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关于提高非英语专业学生的写作能力 ——大学英语教师对学生作文批改的分析

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关于提高非英语专业学生的写作能力 ——大学英语教师对学生作文...

作者：胡秋月中国地质大学（北京）

学位级别：硕士

大学英语教学的目的是为了培养学生使用英语的能力。写作能力的培养是大学英语教学中不可忽略的重要环节。鉴于当下大多数大学没有为非英语专业学生专门设立英语写作课程，课外的练习即教师所布置的作文变得尤为重要。教师对学生作文的... 详细信息

大学英语教学的目的是为了培养学生使用英语的能力。写作能力的培养是大学英语教学中不可忽略的重要环节。鉴于当下大多数大学没有为非英语专业学生专门设立英语写作课程，课外的练习即教师所布置的作文变得尤为重要。教师对学生作文的批改在很大程度上影响了学生写作水平的提高。本文的目的即通过对学生和教师尤其是学生的问卷调查分析出非英语专业学生对教师作文批改的看法，包括他们是否觉得教师的批改有效，他们认为有帮助的批改形式及方法以及在作文批改方面教师的实践是否和学生的需求相符合。关于教师对学生作文批改的研究在五十年以前就开始了，西方的语言学家和英语教学的实践者们就此问题提出了不同的看法。英语教学作为外语教学在中国这种汉语语言环境下有其自身的特点，前人的研究在某些方面符合中国的教学实际，然而中国学生有其自身特点，比如语言环境的影响以及学生的学习动机，这些因素的综合作用导致了学生对教师作文批改的不同要求。本文通过对学生和教师的问卷调查的分析得出结论：非英语专业的学生认为教师的批改是非常必要和有帮助的，对于作文的拼写、语法、词汇和结构层面的批改都是很受学生欢迎的，另外批改技巧诸如符号法等都是学生所喜爱并认为有效的方法。教师关注并最大程度上满足学生的要求并采用这些方法将会极大地帮助学生提高其写作水平。

关键词：教师批改写作能力英语作为外语的写作非英语专业学生

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富力地产资金链风险防控研究

富力地产资金链风险防控研究

作者：胡秋月安徽工业大学

学位级别：硕士

房地产业是我国国民经济的支柱,它涉及和笼盖的产业链非常之广,该产业可否良性运作涉及到我国许多行业的发展,关系到改善就业等民生话题。但由于房地产业属于资金密集型企业,在运作中须要足够大的资金投入,再加上目前我国制度不健全、... 详细信息

房地产业是我国国民经济的支柱,它涉及和笼盖的产业链非常之广,该产业可否良性运作涉及到我国许多行业的发展,关系到改善就业等民生话题。但由于房地产业属于资金密集型企业,在运作中须要足够大的资金投入,再加上目前我国制度不健全、房企融资难、资金的周转较慢以及库存积压,管理不善等问题让房地产行业资金链承压,资金链断裂风险大。一旦资金链发生断裂,投资者、银行等信贷机构、债权人的利益都将会受到损害,严重时甚至会影响整个宏观经济。因此面对这种环境,房地产业的资金链风险仍需获得关注,为房企规避资金链风险提出合理的防范建议目前亟待解决。本文用案例分析法发现了案例公司运营中所隐匿的资金链风险,以期为同行业资金链问题的防范以及为房企制订合理的公司发展战略提出借鉴意义。文章第一部分是绪论。第二部分为概念介绍和理论基础,分别介绍了资金链风险的含义,与财务风险的联系以及我国房地产行业资金链风险;从现金的持有动机理论、价值链管理理论、资本循环角度为文章提供理论基础;第三部分为我国房地产行业上市公司的资金链现状分析。第四部分介绍案例公司基本概况和实际控制人基本情况、用修正后的Z计分模型衡量富力地产的资金链风险,从风险表现的三个阶段识别风险。第五部分为文章的重点,从宏观政策调控层面、中观房地产行业特征层面以及实际控制人异质性角度分析案例公司资金链风险的成因,经过分析发现实际控制人异质性为案例公司资金链风险产生的最主要原因。第六部分从优化资金链内外环境的角度提出防范资金链风险的措施。第七部分为结论。

