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产褐藻胶裂解酶菌株S10的鉴定、全基因组测序及分析

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食品科学 2024年

作者：刘芳舒志强王共明井月欣赵云苹徐英江矫春娜张健山东省海洋资源与环境研究院烟台市海珍品质量安全控制与精深加工重点实验室上海海洋大学食品学院

菌株S10是从仿刺参肠道中分离出的一株具有较高酶活的高产褐藻胶裂解酶菌株。为了详细解析菌株S10的基因组序列信息，进而深入挖掘与褐藻胶裂解酶相关的基因资源。本研究通过形态学观察和16S rRNA序列分析对菌株S10进行了菌种鉴定，然... 详细信息

菌株S10是从仿刺参肠道中分离出的一株具有较高酶活的高产褐藻胶裂解酶菌株。为了详细解析菌株S10的基因组序列信息，进而深入挖掘与褐藻胶裂解酶相关的基因资源。本研究通过形态学观察和16S rRNA序列分析对菌株S10进行了菌种鉴定，然后利用Illumina二代测序技术和第三代高通量PacBio测序平台对菌株S10进行全基因组测序，并使用相关软件对测序数据进行基因组组装、基因预测及基因功能注释等。此外，根据注释结果对菌株S10中所含的3组假定褐藻胶裂解酶基因序列进行生物信息学分析及结构预测。结果表明，菌株S10被鉴定为Vibrio alginolyticus，基因组总长度为5 397 046 bp，GC含量为44.59%，由两条染色体和一条质粒组成。预测共有4 936个编码基因，127个tRNA基因和37个rRNA基因。在COG、GO、KEGG和CAZy数据库中分别注释到4 039、3 163、3 104和96个功能基因。此外，在菌株S10中发现了3组潜在的褐藻胶裂解酶基因alg4755、alg4756和alg4760。生物信息学分析表明，褐藻胶裂解酶Alg4755、Alg4756和Alg4760均属于多糖裂解酶家族7（PL7）蛋白，具有3个PL7家族高度保守的基序（R*E*R，Q(I/V)H，Y*KAG*Y*Q）。综上，S10菌株全基因组测序及分析对该菌的高效产酶机制研究和新型褐藻胶裂解酶的挖掘具有重要意义，也为后期酶的表达及工业化应用提供理论基础。

关键词：褐藻胶裂解酶溶藻弧菌全基因组测序基因功能注释生物信息学

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发酵技术在海藻功能性食品加工中的应用

食品与发酵工业 2024年第12期50卷 379-387页

作者：王冬晴马长伟王共明刘芳井月欣赵云苹张健矫春娜徐英江中国农业大学食品科学与营养工程学院北京100083 山东省海洋资源与环境研究院烟台市海珍品质量安全控制与精深加工重点实验室山东烟台264006

发酵是一种清洁、低能耗的传统食品加工技术,具有提高食品营养价值、延长食品货架期、产生特殊风味物质等优点。海藻作为海洋植物,生长过程不占用淡水和土地资源,是一种可持续的食物来源,众多研究者利用发酵技术处理海藻提高了其功能活... 详细信息

发酵是一种清洁、低能耗的传统食品加工技术,具有提高食品营养价值、延长食品货架期、产生特殊风味物质等优点。海藻作为海洋植物,生长过程不占用淡水和土地资源,是一种可持续的食物来源,众多研究者利用发酵技术处理海藻提高了其功能活性,产生了对人体健康有益的生物活性物质。该文综述了国内外海藻及海藻发酵技术的研究现状,系统总结了海藻发酵前后γ-氨基丁酸、多糖、酚类等化学成分的变化,归纳了海藻发酵后在抗氧化、降血糖、抗血栓等方面潜在的功能,梳理了目前已有的海藻发酵功能性食品,并对未来海藻发酵的发展方向提出构想,为开发具有特定功能活性的海藻发酵食品、扩大海藻产品的品类提供参考。

关键词：发酵技术海藻化学成分功能活性功能性食品

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脱氧核糖核酸的制备及在化妆品中的应用

广州化工 2024年第18期 1-4页

作者：季一枝刘芳张健王共明井月欣矫春娜乔瑞光上海海洋大学食品学院山东省海洋资源与环境研究院烟台市海珍品质量安全控制与精深加工重点实验室

脱氧核糖核酸(DNA)是生物的主要遗传物质，存在于所有真核生物、原核生物及部分病毒中。随着对DNA理化性质的深入了解，发现其具有抗紫外线、保湿、抗衰老、美白等多种护肤功能，因其来源十分广泛且安全性高，正成为热门化妆品的原料之... 详细信息

