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中草药添加剂对羊生长性能、血常规及其免疫功能影响

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黑龙江畜牧兽医 2013年第7期 115-118页

作者：李春燕汤德元甘振磊陶玉顺曾智勇贵州大学动物科学学院贵阳550025

为了研究中草药添加剂对羊增重及免疫功能的影响,试验先通过合理筛选中草药饲料添加剂配方,再对中草药饲料添加剂与基础日粮的最佳比例进行探究。探究分两步进行,预试验和正式试验。预试验随机选择健康断奶羊7只,分别用中草药添加剂含量... 详细信息

为了研究中草药添加剂对羊增重及免疫功能的影响,试验先通过合理筛选中草药饲料添加剂配方,再对中草药饲料添加剂与基础日粮的最佳比例进行探究。探究分两步进行,预试验和正式试验。预试验随机选择健康断奶羊7只,分别用中草药添加剂含量为1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%的饲料饲喂,每种比例的配方各喂10 d,然后每10 d称重1次。正式试验第一阶段选择健康3月龄羊15只,随机分为1个对照组和4个试验组,每组3只,试验组分别添加2%、3%、4%、5%的中草药添加剂,在相同饲养条件下饲喂21 d。正式试验第二阶段选健康、体重相近的3月龄左右羊9只,随机分为1个对照组和2个试验组,每组各3只,试验组分别添加4%、5%的中草药配方,在相同饲养条件下饲喂34 d。定时称量羊群的体重,采集血样测定其血常规和免疫球蛋白含量,从而评价中草药添加剂对羊增重及免疫功能的影响。结果表明:适宜比例的中草药添加剂对羊增重有促进作用,其最佳配比为试验2组(中草药添加剂与基础日粮的配比为5%);对白细胞类大部分指标有促升高作用,红细胞类大部分指标也有促升高作用,血小板则有促降低作用;同时中草药添加剂能增强机体的免疫功能,作用效果与中草药添加剂的浓度呈正相关。

关键词：中草药添加剂羊增重血常规免疫功能

猪圆环病毒贵州株ORF2基因的克隆及表达载体的构建

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黑龙江畜牧兽医 2013年第5期 95-98页

作者：甘振磊汤德元李春燕曾智勇王凤刘建郝飞贵州大学动物科学学院贵阳550025

为了研究猪圆环病毒(PCV)的分子生物学诊断技术和基因工程疫苗,试验根据GenBank公布的PCV ORF2基因的核苷酸序列设计1对特异性引物,从贵州省某猪场的疑似猪圆环病毒组织病料中提取DNA,采用PCR技术扩增PCV ORF2基因,克隆到pMD19-T载体并... 详细信息

为了研究猪圆环病毒(PCV)的分子生物学诊断技术和基因工程疫苗,试验根据GenBank公布的PCV ORF2基因的核苷酸序列设计1对特异性引物,从贵州省某猪场的疑似猪圆环病毒组织病料中提取DNA,采用PCR技术扩增PCV ORF2基因,克隆到pMD19-T载体并测序,将构建好的T载体双酶切,回收目的片段与pET-32a(+)载体及pcDNA3.1(+)载体连接并转化入TOP10中构建原核、真核表达载体,并将ORF2基因插到重组质粒pcDNA3.1-IL-2上,构建以IL-2融合表达真核载体。结果表明:克隆的PCV ORF2基因全长为719 bp,ORF为702 bp,编码233个氨基酸,与Gen-Bank公布的PCV ORF2基因的核苷酸同源性为98.4%。说明试验成功克隆了猪圆环病毒贵州地方毒株ORF2基因,并成功构建了PCV ORF2原核、真核表达载体及以IL-2融合表达真核载体。

关键词：猪圆环病毒 ORF2基因原核表达载体真核表达载体构建

某规模化猪场猪伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型混合感染的诊断

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黑龙江畜牧兽医 2013年第10期 95-97页

作者：刘建汤德元曾智勇罗险峰李春燕甘振磊王凤郝飞贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州省动物疫病预防控制中心贵阳550008

为了了解贵州省某规模化猪场的感染状况,试验采用ELISA方法对该猪场送检的100份血液样品进行了猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)血清学检测,并对该猪场进行了流行病学调查和临床症状观察,对送检的1头发病仔猪进行了病理学剖检,... 详细信息