关键词：房地产公司资金链风险资金链风险分析资金链风险防控

减税降费政策的企业获得感研究——基于问卷调查

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减税降费政策的企业获得感研究——基于问卷调查

作者：胡秋月山东财经大学

学位级别：硕士

2018年以来,面对愈加紧张的国际经济环境和突如其来的疫情冲击,我国选择继续扩大减税降费政策的覆盖范围和规模,为相关企业提供了尽可能的帮助。虽然采取积极的税收政策会使得财政收入短期内吃紧,但从长期来看,这个举措有利于我国经济... 详细信息

2018年以来,面对愈加紧张的国际经济环境和突如其来的疫情冲击,我国选择继续扩大减税降费政策的覆盖范围和规模,为相关企业提供了尽可能的帮助。虽然采取积极的税收政策会使得财政收入短期内吃紧,但从长期来看,这个举措有利于我国经济发展实现“转向”。同时,减税降费政策为企业释放了大量的税负空间,这为深受经济下行压力和疫情冲击影响的濒危企业注入了一针“强心剂”。本文在对相关文献进行梳理后发现,国内外的研究学者大多都是从客观经济效益的层面对税收政策的效果进行评价,这些研究成果主要区别在于,是从宏观税负角度去衡量政策的客观经济效益,还是从微观税负角度去衡量客观经济效益。当然,也有学者选择从主观角度衡量微观经济主体对国家税收的感受和评价,比如,研究国民税收痛苦程度的“税感”,测量纳税人对税收管理和税收服务满意程度的“纳税人满意度”。这些从主观视角出发的研究对本文的形成带来了很大的启发。上述的“税感”和“纳税满意度”的相关研究,其成果主要是构建了衡量宏观税负水平和税收征管服务的指标体系,并不是对具体税收政策进行效果衡量。因此,本文借鉴“获得感”这一具有中国特色、现在常常被用于衡量改革成效的词汇,从企业的主观角度来衡量减税降费政策是否真正得到了落实。本文的主要内容是对企业减税降费获得感进行研究。首先,在界定了企业获得感概念的内涵和外延后,通过分析企业获得感的影响因素和影响路径,得出测量企业获得感要从纵向的“绝对获得感”和横向的“相对获得感”两条路径进行。其次,在设计得到合理科学的企业减税降费获得感调查问卷后,对山东省四个地市的企业分区域进行抽样调查。得到问卷数据后,将问卷数据从总体获得感、绝对获得感、相对获得感三个方面进行初步的描述性统计分析。最后,本文为了进一步得到企业减税降费获得感与其影响因素之间的相关关系,运用stata软件对492份问卷数据进行了有序logit回归分析,得到了税费负担、税收服务、企业差异、营商环境等影响因素对企业获得感的作用方向和作用大小。本文在对问卷数据进行描述性统计分析后发现,从样本企业的总体获得感来看,共有439家样本企业切实感受到了减税降费政策对企业的帮助,在样本总量中占比高达89.22%,总体获得感明显;从企业的绝对获得感来看,小微企业获得感要高于大中型企业;从企业的相对获得感来看,营商环境的变动、税收服务及税制结构、企业经营状况和企业差异,对企业获得感都有着一定的影响,但对企业获得感产生的是加强还是削弱作用,还需要进一步实证分析。本文通过stata软件进行计量分析后发现,税费负担和税收服务的变化对企业获得感的影响最重。同时,本文根据回归结果得出了企业减税降费获得感与预期存在偏差的结论,并提出了相应的解决办法。基于通过数据分析得出的结论,本文认为要使企业获得感与减税降费政策效果协调同步,首先,要加强减税降费政策宣传辅导。要提高政策宣传辅导的质量和效果,提升政策的可得性和可理解性,创新政策宣传的方式,通过提升企业的政策认知度来提升企业整体获得感。其次,要提高纳税服务水平。通过规范办税流程公开制度,提升税收征管透明度。通过提升税务人员的服务意识,提高纳税人对税务服务的满意度。还要提升减税降费工作的效率,尽可能提高企业落实减税降费政策的便利性。最后,要优化税收营商环境。在构建税收营商环境评价体系时,可以加入“企业获得感”的主观评价指标,这样能够更加动态地监测企业对减税降费政策的真实诉求,同时还可以建立统一的减税降费纳税人参与平台,增加纳税人的参与感。

