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戊型肝炎病毒衣壳蛋白结合CYP 2A6并降低其底物催化能力

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病毒学报 2009年第1期25卷 1-8页

作者：唐明郑子峥孙媛媛何水珍赵敏黄慧苗季张军夏宁邵厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建厦门361005

肝炎病毒的感染常常导致人体肝脏代谢能力变化,研究表明甲型肝炎病毒(Hepatitis A Virus,HAV)、乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)和丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)的感染都会影响肝细胞对药物的代谢能力。在本研究中,通过酵... 详细信息

肝炎病毒的感染常常导致人体肝脏代谢能力变化,研究表明甲型肝炎病毒(Hepatitis A Virus,HAV)、乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)和丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)的感染都会影响肝细胞对药物的代谢能力。在本研究中,通过酵母双杂交系统在人肝cDNA文库中筛选与戊型肝炎病毒重组衣壳蛋白E2结合的蛋白,发现了与细胞色素P450 2A6(CYP2A6)部分片段高度同源的蛋白序列。通过pull-down、免疫共沉淀以及特异性底物催化反应评价等方法进一步证实了CYP2A6与重组衣壳蛋白E2、p239间的相互作用,并发现与p239结合可以降低CYP2A6对其特异性底物香豆素的催化能力。上述结果提示CYP2A6可能在戊肝病毒入侵细胞后的细胞病变过程中起作用。

关键词：戊型肝炎病毒细胞色素P450 2A6 蛋白相互作用

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呼吸道黏膜免疫和呼吸道黏膜疫苗研究进展

中国疫苗和免疫 2022年第1期28卷 121-127页

作者：尹一凡林敏强宏生郑子峥厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室/国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心/厦门大学公共卫生学院福建厦门361102

呼吸道黏膜免疫系统是机体抵御空气传播病原体的第一道防线。本文总结了黏膜免疫相关的呼吸道黏膜上皮细胞组成和局部黏膜免疫应答过程,探讨了黏膜免疫的优势和呼吸道黏膜疫苗研发面临的挑战。

关键词：呼吸道黏膜黏膜免疫呼吸道黏膜疫苗

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抗原检测在戊型肝炎临床诊断中的应用

病毒学报 2021年第1期37卷 234-242页

作者：陈子豪唐自闽郑子峥夏宁邵厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门361102 厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361102 厦门大学公共卫生学院厦门361102 厦门大学生命科学学院厦门361102

戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的病毒性肝炎,已经成为全球范围内的公共卫生问题,在临床人群中进行HE的诊断对于疾病传播的预防与控制具有重要的公共卫生意义,对于疾病的治疗具有重要的指导意义... 详细信息

戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的病毒性肝炎,已经成为全球范围内的公共卫生问题,在临床人群中进行HE的诊断对于疾病传播的预防与控制具有重要的公共卫生意义,对于疾病的治疗具有重要的指导意义。本文对HEV抗原新指标的建立和发展进行综述,同时将其与现有指标进行比较,对其应用前景和优化方向提出展望。

关键词：戊型肝炎(HE) 戊肝诊断抗原

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戊型肝炎病毒高通量中和效价评价模型的建立

病毒学报 2015年第1期31卷 1-6页

作者：杨帆唐自闽王思令蔡薇温桂平纪文芳余静菲张可夏宁邵郑子峥厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室、国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心、公共卫生学院厦门361102 厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室、国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心、生命科学院厦门361102

广泛有效的体外感染模型的缺乏限制了抗戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗体及血清定量化中和效价的评估,从而阻碍了对HEV相关抗体应答及免疫机制的深入研究。本研究首先通过在HEV低效复制细胞系HepG2肝癌细胞株上进行了HEV感染细... 详细信息

