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松果菊苷对雨蛙素诱导的急性胰腺炎大鼠模型胰腺及肝损伤的影响与机制

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临床肝胆病杂志 2024年第4期40卷 782-790页

作者：马明和达哇卓玛刘川川樊海宁青海大学临床医学院西宁810001 青海大学附属医院肝胆胰外科西宁810001 青海省包虫病研究重点实验室西宁810001

目的通过建立急性胰腺炎(AP)大鼠模型,研究松果菊苷(ECH)对雨蛙素诱导的AP大鼠模型胰腺及肝损伤的改善作用及机制。方法24只SD大鼠随机分为空白组(Con组)、对照组(Con+ECH组)、AP组和AP+ECH组4组,每组各6只。AP模型构建前7 d给予10 mg/k... 详细信息

目的通过建立急性胰腺炎(AP)大鼠模型,研究松果菊苷(ECH)对雨蛙素诱导的AP大鼠模型胰腺及肝损伤的改善作用及机制。方法24只SD大鼠随机分为空白组(Con组)、对照组(Con+ECH组)、AP组和AP+ECH组4组,每组各6只。AP模型构建前7 d给予10 mg/kg ECH腹腔注射,雨蛙素末次给药24 h后,腹主动脉取血,分离血清行ALT、AST、乳酸脱氢酶(LDH)、GGT、ALP、Alb、TBil、胆碱酯酶(ChE)、血淀粉酶(Amy)、脂肪酶(LPS)等生化检测;HE染色检测胰腺和肝组织病理学改变;透射电镜观察胰腺和肝组织微观结构改变;ELISA检测肝组织匀浆中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10水平;免疫组化分析胰腺和肝组织中TNF-α和p-p65 NF-κB水平;Western Blot检测肝组织中NF-κB通路蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q或Dunnett’s T3检验。结果与Con组相比,AP组大鼠ALT、AST、GGT、LDH、ALP、TBil、AMY、LPS指标均明显增高(P值均<0.01);肝组织匀浆液IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α水平均增加(P值均<0.01)。ECH干预降低AP大鼠ALT、AST、GGT、LDH、ALP、TBil、AMY、LPS水平,并能抑制IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌。HE染色观察可见ECH干预后胰腺组织中腺泡细胞空泡变性和炎性细胞浸润较AP组减轻,肝细胞坏死较AP组减轻。透射电镜检查镜下见ECH干预后肝和胰腺细胞内线粒体肿胀程度较AP组减轻。ECH干预后能部分逆转AP大鼠胰腺和肝组织中p-p65 NF-κB、TNF-α的表达增加。此外,AP大鼠肝组织中MyD88、p-IκBα、p-IKKα、p-p65表达上调,而ECH干预后能部分逆转。结论松果菊苷可通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB途径来改善AP诱发的胰腺和肝损伤。

关键词：松果菊苷胰腺炎大鼠,Sprague-Dawley NF-κB

多房棘球蚴囊泡来源EVs及其emu-miR-10-5p促进小鼠肝星状细胞活化

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中国人兽共患病学报 2024年第5期40卷 454-463,482页

作者：王宇琦达哇卓玛刘川川樊海宁青海大学临床医学院西宁810001 青海大学附属医院西宁810001 青海省包虫病研究重点实验室西宁810001

目的明确多房棘球绦虫囊泡来源胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)及其emu-miR-10-5p在体外调节HSCs活化中的作用。方法小鼠腹腔注射原头节构建继发性多泡型包虫病模型,以小鼠体内病灶为材料培养多房棘球绦虫囊泡并进行PCR鉴定。透... 详细信息

