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钛酸钡压电涂层多孔钛合金材料对巨噬细胞增殖及其破骨分化的影响

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医学研究与战创伤救治 2024年第3期37卷 238-245页

作者：陈瑜欧阳飞吴昊王陵石磊雷伟空军军医大学第一附属医院骨科西安710032

目的探索钛酸钡压电涂层钛合金材料对巨噬细胞增殖及破骨分化的影响。方法分别以钛酸钡涂层多孔钛合金(PTB)和单纯多孔钛合金(PT)为实验组和对照组,通过micro-CT、SEM、EDS等观察了解钛酸钡涂层多孔钛合金材料的表面特征;通过循环负载... 详细信息

目的探索钛酸钡压电涂层钛合金材料对巨噬细胞增殖及破骨分化的影响。方法分别以钛酸钡涂层多孔钛合金(PTB)和单纯多孔钛合金(PT)为实验组和对照组,通过micro-CT、SEM、EDS等观察了解钛酸钡涂层多孔钛合金材料的表面特征;通过循环负载装置制备材料提取液,在动态负载条件下进行RAW264.7细胞-材料共培养,采用SEM、CCK-8、AM-PI染色观察细胞生长状态及增殖活性;利用RANKL对与钛酸钡压电涂层多孔钛合金材料动态负载共培养后的细胞进行破骨分化诱导及TRAP染色,观察分析钛酸钡涂层多孔钛合金压电材料对破骨分化的影响。结果micro-CT显示涂层对总体结构影响不大,SEM显示表面钛酸钡涂层致密、形态规整、结合紧密,EDS显示钛酸钡涂层元素组成合理、分布均匀,材料压电系数(d33)测量显示PTB组压电系数接近天然骨。CCK-8显示两组材料动态提取液细胞毒性等级为Ⅰ级,SEM显示两组表面细胞生长状态良好,Calcein-AM/PI染色显示PTB组细胞表现出更强的增殖活力,流式凋亡显示两组细胞凋亡率与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05),破骨诱导结果显示PTB组细胞总数较多、破骨细胞计数和占比均下降。结论钛酸钡涂层多孔钛合金材料,可在负载条件下形成局部微电场,促进细胞增殖并抑制破骨分化。

关键词： 3D打印钛合金钛酸钡 raw264.7细胞破骨诱导

希望区域法在临床试验适应性设计中的准确性和稳健性研究

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中国卫生统计 2024年第3期41卷 322-330,338页

作者：陈垂雄王陵王文文黄曼丽夏结来李晨中国人民解放军空军军医大学军事预防医学系军队卫生统计学教研室 710032

目的评估希望区域法应用于适应性设计样本量再估计的准确性及稳健性,为该方法的适用条件提供理论参考。方法以二分类资料为例,以包含期中分析的两阶段适应性试验为框架,采用Monte Carlo方法,在相同的组间响应率率差、同合并率等参数的... 详细信息

目的评估希望区域法应用于适应性设计样本量再估计的准确性及稳健性,为该方法的适用条件提供理论参考。方法以二分类资料为例,以包含期中分析的两阶段适应性试验为框架,采用Monte Carlo方法,在相同的组间响应率率差、同合并率等参数的模拟场景下,比较固定样本量设计、成组序贯设计和希望区域法进行样本量再估计的准确性和稳健性。结果模拟研究显示希望区域法在期中检验效能落入希望区域内进行适应性样本量调整时,Ⅰ类错误与同场景下固定设计和成组序贯设计近似。初始估计样本量被低估时,希望区域法比固定设计的检验效能平均提高约5%,比成组序贯设计提高约8.8%,样本量比固定设计多耗费0.18倍,比成组序贯设计多0.38倍。高估初始估计样本量时,三种设计的检验效能相差仅在1%左右,但希望区域法比固定设计多消耗7.5%、比成组序贯设计多耗费48%的样本量。结论相比于固定样本量及成组序贯设计,希望区域法对于试验的整体检验效能提高不大,其平均样本量均大于相同设定场景下的固定设计及成组序贯设计,使用该设计方法时应谨慎权衡试验收益。

关键词：希望区域法样本量再估计条件检验效能 Ⅰ类错误适应性设计

泻肺利水中药心康方提高受磷蛋白磷酸化水平治疗心力衰竭的作用机制

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中药新药与临床药理 2024年第10期35卷 1512-1519页

作者：张钰冰王陵军王婷许朴丽唐璐仪吕洪雪广州中医药大学东莞医院广东东莞523127 中医证候全国重点实验室广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广东广州510405 广州中医药大学岭南医学研究中心广东广州510405

