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猪圆环病毒2型(PCV2)质粒标准物质研制

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中国动物传染病学报 2024年

作者：张媛王传彬顾小雪毕一鸣徐琦原霖高旭年李尔华钟凤然周智倪建强孙雨李琦翟新验刘玉良中国动物疫病预防控制中心普道(北京)标准技术有限公司广州邦德盛生物科技有限公司

针对目前我国尚无猪圆环病毒2型（PCV2）核酸标准物质的现状和实际需求，本研究选取08TJ株PCV2为原料，通过分子生物学等技术，研制了PCV2（08TJ株）质粒标准物质。利用所建立的数字PCR方法对其进行均匀性检验和稳定性评估，并委托8家... 详细信息

针对目前我国尚无猪圆环病毒2型（PCV2）核酸标准物质的现状和实际需求，本研究选取08TJ株PCV2为原料，通过分子生物学等技术，研制了PCV2（08TJ株）质粒标准物质。利用所建立的数字PCR方法对其进行均匀性检验和稳定性评估，并委托8家实验室进行合作定值和3家单位试用。结果表明，所研制的标准物质组内和组间均无统计学差异，样品均匀性良好；在-20℃、4℃、25℃和37℃条件下可分别稳定保存12个月、120 d、14 d和9 d；反复冻融10次后仍稳定；该标准物质标准值±扩增不确定度为（1.1±0.2）×104copies/μL，与实际样品互通性良好。综上所述，本研究所研制的标准物质均匀性和稳定性良好，定值准确，对提升我国PCV2实验室检测技术水平等具有重要现实意义。

关键词：猪圆环病毒标准物质均匀性稳定性

反向遗传学在猪繁殖与呼吸综合征病毒研究中的应用

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中国兽医杂志 2014年第4期50卷 52-53页

作者：翟新验韩焘周智中国动物疫病预防控制中心OIE猪繁殖与呼吸综合征参考实验室北京朝阳100125

反向遗传学遵循“中心法则”,在获得生物体基因组全部序列的基础上,通过对靶基因进行必要的加工和修饰,再按组成顺序构建含生物体必需元件的修饰基因组,让其装配出具有生命活性的个体[1].猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）为单股正链RNA... 详细信息

反向遗传学遵循“中心法则”,在获得生物体基因组全部序列的基础上,通过对靶基因进行必要的加工和修饰,再按组成顺序构建含生物体必需元件的修饰基因组,让其装配出具有生命活性的个体[1].猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）为单股正链RNA病毒,基因组约为15 kb,有8个开放阅读框架（ORF）,ORF1位于基因组的5’末端,编码病毒非结构蛋白,ORF2～7位于基因组的3’末端,编码病毒结构蛋白,PRRSV能引起母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疫病.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传学正链RNA病毒应用开放阅读框架病毒结构蛋白母猪繁殖障碍基因组

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RNA病毒核定位蛋白功能研究进展

中国兽医杂志 2015年第7期51卷 59-61页

作者：韩焘徐琦原霖翟新验中国动物疫病预防控制中心OIE猪繁殖与呼吸综合征参考实验室北京大兴102618

真核细胞的细胞核由核膜包裹为封闭的细胞器,核酸及蛋白质等的转移通过嵌在核膜上的核孔复合体（NPS）进行。一些小分子物质,如代谢产物通过核孔复合体被动扩散进出细胞核,而大分子的运输通常由特异性的信号转导途经通过核孔复合体,核... 详细信息

真核细胞的细胞核由核膜包裹为封闭的细胞器,核酸及蛋白质等的转移通过嵌在核膜上的核孔复合体（NPS）进行。一些小分子物质,如代谢产物通过核孔复合体被动扩散进出细胞核,而大分子的运输通常由特异性的信号转导途经通过核孔复合体,核质穿梭蛋白通常存在核定位信号（NLS）或者核输出信号（NES），可以通过可溶性运输因子karyopherinβ（importinβ）家族介导高效的核质运输。

关键词：核孔复合体穿梭蛋白病毒基因组 RNA病毒被动扩散核定位信号信号转导蛋白功能核质抗病毒药物

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痘病毒载体的应用

中国生物工程杂志 2005年第12期25卷 82-85页

作者：翟新验卢胜明北京实验动物研究中心北京100012

简单介绍痘病毒载体的实际应用。其原理是通过同源重组将外源DNA插入到痘病毒基因组的非实质区域,表达的外源蛋白能正确地进行修饰,并有较高的表达效率,可刺激机体产生免疫应答。痘病毒载体作为基因工程中的重要工具,其应用极其广泛,已... 详细信息

简单介绍痘病毒载体的实际应用。其原理是通过同源重组将外源DNA插入到痘病毒基因组的非实质区域,表达的外源蛋白能正确地进行修饰,并有较高的表达效率,可刺激机体产生免疫应答。痘病毒载体作为基因工程中的重要工具,其应用极其广泛,已成功地表达了来源于植物、动物,乃至人类的许多基因。

关键词：痘病毒载体应用

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猪感染埃博拉病毒的研究进展

畜牧与兽医 2015年第9期47卷 125-128页

作者：韩焘原霖王静刘颖昳翟新验中国动物疫病预防控制中心北京102600

埃博拉病毒是一种对人类以及灵长类动物高致死性的病毒,其分为扎伊尔型、苏丹型、本迪布焦型、塔伊森林型和莱斯顿型5个型,其中2009年在猪身上发现了对人不致病的埃博拉病毒,这使得人们重新认识埃博拉病毒。本文就猪感染埃博拉-莱斯顿... 详细信息

