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SARS-CoV-2广谱中和抗体性质鉴定

中国免疫学杂志 2024年第4期40卷 693-697页

作者：陈秀婷汪毅祯商慧娴王思令郑子峥厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学公共卫生学院厦门361102

目的:对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)广谱中和抗体XMA09进行性质鉴定,探究其广谱中和突变株的潜在机制,为SARS-CoV-2的疫苗设计与广谱中和抗体筛选提供参考。方法:通过ExpiCHO真核表达系统与Protein A层析柱表达纯化XMA09蛋... 详细信息

目的:对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)广谱中和抗体XMA09进行性质鉴定,探究其广谱中和突变株的潜在机制,为SARS-CoV-2的疫苗设计与广谱中和抗体筛选提供参考。方法:通过ExpiCHO真核表达系统与Protein A层析柱表达纯化XMA09蛋白;冷冻电镜技术确定XMA09识别的受体结构域(RBD)上的关键氨基酸位点;间接ELISA与表面等离子共振(SPR)技术检测XMA09对SARS-CoV-2及其突变株Spike蛋白的亲和力;采用基于水疱性口炎病毒(VSV)的假病毒系统检测XMA09对SARS-CoV-2野生型及突变株的中和能力。结果:本研究发现XMA09识别的表位较为保守,对多种突变株Spike蛋白均具有强结合能力,能广谱中和关切突变株(VOCs),包括广泛流行的Omicron亚突变株BA.4/5。结论:XMA09是SARS-CoV-2广谱中和抗体,具有作为SARS-CoV-2治疗性抗体的潜力,并可为SARS-CoV-2的广谱疫苗设计与抗体药物开发提供参考意义。

关键词： SARS-CoV-2 受体结合结构域(RBD) 广谱中和抗体

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自组装颗粒化新冠疫苗研究进展

病毒学报 2024年第2期40卷 424-431页

作者：汪晨尹一凡林敏赵小蒙郑子峥夏宁邵张军厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室厦门大学公共卫生学院厦门361102

自组装纳米颗粒作为抗原展示平台可以有效增强抗原的免疫效果和稳定性,是有前景的疫苗技术。新冠疫情加速了颗粒化新冠疫苗的发展,目前已有一些应用纳米颗粒的新冠疫苗处于不同的临床试验阶段。本文介绍了几种自组装颗粒化抗原展示平台... 详细信息

自组装纳米颗粒作为抗原展示平台可以有效增强抗原的免疫效果和稳定性,是有前景的疫苗技术。新冠疫情加速了颗粒化新冠疫苗的发展,目前已有一些应用纳米颗粒的新冠疫苗处于不同的临床试验阶段。本文介绍了几种自组装颗粒化抗原展示平台在新冠疫苗中的应用,并对其免疫机制和研究进展进行了综述。

关键词：新冠病毒颗粒化抗原展示平台自组装疫苗免疫

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新冠RNA疫苗研究进展

病毒学报 2024年第1期40卷 151-159页

作者：赵小蒙尹一凡林敏汪晨郑子峥夏宁邵张军厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室厦门大学公共卫生学院厦门361102

新冠疫情使得RNA疫苗得到了迅速的发展。本文依据RNA分子形式的不同将RNA疫苗分为三种类型:非复制型传统mRNA疫苗、环状RNA疫苗和自复制型RNA疫苗,并对其技术特点及在新冠病毒领域的研究进展进行综述。

关键词：新冠病毒 mRNA疫苗环状RNA疫苗自复制型RNA疫苗

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RSV疫苗取得突破进展

中国科学基金 2023年第2期 264-265页

作者：夏宁邵郑子峥厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学传染病疫苗研发全国重点实验室厦门大学公共卫生学院实验医学系

呼吸道合胞病毒（RSV）通常只会引起轻微的类似感冒的症状，但在婴儿中，这种病毒会引发肺部的小气道炎症，在老年人中，它会恶化现有的肺部和心脏疾病。50多年前，一种预防RSV的实验性候选疫苗在临床试验中导致两名儿童死亡，导致了80...