目的探讨泻肺利水中药心康方(葶苈子、杏仁、茯苓、黄芪、陈皮、三棱)调控受磷蛋白(PLN)磷酸化治疗心力衰竭的作用机制。方法将48只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、诺欣妥组(25 mg·kg^(-1))及心康方低、中、高剂量组(0.455、0... 详细信息

目的探讨泻肺利水中药心康方(葶苈子、杏仁、茯苓、黄芪、陈皮、三棱)调控受磷蛋白(PLN)磷酸化治疗心力衰竭的作用机制。方法将48只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、诺欣妥组(25 mg·kg^(-1))及心康方低、中、高剂量组(0.455、0.91、1.82 g·kg^(-1)),每组8只。采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制心力衰竭小鼠模型。模型复制成功后,按照上述剂量灌胃给药,每天1次,持续4周。采用超声心动图检测小鼠心功能:左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD);HE染色法观察小鼠心脏组织病理变化;qRT-PCR法检测心脏组织中BNP m RNA表达水平;Western Blot、Jess法检测心脏组织中PLN、p-Thr17-PLN、p-Ser16-PLN、肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)、蛋白激酶A(PKA)、p-PKA、钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、p-CaMKⅡ蛋白表达水平,计算SERCA2a/PLN蛋白表达比值;定磷法检测心脏组织中SERCA2a的活性。结果与假手术组比较,模型组小鼠的LVEF、LVFS显著降低(P<0.01),LVEDD、LVESD显著升高(P<0.01);HE染色显示心肌纤维断裂、排列紊乱,伴有炎性细胞浸润;心脏组织中BNP mRNA表达水平显著升高(P<0.01);心脏组织中p-Thr17-PLN、p-Ser16-PLN、p-PKA蛋白表达水平均显著下降(P<0.01),p-CaMKⅡ蛋白表达水平显著升高(P<0.01),SERCA2a/PLN蛋白表达比值及SERCA2a活性显著降低(P<0.01)。与模型组比较,心康方中、高剂量组小鼠的LVEF、LVFS显著升高(P<0.01),LVEDD、LVESD显著降低(P<0.01);HE染色显示心脏组织病理损伤明显改善;心脏组织中BNP mRNA表达水平显著下降(P<0.01);心脏组织中p-Thr17-PLN、p-Ser16-PLN、p-PKA蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),p-CaMKⅡ蛋白表达水平明显降低(P<0.05),SERCA2a/PLN蛋白表达比值及SERCA2a活性显著升高(P<0.01)。结论心康方可以有效改善心力衰竭小鼠的心功能,可能与其提高心脏组织受磷蛋白磷酸化水平有关。

关键词：心康方心力衰竭受磷蛋白磷酸化肌浆网钙ATP酶2a 小鼠

暖心康通过“代谢-炎症”网络调控巨噬细胞极化对心肌梗死后小鼠心室重构的影响

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中药新药与临床药理 2024年第2期35卷 159-167页

作者：林祉均陈梓欣江佳林董鑫关卓骥王陵军广州中医药大学第一附属医院/中医证候全国重点实验室广东广州510405

目的探究暖心康(红参、毛冬青)通过“代谢-炎症”网络调控巨噬细胞极化改善心肌梗死后小鼠心室重构的作用机制。方法(1)将30只C57BL/6J雄性小鼠随机分为3组:假手术组、模型组、暖心康组(1.65 g·kg^(-1)),每组10只;采用左前降支冠状动... 详细信息