关键词：减税降费企业获得感问卷调查

商业银行个人住房抵押贷款信用风险评估与对策研究

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商业银行个人住房抵押贷款信用风险评估与对策研究

作者：胡秋月哈尔滨工业大学

学位级别：硕士

随着我国个人住房抵押贷款的迅速发展,贷款信用风险日益明显,我国个人住房抵押贷款的不良贷款比率明显高于美国等发达国家水平,而且随着该项业务的继续发展,未来风险呈上升趋势。由于我国商业银行缺乏一套科学的信用风险评估体系,以及... 详细信息

随着我国个人住房抵押贷款的迅速发展,贷款信用风险日益明显,我国个人住房抵押贷款的不良贷款比率明显高于美国等发达国家水平,而且随着该项业务的继续发展,未来风险呈上升趋势。由于我国商业银行缺乏一套科学的信用风险评估体系,以及个人住房抵押贷款业务自身的一些因素如产品单一等造成了我国商业银行在个人住房抵押贷款风险管理上相对落后。基于以上背景,本文以信息学、系统科学、博弈论等相关学科的理论和方法为指导,以降低住房抵押贷款信用风险为目标,探讨了住房抵押贷款信用风险的内在机理、传统信用评估方法等,提出了一套有效控制个人住房抵押贷款信用风险的集评估、预测和决策于一体的理论和方法,对商业银行在抵押贷款业务中控制信用风险具有很好的借鉴作用。首先,本文对信用风险进行界定,应用信息学的知识探讨了个人住房抵押贷款信用风险产生的原因即信息缺陷,而后分析了借款博弈和还款博弈,总结发达国家的管理经验。其次,阐述了信用风险评估体系建立的原则,从三个维度对影响信用风险的变量进行分析和选择,并加以量化,建立我国商业银行信用风险评估指标体系。再次,在该指标体系下,建立ANN神经网络信用风险评估模型,基于某银行数据,对各影响因素与信用风险度的关系进行模拟和预测,并对结果进行分析。最后,从建立个人征信体系和丰富住房抵押贷款产品两个方面提出加强信用风险管理的对策。本文的主要结论有:第一,信用风险的博弈分析得出加强贷前个人信息收集、甄别,对个人信用评估等以及对贷后个人信息的监督和管理是非常重要的。第二,本文建立的商业银行个人住房抵押贷款信用风险评估指标体系,充分考虑了商业银行个人住房抵押贷款信用风险评估过程中的12个影响因素,并进行科学分类,能够真实、合理、有效地反映信用风险评估运作的实际情况。第三,ANN神经网络模型在个人住房抵押贷款信用风险评估应用上突破了传统信用风险评估方法如打分法以线性处理为基础的局限性,能更便捷更有效更精确的处理复杂信息,为商业银行在个人住房抵押贷款实际操作中提供理论指导。第四,本文所作研究表明要想建立针对我国个人住房抵押贷款的有效且符合实际的个人信用风险评估模型,必须健全我国征信体系和丰富抵押贷款产品,这两方面对于管理信用风险具有重要意义。

关键词：信用风险信用风险评估信息缺陷指标体系 ANN

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重庆市B区生态环境系统干部队伍建设研究

重庆市B区生态环境系统干部队伍建设研究

作者：胡秋月重庆大学

学位级别：硕士

党的十八大将生态文明建设纳入了“五位一体”的总体布局中,生态环境保护工作的地位就越发重要,从中央到地方对生态环保工作的重视力度也逐渐增强。生态环境系统是打好污染防治攻坚战的主战场,生态环境系统干部更是承担生态环境保护伟... 详细信息

