检索结果-南通市图书馆

不同细菌来源的3-酮脂酰ACP合成酶Ⅲ生物学特性分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物化学与生物物理进展 2016年第10期43卷 1004-1012页

作者：余永红马建荣苗馨予王海洪广东食品药品职业学院广州510520 华南农业大学生命科学学院/广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室广州510642

3-酮脂酰ACP合成酶Ⅲ（FabH）是催化细菌脂肪酸合成的起始反应.研究表明,革兰氏阳性细菌FabH对支链脂酰-CoA前体的选择性是其合成支链脂肪酸的关键.但部分革兰氏阴性细菌也产生一定量的支链脂肪酸,其合成机制还不清楚.为此,本研究选取... 详细信息

3-酮脂酰ACP合成酶Ⅲ（FabH）是催化细菌脂肪酸合成的起始反应.研究表明,革兰氏阳性细菌FabH对支链脂酰-CoA前体的选择性是其合成支链脂肪酸的关键.但部分革兰氏阴性细菌也产生一定量的支链脂肪酸,其合成机制还不清楚.为此,本研究选取了革兰氏阳性细菌枯草芽孢杆菌BsfabH1和BsfabH2、金黄色葡萄球菌SafabH、天蓝色链霉菌ScofabH、革兰氏阴性细菌茄科雷尔氏菌RsfabH、大肠杆菌EcfabH,以及产支链脂肪酸的水稻黄单胞菌XoofabH,共7种fabH同源基因进行生物学特性分析.异体遗传互补茄科雷尔氏菌fabH突变株RsmH,表明这7个基因编码蛋白都具有3-酮脂酰ACP合成酶Ⅲ活性.脂肪酸组成分析显示,4个革兰氏阳性菌fabH和XoofabH互补株类似,均能产生支链脂肪酸,而EcfabH和RsfabH互补株不产生支链脂肪酸,说明XooFabH不同于EcFabH,参与支链脂肪酸合成.体外酶学分析表明,XooFabH与4种革兰氏阳性菌FabH类似,对支链脂酰-CoA有较高的选择,但EcFabH和RsFabH对支链前体活性低.与革兰氏阳性细菌FabH不同,XooFabH对中短链长（C4-C10）脂酰-CoA也具有较高的活性.综合以上结果,不同细菌来源FabH的生物学特性差异明显,FabH能利用支链前体是细菌合成支链脂肪酸的关键因素.

关键词：脂肪酸合成 3-酮脂酰ACP合成酶Ⅲ 支链脂肪酸

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

木聚糖生物转化药物、能源和化工中间体

现代化工 2011年第6期31卷 23-27,29页

作者：王海洪孙晓锋吴耀国西北工业大学应用化学系陕西西安710072

介绍了木聚糖的结构与酶糖化机理,综述了国内外对木聚糖生物转化方面的研究。详细介绍了木聚糖转化为低聚木糖和木糖醇等医药食品、燃料乙醇和2,3-丁二醇等能源物质、乳酸和糠醛等化工中间体的研究进展。

关键词：木聚糖低聚木糖燃料乙醇木糖醇 2,3-丁二醇乳酸糠醛

大肠杆菌holo-ACP的过表达、分离纯化及长链脂酰ACP的合成

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微生物学报 2008年第7期48卷 963-969页

作者：汪玲玲杨辑黄诚之王海洪华南农业大学生命科学学院广州510642

【目的】获得高纯度大肠杆菌holo-ACP和多种长链脂酰ACP,为研究细菌脂肪酸、类脂A和N-酯酰高丝氨酸内脂等物质的合成提供底物。【方法和结果】采用PCR方法扩增得到大肠杆菌酰基载体蛋白基因(acpP)和holo-ACP合成酶基因(acpS)。使用载体p... 详细信息

【目的】获得高纯度大肠杆菌holo-ACP和多种长链脂酰ACP,为研究细菌脂肪酸、类脂A和N-酯酰高丝氨酸内脂等物质的合成提供底物。【方法和结果】采用PCR方法扩增得到大肠杆菌酰基载体蛋白基因(acpP)和holo-ACP合成酶基因(acpS)。使用载体pBAD24、pBAD34和pET28b分别克隆了acpP和acpS,得到pBAD-ACP、pET-ACP和pET-ACP-ACPS3个ACP表达质粒和一个AcpS表达质粒pBAD-ACPS。分别用3个ACP表达质粒转化大肠杆菌DH5α和BL21(DE3),构建了DH5α/pBAD-ACP、BL21(DE3)/pET-ACP和BL21(DE3)/pET-ACP-ACPS3种ACP生产菌株。与holo-ACP纯化常用菌株DK574相比,虽然三菌株在诱导时均能过量表达ACP,但是holo-ACP所占比例偏低。为了提高ACP生产菌株holo-ACP的产量,用质粒pBAD-ACPS分别转化上述3种ACP生产菌株,获得了3种携带双质粒的ACP生产菌株。表达结果显示携带pBAD-ACP和pBAD-ACPS双质粒的DH5α菌株比DK574菌株能产生更多的holo-ACP,且纯度也得到提高(纯度达99%)。同时使用UNOsphereQ阴离子交换层析从这一菌株培养物中分离纯化到了高纯度的holo-ACP,并以纯化到的holo-ACP和多种长链脂肪酸为底物在哈氏弧菌脂酰ACP合成酶的催化下,合成了多种长链脂酰ACP。【结论】通过研究获得一株holo-ACP高产菌株,并证明在大肠杆菌菌株中,同时表达acpP基因和acpS基因,有利于holo-ACP的产生。