目的探究暖心康(红参、毛冬青)通过“代谢-炎症”网络调控巨噬细胞极化改善心肌梗死后小鼠心室重构的作用机制。方法(1)将30只C57BL/6J雄性小鼠随机分为3组:假手术组、模型组、暖心康组(1.65 g·kg^(-1)),每组10只;采用左前降支冠状动脉结扎术复制心肌梗死小鼠模型;灌胃给药,每日1次,连续4周。采用Masson染色法检测心肌组织胶原沉积情况;超声检测小鼠心功能:左室射血分数(LVEF)、收缩末期左室前壁厚度(LVAWS)及舒张末期左室前壁厚度(LVAWD);流式细胞术检测小鼠心脏巨噬细胞分布情况;qPCR法检测心脏组织乳酸脱氢酶A(LDHA)、肉碱棕榈酰转移酶1(CPT-1)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、异柠檬酸脱氢酶(IDH)、琥珀酸脱氢酶(SDHa)mRNA表达。(2)按照1.15 g·kg^(-1)剂量给予大鼠暖心康混悬液灌胃,每日2次,持续5 d,制备暖心康含药血清。采用脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞构建促炎型巨噬细胞模型。细胞分组:空白血清对照组(含5%空白血清+5%胎牛血清的培养基)、暖心康含药血清组(含5%暖心康含药血清+5%胎牛血清的培养基)、脂多糖组(含5%空白血清+5%胎牛血清的培养基+200μg·mL^(-1)脂多糖)、暖心康含药血清+脂多糖组(含5%暖心康含药血清+5%胎牛血清的培养基+200μg·mL^(-1)脂多糖),干预16 h。采用糖酵解压力测试实验检测RAW 264.7细胞糖酵解水平;qPCR法检测RAW 264.7细胞线粒体丙酮酸转运载体(MPC1)mRNA表达;MitoSox Red荧光染色法检测RAW 264.7细胞线粒体氧化应激损伤程度。结果(1)与假手术组比较,模型组小鼠的心脏胶原纤维蓝染面积明显增加,并伴有室壁变薄,左心室腔增大;LVEF、LVAWS、LVAWD等心功能指标水平均显著降低(P0.05),而脂多糖组巨噬细胞的糖酵解水平、ROS水平均显著升高(P<0.01),MPC1 mRNA表达显著下调(P<0.001)。与脂多糖组比较,暖心康含药血清+脂多糖组的巨噬细胞糖酵解水平、ROS水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),MPC1 mRNA表达显著上调(P<0.001)。结论暖心康能够减轻小鼠心肌梗死后的心肌纤维化及心室重构,改善心功能,其作用机制可能与下调心脏组织LDHA mRNA表达,上调GLUT4 mRNA表达,改善心肌梗死后心脏葡萄糖摄取能力,抑制促炎型巨噬细胞糖酵解,增加SDHa及IDH的表达以减轻琥珀酸与柠檬酸堆积,减少活性氧(ROS)生成,从而减少促炎型巨噬细胞过度极化有关。

关键词：暖心康心肌梗死心室重构心肌纤维化巨噬细胞极化能量代谢炎症反应氧化应激小鼠 RAW 264.7细胞

暖心康抑制内皮间充质转化减轻阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征合并动脉粥样硬化小鼠斑块形成

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中药新药与临床药理 2024年第6期35卷 789-797页

作者：王明炀王陵军梁碧容陈梓欣曹艳红张钰冰李淑贤刘景广州中医药大学第一附属医院/广州中医药大学第一临床医学院/中医证候全国重点实验室广东广州510405 广州中医药大学岭南医学研究中心/广东省普通高校慢性心力衰竭中医药防治重点实验室/广州市慢性心力衰竭中医药防治重点实验室广东广州510405 广东省中医临床研究院广东广州510405

目的探讨暖心康(毛冬青、红参)通过抑制内皮间充质转化(EndMT)减轻阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并动脉粥样硬化(AS)小鼠斑块形成的作用及机制。方法将雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为6组:对照组、模型组、阿托伐他汀组(2.6 mg·... 详细信息

目的探讨暖心康(毛冬青、红参)通过抑制内皮间充质转化(EndMT)减轻阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并动脉粥样硬化(AS)小鼠斑块形成的作用及机制。方法将雄性ApoE^(-/-)小鼠随机分为6组:对照组、模型组、阿托伐他汀组(2.6 mg·kg^(-1))以及暖心康低、中、高剂量组(生药量3.5、7.0、14.0 g·kg^(-1)),每组8只。采用将小鼠长期在睡眠期间暴露于慢性间歇性缺氧(CIH)环境,联合高脂饲料喂养,复制OSAHS合并AS小鼠模型。采用油红O染色法观察小鼠主动脉内壁斑块形成情况;Masson三色染色法评估小鼠主动脉根部粥样斑块的胶原含量;免疫荧光法检测主动脉斑块中内皮细胞标志物CD31及EndMT标志物Vimentin的表达情况;ELISA法测定血脂水平;qPCR法检测主动脉组织中EndMT标志物α-SMA、Cdh2 mRNA表达水平。结果与对照组比较,模型组小鼠的主动脉粥样斑块面积显著增加(P<0.01),主动脉根部斑块胶原沉积面积显著增加(P<0.01);斑块处CD31阳性表达细胞数量显著减少(P<0.01),Vimentin阳性表达细胞数量显著增多(P<0.01);血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低(P<0.01);主动脉组织中α-SMA、Cdh2 mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,暖心康各给药组的主动脉粥样斑块面积均显著减少(P<0.05,P<0.01),主动脉根部粥样斑块的胶原沉积面积均明显缩小(P<0.05,P<0.01);暖心康高剂量组小鼠斑块处CD31阳性表达细胞数量明显增加(P<0.05),暖心康中、高剂量组小鼠斑块处Vimentin阳性表达细胞数量明显减少(P<0.05,P<0.01);暖心康高剂量组小鼠的血清TG水平显著降低(P<0.01),暖心康各给药组小鼠的血清T-CHO、LDL-C水平显著降低(P<0.05,P<0.01),暖心康中、高剂量组小鼠的血清HDL-C水平显著升高(P<0.01);暖心康各给药组小鼠主动脉组织中α-SMA、Cdh2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论暖心康可以有效减轻OSAHS合并动脉粥样硬化小鼠的斑块形成,可能与其抑制EndMT,减少胶原纤维形成有关。