目的明确多房棘球绦虫囊泡来源胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)及其emu-miR-10-5p在体外调节HSCs活化中的作用。方法小鼠腹腔注射原头节构建继发性多泡型包虫病模型,以小鼠体内病灶为材料培养多房棘球绦虫囊泡并进行PCR鉴定。透射电镜观察培养囊泡组织中胞外囊泡结构。差速-超速离心法分离囊泡培养上清中EVs,透射电镜、纳米粒径以及Western blot对分离EVs进行鉴定。CCK-8检测不同浓度EVs作用后HSCs活力。EVs作用于HSCs后RT-qPCR和Western blot检测α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平。生物信息学分析确定emu-miR-10-5p为特异性miRNA。过表达emu-miR-10-5p后EdU检测HSCs增殖,RT-qPCR个Western blot检测细胞中α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平。干扰囊泡组织中emu-miR-10-5p后提取培养上清液中EVs作用于HSCs后,检测HSCs细胞中α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达水平。结果成功通过小鼠体内病灶材料培养出多房棘球蚴囊泡,经PCR扩增特异性基因证实为多房棘球绦虫来源。TEM观察培养囊泡表面有较多的囊状结构。通过差速-超速离心分离出多房棘球蚴囊泡来源EVs,并经TEM证实为球形、膜状结构。囊泡来源EVs能被HSCs内化,并促进HSCs增殖和活化。通过综合分析多房棘球绦虫感染小鼠血清、棘球蚴组织、棘球蚴囊泡来源EVs、生发层细胞、原头节miRNA测序结果,发现emu-miR-10-5p在上述成分中均存在表达,并通过RT-qPCR证实emu-miR-10-5p在多房棘球蚴囊泡来源EVs中存在的量较高。进一步研究证实过表达emu-miR-10-5p能促进HSCs增殖,增加HSCs中α-SMA、Collagen I和CollagenⅢmRNA及蛋白表达水平。而干扰囊泡中emu-miR-10-5p后从培养上清液中提取的EVs未增加α-SMA、Collagen I和CollagenⅢmRNA及蛋白表达水平。结论多房棘球蚴囊泡来源EVs及emu-miR-10-5p能够促进HSCs活化。

关键词：多房棘球蚴病胞外囊泡肝星状细胞 emu-miR-10-5p

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微小核糖核酸对包虫病患者免疫细胞功能的调控作用研究进展

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山东医药 2024年第11期64卷 100-103页

作者：王宇琦达哇卓玛樊海宁刘川川青海大学附属医院肝胆胰外科西宁810001 青海省包虫病重点实验室青海大学高原医学研究中心

包虫病是一种对宿主造成严重损害的潜在致命性人畜共患疾病。微小核糖核酸(miRNAs)是一类小型非编码RNA分子,可在转录后以序列特异性方式通过抑制或促进mRNA降解以调节基因表达,从而发挥调控生物学过程的作用。宿主感染棘球蚴绦虫后可... 详细信息

包虫病是一种对宿主造成严重损害的潜在致命性人畜共患疾病。微小核糖核酸(miRNAs)是一类小型非编码RNA分子,可在转录后以序列特异性方式通过抑制或促进mRNA降解以调节基因表达,从而发挥调控生物学过程的作用。宿主感染棘球蚴绦虫后可以引起多种miRNAs表达改变,并参与宿主的免疫调节过程。在包虫病患者的感染过程中,miR-71、miR-4989-3p、miR-222-3p、miR-155-5p、miR-146a-5p可影响单核巨噬细胞功能,miR-277a-3p能够影响树突状细胞功能,miR-374b-5p、miR-126a-5p可影响T淋巴细胞功能,miR-181a-5p能够影响自然杀伤细胞功能,上述miRNAs通过影响患者的免疫细胞及其功能而参与免疫调节。但目前还有很多miRNAs的功能和机制尚未得到证实,需要我们使用更先进的方法来确定有效的miRNAs及其功能,以便为包虫病的早期诊断和治疗提供新靶点及理论依据。

关键词：微小核糖核酸棘球绦虫包虫病单核巨噬细胞树突状细胞 T淋巴细胞自然杀伤细胞免疫调节

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土荆皮乙酸的抗多房棘球蚴作用及其机制研究

中国普外基础与临床杂志 2024年第6期31卷 695-705页

作者：陈青达哇卓玛刘川川樊海宁青海大学临床医学院西宁810001 青海大学附属医院肝胆胰外科西宁810001 青海省包虫病研究重点实验室西宁810001

目的探讨土荆皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)体外对原头节细胞凋亡的影响,以及体内对病灶-宿主微环境组织中血管生成和细胞凋亡的调节作用及其可能机制,为临床开发多房棘球蚴病新型替代药物提供依据。方法体外实验:原头节、囊泡、生发... 详细信息