关键词： holo—ACP AcpS和脂酰ACP合成酶

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

苜蓿中华根瘤菌desA基因功能的鉴定

生物化学与生物物理进展 2015年第8期42卷 740-749页

作者：马金成周俊超吴楚云胡喆王海洪华南农业大学生命科学学院广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室广州510642

为研究苜蓿中华根瘤菌脂肪酸脱饱和酶desA基因在不饱和脂肪酸合成、共生结瘤固氮以及应对逆境胁迫中的功能,为高效利用苜蓿中华根瘤菌提供理论依据,本文通过异体遗传互补和脂肪酸组成薄层层析,分析SmdesA编码蛋白是否具有脱饱和酶的活... 详细信息

为研究苜蓿中华根瘤菌脂肪酸脱饱和酶desA基因在不饱和脂肪酸合成、共生结瘤固氮以及应对逆境胁迫中的功能,为高效利用苜蓿中华根瘤菌提供理论依据,本文通过异体遗传互补和脂肪酸组成薄层层析,分析SmdesA编码蛋白是否具有脱饱和酶的活性并参与不饱和脂肪酸的合成,构建SmdesA的缺失突变株和互补菌株,比较各菌株在不同逆境胁迫条件下的生长速率以及回接宿主植物后与紫花苜蓿共生结瘤的能力.结果表明SmdesA不能互补大肠杆菌CY57中EcfabA的突变,但具有将饱和脂肪酸脱饱和形成不饱和的棕榈油酸和十八碳烯酸的能力.另外,SmdesA缺失突变对苜蓿中华根瘤菌的脂肪酸组成影响不大,但会显著影响低温和高盐条件下菌株的生长速率以及与紫花苜蓿共生结瘤的能力.我们推测,SmdesA参与的脱饱和途径可能是苜蓿中华根瘤菌不饱和脂肪酸合成的补偿途径,其编码的蛋白DesA不是不饱和脂肪酸合成的关键酶,但在应对逆境胁迫和共生结瘤中具有重要的生物学功能.

关键词：苜蓿中华根瘤菌细菌脂肪酸合成脂肪酸脱饱和酶 DesA

五个3-酮脂酰ACP合成酶同源蛋白的功能鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物化学与生物物理进展 2014年第9期41卷 887-895页

作者：马金成邓丽婷童文华朱磊王海洪华南农业大学生命科学学院广东省农业生物蛋白质功能与调控重点实验室广州510642

大肠杆菌的FabB和FabF均具有长链3-酮基脂酰ACP合成酶活性.除参与长链饱和脂酰链的延伸外,FabB还是合成不饱和脂肪酸的关键酶之一,参与不饱和脂酰ACP的从头合成,最终生成顺-9-十六烯脂酰ACP.而FabF只能将顺-9-十六烯脂酰ACP延伸为顺-11... 详细信息

大肠杆菌的FabB和FabF均具有长链3-酮基脂酰ACP合成酶活性.除参与长链饱和脂酰链的延伸外,FabB还是合成不饱和脂肪酸的关键酶之一,参与不饱和脂酰ACP的从头合成,最终生成顺-9-十六烯脂酰ACP.而FabF只能将顺-9-十六烯脂酰ACP延伸为顺-11-十八烯脂酰ACP,不参与不饱和脂酰ACP的从头合成.有研究表明,粪肠球菌、乳酸乳球菌、丙酮丁醇梭菌和茄科雷尔氏菌等细菌的FabF同源蛋白,具有类似大肠杆菌FabB和FabF的双功能.为证实该现象是否普遍存在,本研究选取了枯草芽孢杆菌BsfabF、中华苜蓿根瘤菌SmfabF、霍乱弧菌VcfabF、铜绿假单胞菌PafabF1和PafabF2 5个同源基因进行功能鉴定,体外酶学分析表明,5个FabF同源蛋白均具有长链3-酮基脂酰ACP合成酶活性,异体互补大肠杆菌CL28的脂肪酸组分分析显示,SmfabF、VcfabF、PafabF1和PafabF2具有3-酮脂酰ACP合成酶Ⅱ(FabF)活性,遗传互补大肠杆菌温度敏感突变株CY242和CY244的研究显示,仅有PafabF2编码的蛋白拥有3-酮脂酰ACP合成酶Ⅰ(FabB)活性,能互补大肠杆菌fabB的突变.这表明不是所有的FabF同源蛋白均具有3-酮脂酰ACP合成酶Ⅰ和Ⅱ的双重活性.