为了了解贵州省某规模化猪场的感染状况,试验采用ELISA方法对该猪场送检的100份血液样品进行了猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)血清学检测,并对该猪场进行了流行病学调查和临床症状观察,对送检的1头发病仔猪进行了病理学剖检,最后采用复合PCR技术进行确诊。结果表明:采用ELISA方法检测猪伪狂犬病和猪圆环病毒病的抗体阳性率分别为52%和48%;通过流行病学调查、临床症状观察和病理学剖检,初步判定该猪场感染PRV和PCV-2;采用复合PCR检测确诊该猪场存在PRV和PCV-2混合感染。

关键词：猪伪狂犬病猪圆环病毒病 ELISA 复合PCR 混合感染

某猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒和副猪嗜血杆菌混合感染的诊治

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中国兽医杂志 2013年第2期49卷 46-47页

作者：刘建汤德元曾智勇罗险峰李春燕甘振磊王凤郝飞贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物疫病预防控制中心贵州贵阳550008

笔者于2011年2月对发生在贵州省某猪场发生的猪繁殖与呼吸综合征病毒和副猪嗜血杆菌混合感染的疫情进行了诊治，结果报告如下。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒副猪嗜血杆菌混合感染诊治猪场贵州省疫情

贵州省某猪场PRRSV,PCV-2和PRV混合感染的快速诊断

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黑龙江畜牧兽医 2013年第11期 108-110页

作者：王洪光汤德元罗险峰曾智勇甘振磊刘建郝飞贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州省动物疫病预防控制中心贵阳550008

为快速诊断出贵州某猪场饲养猪发病的原因,试验对送检样品进行了流行病学调查、临床症状观察、解剖病理观察及血清学检查,初步诊断该猪场发病猪为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)或猪伪狂犬病毒(PRV)感染。为确诊... 详细信息

为快速诊断出贵州某猪场饲养猪发病的原因,试验对送检样品进行了流行病学调查、临床症状观察、解剖病理观察及血清学检查,初步诊断该猪场发病猪为猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)或猪伪狂犬病毒(PRV)感染。为确诊病因,对病料进行了PCR/RT-PCR检测。结果表明:该猪场发病猪为PRRSV、PCV-2和PRV的混合感染。说明该方法能确诊这3种病毒感染。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪圆环病毒2型猪伪狂犬病毒混合感染快速诊断

规模化猪场主要病毒性疫病的净化及其效果的检测

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黑龙江畜牧兽医 2013年第7期 85-87页

作者：郝飞汤德元罗险峰李春燕曾智勇甘振磊王凤刘建贵州大学动物科学学院贵阳550025 贵州省动物疫病预防控制中心贵阳550008

为了净化规模化猪场的主要病毒性疫病并监测其达到的效果,试验对贵州省已采取相关疫病净化措施的某规模化猪场送检的370份血清进行7种主要病毒性疫病的ELISA抗体水平监测,再结合PCR分子诊断技术进行确诊。结果表明:猪繁殖与呼吸综合征病... 详细信息

为了净化规模化猪场的主要病毒性疫病并监测其达到的效果,试验对贵州省已采取相关疫病净化措施的某规模化猪场送检的370份血清进行7种主要病毒性疫病的ELISA抗体水平监测,再结合PCR分子诊断技术进行确诊。结果表明:猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(CSFV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪伪狂犬病毒(PRV)的抗体阳性率分别为73.0%、80.3%、84.3%、86.2%、90.5%、94.6%、96.8%,达到国家相关标准;PRV gE基因缺失ELISA结果和PCR核酸监测结果均为PRV病原阳性。说明此规模化猪场存在PRV野毒感染,建议采取相应的综合防制措施对其净化。

关键词：规模化猪场主要病毒性疫病净化效果监测

我国规模化猪场主要病毒性疫病的综合防控对策

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畜牧与兽医 2012年第10期44卷 86-89页

作者：郝飞张华汤德元罗险峰马萍李春燕刘霞甘振磊王凤刘建贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物疫病预防控制中心贵州贵阳550008

