呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体的制备

作     者：向江艳 詹炉停 赵敏 张伟 郑子峥 夏宁邵 XIANG Jiang-Yan;ZHAN Lu-Ting;ZHAO Min;ZHANG Wei;ZHENG Zi-Zheng;XIA Ning-Shao

作者机构：厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361102 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2018年第34卷第9期

页      面：1354-1359页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：本文为国家自然科学基金(No.81401668)项目 

主　　题：呼吸道合胞病毒 L蛋白 单克隆抗体 肽段展示 

摘      要：目的:制备人呼吸道合胞病毒L蛋白单克隆抗体,并对其进行性质鉴定。方法:选取RSV-A2 L蛋白上具有亲水性可能的loop区段,将这些目的片段展示在HBc149上进行原核表达并纯化。重组蛋白免疫6~8周BALB/c雌性小鼠,根据免疫后血清的ELISA和WB分析结果选择L3935和L4099组小鼠进行脾脏免疫。融合后,用间接ELISA法筛选和多次克隆化,获得稳定分泌抗L蛋白单克隆抗体细胞株,并结合ELISA、免疫荧光和免疫印迹对所获得的单抗进行鉴定。结果:获得11株L蛋白特异性单克隆抗体,亚类鉴定结果 IgG1、IgG2a和IgG3单抗各3株,IgG2b单抗2株。结论:成功制备了L蛋白特异性单克隆抗体,也为RSV感染的免疫和发病机制研究奠定基础。