关键词：细菌脂肪酸合成 3-酮基脂酰ACP合成酶Ⅰ 3-酮脂酰ACP合成酶Ⅱ 遗传互补

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

紫菜加工利用可行性分析

食品科技 2000年第6期25卷 29-30页

作者：王海洪王扬徐大伦宁波大学食品科学与工程系 315211

0 前言紫菜属红藻类,在我国有10多个品种.紫菜味美可口,营养丰富,为佐料佳品,且具有很好的药用功能,化痰软坚,清热利尿,补肾养心,健脾降压.用于防治甲状腺肿大、慢性气管炎,预防动脉硬化及降低血压.如今,日本医学界又发现,紫菜中含有多... 详细信息

0 前言紫菜属红藻类,在我国有10多个品种.紫菜味美可口,营养丰富,为佐料佳品,且具有很好的药用功能,化痰软坚,清热利尿,补肾养心,健脾降压.用于防治甲状腺肿大、慢性气管炎,预防动脉硬化及降低血压.如今,日本医学界又发现,紫菜中含有多种维生素,是治疗胃溃疡的食疗佳品,还能减少男性阳痿的发生.

关键词：紫菜营养成分产品开发可行性分析食品

大肠杆菌3-酮基脂酰ACP还原酶110位天冬酰胺突变后的结构与功能

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物化学与分子生物学报 2012年第8期28卷 713-721页

作者：童文华张文彬马金成王海洪华南农业大学生命科学学院广州510642

3-酮基脂酰ACP还原酶催化3-酮基脂酰ACP还原为3-羟基脂酰ACP,是细菌脂肪酸合成反应的关键酶之一.为了明确该酶中110位的保守天冬酰胺残基在酶催化活性和酶结构中的作用,本研究采用基因定点突变和蛋白质表达纯化技术,获得了大肠杆菌3-酮... 详细信息

3-酮基脂酰ACP还原酶催化3-酮基脂酰ACP还原为3-羟基脂酰ACP,是细菌脂肪酸合成反应的关键酶之一.为了明确该酶中110位的保守天冬酰胺残基在酶催化活性和酶结构中的作用,本研究采用基因定点突变和蛋白质表达纯化技术,获得了大肠杆菌3-酮基脂酰ACP还原酶FabG的两个突变蛋白:FabG N110Q和FabG N110L.圆二色谱结果显示,天冬酰胺残基的突变改变了FabG的空间结构,使突变蛋白的α螺旋结构明显增加.以3-酮脂酰ACP为底物的酶活性测定表明,突变蛋白的酶活性均有下降,但残存的酶活性达到了FabG的75%以上.突变蛋白FabG N110Q和FabG N110L具有3-酮基脂酰ACP还原酶的活性,能在体外重建细菌脂肪酸合成反应.对fabG温度敏感突变株的遗传互补分析表明,FabG蛋白110位天冬酰胺突变为谷氨酰胺或亮氨酸后,在一定的条件下仍能互补大肠杆菌的生长.本研究结果提示,FabG 110位的天冬酰胺残基不是参与3-酮基脂酰ACP还原酶催化反应的必需氨基酸,它只是作为结构氨基酸,在维持FabG的空间结构的稳定性方面起作用.

关键词：大肠杆菌 FabG 脂肪酸合成 3-酮基脂酰ACP还原酶结构与功能

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

粪肠球菌fabI和fabK基因功能分析

粪肠球菌fabI和fabK基因功能分析

首届全国微生物基因组学学术研讨会

作者：王海洪华南农业大学生命科学学院

粪肠球菌基因组中具有完整的编码脂肪酸合成酶系的基因簇,同源分析认为 fabI基因编码二氯苯氧氯酚(triclosan)敏感的烯脂酰ACP还原酶,而fabK 基因编码二氯苯氧氯酚抗性的烯脂酰ACP还原酶。研究表明fabI和fabK基因均能互补大肠杆菌fabI(...

粪肠球菌基因组中具有完整的编码脂肪酸合成酶系的基因簇,同源分析认为 fabI基因编码二氯苯氧氯酚(triclosan)敏感的烯脂酰ACP还原酶,而fabK 基因编码二氯苯氧氯酚抗性的烯脂酰ACP还原酶。研究表明fabI和fabK基因均能互补大肠杆菌fabI(ts)突变菌株,均具有烯脂酰ACP还原酶活性。二氯苯氧氯酚抑制粪肠球菌生长的最小抑菌浓度(MIC)为50 μg／ml,然而,在大肠杆菌野生菌株中过量表达粪肠球菌fabK基因,未使大肠杆菌对二氯苯氧氯酚的抗性显著提高。因此,是否是fabK基因赋予粪肠球菌对二氯苯氧氯酚的高抗性有待深入研究。

关键词：

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

斯堪尼亚公司客车产品的现况及发展

重型汽车 1998年第1期 32-34页

作者：王海洪上海习翼汽车制造有限公司