猪病是制约规模化养猪业发展的重要因素之一,尤其是规模化猪场猪的病毒性疫病给养猪业带来了极大的损失。规模化猪场主要病毒性疫病有猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒感染、猪伪狂犬病、猪口蹄疫、猪细小病毒病、猪流感、流行性... 详细信息

猪病是制约规模化养猪业发展的重要因素之一,尤其是规模化猪场猪的病毒性疫病给养猪业带来了极大的损失。规模化猪场主要病毒性疫病有猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒感染、猪伪狂犬病、猪口蹄疫、猪细小病毒病、猪流感、流行性乙型脑炎、猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻等。本文通过分析当前规模化猪场存在的主要病毒性疫病,结合规模化猪场的实际情况,提出了包括规模化猪场的选址布局、种源净化、防疫组织和制度、免疫接种和免疫监测、严格的消毒制度、加强猪群饲养管理并建立猪场疫病诊断和预警系统等综合性措施,为有效防控规模化猪场病毒性疫病发生提供参考。

关键词：规模化猪场主要病毒性疫病综合防控对策

1株猪流行性腹泻病毒S基因的克隆及序列分析

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中国兽医学报 2017年第12期37卷 2294-2299页

作者：周如月刘琪甘振磊贾爱卿王贵平广东海大畜牧兽医研究院广东广州511400

本研究对分离的1株猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S基因进行克隆和测序,并进行生物信息学分析。通过ORF3序列分析发现,未有核苷酸的缺失,推测为PEDV野毒株。S基因分析结果表明,该毒株(以GD/JMEP表示)与经典的CV777毒株亲缘关系较远,核苷酸同... 详细信息

本研究对分离的1株猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S基因进行克隆和测序,并进行生物信息学分析。通过ORF3序列分析发现,未有核苷酸的缺失,推测为PEDV野毒株。S基因分析结果表明,该毒株(以GD/JMEP表示)与经典的CV777毒株亲缘关系较远,核苷酸同源性为93.2%,存在多个氨基酸的缺失、插入或者突变;与近几年广东流行的PEDV毒株处于同一个群,亲缘关系较近;相比于经典传统毒株,GD/JMEP株在S基因的几个位点存在核苷酸的缺失或者插入;与目前流行毒株比较,在S基因的406位点存在新的突变。通过氨基酸序列比对分析,GD/JMEP株发生了6个新的氨基酸位点突变,表明本试验检测的GD/JMEP株为目前广东PEDV流行毒株。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S基因序列分析遗传变异

猪圆环病毒Ⅱ型贵州分离株ORF2基因表达的试验

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中国兽医杂志 2015年第9期51卷 43-46页

作者：韦冠东甘振磊马萍汤德元王洪光唐宇张元鑫曾智勇李达贵州大学动物科学学院贵州贵阳550025 贵州省动物疫病预防控制中心贵州贵阳550008

通过采集疑似猪圆环病毒感染的病料,分离到1株猪圆环病毒2型贵州株,并对其进行了鉴定。原核表达试验结果表明,PCV-2贵州株的ORF2基因可在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达的目的蛋白约为40.0 k Da,且复性蛋白具有一定免疫原性。将真核表达... 详细信息

通过采集疑似猪圆环病毒感染的病料,分离到1株猪圆环病毒2型贵州株,并对其进行了鉴定。原核表达试验结果表明,PCV-2贵州株的ORF2基因可在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达的目的蛋白约为40.0 k Da,且复性蛋白具有一定免疫原性。将真核表达质粒分别转染PK-15细胞,以掌握ORF2基因和白细胞介素-2(IL-2)基因体外表达情况;将重组质粒、空载体及生理盐水分别免疫BALB/c小鼠,以监测血清中特异性抗体及T淋巴细胞亚群含量,从而探讨猪圆环病毒Ⅱ型贵州分离株ORF2基因真核表达效果及长白猪细胞因子IL-2对PCV2 ORF2免疫原性的影响,结果表明,pc DNA3.1-ORF2和pc DNA3.1-ORF2-IL-2在PK-15细胞中获得了较高的表达,IL-2可明显增强PCV-2 DNA免疫效果。

关键词：猪圆环病毒2型 ORF2基因 IL-2 表达重组质粒