关键词：暖心康内皮间充质转化阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征动脉粥样硬化小鼠

桂枝通络片通过抑制中性粒细胞胞外诱捕网缓解动脉粥样硬化

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医药导报 2024年

作者：吕秋云杨林沈东黄小靖潘显梅钟森杰陈洁王陵军冼绍祥徐文华方红城广州中医药大学深圳市中西医结合医院研究生培养基地深圳市中西结合医院心血管科广州中医药大学第一附属医院心血管科中医证候全国重点实验室深圳市中西结合医院治未病科

目的探讨桂枝通络片(GZTLP)通过调控中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)改善APOE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的作用机制。方法将24只8周龄APOE基因敲除小鼠造模后随机分为4组：GZTLP大剂量组、小剂量组、模型对照组、正常对照组，每组各6只。GZ... 详细信息

目的探讨桂枝通络片(GZTLP)通过调控中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)改善APOE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的作用机制。方法将24只8周龄APOE基因敲除小鼠造模后随机分为4组：GZTLP大剂量组、小剂量组、模型对照组、正常对照组，每组各6只。GZTLP大剂量组、小剂量组分别给予GZTLP 1.87mg·g-1、0.47mg·g-1灌胃，正常对照组和模型对照组灌胃给予等体积0.9%氯化钠溶液，灌胃6周，采用大体油红O染色整体观察主动脉内脂质斑块沉积情况；油红O染色观察主动脉根部脂质沉积；HE染色观察主动脉根部脂质斑块病理形态学改变；酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠外周血白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平；采用免疫荧光法检测主动脉弓部斑块部位淋巴细胞抗原6G(Ly6G)、中性粒细胞外诱捕网形成标志基因髓过氧化物酶(MPO)和瓜氨酸化组蛋白H3(Cit-H3)的表达及Ly6G、MPO和Cit-H3的共定位情况。结果与正常对照组相比，模型对照组小鼠主动脉出现严重的脂质斑块沉积，形态学损伤，大量炎症细胞浸润，血清炎症因子IL-1β和TNF-α的含量增多，主动脉组织中Ly6G、Cit-H3和MPO的蛋白表达明显增多；与模型对照组相比，GZTLP组小鼠主动脉内脂质斑块沉积斑块减少，主动脉细胞排列较规整，炎症细胞浸润情况改善，血清炎症因子IL-1β和TNF-α的含量显著减少(P＜0.05)，主动脉组织中Ly6G、MPO和Cit-H3发生共定位及蛋白表达明显减少(P＜0.01)。结论桂枝通络片能改善动脉粥样硬化，其机制可能与抑制中性粒细胞胞外诱捕网有关。

关键词：桂枝通络片动脉粥样硬化中性粒细胞中性粒细胞外诱捕网

基于“三因四证”调整免疫炎症状态的中医药治疗心血管疾病研究述评

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环球中医药 2024年第7期17卷 1261-1266页

作者：冼绍祥刘思琳陈梓欣王陵军广州中医药大学第一附属医院岭南心血管病研究所 510405 广州中医药大学第一附属医院岭南医学研究中心 510405

动脉粥样硬化是心血管疾病发生发展的重要病理基础,物质代谢异常和免疫炎症反应是其发生发展的重要原因,由此导致的免疫炎症状态贯穿其病理始终。本文以“病”(心力衰竭)为切入点,结合心脉相关理论,总结气、血、水“三因”病机与免疫炎... 详细信息