党的十八大将生态文明建设纳入了“五位一体”的总体布局中,生态环境保护工作的地位就越发重要,从中央到地方对生态环保工作的重视力度也逐渐增强。生态环境系统是打好污染防治攻坚战的主战场,生态环境系统干部更是承担生态环境保护伟大责任的主力军,是生态环境事业长久发展的坚实后盾力量,肩负着更加艰巨的时代任务。因此,要加强生态环境事业发展,就必须加强生态环境系统干部建设,为生态环境保护事业助力。本文在结合国内外对干部队伍建设研究的相关理论和研究文献后,通过调查分析相关统计数据,首先对重庆市B区生态环境系统干部队伍建设的现状进行客观地描述分析,其次对B区生态环境系统干部队伍建设中存在的问题进行阐释,并对产生问题的原因进行深刻剖析;最后对加强B区生态环境系统干部队伍建设的对策进行了探讨。本文得出如下基本结论:第一,重庆市B区生态环境系统干部队伍建设呈现出环保人员编制数量不足、环保干部队伍建设思想滞后、环保干部自身发展后劲不足、激励机制不够、人文氛围不浓的基本现状。第二,重庆市B区生态环境系统干部队伍建设存在的问题主要是:环保队伍干部编制数量较少,无法满足经济社会发展的需要;干部激励机制不到位、系统内部文化不浓厚等问题,影响了环保队伍干部干事创业的积极性,从长远来看将影响环保事业的发展。第三,加强重庆市B区生态环境系统干部队伍建设要从加强环保部门重视力度、夯实环保部门力量、完善干部激励措施、丰富干部培训方式、强化系统内部人文关怀等方面发力。

关键词：重庆市B区生态环境系统干部队伍现状干部队伍建设

果生刺盘孢G蛋白信号调控因子CfRGS4基因的生物学功能

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菌物学报 2024年第8期43卷 40-53页

作者：胡秋月曹凌雪李河中南林业科技大学南方人工林病虫害防控国家林业和草原局重点实验室森林有害生物防控湖南省重点实验室湖南长沙410004

果生刺盘孢Colletotrichum fructicola是油茶炭疽病的优势病原菌。研究果生刺盘孢G蛋白信号调节因子CfRGS4基因的生物学功能,为揭示病菌致病机制以及防治油茶炭疽病提供理论依据。构建CfRGS4基因敲除载体片段,利用PEG介导的原生质体转... 详细信息

果生刺盘孢Colletotrichum fructicola是油茶炭疽病的优势病原菌。研究果生刺盘孢G蛋白信号调节因子CfRGS4基因的生物学功能,为揭示病菌致病机制以及防治油茶炭疽病提供理论依据。构建CfRGS4基因敲除载体片段,利用PEG介导的原生质体转化和抗性筛选及PCR电泳验证,获得果生刺盘孢CfRGS4基因敲除突变体及回补菌株。对野生型、△Cfrgs4和△Cfrgs4-C进行观察,结果表明:相较于野生型,突变体△Cfrgs4-1和△Cfrgs4-2在PDA培养基上的生长速率下降了24%和22%,在MM培养基上下降了22%和20%;分生孢子萌发率降低了65%和70%;附着孢形成率降低了24%和17%;在含有400μg/mL CR的细胞胁迫剂上,突变体△Cfrgs4-1和△Cfrgs4-2的生长抑制率为14%和11%;与野生型相比,突变体菌落表现出被水浸润的现象,荧光定量PCR结果显示,突变体△Cfrgs4中菌丝疏水相关基因CU1和MHP1基因均显著上调表达;在含有200μg/mL ABTs的PDA平板和PDB培养基中,突变体△Cfrgs4的胞外漆酶和过氧化物酶活性显著降低;突变体△Cfrgs4-1和△Cfrgs4-2在含有2.5 mol/L(30%和31%)和5 mol/L Cu^(2+)(73%和75%)的PDA培养基上的抑制率均显著高于野生型;在致病力测定中,突变体△Cfrgs4-1和△Cfrgs4-2在油茶叶片上造成的病斑面积减小了40%和48%,在苹果上造成的病斑面积减小了48%和55%。综上所述,G蛋白信号调控因子CfRGS4基因参与调控果生刺盘孢的生长发育、表面疏水性、附着胞形成、胞外漆酶和过氧化物酶活性、Cu^(2+)耐受性及致病性。

关键词：果生刺盘孢油茶 CfRGS4基因致病力

初中学校体育现代化评价指标体系构建及应用测度研究

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初中学校体育现代化评价指标体系构建及应用测度研究

作者：胡秋月西华师范大学

学位级别：硕士

“实现教育现代化,教育的本质是促进人的发展”,这不单体现出国家要在2035年实现教育现代化而提出的总目标,还是未来初中阶段学校体育的发展方向。本文立足于教育现代化发展的大背景,运用了文献资料法、德尔菲法、层次分析法、数理统计... 详细信息

