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小分子RNA沉默间隙连接蛋白37对猪腹主动脉粥样斑块的影响

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中华实验外科杂志 2014年第6期31卷 1258-1261页

作者：郭素峡杨向军苏州大学第一附属医院心内科 215006

目的建立猪动脉粥样硬化斑块模型，构建猪靶向小干扰RNA（siRNA）慢病毒载体，定向转染后用血管内超声（IVUS）分析斑块特性变化。方法60只猪建立动脉粥样硬化模型，间隙连接蛋白37（Cx37）siRNA慢病毒悬液、mock—siRNA、生理盐水分别... 详细信息

目的建立猪动脉粥样硬化斑块模型，构建猪靶向小干扰RNA（siRNA）慢病毒载体，定向转染后用血管内超声（IVUS）分析斑块特性变化。方法60只猪建立动脉粥样硬化模型，间隙连接蛋白37（Cx37）siRNA慢病毒悬液、mock—siRNA、生理盐水分别注入斑块，2个月后用血管内超声检测斑块体积和组织成分，并与干预前比较。同时检测斑块Cx37 mRNA及Cx37蛋白表达．并行组间比较。结果慢病毒转染2个月后，猪腹主动脉斑块Cx37 mRNA水平在Cx37 siRNA组下降到34％，mock—siRNA组下降到61％，生理盐水组下降到94％（P〈0．05），其中Cx37 siRNA组显著下降。Western blot分析显示Cx37蛋白表达水平在Cx37siRNA干扰组较其他组低（0．21±0．07、0．65±0．06、0．54±0．07）。IVUS检测，10个月时斑块坏死核心占比率较8个月时[降低（5．26±2．11）％比（7．83±1．03）％，P〈0．05]。Cx37 siRNA组斑块体积较8个月时减小[（21．03±6.24）mm^3比（31．23±10．23）mm^3，P〈0．01]。而mock—siRNA和生理盐水组，斑块体积较8个月时增大[（38．54±13．56）mm^3比（32．12±11．21）mm^3，（37．36±14．21）mm^3比（30．21±12．02）mm^3，P〈0．05]。结论Cx37 siRNA安全有效作用于动脉粥样硬化斑块，有效地减少Cx37 mRNA和蛋白表达，并促进斑块稳定及缩小斑块。

关键词：血管内超声动脉粥样硬化基因治疗 RNA干扰

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腺相关病毒的基因疗法在心血管疾病中的应用

生命科学 2021年第3期33卷 392-399页

作者：廖敏琪郭素峡东莞市人民医院心血管内科东莞523000

尽管现代医疗手段不断改进,但心血管疾病(cardiovascular diseases,CVD)的病死率仍居高不下,寻找新的防治方法将具有良好的临床应用前景。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)作为基因治疗的载体之一,可以通过基因替代、基因沉默、... 详细信息

尽管现代医疗手段不断改进,但心血管疾病(cardiovascular diseases,CVD)的病死率仍居高不下,寻找新的防治方法将具有良好的临床应用前景。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)作为基因治疗的载体之一,可以通过基因替代、基因沉默、递送新基因、基因编辑等方式在CVD中起到治疗作用。AAV有多种血清型,其中AAV1型、6型、8型、9型对心脏有组织亲和性,并且转导后能在体内稳定长效表达,安全性高。该文主要针对AAV基因疗法在心力衰竭、冠心病、肥厚型心肌病、扩张型心肌病以及心律失常等CVD中的应用进行综述。目前,AAV载体在克服宿主中和抗体、心脏选择性以及注射剂量和途径的优化等方面仍存在一些挑战,利用外泌体包裹AAV以克服宿主抗体中和,基于CRISPR/Cas9基因编辑技术设计有心脏或血管特异性启动子的AAV载体等改进方法还需要进一步探索。因此,AAV基因治疗在心血管领域还有很大的研发空间和很好的应用价值。