脱氧核糖核酸(DNA)是生物的主要遗传物质，存在于所有真核生物、原核生物及部分病毒中。随着对DNA理化性质的深入了解，发现其具有抗紫外线、保湿、抗衰老、美白等多种护肤功能，因其来源十分广泛且安全性高，正成为热门化妆品的原料之一。高纯度的DNA是进行后续研究的基础，本文将分别对从植物、动物和微生物中提取纯化DNA的方法进行综述，介绍了DNA在抗紫外线、抗衰老、保湿、抗皱以及美白等护肤方面相关的功能及相关作用机制，总结了其在化妆品行业中的应用现状并进行了展望，旨在为天然DNA在化妆品领域的应用提供参考。

关键词： DNA 化妆品提取纯化护肤功能应用前景

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仿刺参卵多肽、多糖的制备及多肽活性研究

仿刺参卵多肽、多糖的制备及多肽活性研究

作者：王共明上海海洋大学

学位级别：硕士

本课题以仿刺参加工的副产物-仿刺参生殖腺为原料，经显微鉴定后分出仿刺参卵和仿刺参精，对精和卵的营养成分进行了测定。然后以仿刺参卵为研究对象，优化了其酶解工艺条件，结合超滤法制备出仿刺参卵多糖和梯级肽，对梯级肽的化学抗... 详细信息

本课题以仿刺参加工的副产物-仿刺参生殖腺为原料，经显微鉴定后分出仿刺参卵和仿刺参精，对精和卵的营养成分进行了测定。然后以仿刺参卵为研究对象，优化了其酶解工艺条件，结合超滤法制备出仿刺参卵多糖和梯级肽，对梯级肽的化学抗氧化活性及细胞活性进行了研究，最后以得率和活性为导向分离出纯化多肽。主要研究内容如下：1.仿刺参生殖腺营养成分测定仿刺参卵营养较均衡，其中粗蛋白含量达到50.72g/100g，粗多糖含量高达27.25g/100g，粗脂肪中多以磷脂形式存在。使用高效液相色谱分析仿刺参卵氨基酸组成，得出仿刺参卵氨基酸总量及必需氨基酸的总量分别为347.19mg/g和176.27mg/g。含量较高的氨基酸有Glu、Asp、Leu和Lys。仿刺参精的粗蛋白含量高达72.76g/100g，其中氨基酸总量与必需氨基酸总量分别为536.95mg/g和250.74mg/g，含量较高的氨基酸有Glu、Lys、Ala、Asp和Arg。2.仿刺参卵酶解工艺条件优化通过酶种类的筛选，水解方式的选择，确定了最佳酶解工艺条件，即先以混合酶(木瓜蛋白酶:复合蛋白酶=1:1，酶质量比)在加酶量2%、酶解温度75℃条件下酶解4h，煮沸灭酶活后添加风味蛋白酶在加酶量1.5%、酶解温度45℃条件下继续酶解1h，在此工艺条件下仿刺参卵的水解度达到了77.11%。本实验采用了三种外源酶，并结合海参卵中的自溶酶，从而形成了多酶体系，结果表明本实验对仿刺参卵的酶解工艺优化成功，不仅节约了成本，提高了经济效益，并且水解过程产生了丰富的多肽与氨基酸，得到的水解液鲜香浓郁，颜色鲜亮，状态均匀澄清，可用于开发风味独特的功能食品。3.仿刺参卵多糖的制备本实验通过采用梯度稀释法，优化了超滤法分离仿刺参卵多糖、多肽及制备仿刺参卵梯级肽的工艺方法。试验中使用三氯醋酸法沉淀可得到除去蛋白的多糖，通过紫外光谱扫描沉淀的多糖，发现在190nm到200nm处有强烈单一吸收峰，在其它波长处基本无吸收。然后采用葡聚糖凝胶G-100对精制后的多糖进行纯化，分离得到一个无拖尾的多糖峰，采用葡聚糖凝胶G-200在线检测，结果显示只有一个谱峰。使用标准葡萄糖进行洗脱对比，得出仿刺参卵纯化后的多糖分子质量大于200KDa。通过本实验获得了分子质量相对集中的仿刺参卵纯化多糖。4.梯级肽制备及其活性研究通过超滤法分离制备得到三种截留分子质量范围的梯级肽，即F1：分子质量1～10KDa的多肽、F2：分子质量650Da～1KDa的多肽和F3：分子质量﹤650Da的多肽，三种梯级肽的得率分别为F1：0.737%、F2：0.295%及F3：0.515%(鲜重)。对分离得到的仿刺参卵梯级肽进行了化学抗氧化研究和细胞活性研究，化学抗氧化结果显示，F1、F2及F3均体现出较强的清除DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基能力，并且在一定浓度范围内呈现量效关系。其中F1与F2和F3相比表现出明显较高的DPPH和O2-的清除能力，而在清除OH的能力方面3个组分基本相似。细胞活性结果显示，仿刺参卵多肽三个组分对巨噬细胞都起到一定的增殖作用，且终浓度为100、200、400μg/mL的样品对过氧化氢损伤的巨噬细胞保护作用非常明显，三个样品的吸光度值与模型组相比为极显著差异(P<0.01)，仿刺参卵梯级肽在细胞活性上F1组分略好于另外两个组分。5.多肽纯化及理化分析F1组分经过Tricine-SDS-PAGE电泳分离，结果显示F1有多条条带，分子质量集中分布在6.5～35KDa之间。然后使用高速逆流色谱法分离F1得到4个独立的谱峰，通过测定其四个组分清除自由基能力，得出F1四个组分的自由基清除能力均高于三种梯级肽，其中F1-1组分清除OH的能力最强，当浓度为5mg/mL时，清除OH的能力达到了82.95U/mL。将F1-1先后经过Sephadex G-100和Sephadex G-50进行分离纯化后，得到三个组分，其中F1-1-3是一个窄高峰，含量是三个组分中最高的。实验发现F1-1-1和F1-1-3表现出较强的清除OH的能力，且都高于F1-1。当F1-1-3浓度为5mg/mL时，清除OH的能力达到了89.82U/mL。F1-1-3经过Tricine-SDS-PAGE电泳分离检测，显示出一条清晰无拖尾条带，说明F1-1-3已经达到电荷均一。与标准分子质量蛋白对比得出，其分子质量在30KDa左右。紫外全波长扫描显示F1-1-3在紫外有两处吸收峰，分别是肽键和苯丙氨酸的特征吸收位置，使用反相高效液相色谱法在214nm分析检测F1-1-3，结果显示其是一种较纯的物质。