“实现教育现代化,教育的本质是促进人的发展”,这不单体现出国家要在2035年实现教育现代化而提出的总目标,还是未来初中阶段学校体育的发展方向。本文立足于教育现代化发展的大背景,运用了文献资料法、德尔菲法、层次分析法、数理统计法、模糊综合评判法,基于人本主义理论和资源配置理论。通过梳理初中学校体育现代化发展相关资料并结合与本论文相关的研究文献,运用Nvivo12软件初步筛选出评价指标,再通过德尔菲法进行三轮的修正与完善。构建了初中学校体育现代化评价指标体系,并用层次分析法对各个指标进行了加权计算,最终归纳出由4个一级指标,8个二级指标,20个三级指标构建的评价指标体系。本文通过对初中学校体育现代化评价指标体系的研究,主要得到以下结论:（1）通过德尔菲法,提取出4个一级指标,体育资源、学生体育基础、体育管理以及体育教育水平。8个二级指标:体育经费资源、体育人力资源、体育活动、学生身体素质、体育制度管理、体育教学管理、体育教学水平、体育信息化水平,其中三级指标包括雷波县初中学校体育经费投入支出比例、生均体育场地面积、体育教师与学生人数比、雷波县体育师资资源、雷波县初中体质监测合格率、体育教学网络平台数量及使用率等指标共计20个。（2）运用层次分析法（AHP）计算出雷波县初中学校体育现代化评价指标的权重,其中一级指标权重:A2学生体育基础0.2737＞A4体育教育水平0.2588＞A1体育资源0.2395＞A3体育管理0.2280。二级指标权重:M3体育活动0.1407＞M8体育信息化水平0.1351＞M4学生身体素质0.1328＞M1体育经费资源0.1258＞M7体育教学水平0.1226＞M5体育制度管理0.1180＞M2体育人力资源0.1138＞M6体育教育管理0.1112。三级指标权重:X8学生参与课外体育活动情况0.0576＞X9雷波县初中生中考体测合格率0.0559＞X20体育教学网络平台数量及使用率0.0550＞X7学校运动会开展率/年0.0544=X11政策文件的执行程度0.0544=X19学校体育信息化建设0.0544＞X12教育监督与评价体制的制定与管理0.0528＞X10雷波县初中学生身体素质达标率0.0523＞X3各初中学校体育场地、器材达标率0.0514＞X18学生运动技能水平0.0502＞X2生均体育场地面积0.0500＞X1雷波县初中学校体育经费投入支出比例0.0487＞X4雷波县体育师资资源0.0477＞X13体育活动制度管理0.0475=X17体育期末考试合格率0.0475＞X5体育教师与学生人数比0.0453＞X15体育教学文件规范化程度0.0433＞X16雷波县初中学校体育教研活动开展情况0.0432＞X6体育后备人才输送率/年0.0442=X14体育课堂常规0.0442。（3）运用模糊综合评判法,对初中学校体育现代化评价指标体系进行了验证。验证得出评价指标体系的得分为80.0098。按照隶属原则,优的隶属得分最高0.7417,以此构建了一套较为科学、可靠的评价指标体系。（4）将验证得到的科学、可靠的初中学校体育现代化评价指标体系应用到雷波县,对雷波县初中学校体育现代化发展程度进行实证分析及评分,最终计算出雷波县初中学校体育现代化的得分是0.661,由此可看出,雷波县的初中学校体育现代化水平呈中等偏下水平。

关键词：初中学校体育现代化评价指标体系

哈尔滨老旧小区改造项目重要性评价及提升策略 ——居民需求与管理模式双重导向

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哈尔滨老旧小区改造项目重要性评价及提升策略 ——居民需求与管...