目的探讨土荆皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)体外对原头节细胞凋亡的影响,以及体内对病灶-宿主微环境组织中血管生成和细胞凋亡的调节作用及其可能机制,为临床开发多房棘球蚴病新型替代药物提供依据。方法体外实验:原头节、囊泡、生发层细胞、人包皮成纤维细胞(human foreskin fibroblasts,HFFs)和正常人肝细胞经不同浓度(0、2.5、5、10、20、40、80、160和320μmol/L)的PAB分别处理7、5、5、5、5 d后,评价原头节存活率、囊泡磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI)释放水平、生发层细胞活力及HFFs和正常人肝细胞活力;原头节和囊泡经2.5%戊二醛固定后用于扫描电镜和透射电镜观察。动物实验:从保种沙鼠腹腔病灶中分离原头节,然后腹腔注射感染18只C57BL/6J小鼠建立模型,随机分为3组,每组6只:模型组(Model组)每日给予0.3 mL PBS缓冲液灌胃;阿苯达唑(albendazole,ABZ)组每日给予0.3 mL ABZ(100 mg/kg)灌胃;PAB组每日予以0.3 mL PAB(40 mg/kg)灌胃。连续灌胃6周后,取病灶-宿主微环境组织,采用ELISA法检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)和半胱氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase3,caspase3)的表达水平,采用生化检测试剂盒检测一氧化氮(nitric oxide,NO)的表达水平,采用Western blot法检测B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(BCL2-associated X protein、Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl2)、caspase3、活化caspase3(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase3,cleaved-caspase3)、VEGF、血管内皮细胞生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)、磷脂肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、磷酸化PI3K(phosphorylated phosphatidylinositol 3 kinase,p-PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)及磷酸化AKT(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)蛋白的表达水平。结果体外实验:体外不同浓度PAB与多房棘球绦虫原头节共培养7 d后,40、80、160和320μmol/L组原头节分别在6、4、2和1 d后全部死亡;PAB对多房棘球绦虫原头节表现出一定的时间和浓度依赖性。多房棘球绦虫囊泡及生发层细胞经PAB处理后,随着PAB浓度增大,培养上清液中PGI释放量逐渐增加[半数最大效应浓度值为(24.40±1.42)μmol/L],生发层细胞活力明显被抑制[半数抑制浓度值为(15.94±2.55)μmol/L]。PAB对哺乳动物细胞无明显毒性。20μmol/L PAB干预原头节3 d后Bax和caspase3蛋白的表达水平上调,Bcl2蛋白表达水平下调。动物实验:与Model组相比,PAB组和ABZ组小鼠的病灶湿重均降低(P<0.01),PAB组和ABZ组的病灶生长抑制率分别为91.03%和74.44%;ABZ组和PAB组小鼠病灶-宿主微环境组织中增殖及血管生成指标(Ki67、CD34蛋白、VEGF和VEGFR2蛋白、eNOS、NO)表达下调(P<0.05),凋亡相关蛋白(caspase3、cleaved-caspase3和Bax蛋白)表达上调(P<0.05),PI3K/AKT信号通路相关蛋白(p-PI3K和p-AKT蛋白)表达下调(P<0.05)。结论PAB在体外和体内有较强的抗多房棘球绦虫作用,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路,导致细胞凋亡增加和血管生成减少有关。

关键词：多房棘球绦虫土荆皮乙酸原头节囊泡生发层细胞细胞凋亡血管生成磷脂肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路