关键词：仿刺参卵酶解多糖多肽纯化 HSCCC 细胞活性化学抗氧化

基于GC-IMS分析盐渍海参挥发性风味物质

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安徽农业科学 2024年第1期52卷 195-198,217页

作者：刘芳张健赵云苹王共明井月欣矫春娜山东省海洋资源与环境研究院山东烟台264006

[目的]探明盐渍海参(Apostichopus japonicas)的挥发性风味物质,比较不同产地盐渍海参的主要挥发性风味物质种类及差异。[方法]采用气相色谱-离子迁移色谱(gas chromatography-ion mobility spectroscopy,GC-IMS)对不同产地盐渍海参挥... 详细信息

[目的]探明盐渍海参(Apostichopus japonicas)的挥发性风味物质,比较不同产地盐渍海参的主要挥发性风味物质种类及差异。[方法]采用气相色谱-离子迁移色谱(gas chromatography-ion mobility spectroscopy,GC-IMS)对不同产地盐渍海参挥发性物质进行定性和相对定量分析,并建立指纹图谱。[结果]盐渍海参定性出以醛类、酮类、醇类和酯类为主的挥发性风味物质83种,但不同产地特征挥发性物质的相对含量不同。庚醛、辛醛等13种醛类是盐渍海参的共有成分。醇类和酮类是长岛盐渍海参的特征风味物质,威海和东营盐渍海参的特征风味物质主要为酯类,大连盐渍海参特征区域未鉴定出确定成分。[结论]不同产地的盐渍海参因特征性风味物质不同而具有独特的风味特征,可以为消费者的选择提供更多参考。

关键词：盐渍海参气相色谱-离子迁移色谱挥发性风味物质指纹图谱

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仿刺参精低分子质量多肽的制备及抗氧化作用

食品科学 2016年第23期37卷 248-253页

作者：张健刘少伟张毅王共明赵云苹刘京熙刘昕华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室上海200237 中国科学院上海生命科学研究院上海200233 山东省海洋资源与环境研究院山东烟台264006

本实验以仿刺参精为原料,制备出多肽并考察其体外和体内抗氧化活性。以清除羟自由基(·OH)能力为指标,考察木瓜蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶的5种酶解方式产生的酶解产物的活性,优化实验用酶。经超滤分级后,测定各级组分的分子质量... 详细信息

本实验以仿刺参精为原料,制备出多肽并考察其体外和体内抗氧化活性。以清除羟自由基(·OH)能力为指标,考察木瓜蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶的5种酶解方式产生的酶解产物的活性,优化实验用酶。经超滤分级后,测定各级组分的分子质量分布、可溶性蛋白质含量、多肽含量和清除·OH能力。选择清除·OH能力较好的低分子质量多肽组分,测定氨基酸组成,设定低、中、高剂量组(100、200、600 mg/kg(以体质量计,下同))、模型对照组、和空白对照组进行42 d小鼠灌胃实验。实验完成后,检测小鼠血液中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和蛋白质羰基含量。结果表明,由木瓜蛋白酶水解,经超滤制备的0.05)。MDA和蛋白质羰基含量得到有效降低,后者达到差异显著(P<0.05)。研究结果显示:<1 000 u仿刺参精多肽具有提高小鼠抗氧化能力的效果,可以作为相关功能产品开发的原材料。