关键词：基因治疗腺相关病毒心血管疾病

急性心肌梗死介入术后无复流患者血清补体4a水平和血小板聚集率的变化

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中华心血管病杂志 2011年第2期39卷 168-170页

作者：郭素峡羊镇宇王如兴南京医科大学附属无锡市人民医院心脏中心南京214023

目的探讨急性心肌梗死（AMI）经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后无复流患者血清补体4a（C4a）水平和血小板聚集率的变化。方法入选行PCI的AMI患者119例，其中介入术后冠状动脉无复流患者（无复流组）28例，冠状动脉恢复血流患者（复流... 详细信息

目的探讨急性心肌梗死（AMI）经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后无复流患者血清补体4a（C4a）水平和血小板聚集率的变化。方法入选行PCI的AMI患者119例，其中介入术后冠状动脉无复流患者（无复流组）28例，冠状动脉恢复血流患者（复流组）91例和疑似冠心病而行冠状动脉造影检查结果正常者（对照组）30例。检测对照组冠状动脉造影前和无复流组、复流组介入术前30min，术后即刻、30min、1h．2h、半年的C4a水平和血小板聚集率，并观察其变化。结果无复流组、复流组和对照组术前30minC4a水平差异无统计学意义。无复流组和复流组术前30min血小板聚集率均高于对照组（P均〈0．05）。无复流组术后即刻、30min和1hC4a水平和血小板聚集率均高于术前和术后2h、半年，同时也均高于复流组术后即刻、30min和1h（P均〈0．05）。复流组不同时间的C4a水平和血小板聚集率差异无统计学意义。无复流组术后即刻、30min和1h，C4a水平与血小板聚集率呈正相关（r值分别为0．91、0．79和0．60，P均〈0．01）。结论 CAa水平和血小板聚集率在AMI患者PCI术后早期短暂升高。

关键词：补体C4a 血小板聚集心肌梗死血管成形术,经腔,经皮冠状动脉

组织蛋白酶B过表达质粒和特异性siRNA表达质粒的构建与转染及对血管平滑肌细胞作用初步探讨

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南京大学学报（自然科学版） 2012年第6期48卷 809-816页

作者：张涛羊镇宇薄小萍王强陈茂华李坚郭素峡冯健尤华彦南京医科大学附属无锡市人民医院心脏中心无锡214320

构建并转染pcDNA3.1-cathepsin B和pSilencer2.1-cathepsin B质粒,建立组织蛋白酶B过表达细胞株与基因沉默细胞株,初步探讨组织蛋白酶B对血管平滑肌细胞凋亡的作用.通过RT-PCR法扩增获得组织蛋白酶B全基因序列并构建pcDNA3.1-cathepsin ... 详细信息

构建并转染pcDNA3.1-cathepsin B和pSilencer2.1-cathepsin B质粒,建立组织蛋白酶B过表达细胞株与基因沉默细胞株,初步探讨组织蛋白酶B对血管平滑肌细胞凋亡的作用.通过RT-PCR法扩增获得组织蛋白酶B全基因序列并构建pcDNA3.1-cathepsin B表达质粒,同时设计针对组织蛋白酶B靶序列的siRNA,按shRNA表达质粒的克隆策略,设计针对该序列的双链DNA序列并构建pSilencer2.1-cathepsin B质粒,通过脂质体转染人主动脉平滑肌细胞(HA-VSMC),经过筛选鉴定建立组织蛋白酶B过表达株与基因沉默株.通过TNF-α/act D(放线菌素D)诱导细胞凋亡,从细胞活性分析、流式细胞术观察组织蛋白酶B对血管平滑肌细胞的作用,并加入组织蛋白酶抑制剂(E64d)和组织蛋白酶B特异性抑制剂(CA-074ME),观察细胞活性改变.实验结果表明转染pcDNA3.1-cathepsin B细胞组织蛋白酶B蛋白水平明显高于对照组,而转染pSilencer 2.1-cathepsin B细胞组织蛋白酶B蛋白水平明显低于对照组.噻唑蓝分析经TNF-α/actD诱导后细胞活性明显降低,与对照组(14.60%±1.34%)比较,沉默组(21.30%±2.37%)活性增加,而过表达组(9.98%±1.04%)较对照组明显下降,加入E64d、CA-074ME组(18.23%±1.05%,17.40%±1.13%)较过表达组活性增加,流式细胞术定量检测得到相似结果.表明组织蛋白酶B对TNF-α/act D诱导的血管平滑肌细胞凋亡具有促进作用.