广泛有效的体外感染模型的缺乏限制了抗戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗体及血清定量化中和效价的评估,从而阻碍了对HEV相关抗体应答及免疫机制的深入研究。本研究首先通过在HEV低效复制细胞系HepG2肝癌细胞株上进行了HEV感染细胞后的连续监测,直到第13d到达病毒载量的检测下限,验证了该细胞系建立感染模型的可行性,进一步采用96孔多通道平行感染、核酸提取及实时荧光定量PCR对五株抗HEV的鼠源单克隆抗体及四位戊肝疫苗接种者的接种前、后血清样本进行了细胞中和试验。结果显示应用该模型能够实现对不同中和能力的单抗及接种疫苗前后的血清进行中和效价的定量化评估。表明本研究已成功建立了HEV体外高通量中和评价模型,同时也显示出该模型在HEV疫苗及抗体应答表位研究中所具有的潜在价值。

关键词：阿霉素肾纤维化三七注射液转化生长因子-β1 P38MAPK

呼吸道合胞病毒在不同龄期BALB/c小鼠上的感染差异

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病毒学报 2016年第4期32卷 411-416页

作者：詹炉停赵敏依含张伟曹健力孙永鹏张璐婧司竣宇夏宁邵郑子峥厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361102 厦门大学公共卫生学院厦门361102 厦门大学生命科学学院厦门361102

呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是全世界范围内引起下呼吸道感染的主要病原体,主要高危人群为六个月以下新生儿及65岁以上人群。目前BALB/c小鼠是RSV感染的有效动物模型,但不同周龄BALB/c小鼠感染RSV后的差异性尚未... 详细信息

呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是全世界范围内引起下呼吸道感染的主要病原体,主要高危人群为六个月以下新生儿及65岁以上人群。目前BALB/c小鼠是RSV感染的有效动物模型,但不同周龄BALB/c小鼠感染RSV后的差异性尚未有报道。本研究分别选择10、30、60周龄BALB/c小鼠,在鼻腔接种106及107PFU RSV后,对不同龄期小鼠临床一般症状、体重、鼻/肺部病毒滴度及肺组织炎症病理变化进行检测及比较。结果显示感染106PFU RSV后小鼠未出现明显的体重下降,而107PFU RSV感染后能有效引发小鼠在感染后6-11天出现明显的体重下降。检测结果显示,在107PFU感染的小鼠的鼻、肺组织能够检测到明显的病毒复制,肺部免疫组化显示病毒主要定位于肺泡周围,炎症观察结果显示出明显的肺部炎症细胞浸润及组织病理损伤。同时本研究还观察到随着小鼠周龄的增大,感染后体重下降越明显,并能检测到更为明显的肺部病毒及验证损伤。这些结果显示出本研究成功建立了不同周龄BALB/c小鼠RSV感染差异模型,为不同年龄人群RSV感染免疫机制的深入探讨及RSV相关抗体和疫苗药物的选择、评估提供依据。

关键词：呼吸道合胞病毒(RSV) 动物模型 BALB/c小鼠周龄支气管炎

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呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体的制备

中国免疫学杂志 2018年第9期34卷 1354-1359页

作者：向江艳詹炉停赵敏张伟郑子峥夏宁邵厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361102

目的:制备人呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体,并对其进行性质鉴定。方法:选取RSV-A2 L蛋白上具有亲水性可能的loop区段,将这些目的片段展示在HBc149上进行原核表达并纯化。重组蛋白免疫6~8周BALB/c雌性小鼠,根据免疫后血清的ELISA和WB分... 详细信息

目的:制备人呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体,并对其进行性质鉴定。方法:选取RSV-A2 L蛋白上具有亲水性可能的loop区段,将这些目的片段展示在HBc149上进行原核表达并纯化。重组蛋白免疫6~8周BALB/c雌性小鼠,根据免疫后血清的ELISA和WB分析结果选择L3935和L4099组小鼠进行脾脏免疫。融合后,用间接ELISA法筛选和多次克隆化,获得稳定分泌抗L蛋白单克隆抗体细胞株,并结合ELISA、免疫荧光和免疫印迹对所获得的单抗进行鉴定。结果:获得11株L蛋白特异性单克隆抗体,亚类鉴定结果 IgG1、IgG2a和IgG3单抗各3株,IgG2b单抗2株。结论:成功制备了L蛋白特异性单克隆抗体,也为RSV感染的免疫和发病机制研究奠定基础。