作者：胡秋月哈尔滨工业大学

学位级别：硕士

老旧小区亟待更新改造的内容类目多、涉及范围广，从改造质量和投资等有效管控的角度来看，需对改造项目进行重要性评价，明确改造重点，按照优先度、分时序逐步改造。当前老旧小区改造相关研究多从单一主体视角出发，如政府部门、施工... 详细信息

老旧小区亟待更新改造的内容类目多、涉及范围广，从改造质量和投资等有效管控的角度来看，需对改造项目进行重要性评价，明确改造重点，按照优先度、分时序逐步改造。当前老旧小区改造相关研究多从单一主体视角出发，如政府部门、施工企业等，研究内容主要为改造内容确定、小区案例实践以及相关改造政策，鲜有基于居民需求视角与后期运维管理的研究。本文基于居民需求与管理模式双重导向，研究老旧小区改造项目重要性决策问题，对哈尔滨市老旧小区改造提出了优化建议。　　本研究以哈尔滨为例，在主城区内选取包括改造前、中、后三个不同改造进程的43个老旧小区进行调研，收集居民对改造项目满意度和重要性评价数据。首先，梳理基于居民需求的改造项目分类及重要性排序，采用满意度数据进行主成分分析与权重排序，获得项目类别及权重结果由大到小依次为：外部建筑结构与管线、公共基础设施、交通组织设施、休闲服务设施和植被绿化。接着，分析不同项目类别在改造前中后的满意度变化情况，通过四分位图具体分析各项目类别的重要性以及改造成效。最后，根据不同运维管理模式将哈尔滨市老旧小区划分为物业主导型、行政引导型和居民自治型，对三类小区各项目重要性评价数据进行统计分析，探讨三类小区中的项目重要性差异情况。　　最后，通过逐步回归模型明晰改造项目重要性影响路径，并基于居民需求与管理模式视角，对三类小区各项目进行IPA分析，找出后期需要重点加强改造的项目，以及可以适当减轻改造力度的项目。于是从改造项目分类分级、重点项目改造方法、三类小区项目优先级提出改造优化策略。首先，将改造项目分为“加强改善、优先级低、继续保持、减小力度”四类，并结合项目权重数据对各项目进行改造力度排序。同时，对居民最为关注的停车位改造、公共休闲空间以及健身设施改造方法进行阐述，并补充“加强改善类项目”改造方法。接着，针对三类运维管理模式小区，提出针对性的改造项目优先级策略以及运维管理策略。

关键词：老旧小区改造项目重要性评价居民需求管理模式哈尔滨

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CEPD调控棉花硝态氮吸收的机理研究

CEPD调控棉花硝态氮吸收的机理研究

作者：胡秋月山东师范大学

学位级别：硕士

氮素是植物正常生长发育所必须的主要的营养物质。土壤中氮素主要以硝态氮和铵态氮形式存在,陆生植物主要以硝态氮为氮源,通过根系吸收硝态氮,维持植物生长。棉花同样主要以硝酸盐的形式从土壤中吸收氮。但是,受气候、地理环境等多种环... 详细信息