关键词：组织蛋白酶B 血管平滑肌细胞小分子RNA干扰细胞凋亡

间隙性连接蛋白37基因1019C／T多态性与经皮冠状动脉介入术后支架内再狭窄的相关性研究

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中华医学遗传学杂志 2013年第4期30卷 456-460页

作者：杨颖郭素峡羊镇宇张涛曹华明王如兴南京医科大学附属无锡市人民医院心内科 214023

目的评估无锡地区人群间隙性连接蛋白37（Connexin37，CX37）基因1019C／T多态性与经皮冠状动脉介人术（percutaneous coronary intervention, PCI）术后支架内再狭窄的相关性。方法532例PCI术后在我院复查冠脉造影的冠心病患者，按造... 详细信息

目的评估无锡地区人群间隙性连接蛋白37（Connexin37，CX37）基因1019C／T多态性与经皮冠状动脉介人术（percutaneous coronary intervention, PCI）术后支架内再狭窄的相关性。方法532例PCI术后在我院复查冠脉造影的冠心病患者，按造影结果分为支架内再狭窄组（67例）和无支架内再狭窄组（465例），501名健康人群作为正常对照组，均采用基因测序技术对CX37基因1019C／T多态性位点基因型进行检测，比较3组人群中基因型及等位基因分布差异。结果（1）在冠心病组与正常对照组比较中，C等位基因及C等位基因携带者（CC＋TC）基因型频率冠心病组明显高于正常对照组（C等位基因：57．050Avs．41．32％，P〈0．01；C等位基因携带者：79．32％vs．65．47％，P〈0．01）；与TT纯合子相比，（CC＋TC）基因型冠心病患病风险显著增加（OR=2．03，95％CI：1．53-2．80）。对性别进行亚组分析显示，无论男性还是女性人群中冠心病组C等位基因携带者频率均显著高于正常对照组（男性：79．63％vs．72．45％，P=0．02；女性：78．00％vs．51．50％，P〈0．01），C等位基因携带者冠心病患病风险明显高于TT型（男性：OR=1．48，95％C1：1．06-2．09；女性：OR=3．34，95％CI：1．90-5．86）。（2）与无支架内再狭窄组相比，支架内再狭窄组C等位基因频率及C等位基因携带者分布频率均显著升高（C等位基因频率：72．39％vs．54．84％，P〈O．01；CC＋TC型：89．55％vs．77．85％，P=0．027）。与TT纯合子相比，C等位基因携带者支架内再狭窄患病风险升高2．44倍（95％C1：1．08-5．50）。性别亚组分析表明，男性人群中支架内再狭窄组C等位基因携带者频率高于无支架内再狭窄组（92．86％vs．77．660A，P=0．008），C等位基因携带者发生支架内再狭窄的风险是TT型的3．74倍（95％CI：1．32-10．64），而在女性人群中两组间（CC＋TC）基因型分布频率无统计学意义（P=0．655）。结论CX37C等位基因不仅与冠心病的发生发展有关联，而且与男性PCI术后支架内再狭窄的发生发展相关。

关键词：支架植入术支架内再狭窄间隙性连接蛋白37基因 1019C T多态性

双源CT在冠状动脉支架内再狭窄诊断中的价值

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中华心血管病杂志 2011年第1期39卷 49-52页

作者：羊镇宇王强郭素峡张煜方向明崔志明南京医科大学附属无锡市人民医院心内科 214023

目的参照定量冠状动脉造影结果,评价双源CT在冠状动脉支架内再狭窄诊断中的价值.方法对55例支架术后出现胸闷、胸痛的冠心病患者,在术后6～12个月行双源CT检查及定量冠状动脉造影.以定量冠状动脉造影结果为参照,评价双源CT诊断支架内... 详细信息