呼吸道合胞病毒（RSV）通常只会引起轻微的类似感冒的症状，但在婴儿中，这种病毒会引发肺部的小气道炎症，在老年人中，它会恶化现有的肺部和心脏疾病。50多年前，一种预防RSV的实验性候选疫苗在临床试验中导致两名儿童死亡，导致了80%的接种者住院，此后，RSV疫苗的研发中断了数十年。之后发现了其中的关键原因：由整个RSV病毒的化学灭活版本制成的疫苗只能引发相对较弱的抗体，不仅不能阻止病毒感染，还会帮助RSV破坏呼吸道。美国国家过敏和传染病研究所的Barney Graham等人在2013年取得的一项关键进展，使得新的RSV疫苗能够避免上述问题。

关键词：

呼吸道合胞病毒融合蛋白(F蛋白)结构及中和表位的研究进展

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中国免疫学杂志 2017年第10期33卷 1569-1574页

作者：曹健力张伟夏宁邵郑子峥厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室厦门361102

呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus,RSV）,是造成全世界范围内婴幼儿下呼吸道感染的主要原因之一,2岁前的幼儿几乎全部感染过RSV[1],造成肺炎及毛细支气管炎等呼吸道疾病[2]。0~2个月的婴儿在感染RSV后易出现严重的病症[3]... 详细信息

呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytial virus,RSV）,是造成全世界范围内婴幼儿下呼吸道感染的主要原因之一,2岁前的幼儿几乎全部感染过RSV[1],造成肺炎及毛细支气管炎等呼吸道疾病[2]。0~2个月的婴儿在感染RSV后易出现严重的病症[3]。而在最新的全球疾病死亡率分析中,1月到1周岁的儿童死亡中约有6.7%是由RSV感染造成的[4]。青壮年人群感染后病症较轻,但在老年人群中会出现严重病症及死亡病例[5]。

关键词：呼吸道合胞病毒病毒融合蛋白中和表位 F蛋白下呼吸道感染呼吸道疾病 RSV感染结构

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呼吸道合胞病毒核蛋白检测抗体的筛选与鉴定

中华微生物学和免疫学杂志 2018年第3期38卷 161-168页

作者：林雪张伟赵敏郑子峥夏宁邵厦门大学、分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室、国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 361102 厦门大学公共卫生学院 361102 厦门大学生命科学学院 361102

目的筛选识别呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）核蛋白（N）的单克隆抗体，并对其性质进行鉴定。方法使用大肠杆菌表达系统原核表达重组N蛋白，蛋白质纯化后免疫BALB/c小鼠。通过脾脏免疫、融合获得杂交瘤细胞，结合... 详细信息

目的筛选识别呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）核蛋白（N）的单克隆抗体，并对其性质进行鉴定。方法使用大肠杆菌表达系统原核表达重组N蛋白，蛋白质纯化后免疫BALB/c小鼠。通过脾脏免疫、融合获得杂交瘤细胞，结合有限稀释法亚克隆细胞株，间接酶联免疫吸附试验（ELISA）对单克隆抗体株进行筛选，并通过蛋白质免疫印迹法（Western blot）、ELISA和间接免疫荧光技术对最终筛选的单克隆抗体进行性质鉴定，根据正交试验的结果挑选捕获能力和检测效果较好的抗体进行诊断试剂的初步调试。结果成功构建N-pTO-T7原核表达载体，并成功表达、纯化得到高纯度重组N蛋白用于小鼠免疫，最终筛选获得24株N蛋白的单克隆抗体，24株抗体均具有较好的ELISA反应性，5A2等8株抗体有较好的Western blot检测特性，11H8等13株抗体可用于间接免疫荧光检测，并获得能够实现在病毒上检测N蛋白的优选配对12F2/11H8-HRP和12F2/15A8-HRP。结论本研究成功筛选出可用于N蛋白特异性检测的单克隆抗体及抗体配对，为RSV感染机制的研究及诊断试剂的研发提供实验资料。

关键词：呼吸道合胞病毒 N蛋白单克隆抗体

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预防性戊型肝炎疫苗

中华肝脏病杂志 2023年第5期31卷 477-482页

作者：刘畅郑子峥夏宁邵厦门大学公共卫生学院、国家传染病诊断和疫苗研发中心、分子疫苗学与分子诊断国家重点实验室厦门361102

近年来,戊型肝炎逐渐被认为是被低估的全球疾病负担。感染导致相关损伤或死亡较严重的人群包括孕妇、有基础肝病的患者和老年人。疫苗是预防戊型肝炎病毒(HEV)感染的最有效手段。由于缺乏高效的HEV细胞培养系统使得开发灭活或减毒疫苗... 详细信息