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抗寄生虫微管蛋白抑制剂的研究进展

现代药物与临床 2024年第8期39卷 2182-2186页

作者：达哇卓玛刘川川樊海宁青海省人民医院高原临床医学转化中心青海大学医学院高原医学研究中心青海大学附属医院青海省包虫病研究重点实验室青海大学附属医院肝胆胰外科

微管蛋白抑制剂特异性作用于微管蛋白、干扰细胞有丝分裂、造成细胞周期停滞，从而诱导细胞凋亡。微管蛋白抑制剂按其结合部位可分为作用于秋水仙碱位点、长春花碱位点和紫杉醇位点的抗寄生虫微管蛋白抑制剂。综述了微管蛋白抑制剂抗寄... 详细信息

微管蛋白抑制剂特异性作用于微管蛋白、干扰细胞有丝分裂、造成细胞周期停滞，从而诱导细胞凋亡。微管蛋白抑制剂按其结合部位可分为作用于秋水仙碱位点、长春花碱位点和紫杉醇位点的抗寄生虫微管蛋白抑制剂。综述了微管蛋白抑制剂抗寄生虫病的研究进展及其作用机制，旨在对抗寄生虫药物的研究提供参考。

关键词：微管蛋白抑制剂抗寄生虫秋水仙碱位点长春花碱位点紫杉醇位点

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新课标下小学英语课堂教学策略分析

校园英语 2023年第15期 142-144页

作者：达哇卓玛甘肃省甘南藏族自治州玛曲县木西合乡寄宿制学校

英语学科是学生学习的主要科目之一，英语的教学方式对学生的学习效率有一定的影响。本文主要基于新课标的理念和要求，分析小学英语课堂教学的现状，主要存在学生缺乏学习的兴趣、教师的教学理念较为落后、教师教学方法有待优化、教师... 详细信息

英语学科是学生学习的主要科目之一，英语的教学方式对学生的学习效率有一定的影响。本文主要基于新课标的理念和要求，分析小学英语课堂教学的现状，主要存在学生缺乏学习的兴趣、教师的教学理念较为落后、教师教学方法有待优化、教师与学生之间的互动较少、缺乏实践性教学环节、教学评价方式不科学等问题，同时针对这些问题提出解决策略，让小学英语课堂教学更加高效，提升学生的英语学习水平。

关键词：新课标小学英语课堂教学

来源：博看期刊

计划行为理论的健康教育护理模式对康复期乳腺癌患者自我管理能力和癌因性疲乏的影响

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2022年第7期 165-168页

作者：达哇卓玛青海省藏医院肿瘤科青海西宁810000

对康复期乳腺癌患者实施基于计划行为理论的健康教育护理模式的效果研究,并评价对自我管理能力、癌因性疲乏的影响。方法:纳入2019年1月到2022年1月康复期乳腺癌患者30例,开展本次研究,以随机数字表法分组。参照组(15例)方案:实施常规护... 详细信息

对康复期乳腺癌患者实施基于计划行为理论的健康教育护理模式的效果研究,并评价对自我管理能力、癌因性疲乏的影响。方法:纳入2019年1月到2022年1月康复期乳腺癌患者30例,开展本次研究,以随机数字表法分组。参照组(15例)方案:实施常规护理;研究组(15例)方案:实施基于计划行为理论的健康教育护理。研究护理前、护理1个月后功能状态量表(KPS)评分,自我管理能力量表评分、癌因性疲乏量表(Piper)评分。结果:护理1个月后,研究组的KPS量表评分(78.07±5.16)分,同参照组的(68.29±4.45)分比较更高(p<0.05);护理1个月后,研究组的自我管理能力量表评分(85.71±4.14)分,同参照组的(78.45±3.45)分比较更高(p<0.05);护理1个月后,研究组的认知疲乏评分(3.18±0.06)分、情感疲乏评分(2.18±0.17)分、行为疲乏评分(3.05±0.79)分、躯体疲乏评分(3.75±0.08)分,同参照组的(4.08±0.37)分、(4.16±1.04)分、(4.14±1.24)分、(4.53±0.23)分比较均更低(p<0.05)。结论:康复期乳腺癌患者接受基于计划行为理论的健康教育护理的效果更加显著,其生活自理能力能够快速提升,患者自我护理能力更强,更有利于减轻癌因性疲乏感受。