目的参照定量冠状动脉造影结果,评价双源CT在冠状动脉支架内再狭窄诊断中的价值.方法对55例支架术后出现胸闷、胸痛的冠心病患者,在术后6～12个月行双源CT检查及定量冠状动脉造影.以定量冠状动脉造影结果为参照,评价双源CT诊断支架内再狭窄的真阳性、真阴性、假阳性、假阴性,并计算敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值.分析心率、置人支架情况对双源CT诊断性能的影响.结果 55例患者共置入89枚支架,其中31.5%（28/89）的支架经冠状动脉造影证实发生支架内再狭窄.双源CT诊断支架内再狭窄的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为89%、87%、76%和95%.双源CT诊断心率＜70次/min及≥70次/min患者支架内再狭窄的敏感性（94%比82%）、特异性（88%比90%）、阳性预测值（76%比75%）、阴性预测值（97%比93%）差异无统计学意义（P＞0.05）.双源CT诊断重叠支架、分叉部位支架与单支架再狭窄的敏感性（84%比100%）、特异性（81%比96%）、阳性预测值（70%比90%）和阴性预测值（91%比100%）差异无统计学意义（P＞0.05）.双源CT诊断直径≥3.50 mm支架、直径3.00 mm支架和直径≤2.75mm支架发生再狭窄的特异性（分别为100%、80%和66%,P＜0.05）和阳性预测值（分别为100%、95%和53%,P＜0.05）差异有统计学意义.结论双源CT对大直径支架的再狭窄有较好的诊断性能,且不受心率和支架分布情况的影响.

关键词：体层摄影术,X线计算机冠状血管造影术支架

尼可地尔预防经皮冠状动脉介入治疗患者造影剂相关急性肾损伤的研究进展

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中国综合临床 2023年第2期39卷 140-144页

作者：徐文健廖敏琪姚永钊郭素峡广东医科大学湛江524023 广东省东莞市人民医院心血管内科 523058

随着影像学和经皮冠状动脉介入治疗的快速发展,造影剂的应用也越来越广泛,造影剂相关急性肾损伤也成为临床最常见的急性肾损伤病因之一。造影剂相关急性肾损伤严重威胁患者的健康以及会给患者带来更大的经济负担,因此预防造影剂相关急... 详细信息

随着影像学和经皮冠状动脉介入治疗的快速发展,造影剂的应用也越来越广泛,造影剂相关急性肾损伤也成为临床最常见的急性肾损伤病因之一。造影剂相关急性肾损伤严重威胁患者的健康以及会给患者带来更大的经济负担,因此预防造影剂相关急性肾损伤的发生尤为重要。尼可地尔是一种临床中常见的血管舒张药物,广泛应用于心绞痛的治疗,具有对抗氧化应激、抗细胞凋亡、抗炎症和扩张血管等作用,被认为能有效预防造影剂相关急性肾损伤。但目前关于尼可地尔预防造影剂相关急性肾损伤的疗效研究仍缺少更深入的研究。

关键词：造影剂相关急性肾损伤经皮冠状动脉介入治疗尼可地尔预防

间隙性连接蛋白37 C1019T基因多态性与冠心病相关性研究进展

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医学综述 2011年第21期17卷 3214-3216页

作者：杨颖郭素峡羊镇宇南京医科大学附属无锡市人民医院心内科江苏无锡214023

冠状动脉粥样硬化性心脏病是严重危害人类健康的常见疾病,是一种多因素、多基因疾病。遗传流行病学研究显示遗传因素在冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生、发展中有重要意义。近年来随着分子生物学技术的迅速发展,从基因方面阐明冠状动脉... 详细信息