埃博拉病毒是一种对人类以及灵长类动物高致死性的病毒,其分为扎伊尔型、苏丹型、本迪布焦型、塔伊森林型和莱斯顿型5个型,其中2009年在猪身上发现了对人不致病的埃博拉病毒,这使得人们重新认识埃博拉病毒。本文就猪感染埃博拉-莱斯顿型病毒(REBOV)的发现、流行病学以及猪感染其他亚型埃博拉病毒的情况进行综述,为进一步研究和防控猪感染埃博拉病毒提供思路。

关键词：埃博拉病毒猪埃博拉-莱斯顿型病毒

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我国原种猪场防疫技术水平现状与思考

黑龙江畜牧兽医（下半月） 2015年第11期 120-122页

作者：韩焘原霖王鸽马英翟新验中国动物疫病预防控制中心北京102600

近年来我国的养猪业有了很大发展，规模化养殖成为主要模式，但由于种种原因使得规模化猪场疫病频发。猪场防疫技术水平成为规模化饲养的关键因素，且关系到动物源食品安全。本次调查采用实地考察、问卷和深度访谈的方式进行，主要针对... 详细信息

近年来我国的养猪业有了很大发展，规模化养殖成为主要模式，但由于种种原因使得规模化猪场疫病频发。猪场防疫技术水平成为规模化饲养的关键因素，且关系到动物源食品安全。本次调查采用实地考察、问卷和深度访谈的方式进行，主要针对存栏量过万头的国家级原种猪场，实地考察各猪场的防疫设施、兽医工作者的水平、免疫档案。

关键词：原种猪场防疫技术动物源食品安全水规模化养殖规模化猪场规模化饲养兽医工作者

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核酸标准物质研究现状

中国畜牧兽医 2014年第11期41卷 89-92页

作者：原霖韩焘翟新验中国动物疫病预防控制中心 OIE猪繁殖与呼吸综合征参考实验室北京102618 中国农业大学动物医学院北京100193

以核酸扩增为基础的分子诊断技术越来越广泛的应用于医学研究、出入境检验检疫、疫病诊断等领域,核酸标准物质是保证体外诊断检测数据和结果准确一致的重要材料。作者介绍了国内外核酸标准物质的发展历史、研究现状及面临的挑战,展望了... 详细信息

以核酸扩增为基础的分子诊断技术越来越广泛的应用于医学研究、出入境检验检疫、疫病诊断等领域,核酸标准物质是保证体外诊断检测数据和结果准确一致的重要材料。作者介绍了国内外核酸标准物质的发展历史、研究现状及面临的挑战,展望了核酸标准物质未来发展方向。

关键词：核酸标准物质核酸扩增技术分子诊断

美洲型与欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp7蛋白的截短表达和鉴定

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生物工程学报 2013年第1期29卷 21-30页

作者：邱鹏宁昆蔡林刘奇汪葆玥翟新验遇秀玲倪建强田克恭中国动物疫病预防控制中心OIE猪繁殖与呼吸综合征参考实验室农业部兽医诊断中心北京100125

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp7蛋白具有较强的免疫原性,且在美洲型(NA)和欧洲型(EU)PRRSV之间免疫原性差异显著,是抗体分型检测的理想靶抗原。本研究采用原核表达系统分别表达和纯化了NA和EU PRRSV Nsp7蛋白,Western blotting分析... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp7蛋白具有较强的免疫原性,且在美洲型(NA)和欧洲型(EU)PRRSV之间免疫原性差异显著,是抗体分型检测的理想靶抗原。本研究采用原核表达系统分别表达和纯化了NA和EU PRRSV Nsp7蛋白,Western blotting分析表明重组蛋白与相应血清型抗体有较强的免疫反应,但特异性较差,与另一血清型抗体仍存在一定的免疫反应,预示两种血清型PRRSV Nsp7蛋白存在免疫交叉反应抗原表位,全长表达不能用于分型诊断。利用生物学软件分析NA和EU PRRSV Nsp7的相似抗原表位,采用融合PCR缺失其编码序列后,经表达纯化获得NA-Nsp7和EU-Nsp7两种截短蛋白,蛋白大小约为43 kDa,Western blotting分析表明NA-Nsp7和EU-Nsp7可分别与相应血清型抗体发生特异性反应,且无免疫交叉反应,为NA和EU PRRSV分型抗体检测试剂的研制奠定了基础。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 Nsp7蛋白融合PCR 分型诊断

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SPF鸡的质量保障体系

中国家禽 2008年第22期30卷 70-72页

作者：翟新验卢胜明北京梅里亚维通实验动物技术有限公司北京100012

SPF（Specific Pathogen Free）鸡是农业、生物医学、生物制品研究及生产的重要原材料，其质量直接关系到上述诸项研究成果及产品的可靠性和准确性。1SPF鸡的特性和应用1．1SPF鸡的特性SPF鸡是指生长在屏障系统或隔离器中，无国内外（... 详细信息

SPF（Specific Pathogen Free）鸡是农业、生物医学、生物制品研究及生产的重要原材料，其质量直接关系到上述诸项研究成果及产品的可靠性和准确性。1SPF鸡的特性和应用1．1SPF鸡的特性SPF鸡是指生长在屏障系统或隔离器中，无国内外（尤其是国内）流行的鸡主要传染性病原，具有良好的生长和繁殖性能的鸡群。由于SPF鸡与普通鸡生活的环境不同，决定了其本身在微生物控制方面的特殊性：①无主要的鸡传染病，如：

关键词：质量保障体系 SPF鸡传染性病原微生物控制生物医学生物制品研究成果屏障系统