关键词：仿刺参精多肽抗氧化小鼠

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仿刺参卵酶解工艺条件优化

食品科学 2012年第23期33卷 193-198页

作者：王共明张健王茂剑赵云苹高继庆李倩上海海洋大学食品学院上海200000 山东省海洋水产研究所山东烟台264006

以仿刺参卵为材料,优化出酶解工艺,获得高水解度、风味独特的水解产物。首先,通过实验从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶与风味蛋白酶中筛选出合适的水解用酶。然后通过单因素试验与正交试验,分别考察酶解温度、加酶量及酶解时间对... 详细信息

以仿刺参卵为材料,优化出酶解工艺,获得高水解度、风味独特的水解产物。首先,通过实验从木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶与风味蛋白酶中筛选出合适的水解用酶。然后通过单因素试验与正交试验,分别考察酶解温度、加酶量及酶解时间对筛选出的各种蛋白酶水解度的影响,获得单酶的优化水解工艺条件。最后进行多酶体系综合酶解实验,综合考虑水解度、生产成本和水解液感官评定结果来确定最佳水解工艺条件。结果表明:最佳酶解条件为:以混合酶(木瓜蛋白酶与复合蛋白酶质量比1:1)在加酶量2.0%、酶解温度75℃条件下酶解4h,煮沸灭酶活后再添加1.5%风味蛋白酶,在酶解温度45℃条件下继续酶解1h,在此工艺条件下水解度达到了77.11%,并且水解液鲜香浓郁,状态均匀澄清,可用于开发风味独特的功能食品。

关键词：仿刺参卵酶解水解度感官评价优化

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仿刺参肠道多糖的纯化及理化分析

食品科学 2011年第17期32卷 118-122页

作者：林威威张健王茂剑常耀光王共明上海海洋大学食品学院上海200000 山东省海洋水产研究所山东烟台264006 中国海洋大学食品科学与工程学院山东青岛266003

目的:对仿刺参肠道多糖进行纯化,并对纯化产物进行理化分析。方法:使用葡聚糖凝胶(G-100)层析柱分离出两种仿刺参肠道多糖,选取其中多糖A进行研究。使用葡聚糖凝胶(G-100)柱层析法和琼脂糖凝胶电泳法进行纯度检测,葡聚糖凝胶(G-200)柱... 详细信息

目的:对仿刺参肠道多糖进行纯化,并对纯化产物进行理化分析。方法:使用葡聚糖凝胶(G-100)层析柱分离出两种仿刺参肠道多糖,选取其中多糖A进行研究。使用葡聚糖凝胶(G-100)柱层析法和琼脂糖凝胶电泳法进行纯度检测,葡聚糖凝胶(G-200)柱层析测定分子质量,高效液相色谱法确定其单糖组分,并结合红外吸收光谱法与核磁共振对其结构进行初步检测。结果:实验所得纯化产物多糖A为均一组分,主要含有氨基糖醛酸、氨基半乳糖盐酸盐和岩藻糖3种单糖,并含有少量的氨基葡萄糖、半乳糖。其中岩藻糖有α和β两种构型,以α-岩藻糖硫酸酯残基、β-岩藻糖硫酸酯残基形式存在。分子质量约为18.8×104D。结论:该纯化产物多糖A为一种酸性多糖,推测其为硫酸软骨素类。

关键词：肠道多糖纯化单糖分析结构鉴定仿刺参

从“211”工程视角探析高等教育的公平问题

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科协论坛(下半月) 2010年第2期 155-157页

作者：王共明南开大学社会工作与社会政策系

在现阶段我国高等教育资源非常有限,设立"211"工程对于效率的提高有何效果,"211"高校在公平层面上存在了哪些隐忧,设立"211"高校是否为了提高效率而损害了公平,是否可以在现有条件下实现双赢,对于我国高等教育的健康均衡发展、人民素质... 详细信息

在现阶段我国高等教育资源非常有限,设立"211"工程对于效率的提高有何效果,"211"高校在公平层面上存在了哪些隐忧,设立"211"高校是否为了提高效率而损害了公平,是否可以在现有条件下实现双赢,对于我国高等教育的健康均衡发展、人民素质的普遍提高,对于构建和谐社会都有重大的意义。

关键词： “211工程” 公平效率