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海藻玉壶汤及拆方对甲状腺肿大模型大鼠mTOR-p70S6K/4E-BP1信号通路的影响

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北京中医药大学学报 2021年第5期44卷 436-443页

作者：葛超冉王鑫钟赣生贺佳霍敏李娜陈丰修琳琳柳海艳陈绍红葛东宇董瑞娟范盎然北京中医药大学北京102488

目的探讨海藻玉壶汤中海藻与甘草加减应用对甲状腺肿大模型大鼠哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-核糖体S6蛋白激酶(p70S6K)/真核起始因子4E结合蛋白(4E-BP1)信号通路的影响。方法选取Wistar大鼠84只,雄性,随机分为空白组、模型组、优甲乐... 详细信息

目的探讨海藻玉壶汤中海藻与甘草加减应用对甲状腺肿大模型大鼠哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-核糖体S6蛋白激酶(p70S6K)/真核起始因子4E结合蛋白(4E-BP1)信号通路的影响。方法选取Wistar大鼠84只,雄性,随机分为空白组、模型组、优甲乐组(0.02μg/g)、海藻玉壶汤组(10.08 g/kg)、海藻玉壶汤减海藻组(9.00 g/kg)、海藻玉壶汤减甘草组(9.18 g/kg)和海藻玉壶汤减海藻甘草组(8.10 g/kg),除空白组其余各组给予丙硫氧嘧啶复制甲状腺肿大病理模型,以优甲乐作为阳性对照药,其余各给药组给予相应药液。计算各组大鼠甲状腺系数,观察甲状腺病理形态变化,用RT-PCR法检测甲状腺组织中mTOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA的表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠甲状腺系数、甲状腺细胞核个数升高(P<0.01),滤泡腔面积降低(P<0.01);与模型组比较,海藻玉壶汤组及各拆方组大鼠甲状腺系数、甲状腺细胞核个数降低(P<0.01),滤泡腔面积升高(P<0.01),其中海藻玉壶汤组的恢复作用最明显。与空白组比较,模型组mTOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA表达均升高(P<0.01);与模型组比较,海藻玉壶汤组及拆方各组均可使mTOR、p70S6K、4E-BP1 mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论海藻玉壶汤及拆方对甲状腺肿大模型大鼠的甲状腺系数及甲状腺组织病理形态有纠正作用,其作用机制可能与其抑制mTOR-p70S6K/4E-BP1信号通路进而抑制细胞增殖有关。

关键词：海藻玉壶汤反药组合甲状腺肿大细胞增殖 mTOR-p70S6K/4E-BP1信号通路大鼠

毛蕊异黄酮对流感病毒感染HUVEC细胞通透性及其MLC磷酸化的影响

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中华中医药学刊 2019年第6期37卷 1368-1372,1547-1548页

作者：张俊杰钟婧张淑静董瑞娟葛东宇玄子男陈晓鸣吴莹北京中医药大学生命科学学院北京100029 北京中医药大学中医学院北京100029

目的:通过检测毛蕊异黄酮(Calycosin)对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染的脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)通透性升高及其肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化的影响来探讨其改善内皮细胞通透性的机制。方法:设置正常... 详细信息

目的:通过检测毛蕊异黄酮(Calycosin)对流感病毒A/PR/8/34(H1N1)感染的脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVECs)通透性升高及其肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化的影响来探讨其改善内皮细胞通透性的机制。方法:设置正常组、病毒组和毛蕊异黄酮组;将HUVEC接种于96孔板,MTT法检测不同浓度毛蕊异黄酮的细胞毒性;30 MOI PR8病毒感染病毒组与毛蕊异黄酮组HUVECs后,毛蕊异黄酮组加入20μg/mL毛蕊异黄酮溶液,采用内皮细胞跨膜电阻法检测各组在不同时间点的跨膜电阻值;激光共聚焦显微镜观察各组细胞内丝状肌动蛋白(Filamentous actin,F-actin)的表达和分布;Western Blot检测各组MLC、p-MLC蛋白表达水平;将MDCK接种于96孔板,用PR8病毒感染细胞,MTT法检测不同浓度毛蕊异黄酮的抗病毒活性。结果:毛蕊异黄酮对HUVEC的最大无毒浓度为40μg/mL,细胞存活率约为91.69%;毛蕊异黄酮组细胞通透性与正常组细胞相比无显著差异,但通透性显著低于病毒组(P<0.05);病毒组的F-actin发生变构、细胞中出现粗大的应力纤维,分布于胞浆中,而毛蕊异黄酮组的F-actin分布于细胞膜、应力纤维减少;与正常组相比,病毒组的p-MLC蛋白表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)、与病毒组相比,毛蕊异黄酮组的p-MLC蛋白表达明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);毛蕊异黄酮对流感病毒感染的MDCK细胞的抗病毒作用并不明显。结论:毛蕊异黄酮可通过抑制p-MLC蛋白的表达来抑制流感病毒引起的内皮细胞通透性升高及F-actin变构的作用,从而达到保护内皮细胞的功能。