关键词：呼吸道合胞病毒 L蛋白单克隆抗体肽段展示

人肝细胞内戊型肝炎病毒结合蛋白的酵母双杂交筛选

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病毒学报 2006年第4期22卷 262-266页

作者：何水珍林亦伟郑子峥吴小成张军夏宁邵厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心

为进一步深入研究戊型肝炎病毒(HEV)感染机制以及致病机理,用酵母双杂交系统从人肝细胞cDNA文库中筛选与戊型肝炎病毒衣壳蛋白E2相互作用的蛋白,核酸序列分析及同源性检索表明,4个克隆与E2相互作用,其中一个克隆与P38IP高度同源,细胞免... 详细信息

为进一步深入研究戊型肝炎病毒(HEV)感染机制以及致病机理,用酵母双杂交系统从人肝细胞cDNA文库中筛选与戊型肝炎病毒衣壳蛋白E2相互作用的蛋白,核酸序列分析及同源性检索表明,4个克隆与E2相互作用,其中一个克隆与P38IP高度同源,细胞免疫共沉淀实验结果显示:在哺乳动物细胞水平仍能够检测到E2与P38IP片段的特异的相互作用。

关键词：戊型肝炎病毒(HEV) 结合蛋白酵母双杂交

HepG2细胞中与戊型肝炎病毒衣壳蛋白相互作用蛋白的初步研究

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病毒学报 2006年第5期22卷 329-333页

作者：吴小成何水珍郑子峥孙媛媛张军夏宁邵厦门大学福建省医学分子病毒学研究中心厦门361005

利用重组戊型肝炎病毒（HEV）衣壳蛋白片段p239（368～606aa）形成的类病毒颗粒作为亲和层析诱饵蛋白，HepG2为细胞模型，筛选与p239类病毒颗粒特异性相互作用蛋白：经过二维电泳分离，MALDI-TOF-MS分析鉴定得到GRP78／Bip，HSP90，alph... 详细信息

利用重组戊型肝炎病毒（HEV）衣壳蛋白片段p239（368～606aa）形成的类病毒颗粒作为亲和层析诱饵蛋白，HepG2为细胞模型，筛选与p239类病毒颗粒特异性相互作用蛋白：经过二维电泳分离，MALDI-TOF-MS分析鉴定得到GRP78／Bip，HSP90，alpha-tubulin及P43四个与p239有相互作用的候选蛋白。GRP78／Bip为热休克蛋白家族成员，体外免疫共沉淀实验结果证实，其与p239有特异性的结合：此研究结果为深入研究HEV的感染过程如吸附、入胞，以及HEV的致病机理提供了有益线索。

关键词：戊型肝炎病毒(HEV) 类病毒颗粒(VLP) GRP78/Bip 相互作用

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戊型肝炎病毒新潜在中和性表位的发现

中华微生物学和免疫学杂志 2010年第4期30卷 360-364页

作者：郑子峥唐明苗季赵敏黄慧李婧娴俞海李少伟张军夏宁邵厦门大学国家传染病诊断试剂与工程疫苗技术研究中心 361005

目的探讨戊型肝炎病毒（HEV）衣壳蛋白是否存在除主要免疫优势中和表位aa459～606以外的其他中和表位。方法通过对几株单克隆抗体及其表位的性质进行分析，对比位于主要免疫优势表位区aa459—606和位于该表位N端序列aa394～458区域的数... 详细信息

目的探讨戊型肝炎病毒（HEV）衣壳蛋白是否存在除主要免疫优势中和表位aa459～606以外的其他中和表位。方法通过对几株单克隆抗体及其表位的性质进行分析，对比位于主要免疫优势表位区aa459—606和位于该表位N端序列aa394～458区域的数个表位的中和活性。结果发现位于aa423～437的表位对应的单抗具有潜在中和活性，不同于已知的HEV中和性表位（aa459～606），该表位是一个线性非免疫优势表位。结论HEV ORF2 aa423～437为新的潜在的线性非免疫优势中和表位，该发现丰富了对HEV衣壳结构的认识，为HEV预防与治疗提供了新的针对靶点。

关键词：中和性表位免疫非优势表位戊型肝炎病毒衣壳