近年来,戊型肝炎逐渐被认为是被低估的全球疾病负担。感染导致相关损伤或死亡较严重的人群包括孕妇、有基础肝病的患者和老年人。疫苗是预防戊型肝炎病毒(HEV)感染的最有效手段。由于缺乏高效的HEV细胞培养系统使得开发灭活或减毒疫苗不可行,因此研究者们对重组疫苗进行深入研究。HEV中和位点几乎完全位于病毒粒子的开放式阅读框2所编码的衣壳蛋白(pORF2)中。基于pORF2的许多候选疫苗显示出保护灵长类动物的潜力,其中两种在成人中耐受性良好,对预防戊型肝炎高度有效。全球首个戊型肝炎疫苗239(HEV Hecolin^(■)疫苗)于2012年在中国获批上市。

关键词：戊型肝炎疫苗治疗预防

人呼吸道合胞病毒疾病增强发生机制的研究进展

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病毒学报 2018年第3期34卷 406-414页

作者：张璐婧郑子峥夏宁邵厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院

人呼吸道合胞病毒（Human respiratory syncytial virus,hRSV）是一种可以引起严重下呼吸道疾病的病原体,易感人群为婴幼儿、老年人及免疫力低下者。目前尚无针对RSV的疫苗和特异性抗病毒药物。20世纪60年代,用RSV的福尔马林全病毒灭活... 详细信息

人呼吸道合胞病毒（Human respiratory syncytial virus,hRSV）是一种可以引起严重下呼吸道疾病的病原体,易感人群为婴幼儿、老年人及免疫力低下者。目前尚无针对RSV的疫苗和特异性抗病毒药物。20世纪60年代,用RSV的福尔马林全病毒灭活疫苗（FI-RSV）免疫的婴幼儿发生了免疫后RSV疾病增强的症状,其特征为免疫后当再次发生天然感染时会引起高热、支气管肺炎和哮喘,从而引发了更高的住院率,并最终导致两名FI-RSV免疫接种后感染RSV的幼童死亡。增强的RSV疾病（Enhanced RSV disease,ERD）主要表现为支气管周围以嗜酸性粒细胞为主的过量的单核细胞浸润以及非保护性抗体应答和细胞毒性T淋巴细胞功能异常等免疫反应。近年来,RSV研究领域正发生着重大变化,许多具有新颖设计的候选疫苗正在纷纷进入临床试验,因此我们要更加重视对ERD发生机制和临床特征的理解和分析。本文提供了对ERD发生机制的概括性描述,并对ERD作为新型候选疫苗的重要评价指标进行了讨论。

关键词：呼吸道合胞病毒(RSV) 增强的RSV疾病(ERD) 免疫应答

戊型肝炎病毒ORF1多聚蛋白的不同功能域在细胞内的定位

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病毒学报 2011年第3期27卷 195-201页

作者：黄慧郑子峥赵敏李婧娴赖旺生苗季张军夏宁邵厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院厦门361005

为了探讨戊型肝炎病毒多聚蛋白ORF1的多个功能域在宿主细胞中的表达和定位情况,我们首先将psk-HEV重组载体上的ORF1各功能域的编码序列克隆到绿色荧光蛋白载体pcDNA3.1-GFP上,构建成融合表达的重组质粒,并测序和酶切鉴定其构建成功。再... 详细信息

为了探讨戊型肝炎病毒多聚蛋白ORF1的多个功能域在宿主细胞中的表达和定位情况,我们首先将psk-HEV重组载体上的ORF1各功能域的编码序列克隆到绿色荧光蛋白载体pcDNA3.1-GFP上,构建成融合表达的重组质粒,并测序和酶切鉴定其构建成功。再通过Western-Blot验证各融合蛋白在细胞中正确表达,并用激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白在细胞内的分布和定位。在Huh7细胞中,RdRp蛋白主要分布于细胞核内,HEL蛋白以囊泡状分布于细胞核周,MET蛋白以颗粒状存在于细胞核和细胞质中,PLP蛋白呈极性分布于细胞核周,X蛋白在细胞核和细胞质中均存在。各融合蛋白在细胞中的不同定位印证了对这些蛋白质的功能预测和体外研究结果,这为进一步研究HEV不同蛋白功能提供了支持。

关键词： HEV ORF1蛋白 ORF3蛋白定位