关键词：毛蕊异黄酮流感病毒 HUVEC 细胞通透性 MLC

慈姑多糖对非酒精性脂肪肝病肝损伤的保护作用

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中华中医药杂志 2019年第10期34卷 4796-4799页

作者：柯秀慧董瑞娟葛东宇高誉珊韩悦王晶许安萍廖艳北京中医药大学中医学院北京100029 北京中医药大学针灸推拿学院北京100029

目的:观察慈姑多糖对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝损伤的保护作用及机制。方法:26只雄性ICR小鼠分为3组:对照组和多糖组每组8只,模型组10只。采用高脂饮食喂饲小鼠建立NAFLD模型,同时多糖组灌胃慈姑多糖干预12周。观察... 详细信息

目的:观察慈姑多糖对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝损伤的保护作用及机制。方法:26只雄性ICR小鼠分为3组:对照组和多糖组每组8只,模型组10只。采用高脂饮食喂饲小鼠建立NAFLD模型,同时多糖组灌胃慈姑多糖干预12周。观察肝组织病理变化;各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、高密度脂蛋白(HDLC)、低密度脂蛋白(LDLC)含量变化;肝组织Bax、Bcl-2、Sirt1 mRNA水平的变化。结果:与模型组比较,多糖组小鼠肝组织坏死和脂肪变性明显改善,血清ALT、AST、LDLC含量显著降低(P<0.01), HDLC含量显著增加(P<0.05);肝组织Bax mRNA表达减低(P<0.01),Bcl-2、Sirt1 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:慈姑多糖对NAFLD小鼠肝损伤具有保护作用,其作用机制可能与调控Bcl-2、Sirt1、Bax mRNA的表达有关。

关键词：慈姑多糖非酒精性脂肪肝病 Bax Bcl-2 Sirt1

感音神经性听力损失患者不同噪声模式下的言语识别能力研究

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2018年第2期25卷 86-88页

作者：李楠王硕董瑞娟陈静王媛刘冬鑫首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科耳鼻咽喉头颈科学教育部重点实验室(首都医科大学)北京市耳鼻咽喉科研究所北京100730

目的研究不同噪声模式对听力正常者和感音神经性听力损失者言语识别能力的影响。方法通过MATLAB软件播放儿童版汉语普通话噪声下言语测试句表,测试25名听力正常受试者和20例感音神经性聋受试者分别在安静环境、语谱噪声、双人语噪声下... 详细信息

目的研究不同噪声模式对听力正常者和感音神经性听力损失者言语识别能力的影响。方法通过MATLAB软件播放儿童版汉语普通话噪声下言语测试句表,测试25名听力正常受试者和20例感音神经性聋受试者分别在安静环境、语谱噪声、双人语噪声下的言语识别能力,分析两者在安静和两种噪声模式下对语句感知能力的差异。结果随信噪比降低,听力正常者在语谱噪声下言语识别率低于双人语噪声,但差异无统计学意义(P>0.05)。感音神经性听力损失者在信噪比+5 d B时,双人语噪声下言语识别率低于语谱噪声,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论两种噪声模式对比,听力正常者在双人语噪声下言语识别率更高,感音神经性听力损失者在语谱噪声下言语识别率更高。

关键词：听觉丧失感音神经性噪声言语知觉精细结构信息

电针对高血脂合并脑缺血大鼠巢蛋白和增殖细胞核抗原表达的影响

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世界中医药 2020年第23期15卷 3627-3633页

作者：係梦琪李晓硕葛东宇董瑞娟任秀君北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中医药大学中医学院北京100029

目的:观察电针对高血脂合并脑缺血大鼠侧脑室外侧壁巢蛋白(Nestin)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法:41只成年雄性SD大鼠随机分为正常组和高脂饲料喂养组,高脂饲料喂养组大鼠用高脂饲料喂养42 d造成高脂血症模型后,随机分为假手... 详细信息