关键词：基于计划行为理论的健康教育护理康复期乳腺癌自我管理能力癌因性疲乏

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玉树公安以实际成效为平安建设赋能

玉树公安以实际成效为平安建设赋能

Hoxa1通过MEK/ERK信号通路促进低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖、迁移和表型转换的研究

青海法治报

作者：达哇卓玛

玉树讯（通讯员达哇卓玛）夏季治安打击整治行动开展以来，玉树藏族自治州公安局刑侦部门严格按照“五严打两建设”要求，争取破大案、抓小案，明确打击重点，提高打击能力，强化打击质效，充分发挥警种联动机制，以实际成效为平安玉... 详细信息

玉树讯（通讯员达哇卓玛）夏季治安打击整治行动开展以来，玉树藏族自治州公安局刑侦部门严格按照“五严打两建设”要求，争取破大案、抓小案，明确打击重点，提高打击能力，强化打击质效，充分发挥警种联动机制，以实际成效为平安玉树建设赋能。截至目前，玉树州公安机关共侦......

关键词：平安建设犯罪嫌疑人

来源： cnki报纸评论

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解放军医学院学报 2023年第11期44卷 1253-1264页

作者：翟婷达哇卓玛张雨薇樊海宁刘川川青海大学附属医院内分泌科青海西宁810001 青海大学高原医学研究中心青海西宁810001 青海大学附属医院普外科青海西宁810001 青海省包虫病研究重点实验室青海西宁810001

背景低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary arterial hypertension,HPH)是一种以血管阻力持续性升高和血管重塑为特征的进展性疾病。研究表明Hoxa1参与血管生成过程,但Hoxa1在调控肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cell... 详细信息

背景低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary arterial hypertension,HPH)是一种以血管阻力持续性升高和血管重塑为特征的进展性疾病。研究表明Hoxa1参与血管生成过程,但Hoxa1在调控肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)中的作用尚不明确。目的本研究旨在确定Hoxa1对PASMCs增殖、迁移和表型转化的调控作用。方法使用Ⅱ型胶原酶消化分离培养原代大鼠PASMCs。采用1%低氧处理细胞构建低氧诱导的细胞模型,并检测24 h、48 h、72 h低氧处理的PASMCs中Hoxa1 mRNA和蛋白表达水平。采用干扰或过表达Hoxa1慢病毒下调或上调细胞中Hoxa1表达。慢病毒干扰实验分为常氧组(Normoxia)、低氧组(Hypoxia)、低氧空病毒组(Hypoxia+shRNA-NC)、低氧Hoxa1干扰病毒组(Hypoxia+shRNA-Hoxa1);慢病毒过表达实验分为对照组(Control)、过表达空病毒组(LV-NC)、过表达Hoxa1组(LV-Hoxa1)。采用EdU检测细胞增殖能力;RT-qPCR检测Hoxa1 mRNA表达;Western blot检测Hoxa1、表型转化标志蛋白、MEK/ERK信号通路蛋白表达;免疫荧光检测Hoxa1、α-actin表达;免疫共沉淀实验确定Hoxa1与MEK的相互作用。结果成功分离培养PASMCs,并鉴定细胞表达α-SMA。低氧诱导下PASMCs中Hoxa1表达上调(P<0.05)。低氧下Hoxa1沉默抑制PASMCs增殖和迁移,而常氧下Hoxa1过表达促进PASMCs增殖和迁移(P均<0.05)。低氧下沉默Hoxa1导致Hypoxia+shRNA-Hoxa1组收缩型标志蛋白表达升高,合成型标蛋白表达降低(P<0.05)。而在常氧下过表达Hoxa1导致LV-Hoxa1组收缩型标志蛋白降低,合成型标志蛋白升高(P均<0.05)。此外,Hoxa1表达增加促进MEK/ERK信号通路激活。免疫共沉淀结果显示,Hoxa1与MEK存在相互作用。结论 Hoxa1可能通过激活MEK/ERK通路促进PASMCs增殖、迁移和表型转化。

关键词：肺动脉平滑肌细胞 Hoxa1 增殖迁移表型转化 MEK/ERK信号通路