动脉粥样硬化是心血管疾病发生发展的重要病理基础,物质代谢异常和免疫炎症反应是其发生发展的重要原因,由此导致的免疫炎症状态贯穿其病理始终。本文以“病”(心力衰竭)为切入点,结合心脉相关理论,总结气、血、水“三因”病机与免疫炎症状态的相关性。心气、心血、心水异常可出现在心力衰竭的不同阶段,持续的免疫炎症状态贯穿心力衰竭始终。同时,岭南地区常年湿热的气候环境因素及人群气虚、阳虚和湿热体质与免疫炎症状态发生密切相关,“积湿生热”及“湿自热生”的湿热相互转化机制使得岭南地区心血管疾病的病机以气虚痰浊夹瘀多见。在此基础上,痰、瘀、湿、热等伏匿机体的多种病理产物在疾病发展过程中累积,久酿而成内生伏毒,由此总结性归纳将痰、瘀、湿、毒“四证”与免疫炎症状态紧密联系。本文用“病—证—治”关联视角探讨中医药防治心血管疾病,融合治未病思想,从理论到应用,从基础到临床,以期为进一步制定和实施中医药诊疗方案提供理论指导。

关键词：免疫炎症状态心血管疾病动脉粥样硬化三因四证气血水痰瘀毒湿调态治未病

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基于期中条件检验效能的希望区域法在临床试验非盲样本量重估中的应用

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空军军医大学学报 2024年

作者：陈垂雄王文文黄曼丽黄雅茹王陵夏结来李晨空军军医大学军事预防医学系军队卫生统计学教研室特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室

目的使用希望区域法在适应性设计临床试验中进行非盲样本量重估，通过适应性调整样本量的方式提高临床试验整体研究效率。方法以两均数比较的优效性检验为例，在两阶段适应性设计下使用希望区域法，以固定样本量及成组序贯设计作为方... 详细信息

目的使用希望区域法在适应性设计临床试验中进行非盲样本量重估，通过适应性调整样本量的方式提高临床试验整体研究效率。方法以两均数比较的优效性检验为例，在两阶段适应性设计下使用希望区域法，以固定样本量及成组序贯设计作为方法学参照，通过设定不同的疗效差异初始估计值及真实值，比较希望区域法的Ⅰ类错误、检验效能和平均样本量，并给出应用案例。结果三种试验设计的Ⅰ类错误近似，希望区域法较成组序贯设计及固定样本量设计能提高试验整体的检验效能，但其估计的样本量较大，适用于高估初始差异值的场景，当正确估计或低估初始差异时，提高的检验效能与因有效提前终止试验的成组序贯设计近似，而样本量的估计较成组序贯设计更多。结论希望区域法能有效提高初始估计样本量过低时临床试验的检验效能，避免因试验检验效能不足导致无法检测出药物的真实疗效差异。若有比较可靠的前期数据能够较准确地估计初始差异值，则不推荐在适应性设计临床试验中使用希望区域法。

关键词：希望区域法条件检验效能样本量重估期中分析适应性设计

基于免疫炎症探析心血管疾病中医证候特点及临床意义

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环球中医药 2024年第7期17卷 1274-1280页

作者：何佳玲余润佳关卓骥单伟王陵军冼绍祥广州中医药大学第一临床医学院 510405 广州中医药大学第一附属医院岭南心血管病研究所广州中医药大学第一附属医院岭南医学研究中心广东省中医临床研究院

免疫炎症是心血管疾病的基本病理机制,本质是由于机体炎症免疫相关细胞受内外刺激因素作用下所表现出的异常系统反应,包括免疫紊乱与过度炎症反应。中医认为,心血管疾病根本病机为本虚标实,本虚以气虚、阳虚为主,标实包括气滞、血瘀、... 详细信息

免疫炎症是心血管疾病的基本病理机制,本质是由于机体炎症免疫相关细胞受内外刺激因素作用下所表现出的异常系统反应,包括免疫紊乱与过度炎症反应。中医认为,心血管疾病根本病机为本虚标实,本虚以气虚、阳虚为主,标实包括气滞、血瘀、痰湿、热毒等。免疫功能与正气密切相关,机体免疫功能紊乱,正气虚弱,不可抵御邪气,致使气虚、气滞,进而阳虚、火郁。免疫紊乱进一步加剧炎症反应,火热之邪渐盛,蓄积成毒,毒损心脉,造成局部组织变性坏死,类似变质性炎症;气阳亏虚,形成水湿痰饮之邪,积久化浊,阻碍津液代谢,水液不循常道,大量外渗,类似渗出性炎症;正虚日久成瘀,痰瘀互结,结久成积,阴盛成形,心肌纤维化进展加快,类似增生性炎症。因此,益气扶正、疏肝理气、清热解毒、化痰除湿、活血化瘀等中医治法可以有效调节心血管疾病炎症免疫反应。本文从中医角度集中探索免疫炎症与心血管疾病证候的内在联系,以期为临床治疗心血管疾病提供新的治疗思路。

关键词：免疫炎症心血管疾病中医证候相关性机制