目的:观察电针对高血脂合并脑缺血大鼠侧脑室外侧壁巢蛋白(Nestin)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法:41只成年雄性SD大鼠随机分为正常组和高脂饲料喂养组,高脂饲料喂养组大鼠用高脂饲料喂养42 d造成高脂血症模型后,随机分为假手术组、模型组、电针1组、电针2组。电针1组电针“丰隆”,1次/d,连续7 d。第50天,电针组和模型组用FeCl 3化学诱导造成脑缺血,术后电针组电针“丰隆”“百会”,1次/d,连续14 d。用神经功能缺损评分评定行为学变化,生物化学法检测血脂四项,HE染色观察缺血半暗带形态学改变,免疫组化检测缺血侧侧脑室外侧壁Nestin和PCNA的表达。结果:术后14 d模型组TC、LDL升高(P<0.01),HDL降低(P<0.01);电针组TC、LDL降低(P<0.05),HDL升高(P<0.05)。模型组神经功能缺损评分增高,HE染色组织形态呈脑缺血改变,Nestin、PCNA阳性细胞个数增多(P<0.05);电针治疗可降低神经功能缺损评分(P<0.05),缺血半暗带细胞形态接近正常,Nestin、PCNA阳性细胞数升高(P<0.05),术后7 d时达到高峰,且电针1组高于电针2组(P<0.05)。结论:电针“丰隆”“百会”可调节血脂,促进缺血侧侧脑室外侧壁Nestin、PCNA的表达,改善神经功能,且在高血脂阶段进行针刺干预效果更佳。

关键词：电针脑缺血高脂血症侧脑室神经干细胞

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基于车辆微观行为的瓶颈路段交通流能耗研究

交通标准化 2014年第5期42卷 1-5页

作者：冯晓龙黄文娟卫立阳董瑞娟合肥工业大学交通运输工程学院安徽合肥230009

通过分析瓶颈路段车辆的微观行为,基于汽车燃油消耗微观模型提出了瓶颈路段的燃油消耗计算方法,并运用仿真软件进行验证,在此基础上探讨了瓶颈路段的燃油消耗规律。结果表明车辆经过瓶颈路段时增加的燃油消耗主要来源于车辆进入瓶颈时... 详细信息

通过分析瓶颈路段车辆的微观行为,基于汽车燃油消耗微观模型提出了瓶颈路段的燃油消耗计算方法,并运用仿真软件进行验证,在此基础上探讨了瓶颈路段的燃油消耗规律。结果表明车辆经过瓶颈路段时增加的燃油消耗主要来源于车辆进入瓶颈时的减速、怠速及加速过程,车辆由瓶颈驶向下游路段的燃油消耗没有因为加速工况的存在而大于无瓶颈对照路段的燃油消耗,且交通量越大交通流燃油消耗受瓶颈的影响越大。

关键词：能耗行驶工况交通流瓶颈路段

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小鼠肺组织羟脯氨酸含量测定的实验方法优化

医学研究生学报 2020年第3期33卷 301-306页

作者：陈以文盛春瑞刘珊珊宗晨钟董瑞娟葛东宇王淑艳李丽娜北京中医药大学中医学院北京100029

目的羟脯氨酸(HYP)的检测手段众多,但鲜有精确适用于小鼠肺组织的方法。文章拟建立一种准确、可靠的基于小鼠肺组织的HYP水平测定方法,以更为有效地评估其纤维化发展程度。方法以碱水解法为基础,比较碱水解液浓度及水解时间对小鼠肺组织... 详细信息

目的羟脯氨酸(HYP)的检测手段众多,但鲜有精确适用于小鼠肺组织的方法。文章拟建立一种准确、可靠的基于小鼠肺组织的HYP水平测定方法,以更为有效地评估其纤维化发展程度。方法以碱水解法为基础,比较碱水解液浓度及水解时间对小鼠肺组织HYP水平测定结果的影响;比较实验相关条件改变对HYP标准品测定结果的影响;以上述实验结果为基础,比较干燥和湿润的小鼠肺组织HYP水平测定结果。结果通过优化得出,碱水解液最佳浓度为2 mol/L,最佳水解时间为20 min;柠檬酸缓冲液最适pH值为6.0~6.5,适用于氯胺T最佳溶剂为甲醇,氯胺T溶液的最佳反应时间为15 min,高氯酸溶液的最佳反应时间为5 min,4-(二甲氨基)苯甲醛溶液的最佳显色条件为85℃水浴3 min,用干燥肺组织测得的HYP含量[(212.26±8.83)mg/g肺组织]较用湿润肺组织[(162.70±15.04)mg/g肺组织]高(P<0.01)。用改进后方案测得的肺组织HYP水平([(375.20±6.83)mg/g肺组织])明显高于使用优化前[(345.99±8.57)mg/g肺组织]。以HYP标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标绘制标准曲线,其回归方程为y=0.014x+0.0725,相关系数为R 2=0.9991。回收率分别为118.68%、117.38%和117.88%,均在80%~120%之间,说明本法较为可靠。结论建立了一种准确、可靠的基于小鼠肺组织的HYP水平测定方法。

关键词：碱水解法羟脯氨酸肺纤维化小鼠肺组织方法优化

感音神经性听力损失与听神经病谱系障碍患者频率选择特异性研究

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中国耳鼻咽喉头颈外科 2015年第1期22卷 27-31页

