细信息

2023年8月6日,山东省德州市平原县发生M 5.5地震,造成了严重的经济损失,打破了山东省近40年未发生M≥5.0地震的平静期。平原地震震中区域人口稠密,经济发展迅速,其引起的区域地震活动性变化与未来强震发生的可能性是社会关注的热点。本文通过有限元数值模拟方法,建立三维模型研究震中孕震环境及其邻区同震形变应力场,利用假定破裂模型模拟地震同震位错,根据库仑应力变化理论探究周围区域地震活动性变化。结果表明,本次地震主要形变集中于发震断层10 km范围内,震中位置库仑应力下降超过500 kPa,未来短期内强震发生概率不大。平原地震对附近地震活动性造成了一定影响,可能促进了北部走滑型中小震活动,抑制了西侧正断型地震的发生。对于华北平原及邻近断层地震活动性变化仍需要更长时间地震数据和更深入的研究工作。

关键词：平原地震地震活动性库仑应力变化有限元数值模拟

粤港澳大湾区交通流网络空间结构和边界效应测度

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热带地理 2024年第5期44卷 783-793页

作者：吴旗韬广东省科学院广州地理研究所广州510070

推动港澳与内地交通互联互通和融合发展是粤港澳大湾区高质量发展的重要内容。大湾区由于制度差异对跨境交通产生边界效应,但现有研究中利用真实交通流大数据对边界效应的动态测度研究不足。文章基于粤港澳大湾区高速公路收费数据和跨... 详细信息

推动港澳与内地交通互联互通和融合发展是粤港澳大湾区高质量发展的重要内容。大湾区由于制度差异对跨境交通产生边界效应,但现有研究中利用真实交通流大数据对边界效应的动态测度研究不足。文章基于粤港澳大湾区高速公路收费数据和跨境交通数据构建大湾区交通流网络,采用复杂网络和边界效应度量方法,研究大湾区交通流网络空间结构及其边界效应的动态变化。结果表明,粤港澳大湾区交通流网络具有独特的广佛、深莞惠“双核心―边缘”结构,疫情后大湾区交通流网络的交通覆盖度和紧密度都有较大提升,港澳车流开始跨越边界向北延伸,粤港澳交通融合加速,形成“两岸互通、全域互联”的空间格局,但整体上香港地区和澳门地区在整体网络的重要性依然较弱。香港地区和内地、澳门地区和内地间的阻碍系数高于内地各县区间的阻碍系数,客车的阻碍系数普遍低于货车的阻碍系数。疫情后全网络的阻碍系数呈现动态下降趋势,边界效应的限制作用降低。文章拓展了交通流网络研究中边界效应的定量研究框架,有助于推动粤港澳大湾区交通融合发展。

关键词：边界效应交通流网络时空特征粤港澳大湾区

美国AI赋能的一体化威慑战略:内涵、表现与限度

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情报杂志 2024年

作者：肖迅韬云南大学国际关系研究院江苏战略与发展研究院

[研究目的]为更好应对大国战略竞争与各类冲突活动带来的现实威胁,拜登政府推出“一体化威慑”战略,并将其视为国家安全与国防战略的核心要素。对美国“一体化威慑”战略的解读,有助于更好地厘清美国国家安全与国防战略的走向,对维护我... 详细信息

[研究目的]为更好应对大国战略竞争与各类冲突活动带来的现实威胁,拜登政府推出“一体化威慑”战略,并将其视为国家安全与国防战略的核心要素。对美国“一体化威慑”战略的解读,有助于更好地厘清美国国家安全与国防战略的走向,对维护我国国家安全有着重要意义。[研究方法]采用文献分析、归纳与演绎等方法,通过对相关政策文件、官方报道等开源情报进行梳理,对人工智能(AI)赋能的美国“一体化威慑”战略的内涵与表现进行归纳与总结,并对其实施限度展开分析。[研究结论]“一体化威慑”战略以整合全域、注重集体威慑为特征,以AI为技术依托,以赢得大国战略竞争为终极目标,是美国为优化资源、分摊成本而做出的务实战略选择,但其“宏大”愿景的落地尚面临诸多分歧和不确定风险。

关键词：国家安全威慑战略一体化威慑人工智能一体化整合冲突联合全域指挥与控制

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不实告知误导缔约场景下的合同解消

清华法学 2024年第3期18卷 102-117页

作者：俞彦韬华东政法大学

当今社会，合同当事人缔约阶段的信息收集负担正在急剧加重，其依赖交易相对人提供的资讯进行决策，事属寻常。在告知方的信息不实或缺失使受告知方被误导缔约的场合，传统的欺诈制度仅允许于告知方故意时否定合同的拘束力，这一故意要... 详细信息