氮素是植物正常生长发育所必须的主要的营养物质。土壤中氮素主要以硝态氮和铵态氮形式存在,陆生植物主要以硝态氮为氮源,通过根系吸收硝态氮,维持植物生长。棉花同样主要以硝酸盐的形式从土壤中吸收氮。但是,受气候、地理环境等多种环境因素的影响,硝酸盐在土壤中的分布往往是不均匀的。在拟南芥中的研究中发现,在根区氮素不均匀分布条件下,拟南芥可启动氮素系统调控信号机制,促进高N侧根系生长,提高高氮侧硝态氮吸收基因表达促进高氮侧硝态氮吸收。在这一调控过程中,地上部叶片产生的CEPD1蛋白可以运输到高氮侧根系,诱导高氮侧根系硝态氮吸收关键基因NRT基因表达,促进硝态氮吸收。棉花的耐逆性较强,常被种植在盐碱地、瘠薄地等新开垦农田。新开垦的农田土壤肥力较差,养分含量不均匀,并且棉花主要以吸收硝态氮为主。为了研究棉花中是否也具有类似拟南芥中促进高氮侧根系硝态氮吸收的调控机理。我们从棉花中选取了拟南芥CEPD1基因的同源基因GhCEPD,重点研究GhCEPD基因调控硝态氮吸收的机理。1.棉花GhCEPD基因克隆及表达分析。利用生物信息学方法,在棉花基因组数据中发现了6个GhCEPD基因。组织特性性表达分析发现,这6个基因都只在叶片中表达,有5个基因受低氮胁迫诱导,其中GhCEPD1-4基因的表达丰度最高。GhCEPD1-4蛋白与拟南芥At CEPD1蛋白的亲缘关键最近,同源性86%。根据棉花基因组序列设计引物,克隆了棉花GhCEPD1-4基因,该基因开放读码框全长306 bp。同时,克隆了GhCEPD1-4基因起始密码子前2281 bp的启动子。2.棉花GhCEPD1-4基因GFP融合载体构建及转基因棉花获得。利用常规分子生物学技术构建了融合GFP和GhCEPD1-4基因的表达载体,该表达载体以GhCEPD1-4基因自身启动子(P)为启动子。利用农杆菌介导的愈伤组织转化法,转化华棉1号愈伤组织,获得了20株T代转基因再生棉苗。对这20株棉苗进行PCR验证发现,其中17株棉苗能够检测到外源GFP基因条带,说明这17株棉苗为转基因阳性棉苗。利用荧光定量PCR方法检测这17株转基因棉苗中GhCEPD1-4::GFP融合基因表达情况,发现在转基因棉苗中都能检测到GhCEPD1-4::GFP融合基因表达,从中选择了3株（L-1、L-2和L-3）表达丰度最高的棉苗进行了深入研究。这3株棉苗分别单株收获种子,播种后利用卡那霉素筛选,在卡那霉素抗性苗叶片和根系中都能检测到荧光信号,说明GhCEPD1-4::GFP融合基因已经整合到棉花基因组上,并能正常转录和表达。***1-4在叶片和根系中转运调控硝态氮吸收。荧光共聚焦显微镜观察发现,转GhCEPD1-4基因棉苗叶片和根系中都能检测到荧光信号,但是野生型（华棉1号）中没有荧光信号。以转基因棉苗为接穗,野生型棉苗为砧木进行嫁接,嫁接棉苗叶片和根系中都有荧光信号;但是以转基因棉苗为砧木,野生型棉苗为接穗进行嫁接,嫁接棉苗叶片和根系中荧光信号都消失。利用下胚轴环割技术把转基因棉苗下胚轴进行环割后发现,根系中荧光信号也消失。这些结果说明GhCEPD1-4基因主要在叶片中表达,翻译形成GhCEPD1-4蛋白后,可通过韧皮部运输到根系。利用VIGS技术在棉花中沉默GhCEPD1-4基因,发现沉默GhCEPD1-4基因后,棉苗根系硝态氮吸收相关基因NRT1.1、NRT2.1和NRT1.5表达下降,根系NO的内流速度下降,并且叶片中N含量也显著下降。这些研究结果说明,GhCEPD1-4基因可通过诱导根系NRT1.1、NRT2.1和NRT1.5基因表达,提高棉苗硝态氮吸收能力,提高叶片氮素含量。***1-4促进高氮侧根系硝态氮吸收。利用嫁接分根法构建具有2个完整根系的棉苗,两侧根系分别用含有不同浓度硝酸盐（低氮营养液:0.25 mM NO;高氮营养液:5 mM NO）的营养液处理,模拟根区氮素差异分布,两侧根系都用低氮营养液处理为低氮处理对照,两侧根系都用高氮营养液处理为高氮处理对照。发现根区氮素差异分布能够诱导叶片GhCEPD1-4基因表达,高氮侧根系NRT1.1、NRT2.1和NRT1.5基因表达和NO的内流速度显著高于高氮处理对照根系。利用VIGS技术沉默嫁接棉苗地上部GhCEPD1-4基因降低了高氮侧根系NRT2.1和NRT1.5基因表达和NO的内流速度。利用韧皮部环割技术环割高氮侧根系下胚轴韧皮部也导致高氮侧根系NRT1.1、NRT2.1和NRT1.5基因表达和NO的内流速度下降。这些结果说明,根区氮素差异分布可诱导叶片GhCEPD1-4基因表达,GhCEPD1-4通过韧皮部运输到根系,诱导高氮侧根系诱导NRT1.1、NRT2.1和NRT1.5基因表达,促进高氮侧根系NO吸收。总之,本文深入研究了棉花GhCE

关键词：棉花 CEPD 硝态氮 NRT