作者：王硕董瑞娟王媛刘冬鑫陈静吴燕君首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科耳鼻咽喉头颈科学教育部重点实验室(首都医科大学)北京市耳鼻咽喉科研究所北京100730

目的评价感音神经性听力损失患者(耳蜗病变)与听神经病谱系障碍患者听觉系统的频率选择特异性,对比说明不同类型听力损失对听觉系统频率选择特异性的影响。方法使用测量心理物理调谐曲线(psychophysical tuning curve,PTC)的方法评价频... 详细信息

目的评价感音神经性听力损失患者(耳蜗病变)与听神经病谱系障碍患者听觉系统的频率选择特异性,对比说明不同类型听力损失对听觉系统频率选择特异性的影响。方法使用测量心理物理调谐曲线(psychophysical tuning curve,PTC)的方法评价频率选择特异性,即当存在一个纯音信号,其频率和强度保持不变,加入另一个窄带噪声,噪声的中心频率和强度均发生变化,通过改变噪声的中心频率与强度掩蔽纯音信号,由此获得的窄带噪声中心频率与其强度的关系曲线。PTC越窄,尖部越尖锐说明频率选择特异性越好,使用测试频率与PTC曲线最小强度上10 d B的曲线宽度的比值(Q10dB)评价PTC曲线的尖锐程度。选取听力正常受试者11名,感音神经性听力损失受试者14例,听神经病谱系障碍患者17例,测量3个组受试者双耳在500Hz和1000Hz处的心理物理调谐曲线。结果听力正常受试者平均Q10dB结果为3.4±0.9,感音神经性听力损失受试者平均Q10d B结果为1.8±0.4,听神经病谱系障碍受试者平均Q10d B结果为3.5±1.0。听神经病谱系障碍患者组Q10 d B结果与听力正常组Q10dB结果间无显著性差异(P>0.05),而感音神经性听力损失组Q10dB结果与听力正常组(F=34.90,P<0.001)和听神经病谱系障碍组Q10dB结果间均存在显著性差异(F=31.09,P<0.001)。结论耳蜗病变会导致频率选择特异性障碍,而听神经病谱系障碍患者听觉系统的频率选择特异性可能基本正常。

关键词：听觉丧失,感音神经性频率选择特异性心理物理调谐曲线听神经病谱系障碍

从“肺与大肠相表里”探究鼠李糖乳杆菌对过敏性哮喘小鼠ERK1/2和p38 MAPK通路的影响

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现代中西医结合杂志 2023年第2期32卷 154-159,182页

作者：李秋逸刘茈蕊李亚兰董瑞娟葛东宇彭桂英北京中医药大学生命科学学院北京102488 北京中医药大学中医学院北京102488

目的基于“肺与大肠相表里”理论探讨鼠李糖乳杆菌对过敏性哮喘小鼠细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)通路及相关免疫细胞的影响。方法将18只雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、鼠李糖乳杆菌组... 详细信息

目的基于“肺与大肠相表里”理论探讨鼠李糖乳杆菌对过敏性哮喘小鼠细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)通路及相关免疫细胞的影响。方法将18只雌性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、鼠李糖乳杆菌组,每组6只。采用卵白蛋白(OVA)致敏加激发方法构建小鼠过敏性哮喘模型,鼠李糖乳杆菌组于雾化激发前给予鼠李糖乳杆菌灌胃,连续7 d,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃。末次灌胃后取各组小鼠肺组织和结肠组织,HE染色进行组织病理观察;ELISA法检测血清OVA特异性IgE含量,流式细胞术检测肺组织中2型固有淋巴样细胞(ILC2)比例,Western blot法检测肺组织中p-ERK1/2和p-p38 MAPK表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠支气管及血管周围存在明显炎症细胞浸润,部分肺泡结构消失;结肠腺体排列紊乱,隐窝和杯状细胞明显减少,黏膜及黏膜下层炎性细胞浸润;血清OVA特异性IgE含量、肺组织中ILC2比例、肺组织中p-ERK1/2及p-p38 MAPK相对表达量均明显升高(P均<0.05)。与模型组比较,鼠李糖乳杆菌组小鼠支气管炎性细胞浸润明显改善;结肠腺体、杯状细胞增多,排列较为整齐,炎细胞浸润明显减少;血清OVA特异性IgE含量、肺组织中ILC2比例、肺组织中p-ERK1/2及p-p38 MAPK相对表达量均明显降低(P均<0.05)。结论鼠李糖乳杆菌可能通过抑制ERK1/2及p38 MAPK磷酸化,减少肺部ILC2,从而减轻过敏性哮喘的肺部炎症。

关键词：过敏性哮喘鼠李糖乳杆菌肺与大肠相表里细胞外信号调节蛋白激酶1/2 p38丝裂原激活蛋白激酶 2型固有淋巴样细胞