当今社会，合同当事人缔约阶段的信息收集负担正在急剧加重，其依赖交易相对人提供的资讯进行决策，事属寻常。在告知方的信息不实或缺失使受告知方被误导缔约的场合，传统的欺诈制度仅允许于告知方故意时否定合同的拘束力，这一故意要件缺乏正当性，不应绝对化。受告知方可以基于重大误解撤销受误导的合同，告知方有无过错，在所不问，但受告知方信赖不实告知缺乏合理性的，不得撤销。受告知方还可基于缔约过失或侵权责任请求告知方作出同意解消受误导合同的意思表示(废止请求权),以达成合意解除，不受错误撤销权除斥期间是否经过的影响，且可保证原合同下的担保权存续。以上各种机制与欺诈撤销权一道，构成了我国法上解消受误导合同拘束力的完整体系。

关键词：不实告知欺诈撤销权错误撤销权恢复原状废止请求权

“何必”曰“利”:孟子仁义观再探——以先秦义利的互训、对立关系为线索

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四川大学学报（哲学社会科学版） 2024年第1期 91-104,212,213页

作者：聂韬电子科技大学外国语学院成都611731

《孟子》首章中“王何必曰利”的表述,在后世围绕“义利之辨”的儒家经学阐释以及当下学界的相关讨论中一直处于核心地位。过往研究多聚焦探讨与阐发孟子之“利”的具体指涉,这可能是受限于宋明儒家之后一直流行未蔽的孟子被“圣化”之... 详细信息

《孟子》首章中“王何必曰利”的表述,在后世围绕“义利之辨”的儒家经学阐释以及当下学界的相关讨论中一直处于核心地位。过往研究多聚焦探讨与阐发孟子之“利”的具体指涉,这可能是受限于宋明儒家之后一直流行未蔽的孟子被“圣化”之风。然而,当我们将孟子的辟利之举置于先秦普遍义利互训的关系,即孟子所处的诸子论辩语境之中进行考察,孟墨二者的仁义观在“利他”性上呈现了较大的差异。以此重新审视《孟子》中的诸多记载,及孟子“何必曰利”的仁义之道,我们发现孟子不仅在思想层面排除“利”的负面内涵,也无可避免地将“利”的正面指涉———包括合理正当的“利他”动机,一并与“仁义”相隔离。此举让孟子之仁义既难达到“形而上”之利他的哲学高度,也使其“形而下”的施行范围受限于战国征战环境,受制于伦理纲常,无奈于国家强弱和大小,甚至在那些更为在乎如何权衡“利”的战国学者们眼中,成为诸侯王、谋士们借“仁义”之名来遮盖其“自利”之实的工具。

关键词：孟子仁义观义利互训孟墨之别利他君亲伦常

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云计算在智慧农业系统中的应用研究

中国农业资源与区划 2024年第1期45卷 10-10,33页

作者：黄宇韬福建理工大学

当前我国正处在由传统农业向智慧农业转型升级的关键时期,其中云计算技术的日益成熟为智慧农业系统的构建提供了支撑。云计算技术通过虚拟化计算资源(如服务器、数据库、数据库管理系统、存储设备、数据库管理系统等),将其汇聚到一个虚... 详细信息

当前我国正处在由传统农业向智慧农业转型升级的关键时期,其中云计算技术的日益成熟为智慧农业系统的构建提供了支撑。云计算技术通过虚拟化计算资源(如服务器、数据库、数据库管理系统、存储设备、数据库管理系统等),将其汇聚到一个虚拟的云中,然后通过网络对外提供服务。这种技术可以用于实现智慧农业系统的各种功能,如数据采集、处理、分析、存储等。

关键词：数据库管理系统云计算技术数据采集存储设备虚拟化计算服务器智慧农业系统

基于CMIP6模式的北冰洋波弗特流涡历史和未来不同温室气体排放情景下变化的模拟分析

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极地研究 2024年

作者：杨瀚韬白学志河海大学海洋学院

基于43套CMIP6模式资料和ORAS5(Ocean Reanalysis System 5)同化数据,探讨了北冰洋加拿大海盆波弗特流涡在历史时期(1979—2014)和未来SSP1-2.6和SSP5-8.5两种温室气体排放情景下的变化特征。研究结果表明历史时期CMIP6的多个模式及多... 详细信息

基于43套CMIP6模式资料和ORAS5(Ocean Reanalysis System 5)同化数据,探讨了北冰洋加拿大海盆波弗特流涡在历史时期(1979—2014)和未来SSP1-2.6和SSP5-8.5两种温室气体排放情景下的变化特征。研究结果表明历史时期CMIP6的多个模式及多模式平均都低估了流涡的强度,且对流涡强度变化趋势的模拟存在较大差异;其中35套CMIP6模式资料中有45%的模式资料能够较好地再现ORAS5同化数据所显示的上升趋势。在未来SSP1-2.6和SSP5-8.5两种排放情景下,波弗特流涡强度都将呈上升趋势,只是在本世纪后期,后者的强度会低于前者且这种差异将随时间增大;海冰密集度和海平面气压呈显著正相关、均持续下降,但后者的下降趋势较前者更明显。对流涡增强的成因分析表明, SSP1-2.6排放情景下流涡的增强主要与海冰密集度的下降有关,而SSP5-8.5排放情景下流涡的弱增强则主要与海冰显著减少导致的波弗特高压减弱有关。

关键词： CMIP6模式 SSP1-2.6 SSP5-8.5 波弗特流涡变化趋势