冠状动脉粥样硬化性心脏病是严重危害人类健康的常见疾病,是一种多因素、多基因疾病。遗传流行病学研究显示遗传因素在冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生、发展中有重要意义。近年来随着分子生物学技术的迅速发展,从基因方面阐明冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生将为冠状动脉粥样硬化性心脏病的诊治开辟一个新领域。在此对其中的一种候选基因即间隙性连接蛋白37C1019T基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的相关性研究进行综述。

关键词：间隙性连接蛋白37C1019T 基因多态性冠状动脉粥样硬化性心脏病

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不同剂量阿托伐他汀对稳定性斑块的影响

中国综合临床 2013年第2期29卷 142-145页

作者：高长征郭素峡江苏省无锡市第四人民医院心内科 214000 南京医科大学附属无锡市人民医院心内科

目的探讨不同剂量阿托伐他汀对稳定性斑块的影响。方法入选经冠状动脉造影和血管内超声检查确定为稳定性斑块的174例患者，分为4组：阿托伐他汀10mg组47例，阿托伐他汀20mg组45例，阿托伐他汀40mg组43例，阿托伐他汀80mg组39例，随访3—... 详细信息

目的探讨不同剂量阿托伐他汀对稳定性斑块的影响。方法入选经冠状动脉造影和血管内超声检查确定为稳定性斑块的174例患者，分为4组：阿托伐他汀10mg组47例，阿托伐他汀20mg组45例，阿托伐他汀40mg组43例，阿托伐他汀80mg组39例，随访3—6个月，观察给予他汀药物的4组低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、超敏C反应蛋白（hs—CRP）、坏死核所占百分比及斑块体积的动态变化。结果各组患者LDL—C、HDL—C、hs—CRP、坏死核所占百分比及斑块体积的基线水平是相近的（P均〉0．05）。随访3～6个月后（1）阿托伐他汀治疗的4组LDL—C与基线相比均有明显下降（t值分别为3．12、4．23、3．26、5．21，P均〈0．01），且阿托伐他汀20mg组和40mg组治疗后两组间LDL—C不同（P〈0．05）；（2）阿托伐他汀10、20、40mg组治疗后HDL—C与基线比较差异均无统计学意义，但阿托伐他汀80mg组HDL—C明显高于其余3组（P均〈0．05），同时高于基线（t=2．35，P〈0．01）；（3）阿托伐他汀80mg治疗后hs—CRP较基线显著下降[分别为（3．59±1．07）mg／L与（6．10±2．12）mg／L，t=2．37，P〈0．01]；（4）通过血管内超声虚拟组织成像技术（IVUS—VH）检测，斑块坏死核所占百分比在阿托伐他汀10mg组明显高于基线[16．54±1．76）％与（7．83±1．03）％，t=2．38，P〈0．01]，提示斑块向不稳定进展（坏死核所占百分比〉10％定义为不稳定性斑块），在阿托伐他汀20、40、80mg组与基线相比无进展（t值分别为1．24、0．21、0．69，P值分别为0．069、0．846、0．643）；（5）斑块体积在阿托伐他汀10、20mg组与基线相比无增大，但是在阿托伐他汀40、80mg组斑块体积明显缩小[（30．69±8．12）mm。与（37．09±12．01）mm^3，t=1．29，P=0．019；（24．99±1．01）mm。与（36．474-14．68）mm^3，t=2．62，P〈0．01]。结论不同剂量阿托伐他汀对稳定性斑块疗效不同。（1）对于LDL—C，20mg／d阿托伐他汀就能使LDL—c降低达标，但40mg／d阿托伐他汀降低幅度明显优于20mg／d，与80mg／d相似。（2）对于HDL—C，只有80mg／d阿托伐他汀能使之升高。（3）给予80mg／d阿托伐他汀能使hs—CRP下降。（4）≥20mg／d阿托伐他汀有稳定斑块的作用，80mg／d优于40mg／d及20mg／d，而且40～80mg／d阿托伐他汀有逆转斑块的作用。

关键词：稳定性斑块阿托伐他汀血脂超敏C反应蛋白斑块体积血管内超声虚拟组织学